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Bioengineering

बायोमेडिकल और बायोइंजीनियरिंग अनुसंधान के लिए एक ऑक्टोपस पारिस्थितिकी तंत्र की स्थापना

Published: September 22, 2021 doi: 10.3791/62705
Automatic Translation
1,2, 1,2, 1,2, 3,4, 1,2,4
1Department of Biomedical Engineering, Michigan State University, 2Neuroengineering division, The Institute for Quantitative Health Science and Engineering, Michigan State University, 3Biomedical Imaging division, The Institute for Quantitative Health Science and Engineering, Michigan State University, 4Department of Radiology, Michigan State University

Summary

ऑक्टोपस की अद्वितीय शारीरिक और शारीरिक संरचनाओं को समझना जैव चिकित्सा अनुसंधान को बहुत प्रभावित कर सकता है। यह मार्गदर्शिका प्रदर्शित करती है कि इस प्रजाति को समायोजित करने के लिए एक समुद्री वातावरण को कैसे सेट-अप और बनाए रखा जाए और ऑक्टोपस के तंत्रिका तंत्र की शारीरिक रचना और कार्य की कल्पना करने के लिए अत्याधुनिक इमेजिंग और विश्लेषणात्मक दृष्टिकोण शामिल हैं।

Abstract

बायोमेडिकल अनुसंधान में कई विकास शारीरिक और सेलुलर तंत्र की खोज से प्रेरित हैं जो विभिन्न प्रजातियों में विशिष्ट कार्यों का समर्थन करते हैं। ऑक्टोपस इन असाधारण जानवरों में से एक है जिसने वैज्ञानिकों को तंत्रिका विज्ञान, रोबोटिक्स, पुनर्योजी चिकित्सा और प्रोस्थेटिक्स के क्षेत्रों में नई अंतर्दृष्टि दी है। सेफालोपोड्स की इस प्रजाति के साथ अनुसंधान के लिए ऑक्टोपस और इसके पारिस्थितिकी तंत्र दोनों के लिए जटिल सुविधाओं और गहन देखभाल की स्थापना की आवश्यकता होती है जो परियोजना की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है। इस प्रणाली को जानवर के लिए एक सुरक्षित और स्वच्छ वातावरण प्रदान करने के लिए कई यांत्रिक और जैविक फ़िल्टरिंग सिस्टम की आवश्यकता होती है। नियंत्रण प्रणाली के साथ- साथ, सुविधा को लंबे समय तक संचालित रखने के लिए विशेष नियमित रखरखाव और सफाई की आवश्यकता होती है। टैंक के परिदृश्य को बदलकर, विभिन्न प्रकार के शिकार को शामिल करके, और उनके माध्यम से काम करने के लिए चुनौतीपूर्ण कार्यों को पेश करके इन बुद्धिमान जानवरों को एक समृद्ध वातावरण प्रदान करने की सलाह दी जाती है। हमारे परिणामों में एमआरआई और एक पूरे शरीर के ऑटोफ्लोरेसेंस इमेजिंग के साथ-साथ उनके तंत्रिका तंत्र को बेहतर ढंग से समझने के लिए व्यवहार संबंधी अध्ययन शामिल हैं। ऑक्टोपस के पास अद्वितीय शरीर विज्ञान होता है जो जैव चिकित्सा अनुसंधान के कई क्षेत्रों को प्रभावित कर सकता है। उन्हें एक टिकाऊ पारिस्थितिकी तंत्र प्रदान करना उनकी विशिष्ट क्षमताओं को उजागर करने में पहला महत्वपूर्ण कदम है।

Introduction

बायोमेडिकल अनुसंधान और बायोमेडिकल इंजीनियरिंग में नई अवधारणाएं अक्सर विशिष्ट रणनीतियों की पहचान करने से प्रेरित होती हैं जो जैविक प्रजातियों के पास पर्यावरण और शारीरिक स्थितियों और चुनौतियों को संबोधित करने के लिए होती हैं। उदाहरण के लिए, जुगनू में प्रतिदीप्ति गुणों को समझने से नए फ्लोरोसेंट सेंसर का विकास हुआ है जो अन्य मॉडल जीवों में सेलुलर गतिविधि की रिपोर्ट कर सकते हैं1; शैवाल में प्रकाश द्वारा सक्रिय आयन चैनलों की पहचान करने से सेलुलर और अस्थायी विशिष्ट प्रकाश-आधारित-न्यूरोमॉड्यूलेशन 2,3,4,5 का विकास हुआ है; पृथ्वी के चुंबकीय क्षेत्र के अनुसार नेविगेट करने वाले ग्लास कैटफ़िश में प्रोटीन की खोज ने चुंबकीय-आधारित-न्यूरोमॉड्यूलेशन 6,7,8,9,10,11 के विकास का नेतृत्व किया है; Aplysia में साइफन पलटा को समझना व्यवहार के सेलुलर आधार को समझने के लिए महत्वपूर्ण रहा है12,13,14.

शोधकर्ताओं ने शारीरिक कार्यों पर अद्वितीय शक्तियों और उपन्यास दृष्टिकोणों का लाभ उठाकर वर्तमान बायोइंजीनियरिंग और फाइलोजेनेटिक टूलबॉक्स पर विस्तार करना जारी रखा है जो गैर-पारंपरिक प्रयोगशाला प्रजातियां रखती हैं। संघीय एजेंसियां विभिन्न प्रजातियों पर किए गए उपन्यास कार्य को वित्त पोषित करके अध्ययन की इन लाइनों का समर्थन करना शुरू कर रही हैं।

अद्वितीय शरीर रचना विज्ञान और उत्थान क्षमताओं के साथ-साथ इसकी प्रत्येक भुजा, आकर्षक जीवविज्ञानी और इंजीनियरों के अनुकूली नियंत्रण के साथ जानवरों का एक जीनस, और समाज के हर हिस्से से दर्शकों को लुभाने वाला ऑक्टोपस 17 है। दरअसल, ऑक्टोपस के शरीर विज्ञान और व्यवहार के कई पहलुओं का अध्ययन पिछले दशकों में किया गया है15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 . हालांकि, आणविक और विकासवादी जीव विज्ञान, रोबोटिक्स, गति रिकॉर्डिंग, इमेजिंग, मशीन लर्निंग और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी में हाल के विकास ऑक्टोपस फिजियोलॉजी और व्यवहार से संबंधित खोजों में तेजी लाते हैं और उन्हें अभिनव बायोइंजीनियरिंग रणनीतियों में अनुवाद करते हैं27,28,29,30,31,32,33,34,35 ,36,37,38,39.

यहां हम वर्णन करते हैं कि ऑक्टोपस पशुपालन को कैसे स्थापित और बनाए रखा जाए, जो विभिन्न पृष्ठभूमि, वैज्ञानिक हितों और लक्ष्यों के वैज्ञानिकों और इंजीनियरों के लिए रुचि और प्रासंगिकता का होगा। फिर भी, हमारे परिणाम तंत्रिका विज्ञान और न्यूरोइंजीनियरिंग अनुसंधान में ऑक्टोपस के आवेदन पर ध्यान केंद्रित करते हैं। ऑक्टोपस में केंद्रीय मस्तिष्क में 45 मिलियन न्यूरॉन्स, ऑप्टिक लोब में 180 मिलियन न्यूरॉन्स और आठ अक्षीय डोरियों और परिधीय गैन्ग्लिया में अतिरिक्त 350 मिलियन न्यूरॉन्स के साथ एक अत्यधिक विकसित तंत्रिका तंत्र होता है; तुलनात्मक रूप से, एक कुत्ते में न्यूरॉन्स की एक समान संख्या होती है और एक बिल्ली के पास केवल आधा हिस्सा होता है। कशेरुक तंत्रिका तंत्र के विपरीत, केवल 32K efferent और 140K अभिवाही फाइबर हैं जो ऑक्टोपस के मस्तिष्क में लाखों न्यूरॉन्स को उनके हाथ के अक्षीय डोरियों में से प्रत्येक में लाखों न्यूरॉन्स से जोड़ते हैं40,41,42। ये अपेक्षाकृत कुछ इंटरकनेक्टिंग फाइबर बताते हैं कि मोटर कार्यक्रमों के निष्पादन के लिए अधिकांश विवरण अक्षीय कॉर्ड में ही किए जाते हैं, जो ऑक्टोपस के पास विशिष्ट रूप से वितरित न्यूरोनल नियंत्रण पर जोर देते हैं। ऑक्टोपस की बाहों में असाधारण ठीक मोटर नियंत्रण होता है जो उन्हें हेरफेर कौशल जैसे कि जार ढक्कन खोलने में सक्षम बनाता है, भले ही वे कंटेनर के अंदर हों। यह अत्यधिक विकसित prehensile मोटर क्षमता Cephalopods (ऑक्टोपस, cuttlefish और स्क्विड) 43 के वर्ग के लिए अद्वितीय है।

दरअसल, विकास के लाखों वर्षों के सैकड़ों के माध्यम से, ऑक्टोपस ने एक उल्लेखनीय और परिष्कृत जीनोम और शारीरिक प्रणाली 43,44 विकसित की है जिसने वैज्ञानिक और इंजीनियरिंग क्षेत्रों में नए विकास और प्रगति को प्रेरित किया है। उदाहरण के लिए, ऑक्टोपस के चूसने वालों की शारीरिक संरचना के आधार पर एक पानी-प्रतिरोधी चिपकने वाला पैच गीले और सूखे सतहों से चिपक सकता है45; ऑक्टोपस 'छलावरण त्वचा से प्रेरित एक सिंथेटिक छलावरण सामग्री एक फ्लैट, 2 डी सतह को धक्कों और गड्ढों के साथ एक तीन आयामी एक में बदल सकती है46। लघु नरम और स्वायत्त रोबोट (यानी, ऑक्टोबॉट्स) जो भविष्य में शरीर के अंदर सर्जिकल उपकरण के रूप में काम कर सकते हैं47; और एक हाथ (यानी, ऑक्टोआर्म) एक टैंक की तरह robot48 से जुड़ा हुआ भी विकसित किया गया है। ऑक्टोपस की कई प्रजातियों का उपयोग बायोमेडिकल अनुसंधान में किया जाता है जैसे, ऑक्टोपस वल्गारिस, ऑक्टोपस साइनेंसिस, ऑक्टोपस वैरियाबिलिस, और ऑक्टोपस बिमाकुलोइड्स (ओ. बिमाकुलोइड्स); O. vulgaris और O. bimaculoides सबसे आम 34,49,50 जा रहा है। विभिन्न ऑक्टोपस जीनोम का हालिया अनुक्रमण विशेष रुचि के इस जीनस को बनाता है और ऑक्टोपस अनुसंधान 34,43,51,52 में नई सीमाओं को खोलता है।

हमारे सेट-अप में उपयोग किए जाने वाले बिमाकुलोइड्स ऑक्टोपस की एक मध्यम आकार की प्रजाति है, जिसे पहली बार 1 9 4 9 में खोजा गया था, जिसे मध्य कैलिफोर्निया से बाजा कैलिफ़ोर्निया प्रायद्वीप के दक्षिण में पूर्वोत्तर प्रशांत तट से उथले पानी में पाया जा सकता है। यह अपनी आंखों के नीचे अपने मेंटल पर झूठे eyespots द्वारा पहचाना जा सकता है। जायंट पैसिफिक ऑक्टोपस (एंटरोक्टॉपस डोफ्लिनी) और कॉमन ऑक्टोपस (ओ. वल्गारिस) की तुलना में, कैलिफ़ोर्निया टू-स्पॉट ऑक्टोपस (ओ. बिमाकुलॉइड्स) आकार में अपेक्षाकृत छोटा है, जो कुछ सेंटीमीटर से छोटा शुरू होता है, एक किशोर के रूप में तेजी से बढ़ता है। जब एक प्रयोगशाला के भीतर उठाया जाता है, तो वयस्क मेंटल आकार 100 सेमी के औसत आकार तक बढ़ सकता है और 800 g53,54 तक वजन कर सकता है। ऑक्टोपस में अपने पहले 200 दिनों के भीतर तेजी से विकास की अवधि होती है; तब तक, उन्हें वयस्क माना जाता है और अपने जीवन के बाकी हिस्सों में 55,56,57 बढ़ते रहते हैं। ऑक्टोपस नरभक्षी हो सकते हैं, खासकर जब दोनों लिंगों को एक टैंक के भीतर एक साथ रखा जाता है; इसलिए, उन्हें अलग-अलग टैंक58 में व्यक्तिगत रूप से रखा जाना चाहिए।

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Protocol

सभी पशु अध्ययनों को मिशिगन स्टेट यूनिवर्सिटी की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (आईएसीयूसी) द्वारा अनुमोदित किया गया था।

1. ऑक्टोपस टैंक उपकरण सेट-अप

  1. सबसे पहले, एक मछलीघर के लिए सभी गैर-जैविक सामग्री प्राप्त करें जिन्हें समुद्री पर्यावरण प्रणाली में शामिल किया जाएगा, जैसा कि सामग्री की तालिका में दिखाया गया है। आकार इंच में प्रदान किए जाते हैं।
  2. स्थापना से पहले 70% इथेनॉल और विआयनीकृत (डीआई) पानी के साथ सभी टयूबिंग, पाइपिंग और फ़िल्टर सिस्टम भागों को धोएं। सफाई करते समय साबुन या किसी अन्य रसायन का उपयोग न करें।
  3. कार्बन फाइबर से बने चार टेबल पैरों के साथ और 2 इंच x 2 इंच x 23 इंच (भाग # 72) के आयामों के साथ एक फाइबर ग्लास टेबल 13 इंच x 49 इंच x 1/2 इंच (भाग # 71) रखें। टेबलटॉप के कोनों के नीचे सीधे पैरों को संलग्न करें।
  4. शीर्ष सतह के नीचे, टेबल पैरों में से प्रत्येक के बीच, 2 इंच x 2 इंच लंबा (भाग # 72) कार्बन फाइबर स्थिरीकरण ब्रेसिज़ को टेबल के नीचे और सीधे शीर्ष शेल्फ के किनारे के खिलाफ रखें। मेज के नीचे जमीन पर सीधे एक ही आयाम के साथ एक और शेल्फ शिकंजा के साथ संलग्न करें। पंप ( सामग्री की तालिका देखें) को सीधे नीचे शेल्फ सतह पर बैठने दें, जबकि टैंक शीर्ष सतह पर बैठता है। यह प्रणाली चित्र 1 में दिखाई गई है।
    नोट: टैंक से पानी का उत्पादन गुरुत्वाकर्षण खिलाया जाता है और टैंक के अंदर और बाहर खिलाने वाले लोगों को छोड़कर सभी टयूबिंग को अधिकतम जल निकासी सिर दबाव सुनिश्चित करने के लिए टैंक के नीचे से कम होने की आवश्यकता होती है।

Figure 1
चित्रा 1: ऑक्टोपस टैंक सेटअप। पानी इनलेट और आउटलेट (ए)। 1.22 मीटर x 0.3 मीटर (बी) के क्षेत्र के साथ प्रत्येक में तीन ऑक्टोपस टैंक। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

  1. ग्लास कटिंग ड्रिल बिट्स का उपयोग करके टैंक के किनारों में से एक से 2 इंच का एक एकल 13/4 इंच का छेद ड्रिल करें। पानी के आउटपुट सक्शन स्क्रीन के नीचे आउटपुट छेद की ऊंचाई का निर्धारण करेगा जैसा कि चित्रा 2 ए के दाईं ओर दिखाया गया है। पानी का स्तर सक्शन स्क्रीन द्वारा निर्धारित किया जाएगा और टैंक के शीर्ष से कम से कम 6 इंच की आवश्यकता होगी जो पानी के छप क्षेत्र के लिए अनुमति देता है।
  2. वर्गों को स्थायी रूप से कनेक्ट करने के लिए एक पीवीसी प्राइमर और सीमेंट का उपयोग करें। ऐसा करने के लिए, सबसे पहले, महिला पाइप के अंत में इच्छित पुरुष पीवीसी पाइप के अंत को स्लाइड करें। नर भाग के बाहर पेंटरों के टेप का एक टुकड़ा रखें जो अभी भी प्राइमर और सीमेंट को पाइप के बाहर दिखाने से रोकने के लिए दिखाई देता है। टैप करने के बाद भागों को अलग करें और उसी क्षेत्र में सीमेंट के आवेदन के बाद पुरुष पाइप के बाहर प्राइमर का एक हल्का कोट रखें।
  3. मादा पाइप में नर पाइप refit, जितनी जल्दी हो सके, सीमेंट के आवेदन के बाद और टेप को हटाने के बाद. प्राइमर और सीमेंट के आवेदन के 24 घंटे बाद, डीआई पानी के साथ नए जुड़े हिस्सों को धो लें। इलाज के समय के लिए आगे की दिशाओं के लिए सीमेंट उत्पाद को देखो।
    नोट: सुनिश्चित करें कि सभी टयूबिंग और उपकरणों का सेटअप पीवीसी प्राइमर और सीमेंट का उपयोग करने से पहले ठीक से रखा गया है; पाइप लंबाई आवश्यकताओं में भिन्नता हो सकती है।
  4. इसके बाद, स्थायी रूप से सक्शन स्क्रीन के 1 इंच बाहरी व्यास (ओडी) छोर को कोहनी संयुक्त के 1 इंच के आंतरिक व्यास (आईडी) अंत से कनेक्ट करें। कोहनी संयुक्त के अंत को सीधे पीवीसी टयूबिंग (1 इंच ओडी) से कनेक्ट करें। सीधे टयूबिंग के दूसरी तरफ कनेक्ट तो के माध्यम से दीवार सीधे एडाप्टर महिला सॉकेट कनेक्ट के 1 इंच आईडी के लिए.
    नोट: आईडी पाइप की अंदर की दीवारों के बीच की सबसे चौड़ी दूरी को संदर्भित करता है। OD टयूबिंग चौड़ाई के बाहर को संदर्भित करता है।
  5. स्थायी रूप से एक 1 इंच OD (चरण 1.8 से) के साथ एक सीधे 4 इंच लंबे परमवीर चक्र पाइप के माध्यम से दीवार सीधे एडाप्टर कनेक्ट करें। यह पाइप टैंक से बाहर का सामना करेगा।
  6. स्थायी रूप से सीधे पाइप को पीवीसी कनेक्टर के केंद्र से कनेक्ट करें (1 इंच आईडी टी के आकार का; चरण 1.9 से)। अगला, स्थायी रूप से दो 6 इंच लंबे (भाग # 69) पाइप (1 इंच ओडी) को टी कनेक्टर के दोनों विपरीत सिरों से कनेक्ट करें- एक हवा की रिहाई के लिए सीधे ऊपर का सामना करना पड़ रहा है और दूसरा सीधे पानी के प्रवाह के लिए नीचे है।
  7. स्थायी रूप से नीचे की ओर विस्तारित सीधे पाइप (चरण 1.10 से) को एक महिला सॉकेट कांटेदार पाइप (1-इंच आईडी) सीधे एडाप्टर से कनेक्ट करें। कंटीले पाइप एडाप्टर के लिए एक 36 इंच लंबी रबर ट्यूब (3/4 इंच आईडी) संलग्न करें।
  8. पानी के आउटपुट टयूबिंग और नाबदान प्रणाली के बीच शीतलन प्रणाली रखें।
  9. 3/4 इंच बार्ब फिटिंग, जो सिस्टम के साथ आता है, को चिलर यूनिट के इनपुट और आउटपुट पोर्ट पर संलग्न करें। चिलर के इनलेट फिटिंग पर रबर टयूबिंग (चरण 1.11 से) रखो।
  10. 3/4 इंच आईडी टयूबिंग का एक नया टुकड़ा कनेक्ट करें (चरण 1.13 से) चिलर आउटपुट (चरण 1.12 से) से नाबदान प्रणाली के इनलेट के रूप में चित्र 2b में दिखाया गया है।
  11. इसके बाद, 4 इंच x 12 इंच सॉक फ़िल्टर को 200 μm के छिद्र आकार के साथ, अपने निर्दिष्ट क्षेत्र में रखें जैसा कि चित्र 2 में दिखाया गया है। इसके अलावा, जैसा कि चित्रा 2 में दर्शाया गया है, प्रोटीन स्किमर और रिटर्न पंप को उनके उपयुक्त क्षेत्रों में रखें। वापसी पंप के साथ, पंप क्षेत्र की अंदर की दीवार पर स्वचालित शीर्ष ऑफ फ्लोट वाल्व संलग्न करें, पंप के पानी के इनलेट के शीर्ष से 2 इंच ऊपर; यदि आवश्यक हो तो पंप को टैंक से हटाए जाने से अवरुद्ध न करें।
  12. स्थायी रूप से पंप के आउटलेट (चरण 1.15 से) के लिए एक सीधी 12 इंच लंबी ट्यूब (3/4 इंच ओडी) कनेक्ट करें। 3/4 इंच ओडी सीधी ट्यूब के दूसरे छोर पर, स्थायी रूप से ट्यूब के ओडी को 3/4 इंच आईडी 45 डिग्री कोहनी संयुक्त से कनेक्ट करें। संयुक्त के दूसरे छोर पर, स्थायी रूप से 3/4 इंच ओडी टयूबिंग से कनेक्ट करें।
  13. सीधे ट्यूब के दूसरे छोर (चरण 1.16 से) को सीधे कम करने वाले एडाप्टर के 3/4 इंच आईडी पर संलग्न करें। स्थायी रूप से बड़े एडाप्टर अंत (2-इंच OD) यूवी प्रकाश के इनपुट के लिए कनेक्ट करें।
    नोट: सीधे टयूबिंग लंबाई भिन्न हो सकता है।
  14. अगला, पंप के आउटपुट पाइप (चरण 1.17 से) के साथ यूवी लाइट इनलेट के प्लेसमेंट का मिलान करें ताकि पाइप प्रकाश और पंप (चरण 1.15 से) के बीच झुक न सके। यूवी प्रकाश अनुलग्नक छेद से मेल खाने के लिए स्थिरीकरण ब्रेस में छेद ड्रिल करें। ड्रिल बिट के साथ शिकंजा के आकार का मिलान करें और दिए गए शिकंजा का उपयोग करके यूवी प्रकाश को तालिका में संलग्न करें।
  15. यूवी प्रकाश के आउटपुट के लिए एक और कम करने वाले एडाप्टर के 2-इंच की तरफ स्थायी रूप से कनेक्ट करें (चरण 1.18 से)। एडेप्टर की 1-इंच आईडी पर 5 इंच लंबी सीधी ट्यूब का 1-इंच का ओडी संलग्न करें। इसके बाद, 1-इंच ओडी ट्यूब के लिए 1-इंच आईडी के साथ एक 90 ° कोने का टुकड़ा कनेक्ट करें; कोने के टुकड़े का असंबद्ध अंत टैंक के किनारे की ओर इशारा करते हुए है जहां पानी के इनपुट को जाने का इरादा है (चरण 1.5 के रूप में एक ही पक्ष)।
  16. स्थायी रूप से कोने के दूसरे छोर (चरण 1.19 से) को 6 इंच लंबी ट्यूब (भाग # 69) से कनेक्ट करें जिसमें प्रवाह नियंत्रण इकाई (भाग # 2) के इनपुट के साथ 1-इंच ओडी है। स्थायी रूप से प्रवाह निगरानी इकाई के आउटपुट के लिए एक और 1-इंच ओडी ट्यूब (भाग # 69) कनेक्ट करें; लंबाई टैंक के पक्ष से परे कम से कम 3 इंच का विस्तार करना चाहिए।
  17. एक 13/4 इंच ग्लास कटिंग ड्रिल बिट (भाग # 1) का उपयोग करके, इच्छित वाटरलाइन के ऊपर 3 इंच और टैंक के किनारे से 2 इंच दूर एक नया छेद काटें (चित्रा 1 ए) पानी के आउटपुट छेद वाले पक्ष के विपरीत पक्ष पर। टैंक से बाहर का सामना करने वाले 1-इंच की पर्ची (भाग # 77) के साथ एक और थ्रू-वॉल बल्कहेड फिटिंग संलग्न करें।
  18. Bulkhead पर्ची करने के लिए 1 इंच OD और 4 इंच लंबाई (भाग # 69) स्थायी रूप से के साथ एक सीधी ट्यूब कनेक्ट. इस टयूबिंग टैंक से फैली दूरी से मेल खाने के लिए चरण 1.21 के अंतिम भाग से टयूबिंग को काट लें। स्थायी रूप से खुले पाइपों में से प्रत्येक के लिए एक 90 ° ट्यूब (भाग # 65) कनेक्ट करें और एक अंतिम 1 इंच ओडी सीधी ट्यूब (भाग # 69) को काटें जो स्थायी रूप से दोनों कोने के टुकड़ों को जोड़ती है।
    नोट: चित्रा 3 मछलीघर प्रणाली का एक सरल प्रतिनिधित्व से पता चलता है।
  19. नियंत्रण प्रणाली के बाकी (भाग # 34) को सेट करें, पहले पावर स्ट्रिप (भाग # 53) को मेज पर या पास की दीवार पर बढ़ते हुए। इसके बगल में तरल पदार्थ की निगरानी मॉड्यूल (भाग # 2) माउंट करें।
  20. प्रवाह सेंसर, बिजली पट्टी, और रिसाव का पता लगाने सेंसर मॉड्यूल के लिए कनेक्ट करें। विकास प्रकाश (भाग # 26) सेट करें जो शैवाल बिन (चित्रा 2) से जुड़ा हुआ है।
  21. प्रवाह सेंसर, यूवी प्रकाश, विकास प्रकाश, पंप, और ऊर्जा पट्टी के लिए प्रोटीन skimmer में प्लग. निर्माता के मैनुअल के अनुसार जल नियंत्रण प्रणाली प्रोग्रामिंग सेट करें।
  22. 1 गैलन रिवर्स ऑस्मोसिस (आरओ) या विआयनीकृत (डीआई) पानी के साथ व्यावसायिक रूप से उपलब्ध नमक मिश्रण के आधे कप को मिलाकर खारे पानी को तैयार करें। पूरी तरह से एक टैंक और नाबदान प्रणाली को भरने के लिए 45 गैलन बनाओ।
  23. नाबदान प्रणाली प्रवाह नियंत्रक के भीतर पंप को चालू करें और तब तक खारे पानी को जोड़ते रहें जब तक कि स्वचालित शीर्ष बंद वाल्व बंद स्थिति में न हो, इसलिए कोई अतिरिक्त मीठे पानी की आवश्यकता नहीं है।
  24. एक बार जब पानी पूरा हो जाता है, तो भरना बंद कर दें और 18 डिग्री सेल्सियस से 22 डिग्री सेल्सियस के बीच तापमान निर्धारित करने के लिए पानी की शीतलन इकाई को चालू करें क्योंकि यह बेहतर तापमान सीमा 53 है। प्रोटीन स्किमर चालू करें।
  25. टैंक के तल पर 30 किलोग्राम कुचल कोरल के साथ-साथ शैवाल बिन के तल पर कुचल कोरल की एक परत जोड़ें। ऑक्टोपस वातावरण में कई जीवित चट्टानों और किसी भी अन्य परिवर्धन में जोड़ें। टैंक के उद्घाटन को कवर करने के लिए एक शीर्ष रखें।
    नोट: जीवित चट्टानें मृत कोरल हैं जो बैक्टीरिया और शैवाल जैसे मैक्रोस्कोपिक समुद्री जीवन से बसे हुए हैं।
  26. पैकेजिंग पर निर्देशित के रूप में खारे पानी के एक्वैरियम में इस्तेमाल किया nitrifying बैक्टीरिया जोड़ें। इसे निर्देशित के रूप में जोड़ते रहें, पानी के परीक्षण किट, पीएच सेंसर और तापमान सेंसर के साथ दैनिक तापमान, लवणता, पीएच, अमोनिया, नाइट्राइट और नाइट्रेट की जांच करें। अमोनिया, नाइट्राइट और नाइट्रेट के स्तर के लिए सुरक्षित मान क्रमशः 0.5 पीपीएम, 0.25 पीपीएम और 10 पीपीएम से नीचे हैं।
  27. सुनिश्चित करें कि यूवी प्रकाश उन दिनों के लिए बंद हो जाता है जो नमकीन पानी के सूक्ष्मजीवों को बढ़ने की अनुमति देने के लिए नाइट्रिफाइंग बैक्टीरिया को जोड़ा जा रहा है। पैरामीटर सुरक्षित सीमाओं के भीतर होने के बाद, यूवी प्रकाश को फिर से सक्रिय किया जा सकता है।
  28. सिस्टम स्थापित होने के बाद, यह भी जांचें कि पीएच और ऑक्सीकरण क्रमशः 8.0-8.4 और Equation 159 पर है। मछलीघर में किसी भी जानवर को जोड़ने से पहले, तांबे के पानी के परीक्षण किट का उपयोग करके सिस्टम के भीतर किसी भी तांबे और ऑक्सीजन के स्तर की उपस्थिति की जांच करें।
    नोट: कॉपर अकशेरुकी को नुकसान पहुंचाता है और यह मछली गिल्स 60,61 में ऑस्मोरेगुलेशन के साथ हस्तक्षेप करता है।
  29. यदि पानी में तांबा पाया जाता है, तो DI / RO जल स्रोत का परीक्षण करें। यह निर्धारित करने के बाद कि पानी के स्रोत में तांबा नहीं है, 30% पानी का परिवर्तन करें और सक्रिय कार्बन ब्लॉक (भाग # 46) को पानी के भीतर रखें। यदि समस्या बनी रहती है, तो एक पूर्ण पानी परिवर्तन करें और सभी भागों को साफ करें।
  30. सभी पानी के मापदंडों को सुरक्षित स्तरों के भीतर निर्धारित करने के बाद, ऑक्टोपस जोड़ने से कम से कम एक सप्ताह पहले सिस्टम में 10 भूत चिंराट जोड़ें। यह बैक्टीरिया के लिए बायोमास पेश करने में मदद करेगा और समग्र पानी की गुणवत्ता को इंगित करेगा।
  31. शैवाल बिन के लिए अतिरिक्त मछलीघर पारिस्थितिकी तंत्र निवासियों जोड़ें। इसमें Chaetomorpha spp. (स्पेगेटी शैवाल), Trochus Sp. शामिल हैं। (बैंडेड ट्रोचस घोंघा), और Mercenaria mercenaria (चेरीस्टोन क्लैम)।

Figure 2
चित्रा 2: नाबदान प्रणाली. नाबदान प्रणाली (a) का साइड व्यू. नाबदान प्रणाली का शीर्ष दृश्य (b). कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: टैंक और पर्यावरण नियंत्रण इकाइयों के नीचे नाबदान फ़िल्टरिंग प्रणाली के साथ मछलीघर। हरे तीर प्रणाली के माध्यम से पानी के प्रवाह की दिशा को इंगित करते हैं। ठंडा करने के लिए अनुभाग एक से दो तक और हल्के पदार्थ से भारी जैविक पदार्थ को अलग करने के लिए तीन पर बहने वाला पानी। भारी अपशिष्ट नीचे और बाहर अनुभाग पांच में तैरता है जबकि छोटे जैविक पदार्थ खंड चार के भीतर सॉक फिल्टर में बहते हैं। पानी के भीतर शेष अपशिष्ट को हटाने के लिए छह में प्रोटीन स्किमर में प्रवेश करने वाले खंड पांच के नीचे चार से पानी बहता है। शैवाल बिन में अपशिष्ट, अमोनिया और नाइट्रेट्स को तोड़ने के साथ-साथ पानी को ऑक्सीजन देने के लिए सूक्ष्मजीव होते हैं। सिस्टम के अंतिम भाग में, टैंक में वापस पंप किए जाने से पहले वाष्पीकरण के लिए खाते में अधिक पानी जोड़ा जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

2. भंडारण टैंक

  1. दो लंबे 60-गैलन पानी के भंडारण टैंक स्थापित करें, एक खारे पानी के लिए और दूसरा आरओ पानी के लिए। सुनिश्चित करें कि मीठे पानी के टैंक की अधिकतम भरने की रेखा तालिका से लंबी है। नाबदान प्रणाली में फ्लोट वाल्व के स्वचालित शीर्ष पर एक 1/4 इंच टयूबिंग संलग्न करें और ताजे पानी के टैंक के तल पर टयूबिंग के दूसरे छोर को संलग्न करें।
    नोट: यह फिर से भरने के लिए है अगर पानी वाष्पित हो जाता है। नमक पानी में रहेगा।
  2. खारे पानी के टैंक को पानी से भरें और टैंक में नमक की आनुपातिक मात्रा जोड़ें। मिश्रण और उचित ऑक्सीकरण के लिए खारे पानी के भंडारण टैंक को लगातार वातित करें। नमक का पूरा मिश्रण सुनिश्चित करने के लिए उपयोग करने से पहले एक घंटे तक प्रतीक्षा करें।
    नोट: खारे पानी का टैंक सफाई के बाद टैंकों को फिर से भरने के लिए उपयोगी है।

3. खाद्य टैंक सेटअप

  1. एक सप्ताह से अधिक समय तक झींगा को जीवित रखने के लिए, उन्हें ऑक्टोपस से एक अलग टैंक में स्टोर करें, जिसमें लवणता 30 पीपीटी से कम हो और तापमान 25 डिग्री सेल्सियस के करीब हो।
  2. ऐसा करने के लिए, ऑक्टोपस टैंक परिपक्व होने के एक सप्ताह बाद, झींगा टैंक में परिपक्व खारे पानी के 8 गैलन स्थानांतरित करें। टैंक के तल पर 15 किलो कुचल कोरल जोड़ें। मोल्टिंग के लिए स्पॉट छिपाने के लिए टैंक में कुछ जीवित चट्टानों को जोड़ें (चित्रा 4)।
    नोट: परिपक्व समुद्री जल समुद्री बैक्टीरिया को खारे पानी के भीतर बढ़ने की अनुमति देने की प्रक्रिया को संदर्भित करता है जैसा कि चरण 1.30 में दिखाया गया है।
  3. टैंक के किनारे पर एक कनस्तर फ़िल्टर संलग्न करें। निर्माता द्वारा निर्देशित के रूप में कनस्तर फ़िल्टर सेट करें। टैंक में एक संलग्न हवा पत्थर के साथ एक ट्यूब से जुड़े टैंक के बगल में एक हवा पंप जोड़ें।
  4. फिल्टर को साफ करें और हर हफ्ते फ़िल्टर पैड बदलें। साथ ही 25 फीसदी पानी को एक साथ बदलने की जरूरत होगी। चरण 1.30 में वर्णित जल परीक्षण किट के साथ खाद्य टैंकों में नाइट्रोजन, पीएच और तापमान मापदंडों की दैनिक जांच करें। यदि पानी नाइट्रोजन पैरामीटर उच्च रहते हैं, तो अतिरिक्त पानी के परिवर्तन करें और पानी में नाइट्रोजन अवशोषक बैग जोड़ें; या यदि समस्याएं एक महीने से अधिक समय तक बनी रहती हैं, तो झींगा को एक बड़े टैंक में ले जाने की आवश्यकता होगी।
  5. जैसे ही कुचल कोरल तलछट नष्ट हो जाता है झींगा जोड़ें। पहले चिंराट जोड़ने के लिए, आगमन पर, बायोवेस्ट को हटाने के लिए 5 मिनट के लिए छोटे खारे पानी के टैंक में शिपिंग पानी के बिना चिंराट को स्थानांतरित करें। फिर, झींगा को सीधे टैंक में जोड़ा जा सकता है। मच्छर मछली, आगमन पर, सीधे चिंराट टैंक में जोड़ा जा सकता है।
    नोट: चिंराट और मच्छर मछली सामग्री शीट या अन्य खाद्य आपूर्तिकर्ताओं पर सूचीबद्ध किसी भी जीवित पशु वाणिज्यिक आपूर्तिकर्ता से खरीदा जा सकता है। ऑक्टोपस डीफ्रॉस्टेड झींगा की पेशकश करना भी संभव है।
  6. मछली के गुच्छे, मृत वनस्पति, या शैवाल 62 के साथ चिंराट और मछली को खिलाएं, जैसा कि खाद्य निर्देशों पर निर्देशित किया गया है।
  7. केकड़े के टैंक के लिए, 1 गैलन खारे पानी और 10 किलोग्राम कंकड़ जोड़ें। एक तरफ कंकड़ को ढेर करें, जिससे एक तरफ सूखी भूमि और दूसरी तरफ 2 सेमी खारे पानी को छोड़ दिया जा सके (जैसा कि चित्र 4 में उल्लेख किया गया है)। इन अकशेरुकी के लिए इष्टतम पर्यावरणीय जल पैरामीटर क्रमशः लवणता और तापमान 11,63 के लिए 30-35 पीपीटी और 22-25 डिग्री सेल्सियस होना चाहिए।
  8. टैंक में सीधे फिडलर केकड़े जोड़ें (चित्रा 4)। केकड़े अपने अधिकांश जीवन को भूमि पर बिताएंगे, लेकिन एक समय में कुछ दिनों के लिए पानी के नीचे हो सकते हैं, जिससे टैंक जो आंशिक रूप से पानी के नीचे है, उनके दीर्घकालिक अस्तित्व के लिए महत्वपूर्ण है।
  9. टैंक के सूखे क्षेत्र पर पकवान में मछली के गुच्छे जोड़कर दिन में एक बार फिडलर केकड़ों को खिलाएं। केकड़ों को हटाकर और खारे पानी का 100% बदलकर साप्ताहिक रूप से साफ करें। कंकड़ को साफ करें।
  10. ऑक्टोपस के लिए खारे पानी के टैंकों के भीतर समुद्री बिवाल्व मोलस्क (क्लैम और मसल्स) को स्टोर करें और खुद को खोलने और एक और पानी फ़िल्टरिंग तंत्र प्रदान करने के लिए।
  11. ऑक्टोपस टैंक के फ़िल्टरिंग सिस्टम पर अनावश्यक अपशिष्ट लोड रखने से बचने के लिए पहले सप्ताह के लिए एक अलग खाली टैंक के अंदर मसल्स रखें।
    नोट: जबकि मसल्स ऑक्टोपस की पसंद का भोजन रहे हैं, वे आगमन के तुरंत बाद मरने की अधिक संभावना रखते हैं और टैंक के भीतर जैविक अपशिष्ट को काफी हद तक बढ़ाएंगे यदि वे बड़ी मात्रा में मौजूद हैं।

4. टैंक के लिए ऑक्टोपस का परिचय

  1. सुनिश्चित करें कि अमोनिया, नाइट्राइट और नाइट्रेट का स्तर क्रमशः 0.5 पीपीएम, 0.25 पीपीएम और 10 पीपीएम से नीचे है। टैंक से ऑक्टोपस स्याही को हटाने के लिए पानी का हैंडपंप उपलब्ध है। इस प्रक्रिया के लिए दो लोगों को रखने की भी सिफारिश की जाती है।
  2. आगमन पर, बैग को पैमाने पर रखें और ऑक्टोपस को हटाने के बाद बैग का वजन घटाएं। जानवर को उनके टैंक में स्थानांतरित करते समय पानी के ऑक्सीकरण को बढ़ाने के लिए बैग में एक हवा का पत्थर जोड़ें। शिपिंग पानी के तापमान और लवणता को मापें। शिपमेंट के बाद लंबी बीमारी के रिकॉर्ड मामले।
    1. बैग से टैंक में किसी भी पानी को स्थानांतरित किए बिना, परिवहन बैग को टैंक के कोने पर लटकाएं, जिसमें बैग आंशिक रूप से टैंक के पानी में डूबा हुआ है ताकि परिवहन बैग के तापमान को बदलना शुरू किया जा सके। बैग से 10% पानी निकालें और सिंक को नीचे फेंक दें। टैंक से बैग में समान मात्रा में पानी जोड़ें। हर 10 मिनट में दोहराएं जब तक कि बैग में पानी का तापमान टैंक में पानी के तापमान से 1 डिग्री से अधिक अलग न हो।
    2. एक बार जब बैग और टैंक का तापमान अंतर 1 डिग्री के भीतर होता है, तो सुनिश्चित करें कि ऑक्टोपस को उनके व्यक्तिगत टैंक में स्थानांतरित करने के लिए दस्ताने पहने जाते हैं। स्थानांतरित करने के लिए, हस्तांतरण के दौरान समर्थन प्रदान करने के लिए ऑक्टोपस के नीचे दोनों हाथों को रखें; दूसरे व्यक्ति को धीरे से बैग की तरफ से सक्शन किए गए हथियारों को खींचने की आवश्यकता होगी।
    3. एक बार जब ऑक्टोपस बैग से बाहर हो जाता है, तो इसे अपने नए निवास स्थान के पानी में जल्दी से स्थानांतरित करें, जो शिपिंग बैग से जितना संभव हो उतना कम पानी स्थानांतरित करता है। टैंक में होने पर ऑक्टोपस रिलीज होने वाली किसी भी स्याही को हटाने के लिए हैंड पंप का उपयोग करें। अब जानवर का अनुमानित वजन प्राप्त करने के लिए पानी के साथ बैग का वजन करें।
  3. आगमन के बाद पहले 2 हफ्तों के लिए, ऑक्टोपस की दैनिक खपत की निगरानी करें जो उनके वजन का लगभग 4% से 8% होना चाहिए58,65,66। ऑक्टोपस को दिन में चार बार जांचा जाना चाहिए; इसे 2 सप्ताह के बाद प्रति दिन दो बार तक कम किया जा सकता है। आवश्यकतानुसार अपने भोजन की खपत को समायोजित करने के लिए हर दो सप्ताह में वजन करें।
    नोट: ऑक्टोपस की कुछ प्रजातियों को अपने टैंक से भागने के लिए जाना जाता है, इसलिए उनके टैंक के ढक्कन पर 2.5 किलोग्राम वजन रखने की सलाह दी जाती है।

5. दैनिक देखभाल

  1. पीएच, अमोनिया, नाइट्राइट और नाइट्रेट के लिए व्यावसायिक रूप से उपलब्ध खारे पानी के परीक्षण किट का उपयोग करके, किट के साथ प्रदान की गई चार टेस्ट ट्यूबों में टैंक के पानी की किट-निर्देशित मात्रा जोड़ें। जैसा कि परीक्षण किट पर निर्दिष्ट किया गया है, संबंधित ट्यूब में colorimetric अभिकारक की मात्रा जोड़ें।
  2. यदि अमोनिया, नाइट्राइट और नाइट्रेट का स्तर क्रमशः 0.5 पीपीएम, 0.25 पीपीएम और 10 पीपीएम से ऊपर है, तो बायोमास को सॉक फिल्टर से धोएं या एक नए सॉक फिल्टर में बदल जाएं। इसके अतिरिक्त, एक ब्रश के साथ स्किमर के शीर्ष से बायोमास को साफ करें और टैंक में अतिरिक्त denitrifying बैक्टीरिया जोड़ें। यदि समस्याएं बनी रहती हैं, तो ताजे खारे पानी के 25% को बदलें।
    नोट: उपरोक्त चरण पारिस्थितिकी तंत्र के भीतर नाइट्रोजन यौगिकों को कम करते हैं।
  3. टैंक से सभी मृत केकड़े और चिंराट शवों के साथ-साथ हैंडपंप का उपयोग करके किसी भी ऑक्टोपस फेकल मैटर को हटा दें। टैंक से शेष सभी जीवित केकड़ों को हटा दें और उन्हें भंडारण टैंक में वापस ले जाएं। इसके बाद, टैंक के भीतर बड़ी वस्तुओं को पुनर्व्यवस्थित करें।
  4. केकड़ों की आधी संख्या का परिचय दें जो ऑक्टोपस 1.25 + / - 0.25 ग्राम वजन वाले टैंक में दैनिक रूप से खाएंगे। किशोर ऑक्टोपस के लिए डीफ्रॉस्टेड झींगा या छोटे पुरुष फिडलर केकड़ों को खिलाएं। प्रयोग के आधार पर, केकड़े और चिंराट को टैंक में कहीं भी या सीधे ऑक्टोपस में पेश किया जा सकता है।
    नोट: ऑक्टोपस दैनिक भोजन की खपत उनके वजन का 4% -8% है67। जमे हुए चिंराट को ऑक्टोपस के वजन के आधार पर खाद्य स्रोत के रूप में भी प्रदान किया जा सकता है।
  5. पांच भूत चिंराट दैनिक की पेशकश करें. इस प्रयोग में औसतन तीन का सेवन किया गया। ऑक्टोपस को विभिन्न प्रकार का भोजन प्रदान करने के लिए, सप्ताह में एक बार एक जीवित क्लैम या मूसल दें और हमेशा टैंक के अंदर तीन मच्छर मछली बनाए रखें।
    नोट: जानवरों को विभिन्न प्रकार के भोजन देने की आवश्यकता नहीं है और जानवरों को प्रयोगों के दौरान भोजन द्वारा लुभाए जाने से रोक सकता है। ऑक्टोपस फीडिंग और व्यवहार की सबसे अच्छी निगरानी करने के लिए यहां उपयोग किया जाने वाला फीडिंग शेड्यूल वजन के आधार पर केकड़ों की आधी संख्या को पेश करना है और सुबह में पांच तक झींगा की संख्या बढ़ाना है। शाम को, केकड़ों के दूसरे आधे हिस्से को टैंक में पेश करें।

6. साप्ताहिक स्वच्छता

  1. नाबदान प्रणाली की सफाई से पहले स्किमर, पंप और शैवाल बिन रोशनी को बंद कर दें। फिर, पानी को हटाने से पहले सिस्टम के स्वचालित वाल्व को बंद कर दें। अंत में, स्किमर और सभी पानी को केवल नाबदान प्रणाली से हटा दें।
  2. अपनी दीवारों से अधिकांश बायोमास को हटाने के लिए हल्के से स्क्रब शैवाल बिन। एक ब्रश के साथ नाबदान क्षेत्र के बाकी हिस्सों को साफ करें। सॉक फ़िल्टर को हटा दें, सिरका के साथ साफ करें, और इसे सूखने दें; हर हफ्ते एक और सॉक फ़िल्टर के साथ घुमाएं जो हर तीन महीने में नए लोगों के साथ बदलते हैं। निकालें और साप्ताहिक skimmer के शीर्ष से बायोमास को साफ.
    नोट: प्लास्टिक को साफ करने के लिए धातु का उपयोग करने से बचें क्योंकि यह खरोंच पैदा करेगा जो माइक्रोबियल विकास के लिए प्रवण हो सकता है।
  3. स्किमर को सिस्टम में वापस रखें और खारे पानी के साथ फिर से भरना शुरू करें। जब पंप क्षेत्र भरना शुरू कर रहा है, तो सभी प्रणालियों को वापस चालू किया जा सकता है। जब फ्लोट वाल्व का स्वचालित शीर्ष बंद स्थिति में हो तो पानी जोड़ना बंद कर दें।

Figure 4
चित्रा 4: फिडलर केकड़ों के लिए टैंक (मिनुका पुग्नैक्स)। टैंक के नीचे सूखे बिस्तर के लिए आधा नामित है और दूसरा आधा उथले खारे पानी के 2 सेमी के लिए नामित है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 5
चित्रा 5: भूत चिंराट के लिए टैंक (Palaemonetes paludosus). झींगा टैंक में चट्टानें झींगा को छिपाने और मोल्ट करने के साथ-साथ सूक्ष्मजीवों के विकास के लिए स्थान प्रदान करती हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

7. अस्वस्थ जानवरों की देखभाल

  1. ऑक्टोपस वेलनेस का आकलन करने के लिए गाइड संदर्भ 66 का पालन करें।
    नोट: मादा ऑक्टोपस के लिए, जीवन चक्र का अंत आमतौर पर अंडे देने के बाद शुरू होता है। जानवर भोजन की खपत को कम करना शुरू कर देगा और पूरी तरह से खाना बंद कर देगा और अधिक सुस्त हो जाएगा। जीवन के अंत की प्रक्रिया के बाद का जीवनकाल भिन्न होता है। जानवर को खिलाने और निगरानी करने के अलावा कोई और कार्रवाई नहीं की जा सकती है। Senescent नर भोजन की खपत को कम कर देंगे और सुस्त हो जाएंगे68।

8. ऑक्टोपस संज्ञाहरण

  1. बटलर-Struben et al.69 में विस्तृत के रूप में ऑक्टोपस संज्ञाहरण प्रदर्शन.
  2. ढक्कन के साथ एक 6 एल कंटेनर प्राप्त करें जो कम से कम 15 सेमी लंबा है। ऑक्टोपस के टैंक से सीधे कंटेनर में 4 लीटर पानी रखें और पानी के वातावरण में ऑक्सीजन का प्रसार करने के लिए हवा के पत्थर के साथ एक छोटे से एयर पंप का उपयोग करके 4 लीटर खारे पानी के लिए वातन प्रदान करें।
  3. ऑक्टोपस परिचय से पहले, कंटेनर में 1% EtOH जोड़ें। ऑक्टोपस को संभालने से पहले, साइफन से पानी के साँस छोड़ने की गिनती करके प्रति मिनट सांसों की संख्या दर्ज करें।
    नोट: शोधकर्ता की प्रयोगशाला के भीतर ऑक्टोपस के लिए, बेसलाइन श्वसन प्रति मिनट 16 - 24 सांस है।
  4. ऑक्टोपस को स्थानांतरित करने से पहले, ऑक्टोपस की त्वचा रंजकता और बेसलाइन श्वास दर रिकॉर्ड करें। अपने आस-पास के पानी के साथ स्कूप करके एक साफ 4 एल खुले मुंह कंटेनर का उपयोग करके टैंक से ऑक्टोपस को हटा दें।
    नोट: संज्ञाहरण के दौरान, सांस लेने की दर आवश्यक रूप से पूर्ण संज्ञाहरण का संकेत नहीं देती है।
  5. कंटेनर में रहते हुए ऑक्टोपस का वजन करें, और फिर दोनों हाथों को ऑक्टोपस के शरीर के चारों ओर रखकर और इसे ऊपर उठाकर इसे स्थानांतरित करें। कंटेनर की दीवारों से सक्शन किए गए अंगों को हटाने के लिए एक दूसरे व्यक्ति की आवश्यकता हो सकती है।
  6. जल्दी से 1% EtOH के साथ तैयार कंटेनर में ऑक्टोपस ले जाएँ। एक संभावित भागने को रोकने के लिए ढक्कन बंद करें।
  7. पहले 5 मिनट के अंत में साइफन से पानी के साँस छोड़ने की गिनती करके प्रति मिनट ऑक्टोपस के श्वसन को रिकॉर्ड करें। यदि श्वसन बेसलाइन से ऊपर रहता है और जानवर एक हल्की चुटकी का जवाब देना जारी रखता है, तो पानी में एक अतिरिक्त 0.25% EtOH जोड़ें। पानी में इथेनॉल के अलावा अधिकतम 3% EtOH तक जारी रह सकता है।
    नोट: एक संकेत है कि ऑक्टोपस बेहोश है, इसके क्रोमैटोफोर्स के नियंत्रण का नुकसान है। इस मामले में त्वचा सामान्य से अधिक पतली दिखाई देती है। एक और संकेत हल्के से हथियारों को चुटकी लेना और परीक्षण करना है कि क्या मोटर प्रतिक्रिया है। यदि इस बिंदु पर अभी भी कोई प्रतिक्रिया नहीं है, तो ऑक्टोपस बेहोश है, और प्रयोग किए जा सकते हैं।
  8. संज्ञाहरण के तहत रहते हुए, ऑक्टोपस की श्वास और रंग की निगरानी करें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि यह प्रक्रिया की अवधि के लिए बेहोश रहता है। यदि प्रक्रिया के दौरान ऑक्टोपस जागना शुरू हो जाता है, तो अतिरिक्त 0.25% EtOH जोड़ें।
  9. इथेनॉल संज्ञाहरण के प्रभावों को उलटने के लिए, ऑक्टोपस को अपने स्थायी होल्डिंग टैंक से ऑक्सीजन युक्त पानी के एक नए 4 एल या उससे अधिक टैंक में स्थानांतरित करें। एक बार जब श्वसन सामान्य हो जाते हैं, तो ऑक्टोपस सक्रिय हो जाता है, और इसकी त्वचा सामान्य वर्णक में वापस आ जाती है; इसे अपने टैंक में वापस ले जाया जा सकता है।

9. ऑक्टोपस इच्छामृत्यु

  1. ऑक्टोपस इच्छामृत्यु के लिए अंतर्राष्ट्रीय मानकों का पालन करें जैसा कि फिओरिटो एट अल. में विस्तृत है, Moltschaniwskyj et al., और बटलर-स्ट्रूबेन एट अल 57,58,69।
  2. ऑक्टोपस के होल्डिंग टैंक से 4 लीटर पानी के साथ एक नया 6 एल कंटेनर तैयार करें। MgCl2 में इच्छामृत्यु टैंक के लिए 4% की एकाग्रता के लिए मिश्रण। ऑक्टोपस को बेहोश करने के लिए 8.1 से 8.9 तक के चरणों का निष्पादन करें।
  3. चरण 8.8 के बाद ऑक्टोपस को इच्छामृत्यु टैंक में ले जाएँ। सांस लेने के बंद होने के बाद, 5 मिनट तक प्रतीक्षा करें और ऑक्टोपस का क्षय करें या 5 अतिरिक्त मिनटों के लिए इच्छामृत्यु टैंक में रखें।

10. ओ bimaculoides के व्यवहार

  1. सुबह ऑक्टोपस को न खिलाएं जब उन्हें स्क्रू कैप कंटेनर का उपयोग करने के लिए प्रशिक्षित किया जाएगा। खिलाने के लिए अभिप्रेत क्षेत्र की ओर इशारा करते हुए एक कैमरा रिकॉर्डिंग डिवाइस सेट करें।
  2. सतह भर में 1 मिमी व्यास छेद और कंटेनर भर में पानी के प्रवाह के लिए टोपी के साथ एक 50 mL पेंच टोपी ट्यूब प्राप्त करें। कंटेनर के भीतर एक फिडलर केकड़ा रखें। कंटेनर के भीतर वजन रखें या टैंक के नीचे रहने के लिए बाहर से जुड़े रहें।
  3. कंटेनर को खुले क्षेत्र के भीतर टैंक के नीचे और ऑक्टोपस और कैमरे की दृष्टि में रखें। यदि केकड़ा 4 घंटे के बाद नहीं खाया गया है, तो इसे ट्यूब से हटा दें और दिन के लिए खिला अनुसूची को फिर से शुरू करें। इस अभ्यास को रोजाना करते रहें।
    नोट:: यह चित्र 6 में दिखाया गया है और प्रतिनिधि परिणाम अनुभाग में चर्चा की गई है।

11. ऑक्टोपस एमआरआई

नोट: पहले, ऑक्टोपस के रेटिना में कार्यात्मक एमआरआई प्रतिक्रियाओं को एनेस्थेटिक जानवरों 70 में मापा गया था। यहां, हमने ऑक्टोपस के तंत्रिका तंत्र का एक अल्ट्रा-उच्च स्थानिक रिज़ॉल्यूशन एमआरआई प्राप्त किया, जिसके लिए स्कैनिंग के घंटों की आवश्यकता थी। इस प्रकार, यह एक euthanized O. bimaculoides में किया गया था।

  1. एक 7T सिस्टम का उपयोग कर एमआरआई छवियों को प्राप्त करें। ऊतक के जलयोजन को बनाए रखने के लिए एक रसोई-ग्रेड पॉलीविनाइल क्लोराइड प्लास्टिक रैप में ऑक्टोपस लपेटें। लपेटने पर ऑक्टोपस रखें, सिरों में टक करें, और फिर सील करने के लिए रोल करें।
  2. मस्तिष्क और कई हथियारों की छवियों को प्राप्त करने के लिए 4 सेमी व्यास के साथ एक मात्रा संचारित / प्राप्त कुंडल का उपयोग करें। निम्नलिखित मापदंडों के साथ T1 भारित दुर्लभ अनुक्रम का उपयोग करें: पुनरावृत्ति समय (TR) 1500 ms, प्रतिध्वनि समय (TE) 20 ms, 117 x 117 x 500 μm संकल्प, 100 औसत, दुर्लभ कारक 8. ये इमेजिंग कृंतक दिमाग के लिए विशिष्ट एमआरआई पैरामीटर हैं। एक दुर्लभ कारक का उपयोग करना इमेजिंग को तेजी से बनाता है, जबकि सिग्नल-टू-शोर अनुपात 71 को बढ़ाने के लिए 100 छवियों को एक साथ औसत किया जाता है।
  3. एक 86 मिमी आयतन संचारित कुंडल और एक 4 x 4 सेमी 4-चैनल सरणी कुंडल प्राप्त का उपयोग कर ऑक्टोपस हाथ छवि. सर्जिकल कैंची का उपयोग करके एक हाथ को काट लें और इसे फॉस्फेट-बफ़र्ड खारा से भरे 15 एमएल शंक्वाकार ट्यूब में रखें।
    नोट: अनुक्रम पैरामीटर के साथ एक T1_weighted व्युत्क्रम वसूली अनुक्रम (एमपी-रेज) था: TR / TE = 4000 / 2.17 एमएस, व्युत्क्रम देरी 1050 एमएस, 100 x 100 x 500 μm रिज़ॉल्यूशन, 9 औसत, स्कैन समय 1.5 ज (चित्रा 7)। एक व्युत्क्रम-वसूली अनुक्रम पानी से संकेत को शून्य कर देता है और छवि के भीतर इसके विपरीत बढ़ जाता है; इस अनुक्रम को चुना गया था क्योंकि यह arm72 के आंतरिक शरीर रचना विज्ञान के विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति देता है।

12. क्रायो-प्रतिदीप्ति टोमोग्राफी (सीएफटी) इमेजिंग

  1. ऑक्टोपस को फ्लैश-फ्रीज करें: एक धुएं के हुड में काम करें। सूखी बर्फ के साथ एक देवर के तल को कवर करें, और फिर हेक्सेन से भरें। धीरे-धीरे ऑक्टोपस को लगभग 10 मिनट में हेक्सेन में कम करें, ताजा हेक्सेन और सूखी बर्फ को जोड़ते हुए, ठंड हेक्सेन के साथ ऑक्टोपस को पूरी तरह से कवर करने के लिए आवश्यक हो। ऑक्टोपस को -20 डिग्री सेल्सियस पर जमे हुए रखें जब तक कि यह एम्बेडेड न हो जाए।
  2. एम्बेड और ऑक्टोपस अनुभाग: CFT निर्माता द्वारा प्रदान किए गए उपकरणों का उपयोग करके ऑक्टोपस को पकड़ने के लिए उपयुक्त आकार का एक आयताकार मोल्ड बनाएँ। ओसीटी (इष्टतम काटने के तापमान) मीडिया (हिस्टोलॉजी प्रयोगशालाओं में उपयोग की जाने वाली मानक सामग्री) के साथ मोल्ड के नीचे को कवर करें और इसे अर्ध-ठोस जेल में फ्रीज करने दें।
  3. जमे हुए ऑक्टोपस को ओसीटी की जेल परत में रखें, और फिर 2-3 परतों में ओसीटी के साथ धीरे-धीरे कवर करें। चरणों को डालने के बीच, ब्लॉक चरणों को फ्रीज करें जब तक कि ओसीटी जेल चरण में न हो। ऑक्टोपस को पूरी तरह से कवर करने के बाद, ब्लॉक को -20 डिग्री सेल्सियस पर कम से कम 12 घंटे के लिए फ्रीज करें।
  4. क्रायो-प्रतिदीप्ति टोमोग्राफी system73 में नमूना लोड करें।
  5. अनुभाग और छवि पूरे euthanized O. bimaculoides मेसोस्कोपिक संकल्प पर 3 उत्सर्जन / उत्तेजना फिल्टर का उपयोग करके जिससे कई 3 डी आइसोट्रोपिक डेटासेट का उत्पादन होता है।
  6. जब सेक्शनिंग बांह और पाचन तंत्र तक पहुंचजाती है, तो अनुभागों को आगे के हिस्टोलॉजी के लिए स्लाइड में स्थानांतरित करें।
  7. विशेष रूप से तेजी से प्रसंस्करण को सक्षम करने के लिए डिज़ाइन किए गए CFT विक्रेता से पुनर्निर्माण सॉफ़्टवेयर में कच्चे डेटासेट को लोड करें।
  8. लैंडमार्क संरेखण, हिस्टोग्राम संतुलन, और प्रतिदीप्ति सुधार और सामान्यीकरण का उपयोग करके एक 3-आयामी स्टैक का पुनर्निर्माण करें, जिसमें प्रत्येक तरंग दैर्ध्य के लिए उपसतह प्रतिदीप्ति प्रभावों को हटाना शामिल है।
  9. एक बार अंतिम 3 डी स्टैक पुनर्निर्माण उपकरण द्वारा उत्पादित होने के बाद, इमेजिंग सॉफ़्टवेयर टूल के साथ डेटा की कल्पना करें और 3 डी अधिकतम तीव्रता अनुमानों (3 डी-एमआईपीएस) के साथ सफेद प्रकाश और प्रतिदीप्ति ओवरले के साथ फ्लाई-थ्रू बनाएं, उदाहरण के लिए, चित्रा 873।

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Representative Results

हमारे अध्ययन में सभी जानवरों को जंगली से प्राप्त किया गया था, और इस प्रकार उनकी सटीक उम्र निर्धारित नहीं की जा सकती थी और प्रयोगशाला में उनका रहना परिवर्तनशील था। ऑक्टोपस की स्थिति दैनिक रूप से देखी गई थी। हमने परजीवी, बैक्टीरिया, त्वचा की क्षति, या असामान्य व्यवहार नहीं देखा। जानवरों का औसत वजन 170.38 +/- 77.25 ग्राम था। प्रत्येक जानवर अपने स्वयं के 40-गैलन टैंक में रहता था। एक सप्ताह में एक टैंक के लिए दर्ज मापदंडों के लिए औसत ± मानक विचलन थे: पीएच 8.4 ± 0.0, लवणता 34.06 ± 0.61 पीपीटी, तापमान 18.7 ± 0.75 डिग्री सेल्सियस, अमोनिया 0.11 ± 0.14 पीपीएम, नाइट्राइट 0.25 ± 0.14 पीपीएम, और नाइट्रेट 1.43 ± 2.44 पीपीएम।

O. bimaculoides का व्यवहार: संवेदी मोटर फ़ंक्शन के साथ-साथ ऑक्टोपस के सीखने और स्मृति क्षमताओं को समझने के लिए, अनस्क्रूइंग टेस्ट ट्यूबों को एक उपयोगी परीक्षण (चित्रा 6) के रूप में दिखाया गया है। यह एक समृद्ध वातावरण भी प्रदान करता है जिसे तंत्रिका क्षरण से जुड़े महत्वपूर्ण शारीरिक तंत्र को बनाए रखने के लिए उपयोगी दिखाया गया है74। यह परीक्षण तीन ऑक्टोपस के साथ दैनिक रूप से किया गया था, और टेस्ट ट्यूब को खोलने का तरीका जानने के लिए ऑक्टोपस को औसतन 4 दिन लगे।

Figure 6
चित्रा 6: एक ऑक्टोपस की प्रगति एक ट्यूब के ढक्कन को खोलती है। कैमरा सॉफ़्टवेयर से उत्पन्न हरे रंग का पता लगाने के बक्से के वीडियो रिकॉर्डिंग के लिए कैमरों का उपयोग करें। वीडियो के अंतिम फ्रेम में, नीली वस्तु ऑक्टोपस द्वारा हटाए जाने के बाद टैंक की सतह की ओर बढ़ने वाली ट्यूब की टोपी है। स्केल बार = 30 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

ऑक्टोपस के तंत्रिका तंत्र का एमआरआई: एक एमआरआई महान स्थानिक संकल्प के साथ नरम ऊतक की कल्पना करने का एक साधन प्रदान करता है। हमने ओ. बिमाकुलोइड्स के तंत्रिका तंत्र (चित्रा 7) के अल्ट्रा-उच्च स्थानिक रिज़ॉल्यूशन छवियों (100 माइक्रोन वोक्सेल) का अधिग्रहण किया। यह तकनीक एक पूरे पशु तैयारी में विस्तृत आकृति विज्ञान और फाइबर ट्रैकिंग और अभिविन्यास प्राप्त करने की अनुमति देगी।

Figure 7
चित्रा 7: ऑक्टोपस के तंत्रिका तंत्र का एमआरआई। O. bimaculoides तंत्रिका तंत्र के उच्च संकल्प एमआरआई लक्षण वर्णन. हमने मस्तिष्क की पूर्व विवो एमआरआई छवियों और ऑक्टोपस की बाहों का अधिग्रहण किया जो एक साथ एक तंत्रिका तंत्र बनाते हैं जिसमें 500 मिलियन से अधिक न्यूरॉन्स होते हैं। मस्तिष्क केंद्र में है, और दो ऑप्टिक लोब प्रत्येक पक्ष (ए) पर जुड़े हुए हैं। बाहों का कोरोनल दृश्य। अक्षीय कॉर्ड को इस दृश्य (बी) में कैप्चर किए गए सात हथियारों में से प्रत्येक में देखा जा सकता है। suckers का एक sagittal दृश्य एक जटिल परिधीय तंत्रिका संरचना (सी) को दर्शाता है। स्केल बार = 5 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

क्रायो-प्रतिदीप्ति टोमोग्राफी (सीएफटी) इमेजिंग: सीएफटी एक अत्याधुनिक विधि है जो पूरे जानवर की तैयारी में उच्च-रिज़ॉल्यूशन इमेजिंग प्राप्त करने में सक्षम बनाती है। सिस्टम ने पूरे जानवर की 3-आयामी रूपात्मक छवि उत्पन्न करने के लिए केवल ऑटोफ्लोरेसेंस का उपयोग किया। जैसा कि चित्रा 8 में दिखाया गया है, इसने मस्तिष्क और चूसने वालों की कल्पना करने की अनुमति दी जो 470 तरंग दैर्ध्य (हरे) में बांह के साथ स्थित हैं और 555 (नीले) और 640 (पीले) तरंग दैर्ध्य में पाचन तंत्र।

Figure 8
चित्रा 8: क्रायो-प्रतिदीप्ति टोमोग्राफी (सीएफटी) ओ. बिमाकुलोइड्स की इमेजिंग। पूरे ऑक्टोपस को एक ब्लॉक में एम्बेडेड किया गया था और प्रत्येक अनुभाग के बाद सफेद प्रकाश और प्रतिदीप्ति छवियों को इकट्ठा करते समय क्रमिक रूप से कटा हुआ था। इसने तीन प्रतिदीप्ति तरंग दैर्ध्य के साथ एक 3 डी आइसोट्रोपिक डेटा सेट का उत्पादन किया। स्केल बार = 30 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

सिस्टम सेटअप:
एक्वेरियम पारिस्थितिकी तंत्र को इस तरह से विकसित किया गया है कि पानी को फ़िल्टर करने और ऑक्सीजन देने के यांत्रिक और जैविक दोनों तरीकों को नियोजित किया जाता है। सिस्टम के फ़िल्टरिंग तत्व नाइट्रोजन और ऑक्सीजन के स्तर को बनाए रखने के लिए सॉक फिल्टर, प्रोटीन स्किमर और नियमित सफाई का उपयोग करते हैं। इससे भी महत्वपूर्ण बात यह है कि हम खतरनाक नाइट्रोजनस यौगिकों और अन्य जैविक अपशिष्ट का उपभोग करने के साथ-साथ प्रकाश संश्लेषण की प्रक्रियाओं के माध्यम से पानी को वातित करने के लिए समुद्री सूक्ष्मजीवों पर भी भरोसा करते हैं। अतिरिक्त तरीके, शैवाल के उपयोग के अलावा, पानी में ऑक्सीजन जोड़ने के लिए संलग्न वायु पत्थर के साथ बाहरी एरेटर के माध्यम से है। किसी भी बैक्टीरिया को जोड़ने से पहले, विकास मीडिया के रूप में जीवित रेत या कुचल कोरल जोड़ने की सिफारिश की जाती है। मीडिया के बिना जीवों को सिस्टम के भीतर खुद को स्थापित करने में अधिक समय लगेगा। इस विकास को प्रभावी ढंग से बायोवेस्ट को तोड़ने और उचित मापदंडों के भीतर नाइट्रोजन चक्र को स्थिर करने में 1-3 सप्ताह लगेंगे।

पर्यावरण संवर्धन:
संज्ञानात्मक और संवेदी मोटर संवर्धन न्यूरोजेनेसिस और ऑक्टोपस 75 के समग्र कल्याण में सहायता कर सकता है। संवर्धन में रेतीले सब्सट्रेट, गोले, चट्टानें और अन्य संरचनाएं शामिल हो सकती हैं जो छिपने के स्थान और कवर प्रदान करती हैं। हम अक्सर ऑक्टोपस के टैंक के भीतर संरचनाओं के विन्यास को बदलते हैं और ऑक्टोपस को पता लगाने के लिए प्रेरित करने के लिए दिलचस्प यांत्रिकी के साथ नए खिलौने पेश करते हैं। हमने पाया कि ऑक्टोपस को घर में रखने के लिए नीचे एक छेद के साथ फ्लॉवरपॉट का उपयोग करना सबसे अच्छा है। यह कम दर्दनाक हैंडलिंग की अनुमति देता है, जहां एक प्रवेश द्वार वाले घर में, हटाने की कोशिश करते समय ऑक्टोपस को नुकसान हो सकता है। ऑक्टोपस बड़े Legos के साथ बातचीत का आनंद लेता है और भीतर रखे गए भोजन के साथ अनस्क्रूइंग जार, जैसा कि Fiorito et al.58 में भी वर्णित है। ऑक्टोपस के संज्ञानात्मक और शारीरिक स्वास्थ्य के लिए पर्यावरण संवर्धन महत्वपूर्ण है, जिसे ऑक्टोपस के तंत्रिका तंत्र 74,75 में महत्वपूर्ण पुनर्जनन तंत्र को प्रभावित करने के लिए दिखाया गया है।

सुधार:
सिस्टम के सेटअप को संशोधित किया जा सकता है जैसे टैंकों के आकार को बढ़ाना, विभिन्न नाबदान प्रणालियों का उपयोग करना, साथ ही साथ विभिन्न उपकरण। आगे सुधार किया जा सकता है कि शीतलन प्रणाली के कारण प्रवाह सीमाओं के कारण नाबदान पंप आउटपुट के बाद शीतलन प्रणाली को जोड़ने के लिए कर रहे हैं। अतिरिक्त सुधार नाइट्रेट के स्तर के साथ-साथ अन्य शिकारों को नियंत्रित करने के लिए विभिन्न प्रकार के शैवाल को पेश करना होगा, जैसे कि अन्य गैर-जहरीले मोलस्क और डेकापोड्स, जिन्हें ऑक्टोपस अतिरिक्त विकल्पों के रूप में पसंद कर सकता है।

ऑक्टोपस को निरंतर देखभाल और ध्यान देने की आवश्यकता होती है और इस प्रोटोकॉल के भीतर नियोजित तरीकों ने अपने निवासियों के लिए एक स्थिर और स्वस्थ वातावरण प्रदान करने के लिए साबित किया है। जबकि यहां उल्लिखित तरीके O. bimaculoides के लिए हैं, मूल मछलीघर सेटअप को सिस्टम और उपकरणों के आकार में मामूली भिन्नताओं के साथ अधिकांश समुद्री जानवरों के लिए नियोजित किया जा सकता है। इन जानवरों की अद्वितीय विशेषताएं उन्हें अनुसंधान के कई क्षेत्रों के लिए आदर्श बनाती हैं और इन जानवरों को शामिल करने वाली परियोजनाओं की सफलता पशुपालन टीम के परिश्रम पर निर्भर करती है। ऑक्टोपस उनकी अतुलनीय क्षमताओं के साथ उन्हें बायोमेडिकल अनुसंधान में नियोजित करने के लिए एक उल्लेखनीय और महत्वपूर्ण पशु मॉडल बनाते हैं।

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Disclosures

सभी लेखकों ने हितों के टकराव की घोषणा नहीं की है।

Acknowledgments

यह काम NIH UF1NS115817 (G.P.) द्वारा समर्थित था। G.P. आंशिक रूप से NIH अनुदान R01NS072171 और R01NS098231 द्वारा समर्थित है। हम पैट्रिक Zakrzewki और मोहम्मद Farhoud Emit इमेजिंग से Xerra इमेजिंग प्लेटफ़ॉर्म पर डेटा एकत्र करने और visualizing में मदद और समर्थन के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं। MSU Bruker Biospin के साथ एक अनुसंधान समझौता है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1-3/4 in. Drill Bit Home Depot 204074205 Glass cutting tool
Part number:1
1" flow sensors Neptune Systems Local Dealer Pipe with sensor to measure water flow
Part number:2
1" Slip Bulkhead Strainer Bulk Reef Supply 207113 Strainer for water leaving tank
Part number:3
10 gallon tank Preuss Pets Local Dealer Fiddler crab holding tank
Part number:4
4 inch X 12 inch 200 Micron Nylon Monofiliment Mesh Filter Sock w/ Plastic Ring AQUAMAXX UJ41171 Filter for large organic matter in sump
Part number:5
40 gallon aquarium Preuss Pets Local Dealer 4 Food aquarium tanks
Part number:6
60g poly tanks - rectangle Preuss Pets Local Dealer 2 Water Storage (salt and freshwater)
Part number:7
Active Aqua 1/10th HP Hydroponic or Aquarium Chiller 2018 Model WayWe 719574198463 For cooling water continuously
Part number:8
ALAZCO 2 Soft-Grip Handle Heavy-Duty Tile Grout Brush ALAZCO B06W2FT5V5 Tank Cleaning
Part number:9
Ammonia Testing Kit Aquarium Pharmaceuticals 33D For water testing
Part number:10
Apex system WiFi Neptune Systems Local Dealer System connection for off site monitoring
Part number:11
API Aquarium Test Kit Amazon B001EUE808 For water testing
Part number:12
API Copper Test Kit Amazon B0006JDWH8 For water testing
Part number:13
Aqua Ultraviolet Classic UV 25 Watt Series Units Aqua Ultraviolet A00028 For removing bacteria leaving sump system
Part number:14
AquaClear 50 Foam Filter Inserts, 3 pack Aquaclear A1394 Food Tank Carbon Filter Inserts
Part number:15
Aqueon QuietFlow LED PRO Aquarium Power Filter 30 Aqueon 100106082 Food tank filtering units
Part number:16
Auto Top Off Kit (ATK) (Each includes 1 FMM module, 2 optical sensors and 1 float) Neptune Systems Local Dealer For freshwater tank
Part number:17
Automatic top off from RODI (LLC) Neptune Systems Local Dealer From water storage to octopus tanks
Part number:18
Banded Trochus Snail LiveAquaria CN-112080 For algae bin
Part number:19
Chaetomorpha Algae, Aquacultured LiveAquaria BVJ-76354 For algae bin
Part number:20
Clams - Live, Hard Shell, Cherrystone, Wild, USA Dozen Fulton Fish Market N/A Live food
Part number:21
Classic Sea Salt Mix - Tropic Marin Bulk Reef Supply 211813 Salt for tank water
Part number:22
Clear Masterkleer Soft PVC Plastic Tubing, for Air and Water, 3/4" ID, 1" OD McMaster 5233K71 Cleaning tool
Part number:23
Continuum Aquablade-P Acrylic Safe Algae Scraper W/ Plastic Blade - 15 Inch Marine Depot 4C31001 Cleaning tool
Part number:24
Copper Testing Kit Aquarium Pharmaceuticals 65L For water testing
Part number:25
Curve Refugium CREE LED Aquarium Light Eshopps 6500K Algae bin light
Part number:26
Eheim 1262 return pumps EHEIM 1250219 Pump for storage tanks
Part number:27
Eshopps R-100 Refugium Sump GEN 3 Eshopps 15000 Sump system
Part number:28
Ethyl Alcohol, 200 Proof Sigma-Aldrich 64-17-5 Anesthesia
Part number:29
Extech DO600 ExStik II Dissolved Oxygen Meter Extech DO600 Oxygen measurement
Part number:30
Fiddler Crabs; live; dozen NORTHEAST BRINE SHRIMP N/A Live food
Part number:31
Filter Cartridges Aqueon 100106087 Food tank filters
Part number:32
Florida Crushed Coral Dry Sand - CaribSea Bulk Reef Supply 212959 Sediment for bottom of tank
Part number:33
FMM module Neptune Systems Local Dealer Controller for apex system
Part number:34
Fritz-Zyme TurboStart 900 - Fritz Bulk Reef Supply 213036 Bacteria start
Part number:35
Hand Operated Drum Pump, Siphon, Basic Pump with Spout, For Container Type Bucket, Pail Grainger 38Y789 Water Hand Pump
Part number:36
High pH Testing Kit Aquarium Pharmaceuticals 27 For water testing
Part number:37
Imagitarium Fine Mesh Net for Shrimp Petco 2580993 Shrimp and fish transfer net
Part number:38
Leak Detection Kit (LDK) - Includes FMM module plus 2 ALD sensors Neptune Systems Local Dealer Placed on floor to detect water
Part number:39
Lee`S Algae Scrubber Pad Jumbo - Glass Marine Depot LE12007 Cleaning tool
Part number:40
Live rocks Preuss Pets Local Dealer Habitat for octopus
Part number:41
Long Bottle Cleaning Brush 17" Extra Long Haomaomao B07FS7J7PN Tank Cleaning
Part number:42
Magnesium chloride Sigma-Aldrich M1028-100ML Euthanasia
Part number:43
Magnetic Probe Rack Neptune Systems Local Dealer For holding apex sensor probes
Part number:44
Marine Ghost Shrimp NORTHEAST BRINE SHRIMP N/A Live food
Part number:45
Marineland C-Series Canister Carbon Bags Filter Media, 2 count Chewy 98331 For elevated copper levels
Part number:46
Nitra-Zorb Bag Aquarium Pharmaceuticals AP2213 Absorbs nitrogen compounds
Part number:47
Nitrate Testing Kit Aquarium Pharmaceuticals LR1800 For water testing
Part number:48
Nitrite Testing Kit Aquarium Pharmaceuticals 26 For water testing
Part number:49
Pawfly 2 Inch Air Stones Cylinder 6 PCS Bubble Diffuser Airstones for Aquarium Fish Tank Pump Blue Amazon B076S56XWX Aerate water
Part number:50
Penn Plax Airline Tubing for Aquariums –Clear and Flexible Resists Kinking, 8 Feet Standard Amazon B0002563MM Tubing for connecting air pump to air stone
Part number:51
Plumbing with unions/valves plus 3/4" flex hose Preuss Pets Local Dealer Water transport
Part number:52
PM1 module Neptune Systems Local Dealer Power control module for apex
Part number:53
Protein skimmer Reef Octopus AC20284 Removes biowaste from system
Part number:54
PVC Apex Mounting board, grommets, wire mounts Neptune Systems Local Dealer Helps ensure organization for wires and tubing within system
Part number:55
PVC Regular Cement and 4-Ounce NSF Purple Primer Amazon Oatey - 30246 For connecting PVC pipes
Part number:56
RODI unit Neptune Systems Local Dealer RO Water
Part number:57
Salinity Probes HANNA probes HI98319 Measures salinity of water
Part number:58
Seachem Pristine Aquarium Treatment Seachem 1438 Provides bacteria that break down excess food, waste and detritus
Part number:59
Seachem Stability Fish Tank Stabilizer Seachem 116012607 Seachem Stability will rapidly and safely establish the aquarium biofilter in freshwater and marine systems
Part number:60
Set of lexan tops Preuss Pets Local Dealer Aquarium tank lids
Part number:61
Set of Various extended length aquabus cables Neptune Systems Local Dealer Cables for Apex system
Part number:62
SLSON Aquarium Algae Scraper Double Sided Sponge Brush Cleaner Long Handle Fish Tank Scrubber for Glass Aquariums Amazon B07DC2TZCJ Cleaning tool
Part number:63
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, 45 Degree Elbow Adapter, 3/4 Socket Female x 3/4 Socket Male McMaster 4880K189 PVC pipe
Part number:64
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, 90 Degree Elbow Adapter, 1 Socket Female x 1 Socket Male McMaster 4880K773 PVC pipe
Part number:65
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, Adapter, 1 Socket-Connect Female x 1 Barbed Male McMaster 4880K415 PVC pipe
Part number:66
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, Straight Reducer, 2 Socket Female x 3/4 Socket Female McMaster 4880K008 PVC pipe
Part number:67
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, Tee Connector, White, 1 Size Socket-Connect Female McMaster 4880K43 PVC pipe
Part number:68
Standard-Wall Unthreaded Rigid PVC Pipe for Water, 1 Pipe Size, 10 Feet Long McMaster 48925K13 PVC pipe
Part number:69
Standard-Wall Unthreaded Rigid PVC Pipe for Water, 3/4 Pipe Size, 5 Feet Long McMaster 48925K92 PVC pipe
Part number:70
Structural FRP Fiberglass Sheet, 48" Wide x 96" Long, 1/2" Thick McMaster 8537K15 Table top material
Part number:71
Structural FRP Fiberglass Square Tube, 10 Feet Long, 2" Wide x 2" High Outside, 1/8" Wall Thickness McMaster 8548K33 Structural table material
Part number:72
Tank Sediment TopDawg Pet Supply 8479001207 Sediment for bottom of fiddler crab tank
Part number:73
Temperature probe Neptune Systems Local Dealer Temperature probe for tanks
Part number:74
Tetra TetraMarine Large Saltwater Flakes for all Marine Fish Amazon B00025K0US Fish, shrimp, and crab food
Part number:75
Tetra Whisper Aquarium Air Pump for 10 gallon Aquariums Petco 2335234 Air pump for smaller tanks
Part number:76
Thick-Wall Through-Wall Pipe Fitting, for Water, PVC Connector, 1 Socket-Connect Female McMaster 36895K843 PVC pipe
Part number:77
Vectra s2 pump Bulk Reef Supply 212141 Aquarium Pump
Part number:78
Water Pump TACKLIFE GHWP1A Pump for cleaning tanks
Part number:79
Wyze Cam v2 1080p HD Indoor WiFi Smart Home Camera with Night Vision Amazon B076H3SRXG DeepLabCut Recording
Part number:80

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References

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Bioengineering अंक 175
बायोमेडिकल और बायोइंजीनियरिंग अनुसंधान के लिए एक ऑक्टोपस पारिस्थितिकी तंत्र की स्थापना
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VanBuren, T., Cywiak, C., Telgkamp, P., Mallett, C. L., Pelled, G. Establishing an Octopus Ecosystem for Biomedical and Bioengineering Research. J. Vis. Exp. (175), e62705, doi:10.3791/62705 (2021).

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