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Medicine

Modelo de Bypass Duodeno-Ileal de Anastomose Única com Gastrectomia Vertical em Camundongos

Published: February 10, 2023 doi: 10.3791/64610
* These authors contributed equally

Summary

A derivação duodeno-ileal de anastomose única (SADI-S) é um procedimento bariátrico emergente com importantes efeitos metabólicos. Neste artigo, apresentamos um modelo confiável e reprodutível de SADI-S em camundongos.

Abstract

A obesidade é um importante problema de saúde em todo o mundo. Como resposta, as cirurgias bariátricas surgiram para tratar a obesidade e suas comorbidades relacionadas (por exemplo, diabetes mellitus, dislipidemia, esteato-hepatite não alcoólica, eventos cardiovasculares e cânceres) por meio de mecanismos restritivos e disabsortivos. A compreensão dos mecanismos pelos quais esses procedimentos permitem tais melhorias muitas vezes requer sua transposição para os animais, especialmente em camundongos, devido à facilidade de geração de animais geneticamente modificados. Recentemente, o bypass duodeno-ileal com gastrectomia vertical (SADI-S) de anastomose única surgiu como um procedimento que utiliza efeitos restritivos e disabsortivos, o que vem sendo utilizado como alternativa ao bypass gástrico em caso de obesidade maior. Até o momento, esse procedimento tem sido associado a fortes melhoras metabólicas, o que tem levado a um aumento acentuado de sua utilização na prática clínica diária. No entanto, os mecanismos subjacentes a esses efeitos metabólicos têm sido pouco estudados como resultado da falta de modelos animais. Neste artigo, apresentamos um modelo confiável e reprodutível de SADI-S em camundongos, com foco especial no manejo perioperatório. A descrição e o uso deste novo modelo de roedor serão úteis para a comunidade científica compreender melhor as alterações moleculares, metabólicas e estruturais induzidas pelo SADI-S e definir melhor as indicações cirúrgicas para a prática clínica.

Introduction

A obesidade é uma situação emergente e endêmica com prevalência crescente, afetando aproximadamente 1 em cada 20 adultos nomundo1. A cirurgia bariátrica tornou-se a opção de tratamento mais efetiva para os adultos acometidos nos últimos anos, melhorando tanto a perda de peso quanto os distúrbios metabólicos2,3, com resultados variáveis dependendo do tipo de procedimento cirúrgico utilizado.

Existem dois mecanismos principais que estão implicados nos efeitos dos procedimentos bariátricos: a restrição que visa aumentar a saciedade (como na gastrectomia vertical (SG) onde 80% do estômago é removido) e a má absorção. Dentre os procedimentos que implicam tanto restrição quanto má absorção, a derivação duodenoileal com gastrectomia vertical (SADI-S) tem sido proposta como alternativa ao bypass gástrico em Y-de-Roux (BGYR), no qual se observa reganho de peso em aproximadamente 20% dospacientes4,5. Nessa técnica, a gastrectomia vertical é associada a um rearranjo do intestino delgado, dividindo-o em um membro comum biliar e um membro comum curto (um terço do comprimento total do intestino delgado) (Figura 1A). Tecnicamente, o SADI-S tem a vantagem sobre o BGYR de necessitar apenas de uma anastomose, reduzindo o tempo de operação em aproximadamente 30%. Além disso, esse método preserva o piloro, o que ajuda a reduzir o risco de úlcera péptica e limita o extravasamento anastomótico. O SADI-S também está associado a uma alta taxa de melhora metabólica, favorecendo fortemente seu uso nos últimos anos 6,7.

Uma vez que os efeitos metabólicos têm se tornado cada vez mais fundamentais para os procedimentos bariátricos, a elucidação de seus mecanismos parece crucial. Portanto, o uso de modelos animais para procedimentos bariátricos é de extrema importância para melhor compreensão de seus efeitos metabólicos e das vias celulares e molecularesenvolvidas8. Esses modelos contribuíram, por exemplo, para o melhor entendimento da mudança na ingestão alimentar após GS ou BGYR em ambiente controlado9 e para o estudo dos fluxos de glicose ou colesterol através da barreira intestinal10,11; Estas informações raramente estão disponíveis em estudos clínicos. Esse conhecimento poderia ajudar a definir suas ótimas indicações cirúrgicas. Descrevemos anteriormente modelos de camundongos SG e BGYR12. Entretanto, apesar de seus resultados promissores na prática clínica, o SADI-S só foi desenvolvido e descrito em ratos13,14,15. No entanto, dada a sua maleabilidade genética, o modelo em camundongos tem sido útil no passado para estudar os vários efeitos metabólicos de tais procedimentos16,17,18, e um modelo de camundongo SADI-S poderia ser útil para avaliar os efeitos do SADI-S, apesar da dificuldade técnica.

Neste artigo, descrevemos a adaptação do procedimento SADI-S em camundongos (Figura 1B) de forma reprodutível. Especial atenção é dada à descrição dos cuidados perioperatórios.

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Protocol

Este protocolo foi aprovado pelo comité de ética local francês para a experimentação animal (Comité d'éthique en expérimentation animale; referência CEEA-PdL n 06).

1. Preparo pré-operatório

  1. Adicione alimentos da dieta em gel à dieta normal 3 dias antes da cirurgia. Jejuar os ratos 6 h antes da cirurgia.
  2. Induzir anestesia com isoflurano a 5% (1 L/min) em câmara dedicada com oxigênio (1 L/min). Injetar nos camundongos por via subcutânea buprenorfina (0,1 mg/kg), amoxicilina (15 mg/kg), metoclopramida (1 mg/kg), meloxicam (1 mg/kg) e ferro (0,5 mg/kg).
  3. Faça a barba das primeiras 2/3 partes do abdômen do camundongo a partir do processo xifoide usando uma navalha elétrica. Desinfete o abdómen do rato em duas etapas utilizando uma solução de polividona de iodo .
  4. Coloque o mouse em decúbito dorsal em uma almofada térmica dedicada coberta com uma almofada inferior limpa. Manter a anestesia com um cone nasal com isoflurano a 2%-2,5% (0,4 L/min) com oxigênio (0,4 L/min). Use um teste de pinça dos dedos dos pés para confirmar a profundidade da anestesia.
  5. Cubra o mouse em um filme plástico esterilizado. Para aplicar a hiperextensão no abdômen do camundongo, fixe a pata inferior e use uma seringa de 1 mL ou equivalente colocada atrás das costas do mouse. Corte uma abertura em uma compressa estéril com o tamanho da futura incisão e use-a como campo operatório para cobrir o mouse. A instalação geral é mostrada na Figura 2A.
  6. Antes da cirurgia, use máscara facial, touca e luvas esterilizadas. Utilizar instrumental esterilizado para a cirurgia.

2. O protocolo SADI-S

  1. Laparotomia mediana
    1. Sob microscópio binocular (aumento de 8x), realizar laparotomia mediana com tesoura ou bisturi, abrindo a pele abdominal do processo xifoide até o meio do abdome. Certifique-se de que o processo xifoide e a camada musculoaponeurótica estejam visíveis (Figura 2B).
      OBS: Administrar bupivacaína (3 mg/kg) por via subcutânea no sítio cirúrgico 5 minutos antes de incisão na pele.
    2. Abra a parede abdominal ao longo da linha alba com tesoura entre os músculos abdominais. Cuidado para não entrar na cavidade torácica (Figura 2C).
  2. Exclusão duodenal
    1. Mobilize suavemente o duodeno da cavidade abdominal usando um cotonete umedecido para ver seus lados anterior e posterior. Localizar o ducto biliar principal, imediatamente visível ao microscópio binocular na face posterior do omento menor e duodeno (Figura 3A, setas pretas).
    2. Proximalmente do ducto biliar principal, visualizar-se uma área entre as artérias duodenais sob o microscópio binocular (Figura 3A,B, círculos pontilhados azuis). Penetrar nesta área utilizando micropinças curvas de um lado ao outro do duodeno e realizar uma ligadura duodenal entre as artérias com sutura inabsorvível 6-0 (Figura 3C-E). Tenha cuidado para não ligar os ramos das artérias duodenais.
  3. Gastrectomia vertical
    1. Mobilize o estômago da cavidade abdominal usando um cotonete umedecido e uma pinça não traumática. Separe o estômago dos órgãos circundantes usando microtesouras: separe o omento maior, corte as artérias gástricas curtas (ramo da artéria esplênica) entre o estômago e o baço, e o lipoma ligando o estômago à parte inferior do esôfago (Figura 4A,B).
    2. Com microtesoura, realizar gastrotomia de 5 mm abrindo o fundo de olho e retirar o resíduo de alimento com um cotonete (Figura 4C, seta). Enxaguar o local da gastrotomia com soro fisiológico estéril (37 °C) para evitar a contaminação do conteúdo gástrico removido.
    3. Aplicar clipes cirúrgicos (tamanho médio, 5,6 mm) ao longo da grande curvatura do estômago para excluir aproximadamente 80% do estômago. Dois clipes são suficientes. Remova o estômago excluído cortando-o com microtesoura (Figura 4D-G).
    4. Ancorar os clipes cirúrgicos para verificar a impermeabilidade realizando uma sutura contínua (8-0) do início ao fim da ressecção do estômago (Figura 4H).
  4. Anastomose duodenofileal
    1. Ao microscópio binocular, visualiza-se a última alça ileal, situada imediatamente antes do ceco (Figura 5A). Mobilize suavemente o intestino delgado fora da cavidade abdominal a partir da última alça ileal. Disponha o intestino delgado, conforme mostrado na Figura 5B, de modo que a última alça ileal esteja localizada no lado esquerdo. Com um cordão de sutura de tamanho prévio, medir 10 cm (aproximadamente 1/3 do comprimento total do intestino delgado) da última alça ileal; este será o local da futura anastomose.
    2. A fim de garantir que o futuro membro biliar chegue ao local da anastomose pelo seu lado esquerdo, faça uma grande alça do intestino delgado ao redor do local da futura anastomose. Com microtesoura, realizar enterotomia de 4 mm abrindo-se o intestino delgado neste ponto (Figura 5C-E). Enxaguar o local da enterotomia com soro fisiológico estéril (37 °C) para evitar contaminação.
    3. Realizar enterotomia de 4 mm na parte excluída do duodeno, imediatamente após o piloro, entre o estômago e a ligadura realizada no passo 2.2.2 (Figura 5F). Coloque uma compressa de colágeno hemostático absorvível de 5 mm x 5 mm para favorecer a homeostase.
    4. Usando um 8-0 não absorvível sutura, realizar anastomose duodeno-ileal látero-lateral. Inicia-se pela anastomose lateral posterior, seguida da anastomose lateral anterior (Figura 5G-I).
  5. Fechamento abdominal
    1. Mostrar o intestino delgado na cavidade abdominal para que o membro biliar venha para a anastomose do lado superior-esquerdo do abdome e o membro comum caia para a parte inferior do abdômen.
      NOTA: Lavar o abdome três vezes com aproximadamente 5 mL de solução salina 0,9% estéril (37 °C). Em seguida, sucção do líquido do abdômen para remover o líquido gastrointestinal residual e alimentos digeridos para evitar infecção bacteriana e subsequente inflamação abdominal.
    2. Reidratar o rato com 500 μL de solução salina a 37 °C, aplicando-a directamente na cavidade abdominal utilizando uma seringa de 1 ml.
    3. Fechar a camada musculoaponeurótica com uma única sutura contínua inabsorvível 6-0. Fechar a pele abdominal com pontos separados inabsorvíveis 6-0 (Figura 5J,K).

3. Cuidados gerais pós-operatórios

  1. Depois de parar o isoflurano, deixe o rato acordar na almofada térmica sob 0,4 L/min O2 insuflado com a máscara nasal. Quando estiver totalmente acordado, o que pode ser garantido pela recuperação motora completa, coloque o rato sozinho numa gaiola numa incubadora a 30 °C. Deixe o rato na incubadora a 30 °C durante 5 dias (sem condição específica para gás ou humidade).
    NOTA: A gaiola deve ser aquecida previamente.
  2. Permitir livre acesso à água imediatamente após a cirurgia. Adicionar suplementos vitamínicos, incluindo vitaminas B1, B9, B12 e vitaminas lipossolúveis (A, D, E, K), à água (800 mg/180 mL de água) até o final do protocolo.
  3. Manter a analgesia por injeção subcutânea de buprenorfina (0,1 mg/kg) duas vezes ao dia do dia 1 ao dia 3, uma vez ao dia após até o dia 5. Continuar as injeções subcutâneas de amoxicilina (15 mg/kg), meloxicam (1 mg/kg) e metoclopramida (1 mg/kg) uma vez ao dia até o dia 3. Administrar injeções subcutâneas de ferro (0,5 mg/kg) uma vez ao dia até o final do protocolo.

4. Medidas gerais e eutanásia

  1. Pesar os ratos todos os dias até ao 5º dia de pós-operatório. Em seguida, pese no dia 7 e, em seguida, semanalmente.
  2. Para medir a ingestão diária de alimentos, coloque um rato por gaiola. Coloque um peso conhecido de uma dieta sólida e meça o peso da dieta sólida restante após 24 h. Meça a ingestão de alimentos nos dias 3, 4, 5, 7 e depois semanalmente.
  3. Eutanásia dos camundongos por luxação cervical sob anestesia geral (isoflurano a 5% (1 L/min) com oxigênio (1 L/min)) com injeção subcutânea de buprenorfina (0,1 mg/kg) após incisão cardíaca no átrio esquerdo para coleta de sangue (500 a 600 μL de sangue).
  4. Medir a concentração de hemoglobina no sangue usando um analisador hematológico automático que requer 20 μL de sangue.

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Representative Results

Curva de aprendizado
A curva de aprendizado desse modelo é exibida na Figura 6. Observa-se diminuição progressiva do tempo operatório, atingindo aproximadamente 60 min de cirurgia após 4 semanas de treinamento intensivo (Figura 6A). A sobrevida pós-operatória em 5 dias também melhorou com o tempo, chegando a 77% durante a prática regular (Figura 6B). As causas mais frequentes de mortalidade foram fístula anastomótica e síndrome da alça aferente, resultando em peritonite biliar. Não observamos nenhum óbito no final do primeiro mês com a técnica descrita neste manuscrito. Vale ressaltar que experimentos anteriores realizados sem ancoragem de clipes cirúrgicos com suturas contínuas levaram à migração do clipe em dois terços dos casos, resultando em um óbito por oclusão do intestino delgado aos 31 dias. Esses resultados reforçam que o domínio desse modelo requer treinamento intensivo.

Parâmetros gerais
Camundongos com fundo C57BL6/J foram aleatoriamente alocados no grupo SADI-S (n = 9; 5 machos, 4 fêmeas) e no grupo controle simulado (n = 4; 2 machos, 2 fêmeas). Entre os camundongos SADI-S e os sham, o peso pré-operatório médio (27,9 g ± 0,98 g vs. 28,5 g ± 2,4 g) e a idade (14,8 semanas ± 7,2 semanas vs. 18,7 semanas ± 10,3 semanas) não foram significativamente diferentes. Um camundongo morreu após SADI-S no 4º dia de pós-operatório de um vazamento de anastomose e, portanto, foi excluído da análise a seguir. Os camundongos SADI-S apresentaram perda de peso significativa em comparação com os camundongos controle simulados a partir do quarto dia de pós-operatório: 21,7 g ± 1,6 g versus 29,0 g ± 0,7 g (p = 0,0081) (Figura 7A). A ingestão diária de alimentos (14 dias) aumentou significativamente em camundongos SADI-S (4,4 g ± 0,1 vs. 2,9 g ± 0,6 g por dia, p = 0,027) (Figura 7B).

Os camundongos foram sacrificados 28 dias após a cirurgia. Um camundongo do grupo SADI-S, que não apresentou perda de peso significativa, pareceu ter repermeabilização duodenal. Nenhum evento foi observado nos outros 7 camundongos. Como mostrado na Figura 7C, a concentração de hemoglobina não foi significativamente diferente dos camundongos controle sham no grupo SADI-S após a suplementação com ferro.

Figure 1
Figura 1: Representação da anastomose única derivação duodeno-ileal com gastrectomia vertical (SADI-S). (A) Em humanos, o duodeno é cortado proximalmente do ducto biliar principal. Uma anastomose duodeno-ileal látero-terminal é realizada com o duodeno remanescente, definindo um membro biliar (antes da anastomose) e um membro comum que mede um terço do comprimento total do intestino delgado (após a anastomose). (B) Em camundongos, o duodeno é excluído por ligadura proximalmente ao colédoco principal, e uma anastomose duodeno-ileal látero-lateral é realizada. A figura foi criada com modelos BioRender.com e Servier Medical Art que são licenciados sob uma Creative Commons Attribution 3.0 Unported License; https://smart.servier.com/. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 2
Figura 2: Instalação do mouse para SADI-S . (A) Instalação geral. (B) Abertura da pele desde o processo xifoide (base esternal) até o meio do abdome. (C) Camada músculo-aponeurótica e abertura peritoneal. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 3
Figura 3: Exclusão duodenal. (A) Janela avascular entre as artérias duodenais (círculo pontilhado azul) na face posterior do duodeno, localizada antes do colédoco principal (setas pretas). (B) Janela avascular entre as artérias duodenais (círculo pontilhado azul) na face anterior do duodeno. (C,D) Exclusão duodenal com sutura inabsorvível 6-0. (E) Visão final do duodeno excluído. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 4
Figura 4: Gastrectomia vertical. (A) Maior remoção do omento. (B) Incisão das artérias gástricas curtas. (C) Gastrotomia inicial (seta azul). (D-G) Remoção da região cardíaca do estômago com dois clipes cirúrgicos. (H) Ancoragem dos clipes cirúrgicos com fio inabsorvível 6-0. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 5
Figura 5: Anastomose duodeno-ileal. (A) Identificação da última alça ileal (asterisco). (B) Contagem de 10 cm (um terço do comprimento total do intestino delgado) desde a última alça ileal (asterisco) até o local da futura anastomose (seta azul). (C,D) Rotação do intestino delgado ao redor do local da futura anastomose (seta azul). (E) Enterotomia ileal. (F) Duodenotomia (seta branca). (G-I) Anastomose látero-lateral em duas camadas entre a duodenotomia (seta branca) e a enterotomia ileal (seta azul). (J) Fechamento da camada músculo-aponeurótica. (K) Fechamento da pele. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 6
Figura 6: Curva de aprendizado do procedimento SADI-S . (A) O efeito do treinamento na duração da operação. Os dados são apresentados como o valor médio ± EPM. (B) O efeito do treinamento na sobrevida em cinco dias. Os dados são apresentados em porcentagem. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 7
Figura 7: Parâmetros gerais após SADI-S . (A) Peso corporal pós-operatório, (B) ingestão alimentar medida por 24 h no dia 14 e (C) concentrações de hemoglobina sanguínea foram comparadas entre camundongos SADI-S e sham controle. As comparações estatísticas foram ±feitas com ANOVA two-way (com teste de comparações múltiplas de Sidak) ou testes não paramétricos de Mann-Whitney. * p < 0,05; ** p < 0,01. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Discussion

As cirurgias bariátricas, cujas técnicas estão em constante evolução, parecem ser atualmente o tratamento mais efetivo para a obesidade e comorbidades metabólicas associadas3,19,20. O procedimento SADI-S, descrito pela primeira vez em 20074, é um procedimento promissor associado a maiores efeitos metabólicos do que outras cirurgias disabsortivas. Modelos animais, particularmente camundongos que permitem a geração rápida de modelos geneticamente modificados, são fortemente necessários para entender completamente os mecanismos subjacentes a essas melhorias. Aqui descrevemos um modelo confiável e reprodutível de SADI-S em camundongos.

O primeiro passo crítico do procedimento SADI-S é a exclusão do duodeno, permitindo que apenas as secreções biliares e pancreáticas viajem para o duodeno e os dois primeiros terços do intestino delgado. Em humanos, o duodeno é cortado, permitindo a anastomose duodeno-ilealtérmino-lateral4. No modelo SADI-S de ratos descrito por Montana et al.15, a exclusão do duodeno por sutura inabsorvível ou pinça cirúrgica é imperfeita em alguns casos, resultando em repermeabilização duodenal (ou seja, reintrodução do bolo alimentar no trato digestivo original). No entanto, uma secção do duodeno seguida de anastomose término-lateral é de difícil transposição em camundongos, levando-nos a preferir a ligadura do duodeno. De fato, o curto comprimento dos vasos duodenais limita a mobilização duodenal se o duodeno estiver completamente transeccionado, dificultando a realização da anastomose término-lateral. Experimentos iniciais (dados não mostrados) mostraram alta mortalidade, mesmo com experimentadores treinados e habilidosos. Apenas um caso de repermeabilização foi observado neste estudo. Atenção especial deve ser dada às artérias duodenais durante essa etapa. A desvascularização circunferencial do duodeno leva à morte em todos os casos, mas pode-se esperar que os camundongos se recuperem de uma pequena área desvascularizada causada pela ligadura do vaso distal. A variabilidade anatômica da vascularização duodenal em camundongos impede que descrevamos uma localização constante para realizar essa exclusão. No entanto, 0,5 cm do duodeno após o piloro deve estar disponível para permitir a anastomose término-lateral.

Outro passo fundamental na realização da anastomose é a visualização do intestino de forma que o membro biliar chegue ao local da anastomose duodenofileal pelo lado esquerdo. Caso contrário, o alimento se oporá ao fluxo biliar, fazendo com que o membro biliar se distenda, a bile se difunda para a cavidade abdominal e os camundongos morram de peritonite biliar por volta do 2º dia de pós-operatório. Essa condição semelhante à síndrome da alçaaferente21 pode ser prevenida com a realização de uma alça do intestino delgado centrada na zona anastomosada do íleo. Isso é necessário porque, ao contrário dos humanos, o ceco está posicionado no lado esquerdo do abdome em 80% dos casos emcamundongos22.

Em humanos, o membro comum mede aproximadamente 250 cm para limitar a desnutrição, o que corresponde a aproximadamente um terço do comprimento total do intestinodelgado23. Antes das cirurgias, medimos o comprimento total do intestino delgado do modelo de camundongo em condições semelhantes de alimentação (C57BL6/J sob dieta de ração) para determinar o tamanho do membro comum. Como o comprimento do intestino delgado pode variar entre camundongos de diferentes origens genéticas ou seguindo diferentes condições de alimentação, encorajamos fortemente os futuros cirurgiões a realizar um estudo piloto para medir o tamanho do intestino. O mesmo tamanho deve ser usado para cada camundongo do mesmo fundo, pois a exteriorização sistemática da totalidade do intestino para uma medição completa durante a cirurgia deve ser evitada (pois há risco aumentado de desidratação, hipotermia e lesão visceral).

A gastrectomia vertical faz parte da técnica original do SADI-S, permitindo restrição além da má absorção4. Vários modelos de gastrectomia vertical em camundongos estão disponíveis na literatura 12,24,25,26. O uso de clipes cirúrgicos ao invés de suturas isoladas permite um ganho significativo de tempo24 e reduz a perda sanguínea, duas condições necessárias para o sucesso cirúrgico. Ancoragem do clipe cirúrgico com um 8-0 A sutura contínua impediu a migração do clipe intragástrico em todos os casos em nosso experimento. Ao remover a região cardíaca, essa técnica permite a remoção de cerca de 80% do estômago12. Nesse modelo, entretanto, o SADI-S foi associado à superalimentação em comparação com os camundongos sham controle, visando (provavelmente) compensar a má absorção causada pela derivação intestinal. Outros modelos sugeriram que a gastrectomia vertical em camundongos modificou preferencialmente o comportamento de ingestão alimentar em vez da quantidade absoluta de alimento ingerido por dia em longo prazo11,26. Esse efeito restritivo limitado é uma limitação desse modelo.

Esse protocolo tem uma taxa de sobrevida de 75%. Vale ressaltar que a sobrevida em 5 dias foi um forte preditor de sobrevida em longo prazo, uma vez que nenhum óbito tardio ocorreu durante nosso experimento. Não foi observada estenose da anastomose. No entanto, atingir essa taxa de sobrevida exigiu pelo menos 3 semanas de treinamento microcirúrgico intensivo por um experimentador especializado em cirurgia animal; O aumento da sobrevida ao longo do tempo correlacionou-se com a diminuição do tempo operatório. Os cuidados perioperatórios são uma das chaves para o sucesso dessa técnica. Um protocolo analgésico rigoroso é necessário, além da terapia sistemática baseada em antibióticos, e a alimentação deve ser introduzida progressivamente, usando apenas uma dieta em gel por 3 dias. Como descrito anteriormente 12, a suplementação com vitaminas B1, B9,B12 e lipossolúveis (A, D, E, K) é necessária após cirurgia disabsortiva, assim como a suplementação de ferro, que preveniu anemia em nosso experimento, mas ainda não foi descrita para o modelo SADI-S15.

Em conclusão, SADI-S pode ser transposto com sucesso em camundongos, com algumas modificações a partir de sua descrição em humanos. Esta técnica requer treinamento e um rigoroso protocolo perioperatório. A adaptação desta cirurgia a camundongos poderia permitir uma melhor compreensão dos mecanismos subjacentes ao forte efeito metabólico deste promissor procedimento em comparação com modelos anteriores e poderia ajudar a definir melhor suas indicações cirúrgicas.

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Disclosures

Claire Blanchard foi paga pela Medtronic para fornecer cursos de imersões clínicas.

Acknowledgments

Agradecemos à Ethicon (tecnologias cirúrgicas Johnson e Johnson) pela gentileza de fornecer o cordão de sutura e os clipes cirúrgicos. Este trabalho foi apoiado por bolsas do NExT Talent Project, Université de Nantes, CHU de Nantes.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Agagani needle 26 G Terumo 050101B 26 G needle
Betadine dermique  Pharma-gdd 3300931499787 Povidone solution
Betadine scrub Pharma-gdd  3400931499787 Povidone solution
Binocular microscope Optika Microscopes Italy SZN-9 Binocular stereomicroscope
Buprecare Animalcare 3760087151244 Buprenorphin
Castroviejo, straight 9 cm F.S.T 12060-02 Micro scissors
Castroviejo, straight 9 cm F.S.T 12060-02 Needle holder
Chlorure de sodium Fresenius 0.9% Fresenius Kabi  BE182743 NaCl 0.9%
Clamoxyl Med'vet 5414736007496 Amoxicilline
Cotton buds Comed 2510805 Cotton swabs
Element HT5 Scilvet Element HT5 Automated hematology analyzer
Emeprid CEVA 3411111914365 Metoclopramid
Extra Fine Graefe Forceps, curved (tip width: 0.5 mm) F.S.T 11152-10 Surgical forceps
Extra Fine Graefe Forceps, straight (tip width: 0.5 mm) F.S.T 11150-10 Surgical forceps
Fercobsang Vetoprice QB03AE04 Iron, multivitamins and minerals 
Forane Baxter 1001936060 Isoflurane
Graefe forceps, straight (tip width: 0.8 mm) F.S.T 11050-10 Forceps
Graphpad Prism version 8.0 GraphPad Software, Inc. Version 8.0 Software for statistical analysis
Heat pad Intellibio innovation A-2101-00300 Heat pad
Incubator Bioconcept Technologies Manufactured on demand Incubator 
Lighting Optika Microscopes Italy CL-30 Lighting for microscopy
Ocrygel Med'vet 3700454505621 Carboptol 980 NF
Pangen 2.5 cm x 3.5 cm Urgovet A02978 Haemostatic collagen compress
Prolene 6/0 B.Braun 3097915 Optilene 6/0 (0.7 metric) 75 cm 2XDR13 CV2 RCP, suture cord
Prolene 8/0 Ethicon 8732 2 x BV175-6 MP, 3/8 Circle, 8 mm,  suture cord
Scissors F.S.T 146168-09 Surgical scissors
Sterile compresses  Laboartoire Sylamed 211S05-50 Non-woven sterile compressed
Terumo Syringe Terumo 50828 1 mL syringe
Titanium hemostatic clip Péters Surgical B2180-1 Surgical clip
Vannas Wolff F.S.T 15009-08 Micro scissors
Vita Rongeur Virbac 3597133087611 Vitamin supplementation
Vitaltec stainless Péters Surgical PB 220-EB Medium Surgical clip applier

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Medicina Edição 192
Modelo de Bypass Duodeno-Ileal de Anastomose Única com Gastrectomia Vertical em Camundongos
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Frey, S., Ayer, A., Sotin, T., Lorant, V., Cariou, B., Blanchard, C., Le May, C. Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice. J. Vis. Exp. (192), e64610, doi:10.3791/64610 (2023).

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