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Summary
여기에서는 동물 유래 의약품에서 트리메틸아민(TMA) 측정에 적합한 헤드스페이스 가스 크로마토그래피-탠덤 사중극자 질량분석법(HS-GC-MS/MS) 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 샘플 전처리, 헤드스페이스 처리, 분석 조건, 방법론적 검증 및 동물 유래 의약품의 TMA 측정이 포함됩니다.
Abstract
동물 유래 의약품은 특유의 특성과 상당한 치료 효과를 가지고 있지만 대부분 명백한 비린내이가 있어 임상 환자의 순응도가 낮습니다. 트리메틸아민(TMA)은 동물 유래 의약품의 주요 비린내 성분 중 하나입니다. 잿물 첨가 후 급격한 산-염기 반응으로 인한 헤드스페이스 바이알의 압력 증가로 인해 TMA가 헤드스페이스 바이알에서 빠져나가 동물유래 의약품의 비린내에 대한 연구 진행이 지연되어 기존 검출 방법으로는 TMA를 정확하게 식별하기 어렵습니다. 본 연구에서는 산과 잿물 사이의 격리층으로 파라핀층을 도입한 제어된 검출 방법을 제안하였다. TMA 생산 속도는 자동 온도 조절 용광로 가열을 통해 파라핀 층을 천천히 액화시킴으로써 효과적으로 제어 할 수 있습니다. 이 방법은 우수한 재현성과 높은 감도로 만족스러운 선형성, 정밀 실험 및 회수율을 보여주었습니다. 동물 유래 의약품의 탈취에 대한 기술 지원을 제공했습니다.
Introduction
동물 부위 및/또는 그 부산물에서 추출한 제품(여기서는 동물 유래 의약품이라고 함)을 활용하여 인간의 질병을 치료하는 것이 점점 더 주목받고 있습니다. 암, 심혈관 질환, 간경변, 유방염 및 기타 질병을 치료하는 데 중요한 역할을 하며 강력한 효과, 소량, 중요하고 구체적인 임상 효능의 장점이 있습니다. 그러나 동물성 의약품은 일반적으로 비린내가 두드러져 환자의 순응도에 큰 영향을 미치며 특히 어린이 1,2에게 불리합니다. 비린내는 주로 약에 함유된 단백질, 아미노산, 지방 및 기타 물질에서 비롯되며, 지방산 산화, 아미노산 분해 및 기타 비린내를 가진 다양한 물질을 생성하는 기타 방법을 통해 분해됩니다 2,3,4. 그 중 트리메틸아민(TMA)은 썩거나 썩은 동물 유래 식품에 널리 존재하는 비린내를 동반한 휘발성 가스이다5.
지금까지, 가스 크로마토그래피 (GC), 액체 크로마토 그래피 (LC), 이온 크로마토 그래피, 분광 광도법, 액체 크로마토 그래피 - 질량 분광법 (LC-MS) 및 센서 방법은 환경, 식품 및 소변에서 TMA를 검출하기 위해 일반적으로 사용되어 왔다 6,7,8,9. GC 컬럼 및 주입 시스템의 낮은 오염과 높은 감도, 재현성 및 낮은 검출 한계(0.1-1 mg/kg)를 고려할 때, 헤드스페이스 가스 크로마토그래피-질량분석법(HS-GC-MS) 방법은 식품 및 생물학적 분석에 선호되었다8. 현재 중국만이 식품의 TMA에 대한 국가 표준을 제정했으며 HS-GC-MS는 GB5009.179-2016 표준10의 첫 번째 방법입니다. 따라서 동물유래 의약품에서 TMA를 검출하기 위해 상기 HS-GC-MS 방법을 선택하였다. 초기 단계에서 우리 연구 그룹은 식품의 TMA에 대한 HS-GC-MS 검출 표준이 여러 동물 유래 의약품에서 비린내를 감지할 수 있음을 발견했습니다. 연구결과와 11,12 TMA가 동물 유래 의약품에서 비린내를 유발하는 일반적인 핵심 물질임을 증명할 수 있습니다. 그러나 실험 결과의 재현성이 떨어지고 TMA 이탈, 안정성 불량 등의 문제가 있어 방법론으로 검증할 수 없는 문제점이 있는 것으로 나타났다. 이는 잿물이 헤드스페이스 바이알에 주입되고 빠른 산-염기 반응으로 인해 바이알의 압력이 증가하여 TMA가 주입 기공에서 빠져나와 TMA의 안정적이고 정확한 검출을 방해했기 때문일 수 있습니다. 따라서 본 연구에서는 이러한 문제를 해결하기 위해 개선된 헤드스페이스 가스 크로마토그래피-탠덤 사중극자 질량분석법(HS-GC-MS/MS) 검출 방법을 제안했습니다.
이 프로토콜은 우수한 고체-액체 상 변화 물질인 고체 파라핀의 도움으로 전처리에서 산-염기 반응물을 분리하여 샘플 전처리를 개선합니다. 온도 조절로의 온도 상승에 따라 파라핀이 서서히 액화됨에 따라 TMA도 밀봉된 헤드스페이스 바이알에서 천천히 방출되어 격렬하고 빠른 산-염기 반응으로 인한 압력 증가를 방지하고 안정적이고 정확한 TMA 검출을 보장합니다. 또한 GC-MS/MS에서 다중 반응 모니터링(MRM) 모드와 결합된 헤드스페이스 주입은 매트릭스 화학적 간섭을 효과적으로 억제하고 결과의 신뢰성을 보장했습니다. 방법론적 검증의 결과는 개선된 검출 방법의 선형성, 정밀 테스트 및 회수율이 우수한 재현성과 높은 감도로 요구 사항을 충족할 수 있음을 입증했습니다.
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Protocol
Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo의 의약 재료에 대한 정보는 표 1을 참조하십시오. 그들은 청두 중국 전통 의학 대학의 Xu Runchun 교수에 의해 Pheretima aspergillum (E.Perrier), Periplaneta americana L. 및 Whitmania pigra Whitman의 건조 된 시체로 확인되었습니다.
1. 검체 추출
- Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo를 허브 분쇄기(재료 표 참조)로 부수고 약용 분말을 2번(체 구멍: 0.8mm) 및 4번(체 구멍: 0.25mm) 표준 약물 체를 통해 체로 치고 두 체 사이에 분말을 수집하여 필요한 샘플 분말을 얻습니다.
알림: Pheretima 는 분쇄 후 푹신하므로 분말을 체질할 필요가 없습니다. - 50mL 플라스틱 원심분리기 튜브에 분말 1g(정확 0.001g)을 넣고 5% 트리클로로아세트산(TCA) 용액 20mL( 재료 표 참조)를 넣고 고속 분산 균질기로 1,000rmin-1에서 1 분 동안 균질화합니다.
- 균질화 후, 실온에서 5분 동안 1,717 x g 로 원심분리하고, 유리 깔때기에 약간의 흡수성 면을 첨가하고, 상층액을 50mL 용량 플라스크에 여과한다.
- 5% TCA 용액 15mL와 10mL로 위의 추출 과정을 두 번 반복합니다. 여과액을 합하고 5% TCA 용액으로 50mL로 희석합니다.
2. 시약 준비
- 20% 수산화나트륨 용액 준비: 수산화나트륨 20g을 칭량하고 탈이온수를 사용하여 100mL 부피 플라스크에 부피를 고정합니다.
- 5 % TCA 용액 준비 : TCA 25g의 무게를 측정하고 탈 이온수를 사용하여 500mL 용량 플라스크에 부피를 고정합니다.
3. TMA 표준 원액 준비
- TMA 표준 원액 준비: TMA 염산염 표준시료 0.0162g의 무게를 측정하여 5% TCA 용액에 녹이고 부피를 TMA 표준액 100μg/mL 농도와 동일한 100mL로 고정합니다. 4 °C에서 보관하십시오.
- TMA 표준 사용 용액 준비: 일정량의 TMA 표준 원액을 취하여 5% TCA 용액으로 단계적으로 희석하여 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 2μg/mL, 5μg/mL 및 10μg/mL TMA 표준 용액.
4. 샘플 헤드스페이스 처리
- 20mL 헤드스페이스 바이알에 수산화나트륨 용액 2mL와 고체 파라핀 0.5g(융점: 58-60°C)을 정확하게 칭량합니다( 재료 표 참조).
- 헤드스페이스 바이알을 70°C의 오븐에 약 30분 동안 넣습니다. 고체 파라핀이 완전히 녹습니다.
- 꺼내서 실온으로 식혀 파라핀이 굳도록 한다. 응고된 파라핀은 수산화나트륨을 밀봉합니다.
- 각 샘플 추출 용액 2mL를 취하여 파라핀 층 위에 놓고 캡을 누르고 밀봉합니다.
- 측정을 위해 밀봉된 헤드스페이스 바이알을 기계에 올려 놓습니다( 재료 표 참조).
5. HS-GC-MS/MS 분석 조건 설정
- 헤드스페이스 조건 및 GC-MS 조건에 대해서는 표 2 를 참조하십시오.
- 이온 정보는 표 3 을 참조하십시오.
6. 표준 곡선 그리기
- 4.1-4.3 단계의 샘플 헤드스페이스 처리를 참조하여 잿물 및 파라핀 밀봉층을 함유하는 헤드스페이스 바이알을 준비한다.
- 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 2μg/mL, 5μg/mL 및 10μg/mL TMA 표준 용액 2mL를 20mL 헤드스페이스 바이알에 흡인하고 캡을 밀봉하고 기계에서 측정합니다.
7. 정밀도 시험
- 4.1-4.3 단계의 샘플 헤드스페이스 처리를 참조하여 잿물과 파라핀 밀봉층이 포함된 헤드스페이스 바이알을 준비합니다.
- 0.1μg/mL TMA 표준 용액 2mL를 20mL 헤드스페이스 바이알에 흡인하고 캡을 밀봉합니다. 제조업체의 지침에 따라 기계에서 6 개의 병렬 테스트를 수행하십시오 ( 재료 표 참조).
8. 회수율 실험
- Pheretima, Periplaneta Americana 및 Hirudo(S02, S05, S07; 표 1) 회수율 실험을 위한 대표적인 의약품으로.
- 샘플 분말(S02, S05, S07)의 여러 배치를 가져다가 TMA가 감지되지 않을 때까지 50°C의 오븐에서 72시간 동안 굽습니다.
- 섹션 4-6의 샘플 준비 방법을 참조하여 구운 약 분말에서 TMA 함량을 검출합니다.
- 구운 분말 1g(정확 0.001g)을 취하여 50mL 플라스틱 원심분리기 튜브에 넣고 TMA 표준액 50μL를 추가합니다.
참고: TMA 표준 용액의 농도는 100μg/mL, 1000μg/mL 및 10000μg/mL입니다. - 5% TCA 용액 20mL를 넣고 1000rmin-1에서 1 분 동안 균질화합니다.
- 균질화 후, 1717 x g 에서 5분 동안 원심분리하고, 유리 깔때기에 약간의 흡수성 면을 첨가하고, 상청액을 50mL 부피 플라스크에 여과한다.
- 15 mL 및 10 mL의 5% TCA 용액으로 위의 추출 과정을 두 번 반복하십시오. 여과액을 합하고 5% TCA 용액으로 50mL로 희석합니다.
9. 검출 한계(LOD) 및 정량화(LOQ) 결정
- 신호 대 잡음비(S/N) = 3일 때 해당 농도로 LOD를 결정합니다.
- S/N = 10일 때 해당 농도로 LOQ를 결정합니다.
10. 시료 TMA 함량 측정
- Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo의 미세 분말 약 1g을 각각 취하여 위의 방법에 따라 샘플을 추출하고 기계에서 결정합니다.
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Representative Results
이 프로토콜의 전처리 원리와 작동에 대한 개략도는 각각 그림 1과 그림 2에 나와 있습니다. TMA의 피크 시간은 2.3분이었고, 피크 모양이 뚜렷하고 다른 불순물의 간섭이 없었습니다(그림 3). 0.1-10 μg/mL TMA 표준용액의 선형 범위를 측정하고, TMA 농도를 가로좌표로, 피크 면적을 세로좌표로 하여 표준 곡선을 그렸습니다. 선형 회귀 방정식은 y = 2522482x + 24255로 얻었으며 상관 계수 (R2) = 0.9998로 양호한 선형 관계를 나타냅니다. LOD와 LOQ는 각각 S/N=3, S/N=10으로 계산되었습니다. LOD는 0.03mg/kg이었고 LOQ는 0.11mg/kg이었습니다. 이 방법의 정밀도를 조사하기 위해 TMA(0.1μg/mL)의 함량을 5.84%의 상대 표준 편차(RSD)와 병렬로 6번 측정하여 이 방법의 정밀도가 우수함을 입증했습니다. Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo의 샘플 그룹이 회수 실험의 대표 샘플로 선택되었습니다(각각 S02, S05, S07). 이들은 허브의 TMA를 감소시키기 위해 건조에 의한 스파이크 회복 테스트를 거쳤으며, 평균 회수율은 각각 84.49%, 94.66% 및 85.67%였으며 정확도는 분석 요구 사항을 충족했습니다(표 4). TMA는 Pheretima, Periplaneta Americana 및 Hirudo의 9개 허브 배치에서 13.23-271.63mg/kg 범위의 농도로 검출되었습니다(표 5). 이 프로토콜 방법은 방법론적 검증 결과가 우수하며 명백한 비린내와 함께 동물 유래 약물에서 TMA 함량도 검출했습니다.
그림 1: 잿물-파라핀 추출 용액의 반응 원리 개략도. (1) 20mL 헤드스페이스 바이알에 수산화나트륨 용액 2mL를 정확하게 계량합니다. (2) 헤드스페이스 바이알에 고체 파라핀 0.5g을 추가합니다. (3) 열을 가하여 수산화나트륨 용액으로 층상된 고체 파라핀을 녹이고 수산화나트륨 용액 위에 떠 있습니다. (4) 냉각 후, 파라핀은 고형화되어 수산화 나트륨 용액 위에 단단히 밀봉됩니다. (5) 시료 추출액 2mL를 취하여 파라핀층 위에 올려 놓고 캡을 눌러 밀봉합니다. (6) 측정을 위해 밀봉된 헤드스페이스 바이알을 기계에 놓습니다. 자동 온도 조절 오븐의 가열은 파라핀 층을 녹이고 파라핀 층 위와 아래의 산-염기 반응물이 반응하여 밀폐 된 환경에서 TMA를 생성합니다. 샘플의 헤드 스페이스 처리는 대략 섹션 1 내지 6에서 수행됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2: 시료 전처리 작업의 개략도. (A) 밀봉 잿물: 프로토콜의 4.1-4.3단계. (B) 샘플 추출: 프로토콜의 섹션 1 및 단계 4.4. (C) TMA 검출: 프로토콜의 단계 4.5 및 섹션 5. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3: TMA의 총 이온 크로마토그램. 1μg/mL TMA 표준 용액의 스펙트로그램. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
| 일괄 | 기원 | |
| 페레티마 | 에스01 | 쓰촨성 러산시 |
| 페레티마 | 에스02 | Dianbai 시, 광동성 |
| 페레티마 | 에스03 | 마오밍 시, 광동성 |
| 페리플라네타 아메리카나 | 에스04 | Xichang 시, Liangshan Yi Autonomous Prefecture, 쓰촨성 |
| 페리플라네타 아메리카나 | 에스05 | Midu County, Dali Prefecture, 윈난성 |
| 페리플라네타 아메리카나 | 에스06 | 보저우시, 안후이성 |
| 히루도 | 에스07 | Weishan 카운티, Jining 시, 산동성 |
| 히루도 | 에스08 | 쿤샨 시, 장쑤성 |
| 히루도 | 에스09 | Laiwu 지역, 지난 시, 산동성 |
표 1: 동물 유래 의약품 정보.
| 헤드스페이스 상태 | |
| 자동 온도 조절 오븐의 온도 | 섭씨 80도 |
| 샘플 b 온도 조절 시간 | 30 분 |
| 헤드스페이스 바늘 온도 | 섭씨 100도 |
| 표본 크기 | 1 mL |
| GC-MS 조건 | |
| 크로마토그래피 컬럼 | SH 휘발성 아민, 30m×0.32mm×5μm |
| 컬럼 온도 프로그램 | 40 °C (0.5 분) _20 °C /min _200 °C (5 분) |
| 인젝터 온도 | 섭씨 200도 |
| 캐리어 가스 제어 모드 | 일정한 선형 속도 |
| 주입 모드 | 스플릿 인젝션 |
| 분할 비율 | 10:01 |
| 컬럼 흐름 | 2mL/분 |
| 표본 크기 | 1 mL |
| 이온화 모드 | EI |
| 이온 소스 온도 | 섭씨 200도 |
| GC-MS 인터페이스 온도 | 섭씨 230도 |
| 검출기 전압 | 동조 전압 +0.6kV |
| 획득 모드 정보 | 증권 시세 표시기 |
표 2: 헤드스페이스 상태 및 GC-MS/MS 조건.
| 화합물 이름 | CAS (영문) | 머무름 시간(분) | 정량 이온(m/z) | 세륨 | 기준 이온(m/z) | 세륨 |
| 트리메틸아민 | 75-50-3 | 2.308 | 58>42 | 20 | 58>30 | 7 |
표 3: TMA 화합물 정보.
| 견본 | 시료 농도(mg/kg) | 스파이크 농도(mg/kg) | 측정농도(mg/kg) | 평균 회수율(%) | RSD (%) |
| 에스02 | 128.99 | 500.00 | 548.50 | 84.49 | 2.12% |
| 에스05 | 49.08 | 500.00 | 520.93 | 94.66 | 0.96% |
| 에스07 | 101.36 | 500.00 | 527.07 | 85.67 | 1.87% |
표 4: 동물유래 의약품에서 TMA에 대한 회수율 실험 결과.
| 견본 | 시료 농도(mg/kg) |
| 에스01 | 88.11 |
| 에스02 | 137.34 |
| 에스03 | 18.63 |
| 에스04 | 19.10 |
| 에스05 | 40.50 |
| 에스06 | 13.23 |
| 에스07 | 271.63 |
| 에스08 | 69.73 |
| 에스09 | 67.70 |
표 5: 동물 유래 의약품의 TMA 농도 측정 결과.
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Discussion
동물 유래 의약품은 전신, 장기 또는 조직, 생리학적 또는 병리학적 산물, 배설물 또는 분비물, 동물의 가공 제품에서 유래합니다. TMA는 동물성 의약품에서 비린내를 유발하는 중요한 원인입니다. 후각 역치가 매우 낮고(0.000032 × 10-6 V/V) 강한 비린내를 풍기는 전형적인 악취 물질이다13. 현재 일반적으로 사용되는 HS-GC-MS 방법은 동물 유래 의약품에서 TMA를 안정적이고 정확하게 검출할 수 없습니다.
이 프로토콜은 여러 측면에서 개선된다: (1) TMA는 더 극성이고 알칼리성이다. 이 프로토콜에서는 TMA 검출을 위해 휘발성 아민 가스 크로마토그래피를 위한 특수 컬럼을 선택하여 TMA 검출의 정확성과 감도를 보장합니다. (2) 샘플 GB5009.179-2016의 HC-GC-MS 방법의 준비 과정에서 고농도 수산화나트륨 용액을 밀봉된 헤드스페이스 바이알10에 주입합니다. 이때 산-염기 반응이 발생하면 헤드스페이스 바이알의 압력이 증가하여 TMA가 빠져나가 TMA가 부정확하게 검출될 수 있습니다. 이 프로토콜은 중국 전통 의학에서 이산화황 잔류물의 검출 방법을 언급했습니다14. 시료 전처리에서 고체 파라핀은 산-염기 반응물을 분리하는 매개체로 사용됩니다. 헤드스페이스 바이알이 밀봉된 후 파라핀은 자동 온도 조절 용광로의 가열 하에 천천히 녹고 심한 산-염기 반응을 피하며 TMA 반응을 위한 우수한 기밀 환경을 제공하여 TMA 검출의 안정성과 정확성을 보장합니다. (3) 이 프로토콜은 GC-MS/MS의 MRM 모드를 수집에 사용하고 검출 매개변수(컬럼 온도 프로그램 등)를 최적화하여 분석 효율성과 정확성을 보장합니다.
이 프로토콜의 작동에서 다음 사항에 주의해야 합니다: (1) 적절한 양의 고체 파라핀 왁스를 선택해야 합니다. 파라핀 투여량이 적을수록 밀봉되지 않은 파라핀 층과 산-염기 반응물의 즉각적인 반응이 일어나 밀봉 전에 TMA가 생성되고 빠져 나갑니다. 파라핀 복용량이 많을수록 TMA의 방출, 농축 및 검출을 방해할 수 있습니다. (2) 글랜드가 단단하고 밀봉이 손상되지 않아야 합니다. 또한 프로토콜에는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 동물 유래 의약품의 TMA는 내인성이며 건조로 깨끗하게 제거할 수 없습니다. 회수 실험에는 저농도의 TMA 염산염 표준용액을 사용하였으나 그 효과는 만족스럽지 못하였다. 따라서, 동일한 농도의 TMA 염산염 표준용액만을 이 프로토콜에서 회수 실험을 위해 선택하였다.
결론적으로, 이 프로토콜은 동물 유래 의약품에서 샘플 전처리 방법과 TMA의 정확한 검출을 제공했습니다. 이 방법의 확립은 동물 유래 의약품에서 TMA 검출 방법의 격차를 메우고 동물 유래 의약품의 비린내 물질 연구에 대한 기술 지원을 제공하여 동물 유래 의약품의 연구, 개발 및 적용을 촉진하는 데 큰 의미가 있습니다.
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Disclosures
저자는 공개 할 것이 없습니다.
Acknowledgments
이 작업은 중국 국립 자연 과학 재단(82173991)과 쓰촨 과학 기술 프로그램(2022YFS0442)의 보조금으로 지원되었습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Centrifuge | Beckman Coulter Trading (China) Co. | SSC-2-0213 | |
| Chinese herbal medicine grinder | Zhejiang Yongkang Xi'an Hardware and Pharmaceutical Factory | HX-200K | |
| Convection oven | Sanyo Electric Co., Ltd | MOV-112F | |
| Decapper for 20 mm Aluminum caps | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | V1750004 | |
| Electronic balance | Shimadzu Corporation Japan | AUW220D | |
| Gas chromatography mass spectrometry | Shimadzu Corporation Japan | TQ-8050 NX | |
| Headspace Vial | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | 25760200 | |
| Homogenizer | Shanghai biaomo Factory | FJ200-SH | |
| Preassembled Cap | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | L4150050 | |
| Sample sieve | Zhenxing Sieve Factory | / | |
| SH-Volatile Amine | Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd | 227-3626-01 | |
| Sodium hydroxide | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022101401 | |
| Solid paraffin wax | Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory | 20221112 | |
| Trichloroacetic acid | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022102001 | |
| Trimethylamine hydrochloride | Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd | AF22022108 | |
| Ultra-pure water system | Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd | UPR-11-5T |
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화학 제 193 호 동물 유래 의학 트리메틸 아민 비린내 헤드 스페이스 가스 크로마토 그래피 - 탠덤 사중 극자 질량 분석법Erratum
Formal Correction: Erratum: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry
Posted by JoVE Editors on 11/28/2023.
Citeable Link.
An erratum was issued for: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry. The Authors section was updated from:
Hui Ye1
Xuemei Liu1
Haozhou Huang2
Lin Huang1
Yang Bao1
Hongyan Ma1
Junzhi Lin3
Xiaoming Bao4
Dingkun Zhang1
Runchun Xu1
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
3TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
4Shimadzu (China) Co., Ltd
to:
Hui Ye1
Xuemei Liu1
JiaBao Liao2
Haozhou Huang3
Lin Huang1
Yang Bao1
Hongyan Ma1
Junzhi Lin4
Xiaoming Bao5
Dingkun Zhang1
Runchun Xu1
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2China Resources Sanjiu Modern Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd
3Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
4TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
5Shimadzu (China) Co., Ltd
