Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

نموذج تجزئة النوم المزمن باستخدام الدوار المداري الهزاز للحث على العجز المعرفي والسلوك الشبيه بالقلق في الفئران البرية الشابة

Published: September 22, 2020 doi: 10.3791/61531
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1,2, 1,3
1Department of Neurology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430000, China, 2Key Laboratory of Neurological Diseases of Chinese Ministry of Education, The School of Basic Medicine, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430000,China, 3Department of Pharmacology, School of Basic Medical Science; State Key Laboratory of Medical Neurobiology, Institutes of Brain Science and Collaborative Innovation Center for Brain Science, Fudan University, Shanghai 200032, China

Summary

يُعرض هنا بروتوكول لنموذج تفتيت النوم المزمن (CSF) الذي حققه دوار مداري يتم التحكم فيه كهربائيًا ، والذي يمكن أن يحفز العجز المعرفي المؤكد والسلوك الشبيه بالقلق في الفئران البرية الشابة. يمكن تطبيق هذا النموذج لاستكشاف التسبب في اضطرابات النوم المزمنة والاضطرابات ذات الصلة.

Abstract

اضطراب النوم هو شائع عموما في السكان كداء مزمن أو حدث اشتكى. يُقترح أن يكون اضطراب النوم المزمن مرتبطًا ارتباطًا وثيقًا بـ "التسبب في الأمراض"، وخاصة الأمراض العصبية. وجدنا مؤخرا أن 2 أشهر من تجزئة النوم بدأت مرض الزهايمر (AD) مثل التغيرات السلوكية والمرضية في الفئران من النوع البرية الشباب. هنا، نقدم بروتوكول موحد لتحقيق تجزئة النوم المزمن (CSF). وباختصار، كان الدافع CSF من قبل الدوار المداري تهتز في 110 دورة في الدقيقة وتعمل مع دورة متكررة من 10 s-on، 110 s-off، خلال ضوء المرحلة (8:00 صباحا - 8:00 م) بشكل مستمر لمدة تصل إلى 2 أشهر. تم تقييم اعاقات التعلم المكاني والذاكرة ، مثل القلق ولكن ليس سلوك يشبه الاكتئاب في الفئران كآثار نميم CSF ، مع متاهة ماء موريس (MWM) ، والتعرف على كائن Novel (NOR) ، واختبار الحقل المفتوح (OFT) واختبار السباحة القسري (FST). بالمقارنة مع غيرها من التلاعبات النوم، هذا البروتوكول يقلل من التعامل مع العمل ويزيد من كفاءة النمذجة. وتنتج أنماط ظاهرية مستقرة في الفئران من النوع البرية الصغيرة ويمكن أن تنشأ لمجموعة متنوعة من الأغراض البحثية.

Introduction

اضطراب النوم هو شائع على نحو متزايد على حد سواء في المرضى الذين يعانون من ظروف مثيرة للقلق النوم والأشخاص الأصحاء مع أحداث مثيرة للقلق النوم. وقد لوحظ أن المرضى الذين يعانون من الأمراض العصبية ، والألم المزمن ، والإجهاد العاطفي ، وأمراض الجهاز التنفسي ، وأمراض الجهاز البولي ، وما إلى ذلك ، وعادة ما يشكو من تجارب النوم غير السارة1،2،3،4،5. توقف التنفس الانسدادي أثناء النوم (OSA) ، حركات الأطراف الدورية في النوم (PLMS) ، الأرق أثناء النوم بين اضطرابات النوم الأخرى هي الأسباب الأكثر شيوعًا ، والتي تحفز تجزئة النوم6،7. في البلدان المتقدمة، OSA لديها أكثر من 5٪ إلى 9٪ من انتشار في السكان البالغين و 2٪ في السكان الأطفال8،9،10. وفي الوقت نفسه، هناك نسبة متزايدة من السكان الأصحاء يعانون من اضطراب النوم بسبب الإفراط في استخدام الهواتف الذكية، وعادات النوم غير النظامية، والضوضاء المزعجة، وواجبات العمل، مثل النوبات الليلية لمقدمي الرعاية. ومن المسلم به أن النوم مهم لإزالة النفايات في الدماغ11,12, دمج الذاكرة13,14, التوازن الأيضي15,16, من بين العديد من العمليات الفسيولوجية الأخرى. ومع ذلك ، فإنه لا يزال غير معروف إلى حد كبير ما إذا كان اضطراب النوم على المدى الطويل يؤدي إلى تغييرات لا رجعة فيها في مسببات الأمراض في البشر الأصحاء ، وما إذا كان هو المسببات أو عامل المساهمة في تطوير أمراض الجهاز العصبي المركزي ، مثل الأمراض العصبية في غضون عامين على الطريق. هدفنا هو الإبلاغ عن نموذج تجريبي يولد عجزًا إدراكيًا مستقرًا وواضحًا وسلوكًا يشبه القلق في الفئران البرية الصغيرة بعد علاج تجزئة النوم لمدة شهرين. وسيطبق هذا النموذج على الإجابة على الأسئلة العلمية المذكورة أعلاه.

يتم إدراج اضطراب النوم كعامل خطر محتمل للإصابة بمرض الزهايمر (AD) أو الخرف. كانغ وآخرون وجدت لأول مرة ووصف تفاقم AD علم الأمراض من قبل 6 ح الحرمان من النوم الحاد17. بعد ذلك، ذكرت العديد من الدراسات الأخرى أن الحرمان من النوم أو تفتيت يمكن أن تؤدي إلى تفاقم التسبب في الفئران المُعدّرة في18،19،20. ومع ذلك، درس عدد قليل جدا من الباحثين نتيجة اضطراب النوم في الفئران من النوع البرية الشباب; وهذا هو، ما إذا كان اضطراب النوم يؤدي إلى سلوك AD مثل أو التغيرات المرضية في الفئران من نوع البرية الشباب. في نشرتنا الأخيرة، أبلغنا أن 2 أشهر من تجزئة النوم تسبب عجز واضح في الذاكرة المكانية والقلق مثل السلوك، فضلا عن زيادة بين الخلايا اميلويد β (Aβ) تراكم كل من القشرة وحصان في 2-3 أشهر من نوع الفئران البرية21. لاحظنا أيضا تغيير مستويات التعبير من علامات المسار endosome-autophagosome-lysosome وتفعيل microglia، الذي كان مشابها للتغيرات المرضية التي ذكرت في APP/PS1 الفئران21،22.

تم التحقق من صحة بروتوكول تجزئة النوم (SF) هذا من قبل Sinton etal. 23 وتم تعديله بواسطة Li etal. وباختصار، يُقاطع الدوار المداري الذي يهتز عند 110 دورة في الدقيقة النوم لمدة 10 دقائق كل 2 دقيقة أثناء مرحلة الإضاءة (8:00 صباحًا إلى 8:00 مساءً). تم وصف تغيير بنية النوم في هذا النموذج في السابق بتسجيلات النوم الكهربائية الفيزيولوجية والتي أبلغ عنها Li et al.24، مما يشير إلى زيادة كبيرة في وقت الاستيقاظ وانخفاض في حركة العين السريعة (REM) أثناء مرحلة الضوء على ، مع إجمالي أوقات النوم والاستيقاظ (في 24 ساعة) غير متأثرة بعد أكثر من 4 أسابيع من نميز24. حاليا، النوم الكلي أو الحرمان من النوم الجزئي هي نماذج التلاعب النوم الأكثر استخداما. وعادة ما يتم تنفيذ الحرمان من النوم الكلي من خلال التعامل مع لطيف مستمر أو تعريض الحيوان لأجسام جديدة ، بدلا من ذلك عن طريق تناوب باستمرار شريط أو حلقة مفرغة جارية25،26،27،28،29. لأسباب أخلاقية، الحرمان من النوم الكلي عادة ما يكون أقصر من 24 ساعة. الأكثر شيوعا تطبيق نموذج الحرمان من النوم الجزئي هو طريقة منصة المياه، والتي في المقام الأول النوم REM30،31،32. يمكن أن تؤدي الأساليب الأخرى باستخدام إما حلقة مفرغة أو شريط يكتسح على طول الجزء السفلي من القفص ، إلى تفتيت النوم عند تعيينها على فترات ثابتة33،34،35،36،37،38. يذكر أن SF يقاطع النوم ويسبب بشكل متقطع الإثارة عبر جميع مراحل النوم24. واحدة من المزايا البارزة لهذا النموذج CSF تطبيق الدوار المداري هو أنه يمكن تنفيذها بشكل مستمر لأشهر تسيطر عليها الآلات تلقائيا، مما يتجنب تكرار معالجة العمالة يوميا باستثناء المراقبة المنتظمة. وعلاوة على ذلك، سيسمح الجهاز في وقت واحد لنموذج أقفاص متعددة من الفئران في إطار التدخلات النظامية. خلال جلسات النمذجة بأكملها ، يتم إيواء الفئران في أقفاصها المنزلية مع الفراش المعتاد ومواد التعشيش ، في حين تتطلب بعض الطرق الأخرى التعرض لبيئات متنوعة والإجهاد الحتمي.

وقد تميزت تجزئة النوم في السابق من خلال طريقة التلاعب أثناء النوم ، والتي تحاكي الإثارة المتكررة خلال مرحلة النوم وانتعاش النوم الكبير خلال مرحلة الاستيقاظ. في بعض الآداب، كان يعتبر CSF كنموذج حيواني ل OSA39،40. في هذه الدراسة، ويستند الأساس المنطقي للتردد المختار من الإثارة أن يكون 30 مرة في الساعة على مراقبة مؤشرات الإثارة في المرضى الذين يعانون من توقف التنفس أثناء النوم متوسط إلى شديد. ولوحظ أن 4 أسابيع من النوم تجزئة زيادة كبيرة الكمون الإثارة hypercapnic وعتبة الإثارة عن طريق اللمس، والتي يمكن أن تستمر على الأقل 2 أسابيع بعد الانتعاش24. وقد تم تفسير هذا النمط الظاهري من خلال الكشف عن تقليل تنشيط c-fos في نورادرينرجي، أوريكسينرجي، الهيستاميني، والخلايا العصبية النشطة في الكولينين، استجابة لفرط كابينيا، فضلا عن خفض التوقعات الكاتيكولامين والحساسية من الأوريكسيني في قشرة cingulate24. ومع ذلك ، من الضروري ملاحظة أن أهم ميزة في OSA هي نقص الأكسجة الناجم عن انسداد مجرى الهواء ، مما يؤدي إلى اضطراب النوم41،42. اضطراب النوم و نقص الأكسجة المتكررة تتفاعل بشكل متبادل مع بعضها البعض في OSA pathogenesis. لذلك، قد لا يكون تجزئة النوم وحدها قادرة على إظهار جميع الميزات الرئيسية لـ OSA في الفئران بشكل كامل.

هنا، نقدم بروتوكول موحد لنموذج تجزئة النوم المزمنة في الفئران من النوع البرية الشباب. تم تقييم العجز المعرفي والقلق مثل السلوكيات مثل الاكتئاب بعد العلاج CSF من قبل متاهة المياه موريس، والتعرف على الكائن رواية، اختبار حقل مفتوح، واختبار السباحة القسري. من المهم أن نلاحظ أن هذا النموذج ينبغي أن تؤخذ ككل أن يولد الأنماط الظاهرية من نمط النوم dysregulated, العجز المعرفي, والقلق مثل السلوك. ويمكن تطبيق النموذج الحالي، على أن لا يكون مقصوراً، على الأغراض التالية: 1) مواصلة التحقيق في آليات الإمراض الوظيفية أو الجزيئية الناجمة عن اضطراب النوم المزمن في الفئران الصغيرة دون استعداد وراثي، 2) تحديد المسار المباشر المؤدي إلى التنكس العصبي الذي بدأه اضطراب النوم ، 3) استكشاف العلاجات لتحسين الأنماط الظاهرية الناجمة عن اضطراب النوم المزمن ، 4) دراسة الآليات الوقائية / التعويضية الجوهرية في الفئران البرية من النوع عند اضطراب النوم المزمن ، 5) ليتم تطبيقها لدراسة تنظيم النوم والاستيقاظ وآليات الدولة الانتقالية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وقد وافقت على هذا البروتوكول اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات في مستشفى تونغجي، كلية تونغجي الطبية، جامعة هواتشونغ للعلوم والتكنولوجيا.

1. الفئران فحص والتحضير للتجربة

  1. حدد الفئران من النوع البرية (8-10 أسابيع) ذكور بزبار بوزن 20-28 غرام للتجربة بأكملها.
    ملاحظة: يتم الحصول على فئران C57BL/6 البرية من مركز أبحاث هوبي للحيوانات المختبرية، هوبي، الصين.
  2. تعيين كل الماوس بشكل عشوائي إلى CSF ومجموعة التحكم. البيت 3-5 الفئران في كل قفص لتجنب الإجهاد العزلة الاجتماعية. يتم مطابقة عدد الفئران التي تقع في أقفاص التحكم مع تلك التي تقع في أقفاص CSF المقترنة.
    ملاحظة: يتم تجميع أجهزة الماوس في نفس أقفاص المجموعة لتنفيذ تجارب سلوكية متابعة.
  3. تحديد موقع أقفاص التحكم في نفس الغرفة مع أقفاص CSF، للحفاظ على البيئة المحيطة وآثار العمل متطابقة.
  4. قم بترقيم الفئران ووضع علامة عليها في كل مجموعة على آذانها باستخدام علامة الأذن لأغراض الرصد.
  5. الحفاظ على درجة الحرارة والرطوبة المحيطة بين 21-23 درجة مئوية و 35٪ -60٪
  6. حافظ على البيئة المحيطة في دورة 12 ساعة داكنة فاتحة (8:00 AM-8:00 PM ضوء ON، 8:00 م-8:00 صباحا ضوء إيقاف)، لتجنب تأثير متحيز على إيقاع النوم العادي في الفئران.
  7. تقليل الضوضاء والتداخل أثناء وجود الباحث في غرفة النمذجة.
  8. تزويد الفئران بما يكفي من الغذاء والماء. استخدام فوهات طويلة مع نصائح صمام الكرة على زجاجات المياه، لمنع تسرب المياه على حركات منصة. ربط زجاجة المياه على رأس القفص مع ربيع لتجنب خلع الزجاجة أثناء تشغيل الدوار.

2- إعداد وانشاء الدوار المداري

  1. إعداد الدوار المداري الذي يتم التحكم فيه كهربائياً بمنصة موسعة (67 سم × 110 سم)، حيث يمكن وضع 10 أقفاص على الأكثر.
  2. تعيين الدوار المداري على خلال ضوء المرحلة (8:00 صباحا - 8:00 م) التي تسيطر عليها توقيت البرنامج، وهو الوقت الذي تظهر الفئران معظم نومهم اليومي.
  3. ضبط الدوار المداري مع سرعة 110 دورة في الدقيقة ودورة متكررة من 10 s على، 110 s-إيقاف تسيطر عليها مع جهاز توقيت الحالة الصلبة.
    ملاحظة: قدرة التحميل للمنصة هي 50 كجم. السعة الثابتة من أفق الدوار تهتز هو 2.5 سم.
  4. ربط أقفاص CSF على رأس منصة الدوار بواسطة الينابيع الكثيفة لمنع خلع الأقفاص عند دوران المنصة.

3. النمذجة تجزئة النوم المزمنة والرصد

  1. ضع أقفاصًا لـ CSF وفئران التحكم في غرفة النمذجة لمدة أسبوع واحد قبل التجارب ، للسماح للفئران بالتكيف مع البيئة المحيطة.
  2. في بداية النمذجة، وضمان أن جميع الفئران لديها حرية الوصول إلى الغذاء والماء أثناء الدوران المداري.
  3. في البداية من النمذجة, يلاحظ على الأقلّ ل 1 ساعة أن يضمن الدوار مداريّة يشغل في عتاد.
  4. خلال فترة النمذجة، تحقق من أن الدوار المداري يعمل بشكل صحيح وظروف الفئران كل 2 أيام لضمان الفئران لديها ما يكفي من الغذاء والماء. تغيير الفراش من الأقفاص أسبوعيا.
  5. خلال فترة النمذجة، تزن الفئران أسبوعيا في الساعة 8:00 صباحا عند تغيير الفراش. إزالة الفئران مع فقدان الوزن كبيرة من النمذجة، وأيضا من المجموعات التجريبية.
    ملاحظة: يتم تعريف فقدان الوزن الكبير بأنه وزن أقل من 20 غرام يدوم لمدة أسبوعين.
  6. خلال جلسات النمذجة بأكملها، إزالة المعتدي، إن وجدت، من القفص و، أيضا من المجموعات التجريبية.
  7. بعد إنهاء النمذجة، والاستمرار في الحفاظ على وتغذية الفئران في الغرفة الأصلية.

4. موريس متاهة المياه (MWM) اختبار

  1. التحضير للاختبار
    1. إعداد جهاز من خزان دائري مليئة بالماء الدافئ (20-23 درجة مئوية).
    2. تعليق أربع علامات مع أشكال وألوان مختلفة على الستارة المحيطة خزان في أربعة اتجاهات رباعية كمرجع الرؤية البعيدة. جعل الماء لتظهر غير شفافة من خلال إضافة الحليب المجفف.
    3. حدد موقع منصة في منتصف الربع الجنوبي الغربي.
  2. اختبار التدريب
    1. تخضع الفئران لأربع تجارب متتالية بين الساعة 8:00 صباحًا والساعة 12:00 صباحًا يوميًا على مدى فترة تدريب مدتها 5 أيام.
    2. إطلاق كل فأر في الماء التي تواجه الجدار الجانبي في واحد من أربعة أرباع في أربع تجارب. في كل محاكمة، والسماح للماوس للسباحة لمدة 60 ق للعثور على منصة. إذا كان الماوس غير قادر على الوصول إلى المنصة في غضون 60 s، وتوجيهه إلى المنصة والبقاء هناك لمدة 15 s.
    3. استخدام نظام تتبع الفيديو لتسجيل تلقائيا الكمون الهروب من الفئران للعثور على منصة خفية.
  3. اختبار التحقيق
    1. إجراء اختبار التحقيق في اليوم السادس بعد 5 أيام تدريبية.
    2. إزالة النظام الأساسي. حرر كل فأر من الربع الشمالي الشرقي والسماح لها بالسباحة لمدة 60 s
    3. استخدم نظام تتبع الفيديو لتسجيل بيانات تتبع أجهزة الماوس تلقائيًا.

5. اختبار التعرف على كائن رواية (NOR)

  1. المرحلة المألوفة
    1. ضع الفئران في خزان (طول 30 سم، عرض 28 سم، ارتفاع 35 سم) في تسلسل، والذي يحتوي على نسختين من الكائنات (A1 و A2). السماح للفئران لاستكشاف بحرية (10 دقيقة لكل محاكمة).
    2. استخدم نظام تتبع الفيديو لتسجيل بيانات تتبع أجهزة الماوس تلقائيًا.
  2. مرحلة الاختبار
    1. إجراء تجربة الاختبار بعد تأخير 1 ساعة من المرحلة المألوفة. استبدال أحد الكائنات الأصلية بكائن جديد ("رواية") في الخزان مع الاحتفاظ بالكائنات الأخرى دون تغيير. إعادة الفئران إلى الخزان والسماح لها لاستكشاف لمدة 5 دقائق لكل محاكمة.
    2. استخدام نظام تتبع الفيديو لتسجيل تلقائيا الوقت الذي يقضيه في استكشاف كل كائن من قبل كل ماوس.
      ملاحظة: يتم تحديد استكشاف الجسم عن طريق لعق، استنشاق، مضغ، أو تتحرك vibrissae أثناء توجيه الأنف نحو وأقل من 1 سم من الكائن. يتم حساب مؤشر التمييز (DI) مع المعادلة (TN - TF)/(TN + TF) ، حيث TN = الوقت الذي يقضيه في استكشاف الكائن "الجديد" و TF = الوقت الذي يقضيه في استكشاف الكائن "المألوف".

6. فتح اختبار ميداني (OFT)

  1. إعداد جهاز من خزان (30 سم × 28 سم × 35 سم).
  2. خلال الاختبار، ضع كل فأر في وسط الخزان واسمح له بالاستكشاف بحرية لمدة 5 دقائق. تنظيف الخزان مع الإيثانول 75٪ بعد كل محاكمة لتجنب آثار بقايا الماوس السابق.
  3. استخدم نظام تتبع الفيديو لتسجيل بيانات تتبع أجهزة الماوس تلقائيًا.

7. اختبار السباحة القسري (FST)

  1. إعداد جهاز وعاء أسطواني مفتوح، والذي يحتوي على الماء (20-23 درجة مئوية) التي هي 15 سم عميق.
  2. خلال الاختبار، ضع كل فأر في الأسطوانة واسمح له بالبقاء هناك لمدة 6 دقائق.
  3. استخدام نظام تعقب الفيديو لتسجيل تلقائيا وقت الجمود خلال آخر 4 دقائق من الاختبار من قبل كل ماوس.
    ملاحظة: يتم تحديد الماوس لتكون غير متحركة عندما يتوقف عن تكافح ويطفو في الماء، مما يجعل الحركات التي هي ضرورية فقط للحفاظ على رأسه فوق الماء.

8. تحليل البيانات

  1. تحليل البيانات باستخدام برنامج التحليل الإحصائي (على سبيل المثال، GraphPad Prism 6.0).
  2. التعبير عن كافة البيانات في المتوسط ± SEM.
  3. قارن الكمون الهروب في اختبار MWM بين مجموعتين باستخدام ANOVA في اتجاهين مع التدابير المتكررة متبوعة posttests Bonferroni. يتم تحديد مقارنات أخرى بين CSF ومجموعات التحكم بواسطة اختبارات t غير مُزَوَّل.
  4. النظر في الاختلافات كبيرة إذا P < 0.05 في جميع الاختبارات.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

وقد استنسخت جميع النتائج والأرقام التمثيلية من منشورنا الأخير21. وقد سمح دفتر اليومية الأصلي بإعادة استخدام الأرقام.

ويتضح التصميم التجريبي بأكمله في ترتيب الوقت، والذي يشير إلى توقيت النمذجة CSF، والاختبارات السلوكية من MWM، نور، OFT، و FST(الشكل 1A). حصلنا على أوزان الفئران كل أسبوع من CSF ومجموعات التحكم ، لمراقبة ظروفها العامة خلال جلسات النمذجة. لم يتم العثور على فرق واضح في زيادة الوزن في الفئران بين مجموعتين خلال النمذجة (الشكل 1B).

لتقييم آثار CSF على التعلم المكاني وأداء الذاكرة ، أجرينا تجربة سلوكية MWM43،44. عرضت مجموعة CSF قدرات هروب أفقر للعثور على المنصة خلال 5 أيام تدريبية بالمقارنة مع مجموعة التحكم (الشكل 2A). في اختبار التحقيق، قضى الفئران CSF نسبة زمنية أقل بكثير في الربع المستهدف وعبرت موقع المنصة السابقة من قبل مرات أقل(الشكل 2B, C)، دون السباحة الفرق السرعة(الشكل 2D). وتشير هذه النتائج المذكورة أعلاه إلى أن قدرات الذَكَرَّ على التعلُّم المكاني واسترجاع الذاكرة قد ضعفت بعد الـ CSF.

كما أجرينا اختبار NOR لتقييم التعرف على الكائن والذاكرة العاملة قصيرة الأجل بعد CSF45. في المرحلة المألوفة، لم يكن هناك فرق كبير في إجمالي وقت الاستكشاف بين CSF ومجموعة التحكم (الشكل 3A). وفي المقابل، لم توجد فروق في وقت الاستكشاف بين الجسمين A1 و A2، على التوالي في مجموعتين(الشكل 3B). وضمنت النتائج المذكورة أعلاه عدم وجود اختلافات في قدرات الفئران على الاستكشاف وتفضيلات الموقع. في مرحلة الاختبار، تم تخفيض مؤشر التمييز (DI) للفئران CSF بشكل كبير مقابل الضوابط(الشكل 3C)، والتي تشير بوضوح إلى وجود عجز في التعرف على الكائن والذاكرة العاملة قصيرة الأجل بعد CSF.

قمنا كذلك OFT و FST، على التوالي لدراسة القلق مثل والاكتئاب مثل السلوكيات من الفئران46،47. ومن المثير للاهتمام، في OFT، وجد أن مجموعة CSF قضى وقتا أقل في المنطقة الوسطى من مجموعة التحكم(الشكل 4A)،الذي يوضح أن تجزئة النوم يمكن أن تحفز القلق مثل السلوك إلى حد ما. بالإضافة إلى ذلك، عرضت الفئران CSF مسافة إجمالية أطول تحركت في الخزان (الشكل 4B) ، مما يشير إلى زيادة النشاط التلقائي بعد النمذجة. ومع ذلك، هذا النمذجة CSF لا يمكن أن تحفز الاكتئاب مثل السلوك، والتحقق من قبل الفرق غير كبير في وقت الجمود بين مجموعتين تتعرض FST (الشكل 4C).

Figure 1
الشكل 1: المخطط الانسيابي لإجراء التصميم التجريبي. (أ) إجراء التصميم التجريبي الذي يشير إلى توقيت النمذجة CSF والاختبارات السلوكية (أي MWM و NOR و OFT و FST). (B) منحنيات وزن الجسم من CSF و الفئران التحكم خلال الشهر الأول بعد أن تم إنشاء نموذج CSF. وقد تم تعديل هذا الرقم من Xie et al.21الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: ضعفت قدرات التعلم المكاني والذاكرة في الـ CSF التي تم تقييمها بواسطة اختبار MWM. (أ)فئران CSF أداء أطول زمن الوصول الهروب مقارنة مع الفئران التحكم خلال اختبار التدريب لمدة 5 أيام. **p < 0.01. (B) في اختبار التحقيق ، أظهرت فئران CSF وقتًا أقل في النسبة المئوية التي تقضيها في ربع المنصة على النقيض من فئران التحكم. يُظهر اللوحة العلوية تتبعات تمثيلية لمجموعتين. p < 0.0001. (C)في اختبار التحقيق، قامت مجموعة CSF بأداء أوقات أقل لعبور موقع المنصة بالمقارنة مع مجموعة التحكم. * p < 0.05. (D) سرعة السباحة من مجموعتين في اختبار التحقيق. يشير ن.س. إلى أن التغييرات بين المجموعات المختلفة لم تكن كبيرة. وقدمت جميع البيانات على أنها متوسط ± SEM. n = 10 لكل مجموعة. وقد تم تعديل هذا الرقم من Xie et al.21الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: CSF ضعف التعرف على الكائن وذاكرة العمل وقت قصير تقييمها بواسطة اختبار NOR. أ) إجمالي وقت الاستكشاف بين CSF وفئران التحكم في المرحلة المألوفة، يشير إلى عدم وجود تغييرات كبيرة بين المجموعات المختلفة. (ب) وقت استكشاف الأجسام A1 و A2 على التوالي بين مجموعتين في المرحلة المألوفة. يشير n.s. إلى عدم وجود تغييرات كبيرة بين المجموعات المختلفة. (ج)في مرحلة الاختبار، انخفض مؤشر التمييز (DI) لمجموعة CSF بشكل كبير مقارنة بفئة المراقبة. * p < 0.05. وقدمت جميع البيانات على أنها متوسط ± SEM. n = 10 لكل مجموعة. وقد تم تعديل هذا الرقم من Xie et al.21الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 4
الشكل 4: فاقمت CSF السلوك الشبيه بالقلق ولكن ليس الشبيه بالاكتئاب الذي تم تقييمه من قبل OFT و FST. (أ)قضى فئران CSF وقتًا أقل في المنطقة المركزية خلال 5 دقائق الملاحظة مقارنة بفئران التحكم في OFT. * p < 0.05. (ب)مجموعة CSF عرض مسافة إجمالية أطول انتقلت في خزان مقابل مجموعة التحكم في OFT. * p < 0.05. (C) وقت الجمود بين CSF ومجموعات التحكم في FST. يشير n.s. إلى عدم وجود تغييرات كبيرة بين المجموعات المختلفة. وقدمت جميع البيانات على أنها متوسط ± SEM. n = 10 لكل مجموعة. وقد تم تعديل هذا الرقم من Xie et al.21الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

وتشمل الخطوات الحاسمة في البروتوكول الحالي إعداد آلات تجزئة النوم مع المعلمات المحسنة وفقًا لغرض الدراسة والحفاظ على الفئران في بيئة معيشية مريحة وهادئة طوال جلسات النمذجة بأكملها. ومن المهم أيضا أن تقرر التوقيت المناسب لمقاطعة أو وقف تجزئة النوم وترتيب الاختبارات السلوكية لتلك الفئران. مثل نماذج التلاعب النوم الأخرى، من المهم تنفيذ البروتوكول في غرفة مخصصة مع دورات الضوء الخاضعة للرقابة وفراغ من جميع التدخلات غير الضرورية المحتملة. وينبغي بذل الجهود لتجنب إثارة الضوضاء وتقليل وقت التشغيل الذي يقوم به الباحثون لفحصها، وإعادة تعبئة الأغذية، وإمدادات المياه، وتغيير الفراش، وما إلى ذلك. في حالات نادرة، هناك معتدون يهاجمون زملاء القمامة، وخاصة في بدء جلسات اضطراب النوم غير مريحة. وينبغي أن تخرج المعتدي عندما تكون موجودة من أقفاص المنزل، فضلا عن المجموعات التجريبية. معظم الحيوانات التجريبية باستثناء عدد قليل من تجربتنا، سوف تتكيف مع العلاج وتمكن من الوصول إلى المياه والغذاء حسب الحاجة. قد تسبب الفئران التي اُصيبت بمشاكل جوهرية، مثل الأسنان المشوهة، أو نقص الوزن، أو الجروح الجلدية، فقدان الوزن أو ضعفه. كما أنها تحتاج إلى تجنب استخدامها في النمذجة. وبما أن هذا البروتوكول يمكن أن يؤدي إلى الإجهاد المزمن والديستريج، فمن الضروري استخدام الفئران التي تم فحصها بمعايير موحدة، مثل وزن الجسم، من أجل النمذجة والتجارب.

في البروتوكول الموصوف، سيتم تشغيل الدوار المداري تلقائيًا خلال الساعة 8:00 صباحًا حتى 8:00 مساءً (الضوء على) يوميًا، وهو الوقت الذي تظهر فيه الفئران معظم حياتها اليومية. تم تعيين الدوار يعمل على دورة متكررة من 10 ق على، 110 s-off خلال ضوء على المرحلة للحث على الإثارة المتكررة. ومن شأن مختلف فترات النمذجة تؤدي إلى أنماط ظاهرية مختلفة. يمكن أن يؤدي تفتيت النوم الحاد إلى انخفاض مطلق في مدة النوم ، وزيادة أنشطة الجهاز العصبي المتعاطفة ، مثل مستويات الكورتيزون المرتفعة وضعف حساسية الأنسولين23،24. ومع ذلك، أظهرت تجزئة النوم المزمنة مستويات الكورتيزون غير متأثرة، ومتوازنة مجموع وقت النوم24. أي تعديلات تستند إلى البروتوكول الحالي، مثل دورات الضوء، مطابقة إعدادات تهتز (السرعة، السعة، دورة المتكررة، الخ)ومدة النمذجة، يمكن أن يحتمل أن تغير الظواهر. مطلوب لإجراء تحليل تسجيل النوم وبنية النوم تحت إعدادات النمذجة المختلفة لتحديد الأنماط الظاهرية للنوم. كما قد يؤدي إلى تغييرات سلوكية مرضية ومميزة. كما استكشفنا العجز المعرفي بعد فترة طويلة بدلا من ليلة واحدة تجزئة النوم وتميل إلى تجنب الآثار المنحازة لتفتيت النوم المتقطع على سلوك الفئران في MWM و NOR، قمنا بإجراء هذين الاختبارين السلوكيين بعد إنهاء بروتوكول CSF في اليوم 60. ومع ذلك ، لا محالة ، فإن تأثير الانتعاش النوم في الفئران قد أربك النتائج لMM و NOR أظهرت.

على الرغم من أن هذا النموذج هو يحق مع نموذج تجزئة النوم, وهو يتألف في الواقع من أنماط النوم مجزأة خلال مرحلة الضوء على, dysregulation من إيقاع circadian, وانتعاش النوم التعويضي خلال مرحلة الضوء قبالة. هذا البروتوكول يمكن أن تحفز ليس فقط تغيير نمط النوم، ولكن أيضا العصبية كبيرة، اختلال التوازن الأيضي، اضطراب الجهاز المناعي، الخ21،23،24. كل هذه العمليات المرضية قد تتفاعل مع بعضها البعض وتوسط الأنماط الظاهرية مثل الأوركسترا. وينبغي أن يؤخذ هذا النموذج ككل لتوليد الفئران مع الأنماط الظاهرية من نمط النوم dysregulated، والعجز المعرفي، والسلوك مثل القلق في الفئران من النوع البرية الشباب. كما ذكر في القسم السابق، وهذا النموذج ليس بالضبط عكس OSA بسبب عدم وجود نقص الأكسجة المتكررة. وثمة قيد آخر هو أنه من الصعب توليد التغيرات المرضية الدقيقة والأنماط الظاهرية للنوم في الفئران نفسها. تطبيق واسع النطاق EEG / EMG زرع القطب للنوم تسجيل لا مفر منه الناجمة gliosis الشديد في القشرة48. في السنوات الأخيرة، تم تطبيق تقنيات مراقبة الفيديو وتحليل الصور على أساس الذكاء الاصطناعي في دراسات النوم، والتي من شأنها جمع معلومات النوم الدقيقة دون زرع القطب الغازي49،50،51.

وتشمل أهمية هذا الأسلوب CSF بالمقارنة مع الأساليب القائمة: 1) مختلفة عن بروتوكولات الحرمان من النوم التي عادة ما يتم تنفيذها لساعات أو أيام، والبروتوكول الحالي يحاكي بشكل أفضل اضطراب النوم على المدى الطويل في البشر الأصحاء. انتعاش النوم التعويضي في النوم الفئران مجزأة يعكس تماما somnolence النهار والمثبطات أداء العمل في الناس مع سوء نوعية النوم خلال الليل52,53. 2) هو حتى الآن نموذج تجزئة النوم المزمن الوحيد في الفئران من النوع البري مع العجز المعرفي المؤكد والقلق مثل ولكن ليس الاكتئاب مثل الأنماط الظاهرية السلوك، فضلا عن التغيرات المرضية الجزيئية واضحة في أنسجة الدماغ. 3) هذا العلاج يسبب تهيج أخف للفئران بحيث يمكن أن تستمر النمذجة لعدة أشهر، حتى مع إمكانية أن يتم تنفيذها في فترات أطول من الزمن. 4) مع الإعدادات المناسبة، يمكن لهذا النموذج توليد أنماط ظاهرية مستقرة من اضطراب النوم، والعجز المعرفي، والقلق مثل السلوك، والتي يمكن استخدامها إما نماذج المرض أو التدخلات لتصاميم الدراسة المختلفة. 5) تتطلب بعض نماذج الحرمان من النوم تدخل الجلسة الكاملة من قبل الباحثين لتطبيق التعامل اللطيف أو الأشياء الجديدة. باستثناء المراقبة المنتظمة ، تقلل هذه الطريقة من التعامل مع المخاض ، مما يلغي أيضًا التحيز الاصطناعي.

هذا البروتوكول CSF يوفر الفرصة للإجابة على عدد من الأسئلة العلمية الرئيسية، مثل، هو اضطراب النوم المزمن سبب أو نتيجة الأمراض العصبية؟ هل اضطراب النوم المزمن الناجم عن التسبب في التسبب في الاضطرابات المرضية أثناء سن مبكرة قابل للعكس؟ هل تختلف الآليات التعويضية عند اضطرابات النوم المزمنة بين الشباب وكبار السن، والأشخاص الأصحاء، والمرضى؟ ويمكن أيضا تطبيق هذا البروتوكول لاستكشاف العلاجات من خلال تقييم شدة وتحسين الأنماط الظاهرية السلوكية والجزيئية. كما سيتم تطبيقه على نمذجة الفئران مع استئصال القراني المزمن ، وإعدادات زرع الألياف البصرية للتسجيلات الوظيفية. وعلاوة على ذلك، يمكن أن تستخدم استراتيجية التدخل للحث أو تفاقم الأنماط الظاهرية على رأس الظروف الموجودة من قبل. وأخيراً، يمكن استخدامه لدراسة الآليات الانتقالية في حالة النوم والاستيقاظ. ومن المثير للاهتمام، يمكن للنموذج CSF الحالي أن يحفز القلق الشبيه بالسلوك الشبيه بالاكتئاب في الفئران، وهو ما يتماشى مع الملاحظة السريرية التي تفيد بأن اضطراب النوم لدى المرضى من المرجح أن يرتبط أكثر بكثير بالقلق منه مع الاكتئاب54،55. وهو يوفر نموذجا عمليا لدراسة الاضطرابات العاطفية في القوارض.

وباختصار، فإننا نقدم بروتوكول النمذجة تجزئة النوم المزمنة باستخدام الدوار المداري تهتز، والتي يمكن أن تنتج أنماط ظاهرية مستقرة في الفئران من نوع البرية الشباب وتقليل العمل النمذجة مع كفاءة عالية. ويمكن أن تنشأ من المحتمل لمجموعة متنوعة من أغراض البحث.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ويعلن أصحاب البلاغ أنهما لا يملكان مصالح مالية متنافسة.

Acknowledgments

وقد دعم هذا العمل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (61327902-6 إلى و. وانغ و81801318 إلى F.F. Ding). ونحن نعترف الدكتور سيغريد فيسي لإنشاء نظام تجريبي SF والتفضل بتقديم التفاصيل التقنية. ونحن نعترف الدكتور مايكين Nedergaard للتعليقات مفيدة للتجارب ذات الصلة.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Any-maze behavior tracking system Stoelting,Inc,USA - A video-tracking system which was used to record the behavior track of mice.
C57BL/6J mice Hubei Research Center for Laboratory Animals, Hubei, China. - healthy male C57BL/6J mice aged 10-12 weeks were purchased from Hubei Research Center for Laboratory Animals
Graphpad Prism 6.0 Software Graphpad Software,Inc.USA - Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs.
Morris water maze system Shanghai XinRuan Information Technology Co.,Ltd,China XR-XM101 The system was used to perform Morris water maze test
Orbial rotor Shanghai ShiPing Laboratory Equipment Co.,Ltd,China SPH-331 The orbital rotor was used to establish the chronic sleep fragmentation model
Solid state timer OMRON Corporation, Kyoto, Japan H3CR-F8-300 The solid state time was used to control the frequency and time of the rotor running
Wooden Lusterless Tank - - length 30 cm, width 28 cm, height 35 cm The tank was used to perform open field test and novel object recognition test

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Peter-Derex, L., Yammine, P., Bastuji, H., Croisile, B. Sleep and Alzheimer's disease. Sleep Medicine Reviews. 19, 29-38 (2015).
  2. Mathias, J. L., Cant, M. L., Burke, A. L. J. Sleep disturbances and sleep disorders in adults living with chronic pain: a meta-analysis. Sleep Medicine. 52, 198-210 (2018).
  3. Murphy, M. J., Peterson, M. J. Sleep Disturbances in Depression. Sleep Medicine Clinics. 10 (1), 17-23 (2015).
  4. Walter, L. M., et al. Sleep disturbance in pre-school children with obstructive sleep apnoea syndrome. Sleep Medicine. 12 (9), 880-886 (2011).
  5. Helfand, B. T., et al. The relationship between lower urinary tract symptom severity and sleep disturbance in the CAMUS trial. Journal of Urology. 185 (6), 2223-2228 (2011).
  6. Kimoff, R. J. Sleep fragmentation in obstructive sleep apnea. Sleep. 19 (9), Suppl 61-66 (1996).
  7. Dhondt, K., et al. Sleep fragmentation and periodic limb movements in children with monosymptomatic nocturnal enuresis and polyuria. Pediatric Nephrology. 30 (7), Berlin, Germany. 1157-1162 (2015).
  8. Young, T., Peppard, P. E., Gottlieb, D. J. Epidemiology of obstructive sleep apnea: a population health perspective. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 165 (9), 1217-1239 (2002).
  9. Peppard, P. E., et al. Increased prevalence of sleep-disordered breathing in adults. American Journal of Epidemiology. 177 (9), 1006-1014 (2013).
  10. Marcus, C. L., et al. Diagnosis and management of childhood obstructive sleep apnea syndrome. Pediatrics. 130 (3), 714-755 (2012).
  11. Xie, L., et al. Sleep drives metabolite clearance from the adult brain. Science. 342 (6156), New York, N.Y. 373-377 (2013).
  12. Benveniste, H., et al. The Glymphatic System and Waste Clearance with Brain Aging: A Review. Gerontology. 65 (2), 106-119 (2019).
  13. Stickgold, R., Walker, M. P. Memory consolidation and reconsolidation: what is the role of sleep. Trends in Neurosciences. 28 (8), 408-415 (2005).
  14. Stickgold, R. Sleep-dependent memory consolidation. Nature. 437 (7063), 1272-1278 (2005).
  15. Aalling, N. N., Nedergaard, M., DiNuzzo, M. Cerebral Metabolic Changes During Sleep. Current Neurology and Neuroscience Reports. 18 (9), 57 (2018).
  16. Rempe, M. J., Wisor, J. P. Cerebral lactate dynamics across sleep/wake cycles. Frontiers in Computational Neuroscience. 8, 174 (2014).
  17. Kang, J. E., et al. Amyloid-beta dynamics are regulated by orexin and the sleep-wake cycle. Science. 326 (5955), New York, N.Y. 1005-1007 (2009).
  18. Minakawa, E. N., et al. Chronic sleep fragmentation exacerbates amyloid beta deposition in Alzheimer's disease model mice. Neuroscience Letters. 653, 362-369 (2017).
  19. Qiu, H., et al. Chronic Sleep Deprivation Exacerbates Learning-Memory Disability and Alzheimer's Disease-Like Pathologies in AβPP(swe)/PS1(ΔE9) Mice. Journal of Alzheimer's Disease : JAD. 50 (3), 669-685 (2016).
  20. Holth, J. K., et al. The sleep-wake cycle regulates brain interstitial fluid tau in mice and CSF tau in humans. Science. 363 (6429), New York, N.Y. 880-884 (2019).
  21. Xie, Y., et al. Chronic sleep fragmentation shares similar pathogenesis with neurodegenerative diseases: Endosome-autophagosome-lysosome pathway dysfunction and microglia-mediated neuroinflammation. CNS Neuroscience & Therapeutics. 26 (2), 215-227 (2020).
  22. Ba, L., et al. Distinct Rab7-related Endosomal-Autophagic-Lysosomal Dysregulation Observed in Cortex and Hippocampus in APPswe/PSEN1dE9 Mouse Model of Alzheimer's Disease. Chinese Medical Journal (England). 130 (24), 2941-2950 (2017).
  23. Sinton, C. M., Kovakkattu, D., Friese, R. S. Validation of a novel method to interrupt sleep in the mouse. Journal of Neuroscience Methods. 184 (1), 71-78 (2009).
  24. Li, Y., et al. Effects of chronic sleep fragmentation on wake-active neurons and the hypercapnic arousal response. Sleep. 37 (1), 51-64 (2014).
  25. Misrani, A., et al. Differential effects of citalopram on sleep-deprivation-induced depressive-like behavior and memory impairments in mice. Progress Neuro-psychopharmacology & Biological Psychiatry. 88, 102-111 (2019).
  26. Xu, A., et al. Roles of hypothalamic subgroup histamine and orexin neurons on behavioral responses to sleep deprivation induced by the treadmill method in adolescent rats. Journal of Pharmacological Sciences. 114 (4), 444-453 (2010).
  27. Saito, L. P., et al. Acute total sleep deprivation potentiates amphetamine-induced locomotor-stimulant effects and behavioral sensitization in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 117, 7-16 (2014).
  28. Spano, G. M., et al. Sleep Deprivation by Exposure to Novel Objects Increases Synapse Density and Axon-Spine Interface in the Hippocampal CA1 Region of Adolescent Mice. The Journal of Neuroscience : The Official Journal of the Society for Neuroscience. 39 (34), 6613-6625 (2019).
  29. Morrow, J. D., Opp, M. R. Sleep-wake behavior and responses of interleukin-6-deficient mice to sleep deprivation. Brain, Behavior, and Immunity. 19 (1), 28-39 (2005).
  30. Arthaud, S., et al. Paradoxical (REM) sleep deprivation in mice using the small-platforms-over-water method: polysomnographic analyses and melanin-concentrating hormone and hypocretin/orexin neuronal activation before, during and after deprivation. Journal of Sleep Research. 24 (3), 309-319 (2015).
  31. Aleisa, A. M., Alzoubi, K. H., Alkadhi, K. A. Post-learning REM sleep deprivation impairs long-term memory: reversal by acute nicotine treatment. Neuroscience Letters. 499 (1), 28-31 (2011).
  32. Zagaar, M., Dao, A., Alhaider, I., Alkadhi, K. Regular treadmill exercise prevents sleep deprivation-induced disruption of synaptic plasticity and associated signaling cascade in the dentate gyrus. Molecular and Cellular Neurosciences. 56, 375-383 (2013).
  33. McKenna, J. T., et al. Sleep fragmentation elevates behavioral, electrographic and neurochemical measures of sleepiness. Neuroscience. 146 (4), 1462-1473 (2007).
  34. Tartar, J. L., et al. Hippocampal synaptic plasticity and spatial learning are impaired in a rat model of sleep fragmentation. The European Journal of Neuroscience. 23 (10), 2739-2748 (2006).
  35. Guzman-Marin, R., Bashir, T., Suntsova, N., Szymusiak, R., McGinty, D. Hippocampal neurogenesis is reduced by sleep fragmentation in the adult rat. Neuroscience. 148 (1), 325-333 (2007).
  36. Nair, D., et al. Sleep fragmentation induces cognitive deficits via nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase-dependent pathways in mouse. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (11), 1305-1312 (2011).
  37. McCoy, J. G., et al. Experimental sleep fragmentation impairs attentional set-shifting in rats. Sleep. 30 (1), 52-60 (2007).
  38. Dumaine, J. E., Ashley, N. T. Acute sleep fragmentation induces tissue-specific changes in cytokine gene expression and increases serum corticosterone concentration. American Journal of Physiology. Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 308 (12), 1062-1069 (2015).
  39. Carreras, A., et al. Chronic sleep fragmentation induces endothelial dysfunction and structural vascular changes in mice. Sleep. 37 (11), 1817-1824 (2014).
  40. Khalyfa, A., et al. Circulating exosomes potentiate tumor malignant properties in a mouse model of chronic sleep fragmentation. Oncotarget. 7 (34), 54676-54690 (2016).
  41. Ferreira, C. B., Cravo, S. L., Stocker, S. D. Airway obstruction produces widespread sympathoexcitation: role of hypoxia, carotid chemoreceptors, and NTS neurotransmission. Physiological Reports. 6 (3), (2018).
  42. Tripathi, A., et al. Intermittent Hypoxia and Hypercapnia, a Hallmark of Obstructive Sleep Apnea, Alters the Gut Microbiome and Metabolome. mSystems. 3 (3), (2018).
  43. D'Hooge, R., De Deyn, P. P. Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory. Brain Research. Brain Research Reviews. 36 (1), 60-90 (2001).
  44. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols. 1 (2), 848-858 (2006).
  45. Vogel-Ciernia, A., Wood, M. A. Examining object location and object recognition memory in mice. Current Protocols in Neuroscience. 69, 1-17 (2014).
  46. Kraeuter, A. K., Guest, P. C., Sarnyai, Z. The Open Field Test for Measuring Locomotor Activity and Anxiety-Like Behavior. Methods in Molecular Biology. 1916, Clifton, N.J. 99-103 (2019).
  47. Porsolt, R. D., Bertin, A., Blavet, N., Deniel, M., Jalfre, M. Immobility induced by forced swimming in rats: effects of agents which modify central catecholamine and serotonin activity. European Journal of Pharmacology. 57 (2-3), 201-210 (1979).
  48. Hauglund, N. L., Kusk, P., Kornum, B. R., Nedergaard, M. Meningeal Lymphangiogenesis and Enhanced Glymphatic Activity in Mice with Chronically Implanted EEG Electrodes. The Journal of Neuroscience : The Official Journal of the Society for Neuroscience. 40 (11), 2371-2380 (2020).
  49. Nguyen-Michel, V. H., et al. Rapid eye movement sleep behavior disorder or epileptic seizure during sleep? A video analysis of motor events. Seizure. 58, 1-5 (2018).
  50. Zimmerman, J. E., Raizen, D. M., Maycock, M. H., Maislin, G., Pack, A. I. A video method to study Drosophila sleep. Sleep. 31 (11), 1587-1598 (2008).
  51. Abad, J., et al. Automatic Video Analysis for Obstructive Sleep Apnea Diagnosis. Sleep. 39 (8), 1507-1515 (2016).
  52. Sandlund, C., Hetta, J., Nilsson, G. H., Ekstedt, M., Westman, J. Impact of group treatment for insomnia on daytime symptomatology: Analyses from a randomized controlled trial in primary care. International Journal of Nursing Studies. 85, 126-135 (2018).
  53. Shekleton, J. A., Rogers, N. L., Rajaratnam, S. M. Searching for the daytime impairments of primary insomnia. Sleep Medicine Reviews. 14 (1), 47-60 (2010).
  54. Dixon, L. J., Lee, A. A., Gratz, K. L., Tull, M. T. Anxiety sensitivity and sleep disturbance: Investigating associations among patients with co-occurring anxiety and substance use disorders. Journal of Anxiety Disorders. 53, 9-15 (2018).
  55. Press, Y., Punchik, B., Freud, T. The association between subjectively impaired sleep and symptoms of depression and anxiety in a frail elderly population. Aging Clinical and Experimental Research. 30 (7), 755-765 (2018).

Tags

السلوك، العدد 163، تجزئة النوم المزمنة، الدوار المداري، العجز المعرفي، السلوك الشبيه بالقلق، توقف التنفس أثناء النوم الانسدادي، الأمراض العصبية
نموذج تجزئة النوم المزمن باستخدام الدوار المداري الهزاز للحث على العجز المعرفي والسلوك الشبيه بالقلق في الفئران البرية الشابة
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Xie, Y., Deng, S. Y., Chen, S. M.,… More

Xie, Y., Deng, S. Y., Chen, S. M., Chen, X. J., Lai, W. W., Huang, L. F., Ba, L., Wang, W., Ding, F. F. A Chronic Sleep Fragmentation Model using Vibrating Orbital Rotor to Induce Cognitive Deficit and Anxiety-Like Behavior in Young Wild-Type Mice. J. Vis. Exp. (163), e61531, doi:10.3791/61531 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter