Neuartige Tanktauchen Assay: Eine Methode, um angeborene Stressreaktionen in Zebrafischen zu studieren

- Um zu beginnen, legen Sie ein Infrarotlicht hinter dem neuartigen Tank und eine weiße Acrylfolie zwischen dem Tank und dem Licht, um das Licht zu diffundieren und Blendung zu verhindern. Füllen Sie nun 3/4 des Tanks mit Fischsystem Wasser durch Umkehrosmose von Leitungswasser erzeugt. Übertragen Sie einen akklimatisierten Fisch aus einem Haltebecken zu einem Becher mit Fischsystem Wasser und lassen Sie es für weitere 10 Minuten ruhen.

Verwenden eines Standbild-Videobildes, um die Oberseite zu finden, Mittlere und untere Bereiche des Tanks durch die Berechnung der Höhe des Tanks und teilen sie durch 3, bestimmen Sie die Zeit in jedem Bereich und die Gesamtstrecke mit Tracking-Software verbracht. Ein erwachsener Fisch, wenn in einem unbekannten Tank platziert, zeigt in der Regel eine Präferenz für die untere Hälfte, aufgrund von Stress. Da der Stresspegel reduziert, schwimmt es allmählich nach oben häufiger. Testen Sie mindestens 10 Fische pro Experiment. In einem Beispiel-Protokoll, werden wir die experimentelle Natung sehen.

- Beginnen Sie mit dem Befüllen eines 250 Milliliter Bechers und mindestens zwei Ertanks mit Fischsystemwasser. Am Morgen des Tests, übertragen Sie mindestens 10 erwachsene Zebrafische für jeden Versuchszustand in einzelne Haltebecken, bevor Sie alle Fische für mindestens eine Stunde in den Verhaltensraum zur Akklimatisierung überführen.

Lassen Sie die erwachsenen Fische 10 Minuten im Becher klauen, bevor sie das Wasser und den Fisch aus dem Becher in den experimentellen neuartigen Tank gießen. Sobald der Fisch im Tank ist, beginnen Sie die Kameraaufnahme und entfernen Sie sich vom Setup, um zusätzliche Not für die Fische zu verhindern. Wenn die Aufnahme abgeschlossen ist, entfernen Sie die Person aus dem neuartigen Tank und legen Sie den Fisch in einen neuen Haltebecken.