Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

הערכת אפקט אנטי-דיכאון של Xiaoyaosan על עכברים הדגיש באופן כרוני

Published: January 7, 2019 doi: 10.3791/58276
Automatic Translation
*1, *1,2, 1, 1, 1,2
1School of Traditional Chinese Medicine, Beijing University of Chinese Medicine, 2Formula-pattern Research Center, School of Traditional Chinese Medicine, Jinan University
* These authors contributed equally

Summary

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקים דגם דיכאון העכבר, להתבונן השינויים הקשורים עם מתח כרוני בלתי צפוי מתון (CUMS), ולהעריך את אפקט אנטי-דיכאון של Xiaoyaosan.

Abstract

בנוסף לשימוש מתוקננת של תרופות נוגדות דיכאון, פסיכותרפיה, השימוש של הרפואה הסינית המסורתית יש להוביל שיפור כללי של חולים עם הפרעת דיכאון (MDD). לכן, מטרת מחקר זה היה כדי לבסס מודל דיכאון העכבר, לבחון את השינויים בהתנהגות המשויך מתח כרוני בלתי צפוי מתון (CUMS) ואז להעריך את השפעת נגד דיכאון Xiaoyaosan. עכברים חולקו באופן אקראי ארבע קבוצות: קבוצת ביקורת, קבוצת מודל, קבוצת הטיפול עם Xiaoyaosan, קבוצת טיפול עם פלואוקסטין. כל העכברים הוחזקו בנפרד בתוך כלובים, דיכאון הסחרור הושפע בעכברים לחשוף אותם מספר מניפולציות מעוצב של CUMS במשך 21 ימים, כמפורט בפרוטוקול. עכברים בתוך קבוצת הביקורת וקבוצת מודל התקבל 0.5 מ ל מים מזוקקים, בעוד עכברים בקבוצות הטיפול התקבל גם Xiaoyaosan (0.25 g/ק"ג/יום) או פלואוקסטין (2.6 מ"ג/ק"ג/יום). תרופות המשמשות במחקר נמסרו intragastrically מדי יום במהלך כל ימי בין המצרים. כדי להעריך התנהגויות כמו דיכאון, סדרה של פרמטרים כולל המדינה את המעיל, משקל גוף, פתח את הציון בבחינה שדה ולאחר סוכרוז העדפה תוצאת המשחק נרשמו. ניתוח הנתונים הראה כי התנהגויות של מודל עכברים שונו באופן משמעותי בהשוואה התנהגויות של עכברים בקבוצת הביקורת, אשר שופרו על ידי הטיפול של Xiaoyaosan ו פלואוקסטין. הממצאים הנוכחיים הפגינו את ההשפעות האנטי-דיכאון של Xiaoyaosan על ההתנהגויות של עכברים CUMS-induced וגילה כי תרכובות מן המרשם Xiaoyaosan עשוי להיות משתלם לטיפול בדיכאון, בהתחשב שלהם השפעות מועילות על התנהגויות כמו דיכאון.

Introduction

MDD היא מחלה נפשית כרונית, מאוד חוזרים ונשנים כי מתנות עם מצב רוח נמוך מתמיד, דיכאון, דימוי עצמי נמוך, פיגור שכלי, אובדן של עניין, הפרעות שינה, נטיות עמוקות פסימי או נטיות אובדניות; זה גרם נזק רב בריאות האדם וייצוב חברתית1. זה הפך לאחד בעולם הגורם העיקרי של נכות, זה עשוי להיות אחד הגורמים המובילים העיקריים של המחלה נטל 2030 על פי ארגון הבריאות העולמי2,3. כיום, תרופות נוגדות דיכאון ופסיכותרפיה נחשבים להיות הבחירה הראשונה לטיפול MDD. עם זאת, מספר עצום של חולים שאובחנו עם MDD אינם מגיבים רציפה תרופה או טיפול, הם רשומים כבעלי לטיפול בדיכאון עמיד4.

Xiaoyaosan הוא קלאסי הסינית מתחם5 זה כבר בשימוש נרחב לטיפול במחלות פסיכולוגי במשך אלפי שנים מאז שושלת סונג ב סין6. הוא מורכב של צמחי מרפא סיניים 8: בסיס Bupleuri, אלבה Paeoniae בסיס, בסיס Angelicae סיננסיס, פוריה, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, בסיס Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens , ו Menthae כפית. Xiaoyaosan מכיל את המרכיבים מרובים, יש מטרות מרובות, והוא מנצל מסלולים מספר7. Xiaoyaosan הוכח בדרך כלל להיות נוסחה בטוח ויעיל לטיפול בהפרעות הקשורות נפשי מחלות שונות, מחקרים מודרניים התמקדו גם מנגנון אנטי-דיכאון זה מתחם8,9, 10. בפתוגנזה של MDD עדיין לא ברור, למרות שישנם בעלי תכונות רבגוניות השערות, לרבות ההנחה מונואמין ההשערה קולטן עצבי, ההשערה שינוי פונקציה נוירואנדוקריניים, ההנחה חריגות המערכת החיסונית, ועוד. מספר מחקרים הראו כי השפעת נוגדות דיכאון Xiaoyaosan יש קשר עם חומרים בסיסי של ה11,לעיל השערות12, את תעודות המשלוח פעולה טיפולית כמו שיפור, כמו דיכאון התנהגויות13.

יתר על כן, עם השכיחות של דיכאון, החברה המודרנית סובלת הפחתות כוח העבודה הפנסיה המוקדמת, טיפולים יקרים14. טיפולים יקרים זקוק לטיפול רפואי קפדני, מה שאומר מגוון של הוצאות רפואיות מוגברת ואת הציפייה מדויק של תוצאות בלתי רצויות מדויקת, כמו גם תופעות לוואי15. הרב סיני Xiaoyaosan יש רכיבים נגיש, אפקטים ייחודיים, תופעות לוואי קלה. היישום שלה יכול לשחק תפקיד להפחתת הנטל של טיפול רפואי מודרני. לכן, כדי לספק בסיס תיאורטי יותר של יישום Xiaoyaosan, טיפולים קליניים צריך להיות מוצעים לטיפול בדיכאון, השכיחות של אשר גדל שנה אחר שנה, צריך לשפר את בריאות האדם בו זמנית. מאמר זה מתאר פרוטוקול הכרוכות של Xiaoyaosan כדי למנוע התנהגויות כמו דיכאון על-ידי יצירת המודל דיכאון של העכבר. בדיקת שדה פתוח, ובדיקה העדפה של סוכרוז שימשו כדי לאמת את השפעות נוגדות דיכאון Xiaoyaosan.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

פרוטוקול זה אושרה על ידי ועדת האתיקה בעלי חיים של אוניברסיטת בייג'ינג של הרפואה הסינית, על פי הנחיות כל טיפול, שימוש של מעבדה החיות של סין. שם היה שום מצב מוות מתאונה במהלך ההליך ניסיוני, ללא בעלי צורך להרדימם במחקר זה.

1. מכינים את הסמים לניסוי.

הערה: צמחי מרפא סינים היו שנרכשו, מכן מאומתים על-ידי ד ר ליאו ב' של אוניברסיטת בייג'ינג ברפואה הסינית. Xiaoyaosan מכיל הבאים שמונה מסורתית סינית הסמים על יחס של 6:6:6:6:3:6:2:2: סיננסיס Angelicae בסיס, בסיס Paeoniae אלבה, פוריה, Bupleuri בסיס, בסיס Glycyrrhizae, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, כפית Menthae, Rhizoma Zingiberis Recens.

  1. להכין Xiaoyaosan כפי שתואר לעיל16.
    הערה: שלפנו את תרכובות אלו בחדר הכנה רפואה סינית של החולים לידידות סין-יפן, התשואה החילוץ היה 18.8%.
  2. ודא שאיכות Xiaoyaosan מאת מסות כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים ניתוח (LC-MS/MS)17.

2. הכנת עכברים בהליך ניסיוני

הערה: לקבלת ההליך ניסיוני, 60 בריא זכר C57BL/6J עכברים בגיל 12 שבועות נבחרו, עם כל לעכבר השוקל בין 18 ו- 22 g.

  1. מחזיקים עכברים בנפרד בתוך כלובים בחדר טיפוסי ספציפי פתוגן חינם (SPF) מעבדה בבעלי חיים (22 ± 1 ° C, h 12 h/12 מחזור כהה/אור, לחות יחסית: 30-40%) למשך שבוע לפני ההליך CUMS.
  2. לחלק באופן אקראי עכברים כל קבוצת ביקורת, קבוצת מודל, קבוצת טיפול Xiaoyaosan או קבוצת הטיפול פלואוקסטין לפי משקל הגוף שלהם. לכל קבוצה יש 15 עכברים.
  3. לפני תחילתן של הניסוי, מספר העכברים בכל קבוצה על הזנב באמצעות עט סימון.
  4. לבדוק כל עכברים באמצעות מבחן העדפה חמישה ימים סוכרוז (עיין שלב 5) ולאחר מבחן שדה פתוח (עיין שלב 6).

3. אינדוקציה של דיכאון אצל עכברים

הערה: כדי לגרום לדיכאון, העכברים בקבוצה מודל וקבוצות טיפול שני עברה CUMS על 21 ימים18. ניתן לשנות את התוכנית בהתאם למצב מעשית, אך צריכה להיות מלווה את העיקרון כי הלחץ אותו לא יכול לשמש באופן רציף.

  1. לחשוף עכברים מדי יום כדי שכל שניים גורמי שבע הבאים עבור 21 ימים רצופים19. התוכנית דוגמנות שלנו מיועד כדלקמן:
    1. ביום שני, לחשוף עכברים מניעת מזון (ריק ההזנה של כל כלוב במשך 24 שעות, 8:00 בבוקר עד 8:00 בבוקר), מניעת מים (להסיר בקבוק שתיה של כל כלוב במשך 24 שעות, 8:00 בבוקר עד 8:00 בבוקר).
    2. ביום שלישי, לחשוף עכברים איפוק מתח (עכברים מגבילות באמבט פלסטיק קטן עבור h 3, 8:00 בבוקר עד 11:00), כלובים ריק (להסיר הריפוד בכלוב כל עבור 11 ה', 8:00 בבוקר עד 19:00 בערב).
    3. ביום רביעי, לחשוף עכברים לכלובים המלוכלכים ורטובה (שופך מים לתוך כל הכלוב ולשמור רטוב במשך 24 שעות, 8:00 בבוקר עד 8:00 בבוקר) וצפוף הכלובים (לשים חמש עכברים בכלוב אחד במשך 24 שעות, 8:00 בבוקר עד 8:00 בבוקר).
    4. ביום חמישי, חושפים את העכברים של איפוק מצוקה שחיה קרה כקרח20,21 (כוח אחד העכבר כדי לשחות בתוך אקווריום זכוכית שקופה עם קרח מים במשך 5 דקות).
    5. ביום שישי, לחשוף עכברים הכלובים המלוכלכים ורטובה, מניעת מזון.
    6. ביום שבת, חושפים את העכברים של איפוק מצוקה בכלובים צפופים.
    7. ביום ראשון, לחשוף עכברים הכלובים ריק, שחיה קרה כקרח.
  2. להקליט את המשקל של המדינה ואת הגוף המעיל שבועיות עד סוף דוגמנות (21 יום). לחשב את הציון הכולל של המדינה המעיל כסכום של ציונים מחלקי גוף שונים 7: הראש, הצוואר, הגבי המעיל, המעיל הגחון, forepaws, זנב, ואת כפות הרגליים האחוריות. ציון של אחד מציין מעיל מטופחים, ומציין ציון של אפס של המעיל מסורקות22.
  3. לבצע בדיקה העדפה חמישה ימים סוכרוז (עיין שלב 5) ולאחר מבחן שדה פתוח (עיין שלב 6) בסוף הניסוי.

4. ניהול Xiaoyaosan

הערה: את המינון של Xiaoyaosan (0.25 g/ק"ג/יום) נבחר על בסיס יעילותה משביע רצון כפי שתואר לעיל9.

  1. במהלך הניסוי, להשתמש במים מזוקקים להכין את המתלים Xiaoyaosan ו פלואוקסטין, הקפד להשתמש מיד.
  2. לתת 0.5 מ ל מים מזוקקים העכברים קבוצת הביקורת, קבוצה של מודל על ידי המינהל intragastric כל יום לפני דוגמנות. בינתיים, תן Xiaoyaosan (0.25 g/kg/יום) או פלואוקסטין (2.6 מ"ג/ק"ג/יום) כדי העכברים בקבוצות טיפול שני.

5. סוכרוז העדפת מבחן

הערה: אין אוכל או מים מניעת הוחל לפני המבחן. הפרוטוקול בוצע כפי שדווחה בעבר23.

  1. שני הימים הראשונים, בית העכברים בנפרד שני בקבוקים מלאים במי ברז.
  2. על היומיים הבאים, תן העכברים שני בקבוקים מלאים 1% סוכרוז פתרון.
  3. ביום האחרון, לתת העכברים שני בקבוקים עבור 24 שעות ביממה, אחת עם מים מהברז, והשני עם 1% סוכרוז פתרון. כדי למנוע העדפה לצד של העכברים בשתייה התנהגות, לעבור את המיקום של שני בקבוקים לאחר 12 שעות.
  4. שיא הנפח (mL) של סוכרוז נצרך פתרון והן מי ברז. לחשב את ההעדפה סוכרוז כדלקמן: העדפה סוכרוז (%) = סוכרוז הצריכה/סה כ צריכת נוזלים × 100%.

6. בדיקת שדה פתוח

  1. לבצע ניסוי השדה פתוח בחדר מואר באור עמום ושקט עם ארבעה צדדים שחור הרקובות תיבה מעץ. לחלק floor של ריבועים שווים 25 על ידי קווים כחולים.
  2. נקה תיבת בשדה פתוח עם 5% אלכוהול לפני הגישה של כל עכבר. אז, במקום העכבר במרכז המגרש בעדינות.
  3. להשעות ס"מ מצלמה דיגיטלית כ-200 הגדרה גבוהה מעל השדה, לתעד את אופן הפעולה של כל העכבר במשך 5 דקות.
  4. להעריך את הוידאו התנהגותית של עכברים על ידי תוכנת מערכת מעקב וידאו ולהקליט את הנתונים של הסכום הכולל הפעלה מרחוק ומספר הערכים לאזור המרכז.
  5. לנתח את הנתונים של המרחק הכולל עברה, מספר הערכים לאזור מרכז בתוכנות סטטיסטיות.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

שים לב לכך שהתוצאות פורסמו בעבר על ידי ד ר סיו-פנג דינג, et al. 18

הנתונים היו לבטא זאת אומרת ± שגיאת התקן של הממוצע (SEM). חד-כיווני אנובה או מבחן ללא פרמטרי שימש נתונים כלליים בהתבסס על הבדיקה נורמליות ואת המבחן עבור ההומוגניות של שונות. הבדיקה LSD שימש את ההשוואות בין קבוצות. בנוסף, תהליך מדידות חוזרות של המודל הליניארי כללי (GLM) שימש לערוך ניתוח חד-כיווני אנובה עבור נתונים נמדד חוזרים (מעיל הציון, למשקל הגוף), תהליך ניתוח רב משתני השונות מאומץ לעשות השוואות בין הקבוצות כל הזמן הצבע (שיטת ה-LSD).

מצבה הפיזי של עכברים CUMS-induced

לאחר חשיפת עכברים שלושה שבועות של CUMS על אינדוקציה של דיכאון, ניוון שרירים הדרגתית של המעיל מדינת בקבוצה מודל היה המושרה; ניוון שרירים מבלי להציג לאחר שבועיים של מתח, אבל זה החמיר בסופו של ההליך CUMS (שלושה שבועות), התוצאה המעיל ירד באופן משמעותי בהשוואה לזה של קבוצת הביקורת (F (3, 56) = 25.08, p = 0.000). המדינה המעיל של עכברים היה משופר ובמיוחד לאחר טיפול רציף עם Xiaoyaosan או פלואוקסטין לעומת הקבוצה מודל (F (3, 56) = 25.08, שנינו p = 0.001, איור 1 א'). על-פי שבועי הגוף משקל הנתונים של כל קבוצה, הפחתה משמעותית במשקל הגוף ביטוי בשבוע השלישי (F (3, 56) = 16.149, p = 0.000, איור 1b), בזמן טיפול Xiaoyaosan או פלואוקסטין הגדילה משמעותית את הגופה משקל לעומת הקבוצה מודל (F (3, 56) = 16.149, שניהם, p = 0.001).

הבדיקה העדפה סוכרוז

לפני החשיפה מתח, עכברים בכל קבוצות היה דומה העדפה סוכרוז (תנאי בסיסי, איור 2a). עם זאת, נצפתה ירידה משמעותית בהעדפות סוכרוז לאחר שלושה שבועות של מתח הליך בקבוצה מודל (F (3, 56) = 41.379, p = 0.000, איור 2b). טיפול Xiaoyaosan ו פלואוקסטין ביעילות לבטל שינויים אלה, גדל באופן משמעותי את ההעדפה סוכרוז לעומת קבוצה מודל (F (3, 56) = 41.379, שניהם p = 0.000).

ניסוי השדה פתוח

לפני החשיפה מתח, הציג עכברים כל מדינה התנהגותיים דומים (תנאי בסיסי. איור 2 c ו- 2d). עם זאת, לאחר חשיפה מתח במשך שלושה שבועות, המרחק הכולל עבר תוך חמש דקות משמעותית שונה בין הקבוצות. המרחק הכולל עברה על ידי עכברים בקבוצה מודל היה נמוך באופן משמעותי (F (3, 56) = 4.216, p = 0.003, איור 2f) מאלה של קבוצת הביקורת. יתר על כן, מספר הערכים לאזור המרכזי היה גם שונה באופן משמעותי בין הקבוצות. מספר הערכים לאזור המרכזי של קבוצת מודל ירד באופן משמעותי (F (3, 56) = 2.809, p = 0.013, איור 2e) לעומת קבוצת הביקורת. פלואוקסטין טיפול מנע שינויים אלה במגמה גפיים, לשפר באופן משמעותי את המרחק הכולל ואת המספר של ערכי לאזור המרכזי (F (3, 56) = 4.216, p = 0.029; F (3, 56) = 2.809, p = 0.004). תופעה דומה נצפתה גם בקבוצה טיפול Xiaoyaosan (F (3, 56) = 4.216, p = 0.014; F (3, 56) = 2.809, p = 0.029).

Figure 1
איור 1 : השפעת Xiaoyaosan על CUMS-induced שינויים במצב פיזי עכברים. העכברים מעיל המדינה (a) ומשקל הגוף (ב) נמדדו אחת לשבוע במהלך תקופת מתח. הנתונים היו לבטא את זאת אומרת ± SEM, n = 15 לכל קבוצה. ** p < 0.001 לעומת שליטה; ΔΔ p < 0.001 מול המודל. איור זה שונה מדינג, et al. 18 אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 2
איור 2 : השפעת Xiaoyaosan על התנהגויות כמו דיכאון CUMS-induced. סוללה של מבחנים התנהגותיים נערך, הפרמטרים הבאים נמדדו: העדפה סוכרוז (a, b), מספר הערכים לתוך אזור מרכז (c, e), ואת המרחק הכולל עברה (פעילות גינקולוגיות) (d, f). הנתונים היו לבטא את זאת אומרת ± SEM, n = 15 לכל קבוצה. * p < 0.05, *p < 0.01 ו *p < 0.001 לעומת שליטה; Δ p < 0.05, ΔΔp < 0.01 ו-p ΔΔΔ< 0.001 מול מודל. איור זה שונה מדינג, et al. 18 אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

המודל CUMS השתמשו במחקר זה היא שיטה נפוצה להקמת הדגם diathesis מתח של דיכאון24. ניתן לשחזר רוב גילויי CUMS על-ידי תרופות נוגדות דיכאון, אשר ציין כי שיטה זו מודל יש תוקף ניבוי חזק של25. בשיטה זו, חיות לקבל כרונית בלתי צפוי לגירויים מלחיצים ולפתח הליבה סימפטומים של דיכאון, לרבות מקום ירידה העדפה מיזוג, אנהדוניה התנהגויות כמו רגש לקוי26. כאן, ב פרוטוקול זה, השימוש רציפה של Xiaoyaosan או פלואוקסטין יכול לשפר את התנהגויות כמו דיכאון של עכברים דגם הנוצרות על-ידי CUMS על-פי התוצאות המתקבלות הניסוי; פלואוקסטין הוא כמו תרופה בקרה חיובית כדי להוכיח את השפעת התערבות Xiaoyaosan.

הערכת המעיל ניקוד, בניגוד במגרש הפתוח מבחן, נאלץ מבחן השחייה או החדשנות דיכא האכלה מבחן, הוא מדד אינה משויכת דיכאון אצל בני אדם, אך היא השיטה הכי שכיחה, אמינים ובעלי המאומת היטב עבור דגם דיכאון העכבר27. במחקר הנוכחי, ניוון שרירים הדרגתית של המדינה המעיל בקבוצה מודל הושרה מבלי להציג לאחר שבועיים של מתח אך החמיר בסופו של ההליך CUMS (שלושה שבועות), בעוד משקל הגוף לא היתה שונה באופן משמעותי בקרב קבוצות לאחר שבוע של מתח חשיפה. עם זאת, ההבדל של משקל גוף בכל קבוצה החלו להופיע לאחר דוגמנות לשבועיים, ובכך מוביל לירידה הבאים עד לסוף שבוע-שבועיים. התוצאות מצביעות על שינויים אלה במצב הפיזי של עכברים CUMS-induced יוכל להעצר על ידי טיפול Xiaoyaosan והן פלואוקסטין, רומז כי Xiaoyaosan יכול לשפר את מצבי הפיזי של עכברים מדוכא.

נוסף לאימות המודל CUMS ולוודא את ההשפעה של המתחם נעשה שימוש ב פרוטוקול זה, מבחן העדפה סוכרוז מבחן שדה פתוח שימשו כדי להעריך את התנהגויות דיכאון אפשרי בעכברים CUMS-induced. צמצום אנהדוניה בהעדפות סוכרוז שימש כדי להעריך את מצב דיכאון כמו בחולדות, תוך כדי הבדיקה בשדה פתוח, כמו ניסוי פסיכולוגי בבעלי חיים, משמש בדרך כלל כדי להעריך את תפקוד גינקולוגיות ואת רגשנות של מכרסמים28. התוצאה הראתה כי 3 שבועות של מתח חשיפה הייתה השפעה ברורה על העדפת סוכרוז עכברים, אנהדוניה התהפכה על ידי טיפולים Xiaoyaosan והן פלואוקסטין. ניסוי השדה פתוח משמש בדרך כלל כדי להעריך רגשנות חיות מעבדה29ותפקוד גינקולוגיות. במחקר זה, השתמשו בו כדי לנתח התנהגויות דיכאון. התוצאות של ניסוי השדה פתוח הראה כי המרחק הכולל עברה על ידי העכברים בקבוצה מודל היה נמוך באופן משמעותי מאלה של קבוצת הביקורת. יתר על כן, מספר הערכים לאזור המרכזי ע י קבוצת במודל של עכברים הייתה נמוכה באופן משמעותי מזו של קבוצת טיפול עכברים, אשר הציע כי עכברים CUMS-induced להציג התנהגויות כמו דיכאון. המחקר גם הראה כי Xiaoyaosan ו פלואוקסטין יכול להפחיתם השינויים המוצגים ניסוי השדה הפתוח.

תוצאותיו דומים שנדונו במחקרים קודמים, הנייר הזה הראה כי CUMS גורמת לירידה בצריכת סוכרוז ופעילות גינקולוגיות. השימוש רציפה של Xiaoyaosan היה יעיל מניעה וטיפול CUMS-induced דיכאון בעכברים. מחקרים רבים בחנו דיכאון, הבנה מתקדם של מודל חיה יכולה להיות, המפתח להבהרת המנגנון של דיכאון30. השיטה CUMS שמתואר פרוטוקול זה ניתן להציג ביעילות המדינה דיכאון של עכברים. שלא כמו ' מתח כרוני מתון (CMS) או הנייח כרונית מתח (CIS) שיטת31,32, נקודת מפתח של CUMS טמון הבחירה של לחצים בלתי צפוי והיישום רציונלית של מודל הערכה. כדי נוסף לאשר את השיטה ואת התוצאה המוצגת פרוטוקול זה, העבודה צריכה לכלול את מבחר יותר לחצים ושיטות הערכה עבור שיטת CUMS וזיהוי של ההשפעות לטווח של Xiaoyaosan 28-48 ימי CUMS.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgments

מחקר זה נתמך על ידי מענקים הלאומי מדעי הטבע קרן של סין (מס 81630104; 81473597 מס), את המימון למחקר יסוד האוניברסיטאות המרכזי (מספר 2018-JYBZZ-XS005). הפרוטוקול ואת התוצאות הדגימו בעיתון הזה מקורו של המאמר מעורבות של מנורמל גליה Fibrillary חומצי חלבון ביטוי Hippocampi ב Antidepressant-Like אפקטים של Xiaoyaosan על עכברים הדגיש באופן כרוני על ידי ד ר. דינג סו-פנג, et al.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Chinese Herbs Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company - The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d.
Fluoxetine PATHEON FRANCE 5545A The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d.
C57BL/6j mice Beijing Vital River of the Charles River Company SCXK 2011-0004 60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company.
Mouse cage Styling Biotechnology 34853016 318×202×135 mm
Distilled Water - - The water was used througout the experiment.
Sucrose Sigma - The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution.
ACS-2EAS Electronic Balance Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd. - It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages.
Wooden Black Lusterless Box - - (40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines.
WV-CP470 Camera Panasonic, Japan - A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test.
Etho Vision 3.0 Software Noldus, Wageningen, Holland - A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice.
SPSS Statistics 21.0 Software IBM - SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups.
Graphpad Prism 6.0 Software Graphpad Software,Inc.USA - Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Chrousos, G. P., Gold, P. W. The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis. JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).
  2. Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y. Cinnamic aldehyde treatment alleviates chronic unexpected stress-induced depressive-like behaviors via targeting cyclooxygenase-2 in mid-aged rats. Journal of Ethnopharmacology. 162, 97-103 (2015).
  3. Murray, C. J., Lopez, A. D. Global health statistics: a compendium of incidence prevalence and mortality estimates for over 200 conditions. World Health Organization Harvard School of Public Health World Bank. , ii (1996).
  4. Sackeim, H. A. The definition and meaning of treatment-resistant depression. Journal of Clinical Psychiatry. 62 (16), 10-17 (2001).
  5. Li, W., et al. The effect of compounds of soothing liver, invigorating spleen, tonifying kidney on the praxiology and immunological function of chronic immobilization stressed rats. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica. 11, 33-37 (2003).
  6. Meng, Z. Z., Chen, J. X., Jiang, Y. M., Zhang, H. T. Effect of Xiaoyaosan Decoction on Learning and Memory Deficit in Rats Induced by Chronic Immobilization Stress. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013 (17), 297154 (2013).
  7. Zhao, H., Wan, X., Chen, J. X. A mini review of traditional Chinese medicine for the treatment of depression in China. American Journal of Chinese Medicine. 37 (02), 207-213 (2009).
  8. Gao, X., et al. Metabonomic study on chronic unpredictable mild stress and intervention effects of Xiaoyaosan in rats using gas chromatography coupled with mass spectrometry. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 690-699 (2011).
  9. Li, P., et al. CNP signal pathway up-regulated in rectum of depressed rats and the interventional effect of Xiaoyaosan. World Journal of Gastroenterology. 21 (5), 1518 (2015).
  10. Li, X. J., et al. Xiaoyaosan exerts anxiolytic-like effects by down-regulating the TNF-α/JAK2-STAT3 pathway in the rat hippocampus. Scientific Reports. 7 (1), 353 (2017).
  11. Jun-Sheng, T., et al. Dynamic analysis of the endogenous metabolites in depressed patients treated with TCM formula Xiaoyaosan using urinary (1)H NMR-based metabolomics. Journal of Ethnopharmacology. 158, 1-10 (2014).
  12. Dai, Y., et al. Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).
  13. Zhou, Y., et al. Antidepressant-like effects of the fractions of Xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 236-244 (2011).
  14. Wang, P. S., et al. The Costs and Benefits of Enhanced Depression Care to Employers. Archives of General Psychiatry. 63 (12), 1345-1353 (2006).
  15. Pirraglia, P. A., Rosen, A. B., Hermann, R. C., Olchanski, N. V., Neumann, P. Cost-utility analysis studies of depression management: a systematic review. American Journal of Psychiatry. 161 (12), 2155-2162 (2004).
  16. Wang, S. X., et al. Xiaoyaosan Decoction Regulates Changes in Neuropeptide Y and Leptin Receptor in the Rat Arcuate Nucleus after Chronic Immobilization Stress. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2012 (4), 381278 (2012).
  17. Zhu, X., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus. Evidence-based Complementary and Alternative. 2014, (2014).
  18. Ding, X. F., et al. Involvement of Normalized Glial Fibrillary Acidic Protein Expression in the Hippocampi in Antidepressant-Like Effects of Xiaoyaosan on Chronically Stressed Mice. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1960584 (2017).
  19. Ding, X. F., et al. Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice. BMC Complementary & Alternative Medicine. 17 (1), 326 (2017).
  20. Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration. Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125 (1991).
  21. Duan, J. J., et al. Pharmacokinetics of 5-fluorouracil and cyclophosphamide in depression rats. European Review for Medical & Pharmacological Sciences. 16 (4), 427-436 (2012).
  22. Cao, X., et al. Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors. Science Foundation in China. 19 (1), 56 (2013).
  23. Kirshenbaum, G. S., et al. Decreased neuronal Na+, K+ -ATPase activity in Atp1a3 heterozygous mice increases susceptibility to depression-like endophenotypes by chronic variable stress. Genes Brain & Behavior. 10 (5), 542-550 (2011).
  24. Liu, X. J., et al. Urinary metabonomic study using a CUMS rat model of depression. Magnetic Resonance in Chemistry. 50 (3), 187-192 (2012).
  25. Zhu, S., et al. Unpredictable chronic mild stress induces anxiety and depression-like behaviors and inactivates AMP-activated protein kinase in mice. Brain Research. 1576, (2014).
  26. Yang, C., Wang, G., Wang, H., Liu, Z., Wang, X. Cytoskeletal alterations in rat hippocampus following chronic unpredictable mild stress and re-exposure to acute and chronic unpredictable mild stress. Behavioural Brain Research. 205 (2), 518-524 (2009).
  27. Ding, X. F., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System. Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914 (2014).
  28. Wu, L. L., et al. Antidepressant-Like Effects of Fractions Prepared from Danzhi-Xiaoyao-San Decoction in Rats with Chronic Unpredictable Mild Stress: Effects on Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis, Arginine Vasopressin, and Neurotransmitters. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016 (3), 1-11 (2016).
  29. Stanford, S. C. The Open Field Test: reinventing the wheel. Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134 (2007).
  30. Zeldetz, V., et al. A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats. Journal of Visualized Experiments. (132), e57137 (2018).
  31. Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
  32. Wood, G. E., Norris, E. H., Waters, E., Stoldt, J. T., Mcewen, B. S. Chronic immobilization stress alters aspects of emotionality and associative learning in the rat. Behavioral Neuroscience. 122 (2), 282-292 (2008).

Tags

התנהגות גיליון 143 Xiaoyaosan דיכאון לא צפוי מתח כרוני מתון דיכאון התנהגות בדיקת שדה פתוח בדיקת העדפה סוכרוז
הערכת אפקט אנטי-דיכאון של Xiaoyaosan על עכברים הדגיש באופן כרוני
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Yan, Z. Y., Li, X. J., Ding, X. F.,… More

Yan, Z. Y., Li, X. J., Ding, X. F., Liu, Y. Y., Chen, J. x. Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice. J. Vis. Exp. (143), e58276, doi:10.3791/58276 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter