Summary
Aquí, presentamos un protocolo para ofrecer alternativas de recolección de sangre rápidas, fáciles y confiables para el modelo de rata. Describimos tres métodos diferentes de muestreo de sangre según el contexto: punción de la vena de la cola bajo anestesia o en un animal consciente, y punción de la vena dorsal del pene bajo anestesia.
Abstract
Las muestras de sangre son necesarias en la mayoría de los diseños de animales experimentales para evaluar diversos parámetros hematológicos. Este trabajo presenta dos procedimientos para la recolección de sangre en ratas: la punción de la vena lateral de la cola y la punción de la vena dorsal del pene, que ofrecen ventajas significativas sobre otras técnicas descritas anteriormente. Este estudio muestra que estos dos procedimientos permiten un muestreo rápido (menos de 10 min) y producen volúmenes sanguíneos suficientes para la mayoría de los ensayos (202 μL ± 67,7 μL). La punción de la vena dorsal del pene debe realizarse bajo anestesia, mientras que la punción de la vena lateral de la cola se puede realizar en un animal consciente y restringido.
La alternancia de estas dos técnicas, por lo tanto, permite la extracción de sangre en cualquier situación. Si bien siempre se recomienda que un operador reciba asistencia durante un procedimiento para garantizar el bienestar animal, estas técnicas requieren un solo operador, a diferencia de la mayoría de los métodos de muestreo de sangre que requieren dos. Además, mientras que estos métodos descritos anteriormente (por ejemplo, palo yugular, extracción de sangre de la vena subclavia) requieren un entrenamiento previo extenso para evitar el daño o la muerte del animal, la punción de la vena de la cola y la vena dorsal del pene rara vez son fatales. Por todas estas razones, y de acuerdo con el contexto (por ejemplo, para estudios que incluyen ratas macho, durante el período perioperatorio o postoperatorio inmediato, para animales con venas delgadas de la cola), ambas técnicas se pueden usar alternativamente para permitir extracciones repetidas de sangre.
Introduction
El muestreo de sangre es necesario para la mayoría de los estudios en animales, tanto in vivo como in vitro. En ratas, como la frecuencia y la cantidad de muestreo de sangre pueden ser significativas, es útil tener diferentes alternativas para la recolección. Se han descrito varios métodos en estudios previos.
Las técnicas más utilizadas son la punción de la vena de la cola y la extracción de sangre de la vena safena. El muestreo de venas de la cola es adecuado para todas las cepas de ratas. Con el entrenamiento adecuado, el procedimiento es fácil de realizar y causa una angustia mínima al animal1. Del mismo modo, la extracción de sangre de la vena safena, siempre que se haga correctamente, también es un método de recolección rápido y simple. Ninguno de los métodos requiere anestesia, y ambos permiten extraer repetidamente pequeñas cantidades de sangre. Sin embargo, la punción de la vena safena generalmente produce un volumen sanguíneo más bajo1 y requiere la presencia de dos personas para dejar una extremidad posterior expuesta para la punción2.
Si es necesario recolectar grandes cantidades de sangre de un solo animal, se puede usar una punción cardíaca o punción de la vena cava (se pueden extraer hasta 10 ml de sangre de una rata de 150 g con punción cardíaca2). Estas técnicas requieren anestesia y son procedimientos terminales. El animal debe ser sacrificado después de cualquiera de estas dos técnicas2. El pinchazo yugular es una alternativa que se puede utilizar si es necesario recolectar grandes cantidades de sangre en un estudio que aún no ha alcanzado su punto final. Sin embargo, esta técnica también requiere habilidades técnicas significativas para evitar daños al animal; por lo tanto, su uso debe ser limitado3.
Otras técnicas, como la extracción de sangre de la vena subclavia, no necesitan el uso de anestésicos antes de la recolección de sangre y permiten el muestreo repetido de pequeños volúmenes de sangre. Sin embargo, se requiere un manejo restringido y una incisión de aguja adecuada para esta técnica. Una operación inadecuada puede provocar dolor en los animales o incluso la mortalidad, y el entrenamiento para este método puede ser exigente4.
Otros procedimientos anecdóticos incluyen la punción orbitaria y la punción venosa sublingual, las cuales requieren anestesia, y no son recomendadas ni ampliamente utilizadas. Aunque estudios previos han demostrado una recolección de sangre más rápida por punción orbitaria que por punción de la vena de la cola, se encontró que la punción orbitaria bajo anestesia dietil-éter fue menos tolerada que este último método (basado en las puntuaciones de excitación de los animales y la producción de orina)5. Además, este método está muy influenciado por la habilidad de la persona que realiza el procedimiento y es realizado principalmente por veterinarios experimentados. En comparación, la punción venosa sublingual es menos angustiante y se recomienda para el muestreo repetidode sangre 6. Sin embargo, esta técnica presenta efectos adversos severos como la reducción de la ingesta de alimentos y agua, que puede llevar a la muerte del animal7.
Este estudio describe dos métodos utilizados en nuestro laboratorio para el muestreo repetido de sangre. La punción de la vena de la cola se puede realizar en un animal consciente, y el daño tisular y los efectos adversos son mínimos. La modificación de esta técnica en este estudio incluye la estabilización de la cola con el dedo índice y medio, lo que permite que un solo operador realice la recolección de sangre. La punción de la vena dorsal del pene ya se ha descrito para inyecciones intravenosas simples. Esta técnica se realiza bajo anestesia y permite una fuente de sangre confiable en caso de dificultades con otros métodos (por ejemplo, durante el período postoperatorio inmediato, con un animal pequeño, cuando se realiza una extracción de sangre perioperatoria bajo anestesia). Similar al muestreo de venas de la cola, la lesión en el sitio de punción tendrá un efecto general menor en el animal en comparación con las técnicas mencionadas anteriormente8. El objetivo de este documento de métodos es ofrecer a los investigadores sin experiencia alternativas simples y confiables de muestreo de sangre de acuerdo con el contexto (por ejemplo, para procedimientos realizados bajo anestesia, para estudios que incluyen ratas macho, para animales con venas delgadas de la cola).
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Protocol
Los procedimientos se realizaron en ratas Lewis macho de 3 meses de edad, cada una con un peso de 300-400 g. Se incluyeron un total de 24 animales, con tres condiciones de punción: 12 ratas se sometieron a punción de vena de la cola sin anestesia (TV grupal sin anestesia), y otras 12 ratas fueron anestesiadas para someterse tanto a punción de vena de la cola (TV grupal con anestesia) como a punción de vena peneana (grupo PV con anestesia). Todos los procedimientos fueron aprobados y respetaron las directrices del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC). Todos los animales fueron sacrificados al final del estudio (después de un seguimiento de 1 mes) por sobredosis de dióxido de carbono. Consulte la Tabla de materiales para obtener detalles relacionados con todos los materiales e instrumentos utilizados en este protocolo.
1. Directrices generales
- De acuerdo con las directrices de IACUC, asegúrese de que el volumen sanguíneo máximo extraído no sea superior al 10% del volumen total de sangre cada 2 semanas9. Por ejemplo, una rata de 300 g debe tener un volumen sanguíneo total de aproximadamente 19,2 ml. En el caso de un protocolo que requiera cuatro extracciones de sangre solo en la primera semana (día 0, día 1, día 3, día 7), limite la recolección a un máximo de 250 μL de sangre por muestra.
- Para los procedimientos realizados bajo anestesia, administrar isoflurano a través de un vaporizador de precisión para anestesiar al animal. Inducir la anestesia en una cámara con una dosis de 3% -5% de isoflurano durante 5 min, y mantener usando una dosis de 1% -3% de isoflurano a través de un cono nasal durante el procedimiento. Ajustar el nivel de isoflurano en función de la monitorización continua de la frecuencia respiratoria. Verifique si la sedación es suficiente pellizcando el dedo del pie antes de comenzar el procedimiento.
- No deje al animal desatendido durante el procedimiento o hasta que haya recuperado la conciencia suficiente para mantener la decúbito esternal.
- Después de la recolección de sangre, controle al animal hasta la recuperación completa antes de devolverlo a su jaula, y no lo introduzca en compañía de otros animales hasta que esté completamente recuperado.
NOTA: De acuerdo con los servicios veterinarios, no fue necesario tomar analgésicos después del procedimiento después de la punción de la vena de la cola o la vena del pene.
2. Extracción de sangre de la vena del pene
- Preparación
- Prepare el siguiente equipo: gasa estéril, guantes, toallitas con alcohol, un tubo de EDTA de recolección de sangre microcapilar (gorro púrpura) y una jeringa de insulina de 30 G (30 U o 50 U).
- Saque a la rata de su jaula y póngala en una cámara para su inducción con isoflurano a través de un vaporizador de precisión (dosis: 3% -5%). Una vez que el animal esté sedado, transfiéralo a la mesa de procedimientos y coloque al animal boca arriba con la nariz colocada en el cono de la nariz para mantener la anestesia. Controle la frecuencia respiratoria y ajuste el nivel de isoflurano en consecuencia (dosis de mantenimiento: 1% -3%). Verifique que el animal esté suficientemente sedado por pellizco del dedo del pie antes de comenzar el procedimiento.
- Muestreo de sangre
- Mueva el émbolo hacia adelante y hacia atrás en la jeringa varias veces para suavizar la retirada. Cree presión negativa en la jeringa tirando del émbolo para eliminar un par de microlitros.
- Con la ayuda de la mano no dominante, retraiga el prepucio desde el extremo del pene y sostenga el glande entre el índice y el pulgar, tirando suavemente. La vena dorsal del pene aparecerá como un cordón azul superficial. Ver Figura 1 y Figura 2.
- Con el ojo de la aguja apuntando hacia arriba, inserte la jeringa de insulina en la vena en un ángulo de 35°. Una vez que la aguja ha entrado en la vena, la sangre fluirá hacia la jeringa.
- Extraiga lentamente el émbolo de la jeringa a un ritmo lento y constante para recoger el volumen deseado.
NOTA: No retire el émbolo demasiado rápido, ya que esto hará que la vena se colapse y detenga el flujo sanguíneo. - Si el flujo sanguíneo disminuye, gire la aguja ligeramente en el sentido de las agujas del reloj o en el sentido contrario a las agujas del reloj.
- Retire la jeringa. Se formará una gota de sangre en el sitio de punción, cuya aspiración permitirá la recolección de algunos microlitros más de sangre en el caso de un procedimiento no estéril.
- Si la primera punción falla, vuelva a insertar la aguja más proximalmente en la vena.
NOTA: A diferencia del muestreo de la vena de la cola, la punción iterativa de la vena dorsal del pene generalmente no tiene éxito. - Aplique una ligera presión en el sitio de punción para detener el sangrado y limpie el área con una toallita con alcohol nueva.
- Coloque el pene de nuevo en su posición neutral.
- Apague el isoflurano y controle a la rata hasta que se recupere por completo. Devuelve la rata a su jaula.
3. Punción de la vena de la cola
- Preparación
- Prepare el siguiente equipo: un soporte de sujeción de plástico, gasa estéril, guantes, toallitas con alcohol, un tubo de EDTA para recolección de sangre microcapilar (gorro púrpura) y una jeringa de insulina de 28 G 1/2 (30 U o 50 U).
- Saque a la rata de su jaula y asegúrela rápidamente en un cono de restricción de plástico. Cierre el extremo grande del cono alrededor de la base de la cola. Asegúrese de que el animal esté cómodo y que la respiración no esté restringida durante todo el procedimiento.
- Sumerja la cola en agua tibia (37 °C) durante aproximadamente 1 minuto para dilatar la vena. Seque la cola con una toalla de papel. Coloque al animal (en su retenedor) boca abajo, con la cola acostada sobre una almohadilla térmica.
- Seleccione la vena de la cola derecha o izquierda (línea azul) para el muestreo girando todo el animal hacia ambos lados (esto evita la torsión de la cola). Utilice el tercio terminal de la cola para la punción de los vasos sanguíneos, ya que los vasos se vuelven más superficiales en esta zona. La arteria es ventral, y las dos venas son laterales10.
- Limpie la cola con toallitas de etanol al 70% en el sitio de punción.
- Coloque la cola en el borde de la almohadilla térmica para crear un ángulo en el tercio terminal de la cola. Esto lleva la vena a la superficie y crea más espacio para tomar la muestra.
- Muestreo de sangre
- Mueva el émbolo hacia adelante y hacia atrás en la jeringa varias veces para suavizar la retirada. Cree presión negativa en la jeringa tirando del émbolo para eliminar un par de microlitros.
- Con la ayuda del dedo índice y medio no dominantes, asegure la cola plana en la almohadilla térmica. Coloque el dedo medio proximalmente y el dedo índice distalmente, con el sitio de punción entre estos dos dedos. Aplique más presión en el dedo medio que en el índice para asegurar la cola, ocluyendo el vaso solo proximalmente y permitiendo que la sangre se acumule. Consulte la figura 1 y la figura 3.
- Con el ojo de la aguja apuntando hacia arriba, deslice la jeringa de insulina contra el dedo índice hasta que se inserte en la vena (esto crea un ángulo de 35° entre la aguja y la cola). Una vez que la aguja ha entrado en la vena, la sangre fluirá hacia la jeringa. En este punto, libere la presión sobre el dedo índice y medio para asegurarse de que el flujo sanguíneo no esté ocluido.
- Extraiga lentamente el émbolo de la jeringa a una velocidad constante para recoger el volumen deseado.
NOTA: No retire el émbolo demasiado rápido; Esto hará que la vena se colapse y detenga el flujo sanguíneo. - Si el flujo sanguíneo disminuye, gire la aguja ligeramente en cualquier dirección.
- Retire la jeringa de la cola. Se formará una gota de sangre en el sitio de punción de la cola. La aspiración de esta sangre permite la recolección de algunos microlitros más de sangre en el caso de un procedimiento no estéril.
- Si la primera punción falla, vuelva a insertar la aguja más proximalmente en la vena.
NOTA: La vena se vuelve progresivamente más profunda a medida que se acerca a la base de la cola. Si no hay flujo sanguíneo en la jeringa, aumente el ángulo entre la jeringa y la cola, o gire la aguja. - Aplique presión en el sitio de punción para detener el sangrado y limpie el área con una toallita con alcohol nueva. Retire la rata del cono de plástico y devuélvala a su jaula.
- Punción de la vena de la cola bajo anestesia
- Realice los pasos 2.1.1 y 2.1.2 para inducir y mantener la anestesia.
- Realice los pasos 3.1.3-3.2.7 para la recolección de sangre; ver Figura 1.
- Realice el paso 2.2.10 para la recuperación del animal.
Figura 1: Esquemas de los diferentes métodos de punción en este protocolo. (A) Punción modificada de la vena de la cola en un animal consciente y restringido; (B) punción modificada de la vena de la cola y punción de la vena del pene bajo anestesia. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Representative Results
El éxito se definió como una extracción de sangre que produce al menos 100 μL de sangre en menos de 10 min (desde el momento de la punción hasta el final de la recolección de sangre), y el fracaso se definió como una extracción de sangre que produce menos de 100 μL de sangre o toma más de 10 minutos para recuperar el volumen de sangre requerido. Se permitió un máximo de 250 μL de sangre por muestra. Los análisis estadísticos se realizaron mediante una prueba ANOVA unidireccional para comparaciones múltiples y la prueba de chi cuadrado. Los datos se presentaron como valor medio ± desviación estándar, y p < 0,05 se utilizó como punto de corte para determinar la significación estadística.
La comparación de las tasas de éxito mostró resultados similares para la punción de la vena de la cola en ratas conscientes (92%) y la punción de la vena del pene bajo anestesia (83%) (p = 0,0543), como se muestra en la Figura 4. Curiosamente, bajo anestesia, la vena de la cola se volvió muy poco confiable, y la punción de la vena de la cola bajo anestesia tuvo solo una tasa de éxito del 25% en este estudio, probablemente debido al adelgazamiento de la vena. En el caso de la anestesia, la punción de la vena peneana fue más exitosa que la punción de la vena de la cola para el muestreo (p < 0,0001).
Comparamos los volúmenes de sangre recolectados y las duraciones del procedimiento entre la punción de la vena de la cola y la vena dorsal del pene realizada en ratas bajo anestesia y la punción de la vena de la cola realizada en ratas conscientes. La Figura 5 muestra que la punción de la vena de la cola sin anestesia (217,5 μL ± 69,04 μL) y la vena del pene bajo anestesia (185,8 μL ± 66,4 μL) produjeron cantidades comparables de sangre (p = 0,4966), y estos volúmenes de sangre fueron significativamente mayores que el volumen recogido con punción de la vena de la cola bajo anestesia (54,4 μL ± 68,8 μL) (p < 0,0001).
La duración del procedimiento fue similar en el grupo de punción de vena peneana bajo anestesia (315,2 s ± 160 s) y en el grupo de punción de vena de la cola sin anestesia (262,5 s ± 171 s) (p = 0,6632). La Figura 6 muestra que el muestreo se realizó en menos de 6 min en ambos grupos, mientras que la punción de la vena de la cola bajo anestesia tomó más de 8 min (500,8 s ± 196 s) debido a fallas múltiples (p < 0,0382).
Figura 2: Método de punción de la vena dorsal del pene. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3: Método modificado de punción de la vena de la cola. Tenga en cuenta que la cola se mantiene presionada y el sitio de punción se encuentra entre los dedos índice y medio. La jeringa debe descansar y deslizarse contra el dedo índice para mantener un ángulo de punción estable. El uso de la mano no dominante permite la estabilización de la cola en un animal consciente. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4: Tasas de éxito con punción de vena de cola bajo anestesia, punción de vena de pene bajo anestesia y punción de vena de cola sin anestesia. **** p < 0.0001 con la prueba de chi cuadrado. Abreviaturas: TV = vena de la cola; PV = vena peneana. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 5: Comparación de los volúmenes sanguíneos (en μL) obtenidos en los tres grupos. ***p < 0,001; p < 0,0001 con análisis ANOVA para comparaciones múltiples. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 6: Comparación de la duración del muestreo (en segundos), definida como el tiempo desde el momento de la punción hasta el final de la extracción de sangre, en los tres grupos. El fracaso se definió como una duración de la extracción de sangre que duró más de 600 s (10 min). *p < 0,05; **p < 0,01 con análisis ANOVA para comparaciones múltiples. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
La punción de la vena de la cola es un método eficiente para obtener sangre de una rata consciente. Sin embargo, cuando un animal está bajo anestesia, el efecto del isoflurano puede provocar espasmos vasculares y hacer que la punción de la vena de la cola sea inadecuada11. Como se muestra en este estudio, una alternativa en esta situación es recolectar sangre de la vena del pene, que es más exitosa y produce un volumen significativamente mayor de sangre en menos tiempo. Es importante recordar que en el caso de fallar con este método en el primer intento, los intentos posteriores pueden no tener éxito. Por el contrario, la punción de la vena de la cola permite varias punciones posteriores en caso de dificultad en el primer intento (hay dos venas, y se puede intentar perforar más arriba en la cola)1. Sin embargo, las punciones iterativas pueden causar hemólisis en la muestra, lo que distorsiona los resultados debido a la liberación de hemoglobina y los componentes internos de las membranas eritrocitarias. Esto es especialmente cierto si se analiza el plasma12. Es preferible evitar múltiples punciones y obtener la muestra en una sola extracción de sangre.
En este trabajo, el muestreo de sangre no superó los 250 μL por muestra de acuerdo con este protocolo y las directrices de IACUC para respetar el bienestar animal en el caso de muestreo múltiple. Los avances en las técnicas bioanalíticas han permitido el uso de micromuestras de menos de 50 μL para evaluar la bioquímica sanguínea y los parámetros metabólicos 13. Por lo tanto, 250 μL es suficiente para concluir que ambos métodos son eficientes para estudios futuros. Sin embargo, tanto la vena de la cola como la vena del pene son vasos pequeños y no permiten la recolección de grandes cantidades de sangre. Estos métodos descritos son apropiados para el muestreo repetido y el seguimiento de animales vivos. Si se necesitan grandes cantidades de sangre (por ejemplo, para los procedimientos al final del estudio), se deben considerar otros métodos que produzcan más sangre, como la punción cardíaca.
Estos procedimientos descritos son dos entre muchos; Nuestra elección del procedimiento fue motivada por algunas ventajas. Ambas técnicas pueden ser realizadas por un solo operador. El uso de los dedos índice y medio para estabilizar la vena de la cola en la técnica de vena de la cola modificada hace innecesaria la restricción humana complementaria. Sin embargo, es necesario evaluar el bienestar del animal, y siempre se recomienda la asistencia de un profesional (por ejemplo, un veterinario o técnico veterinario) para evitar someter al animal a dolor o angustia innecesarios2.
Además, los métodos descritos anteriormente (por ejemplo, palo yugular, extracción de sangre de la vena subclavia) requieren un entrenamiento previo extenso para evitar daños o la muerte del animal. En contraste, la vena de la cola o la punción de la vena dorsal del pene rara vez son fatales para la rata, incluso si no están bien ejecutadas. Este estudio tuvo algunos fracasos con ambos métodos, pero no se observaron otros efectos adversos o muertes. Se han informado algunos casos de retención de orina después de las inyecciones dorsales del pene, pero no está claro si la inyección en sí o el agente inyectado es responsable de este resultado. Ni este efecto adverso ni la cicatrización anormal o la infección en el sitio de punción se observaron durante el período de estudio. Además, las evaluaciones diarias de las condiciones de los animales no revelaron dolor o angustia en ningún grupo (sin tinción de porfirina, sin pérdida de peso, animales considerados cómodos por el equipo de investigación y los profesionales veterinarios). Sin embargo, la restricción prolongada y los pinchazos múltiples pueden causar angustia a los animales. Para evitar esto, la aguja debe rotarse cuando el flujo sanguíneo disminuya en lugar de repetir la punción. Se recomienda calentar adecuadamente la cola con agua caliente y una almohadilla térmica para vasodilatar la vena de la cola, así como practicar estos métodos, para reducir el tiempo de restricción.
Los métodos de punción de la vena de la cola y punción de la vena dorsal del pene permiten un muestreo rápido (menos de 6 minutos) y producen volúmenes de sangre suficientes para la mayoría de los ensayos. Cuando se realiza en un animal consciente, la punción de la vena de la cola es un método eficiente y confiable para obtener sangre. Sin embargo, en un animal sedado, los agentes anestésicos tienden a causar espasmos vasculares, y la vena de la cola está sujeta a un adelgazamiento importante11. En este escenario, la punción de la vena dorsal del pene proporciona una mejor tasa de éxito que la punción de la vena de la cola, que tiende a ser poco confiable para la recolección de sangre. Sin embargo, una limitación de la extracción de sangre de la vena del pene es que solo se puede realizar en ratas macho y, por lo tanto, no es adecuada para estudios con ratas hembra. Por lo tanto, de acuerdo con el contexto (es decir, el sexo del animal, la extracción de sangre perioperatoria o postoperatoria, los animales con venas delgadas de la cola), tanto la punción de la vena del pene como la punción de la vena de la cola se pueden usar alternativamente para extracciones de sangre repetidas, incluso por investigadores con poca o ninguna experiencia con estudios en animales.
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Disclosures
Ninguno de los autores tiene ningún conflicto de intereses que declarar.
Acknowledgments
Este trabajo fue financiado por Shriners Children's Boston (B. E. U., K.U., C.L.C.). L.C. está financiado por "La Bourse des Gueules Cassées", "La Bourse Année Recherche" y "La Bourse de l'Amicale des Anciens Internes des Hôpitaux de Paris". Y.B. está financiado por "La Bourse des Gueules Cassées". Y.B. e I.F.v.R. son financiados por los Hospitales Shriners para Niños (la identificación de las becas es #84308-BOS-22 #84302-BOS-21 respectivamente). Este material se basa parcialmente en el trabajo apoyado por la National Science Foundation bajo la subvención No. CEE 1941543. Se agradece el apoyo parcial de los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos (R01EB028782, R56AI171958 y R01DK114506). La figura 1 se creó con BioRender.com.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.5 mL | 28 G ½ Insulin Syringes | BD | 329424 | for tail vein puncture |
| 0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin Syringes | BD | 320468 | for penile vein puncture |
| 250 L Microtainer blood collection tubes with K2EDTA | BD | 365974 | |
| Gauze Sponges | Curity | 6939 | |
| Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine | E-Z Systems | EZ-190F | for penile vein puncture |
| Isoflurane, USP | Patterson Veterinary | 1403-704-06 | for penile vein puncture |
| Nosecone for Anesthesia | World Precision Instruments | EZ-112 | for penile vein puncture |
| Rodent Restraint Cone | Harvard Apparatus | ST2 52-95-86 | for tail vein puncture |
| Small Animal Heated Operating Table (Adjustable) | Peco Services Ltd | 69023 | |
| Webcol Alcohol prep pads | Simply Medical | 5110 |
References
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