MCAO الجرذ النموذجي
التحضيرات سابق للجراحة
وينبغي أن تستخدم تقنية العقيم عن بقاء جميع الإجراءات الجراحية. تطهير سطح العمل الجراحي بالمطهرات التجارية وإعداد حزم الجراحية المعقمة من الصكوك ، الستائر ، والشاش ، ومسحات وخياطة الجروح ، وشفرات المشرط من قبل التعقيم. وينبغي ارتداء قناع جراحي ، بونيه الشعر وقفازات معقمة. ويستخدم أيضا الجافة Germinator حبة لتعقيم الأدوات الجراحية resterilize بين الإجراءات إذا كان سيتم القيام به خلال عملية جراحية متعددة الفئران دورة واحدة. Prewarm بطانية المياه تغلف homeothermic ومكان تحت وسادة ماصة للحيلولة دون انخفاض درجة حرارة الجسم من خلال عملية جراحية الفئران.
- مكان الفئران بصورة عفوية ارتفاع ضغط الدم (أو غيرها من سلالة الفئران في الاختيار) الى غرفة تحريض وتحريض التخدير مع 5 ٪ isoflurane (يجب أن يكون تعيين الجهاز التخدير إلى 1.0 لتر / دقيقة O 2 و 1.0 لتر / دقيقة N O 2). أقل من 1-2 ٪ isoflurane للحفاظ على التخدير.
- تطبيق مرهم الدموع الاصطناعية لكلتا العينين.
- حلق الحنجرة والرقبة وراء ترك المنطقة في موقع شق المحتملين باستخدام كليبرز (اوستر A5 مع شفرة 10 #).
- تطبيق Betadine إلى الشاش وتطهير الجلد بدءا من وسط المنطقة الجراحية ، وتصاعد في الخارج. شطف مع لوحة تحتوي على شاش معقم الايثانول 70 ٪ ، والانتقال لوحة في نمط مماثل. كرر الخطوات على حد سواء لما مجموعه ثلاث دورات.
- ضخ 0.2 مل من بوبيفاكايين 0.5 ٪ تحت الجلد على طول شق موقع المحتملين.
- الفئران في مكان stockinette معقمة أو مع تغطية ثنى جراحية معقمة.
عابر انسداد MCA
- تحت المجهر التشغيل ، ويتم تنفيذ خط الوسط شق بطني ويتم تشريح اللفافة السطحية.
- تحت اللفافة السطحية ، هناك الأنسجة الغدية إلى اليسار والعضلات الثلاث التي تشكل مثلثا : والقصية اللامية ، التي تقع على خط الوسط عبر القصبة الهوائية ، والعضلة ذات الرأسين (التعرف عليها بسهولة مع حصتها بيضاء لامعة وترية) ، وأخيرا ، في عضلة القصية الخشائية.
- يتم إجراء تشريح دقيق حادة وصريحة داخل المثلث لتحديد الشريان السباتي (قد يكون من المفضل تشريح حادة من قبل بعض الحصري لتقليل الضرر العرضي الأنسجة). تتعرض الشرايين الخارجية ، الداخلية ، والشريان السباتي المشتركة (اللجنة الاقتصادية لأفريقيا ، ICA ، CCA). الشريان السباتي هو كبير والبقول واضح. ويعتبر العصب المبهم التعقيب على طول الجانب الوحشي من الشرايين السباتية المشتركة على حد سواء والداخلية ويتم تشريح حاد قبالة الشرايين السباتية المشتركة والداخلية.
- ثم يتم تشريح فرعين اللجنة الاقتصادية لأفريقيا بشكل حاد ، أول فرع البند بشكل إعلامي ، والفرع الثاني يتجه أفقيا. وأكتوي السلطتين وقطع ، والذي يسمح لسهولة أكبر في حشد السفن الكبيرة.
- الآن يتم تشريح اللجنة الاقتصادية لأفريقيا أكثر rostrally. قد تكون مصادفة العظم اللامي ، وهذا سوف يحد من مدى تشريح منقاري. يتم ربط الشريان السباتي الخارجي والخروج بشكل أقصى وقت ممكن مع خياطة الحرير 6-0.
- يتم وضع آخر خياطة الحرير 6-0 فضفاضة حول اللجنة الاقتصادية لأفريقيا بالقرب من التشعب مع ICA. تأكد من عدم انسداد السفينة كما خياطة داخل اللمعة لاستخدامها لإطباق سوف يمر هنا في خطوة لاحقة.
- يتم وضع مقاطع المجهرية في الشرايين السباتية والداخلية المشتركة بالقرب من التشعب.
- يتم إنشاء بضع الشريان الأولية الجزئية بين ربطات العنق الحريرية خياطة اثنين على الشريان السباتي الخارجي.
- إدخال 2.2 -3.0 سم طول للخياطة 4-0 حيدة النايلون ، مع شبك 2.0 سم من الحافة في تقريب المغلفة السيليكون ، في أسفل التجويف اللجنة الاقتصادية لأفريقيا نحو CCA حيث يقع قصاصة المجهرية. هذه الخيوط المتوفرة تجاريا (Doccol كورب ريدلاندز ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة). قطع الجزء المتبقي من اللجنة الاقتصادية لأفريقيا (في الموقع من بضع الشريان جزئي) للافراج عن الجذع ووضع الجذع دون التشعب من اللجنة الاقتصادية لأفريقيا والتحالف ، وهذا سوف يسمح بسهولة أكبر خياطة داخل اللمعة إلى الشريحة في ICA.
- تشديد خياطة الحرير حول الجذع اللجنة الاقتصادية لأفريقيا لتأمين خياطة النايلون داخل اللمعة ومنع النزيف ، ثم إزالة مقطع من الاوعية الدموية الدقيقة ICA. فتح مقطع ببطء قبل إزالته للتحقق من النزيف.
- مواصلة النهوض خياطة النايلون من اللجنة الاقتصادية لأفريقيا لمعة ICA الشريان الدماغي الأوسط (MCA). طول هذا هو عادة 18-20 ملم و هو السبب وراء وضع شبك في خياطة قبل الإدراج. بعد إدخال طول متغير من النايلون خياطة ، قد يكون شعر المقاومة. إذا كان هذا يحدث مع الكثير من الخيط النايلون التي لا تزال موجودة خارج السفينة ، فإنه يشير إلى أن خياطة يدخل على الأرجح الشريان الحنكي (انظر الملاحظة أدناه). التراجع ومنحنى خياطة قليلا من مواصلة السير في ICA ، والتي سيتم تشغيل أكثر بشكل إعلامي. بالإضافة إلى ذلك ، قد يتم تشريح أصل PPA لتصور أفضل مسارمن خيوط داخل اللمعة. يواصل إدراج خياطة النايلون حتى يشعر المقاومة عند وبعد الموقف سم 2 متلوى. عند هذه النقطة ، منعت خياطة داخل اللمعة أصل MCA. ويمكن التأكد MCA انسداد طريق رصد الانخفاض في تدفق الدم الدماغي الإقليمية باستخدام مقياس الجريان الليزر دوبلر (انظر الجدول مواد لمصدر المعدات واحد). نلاحظ أيضا أن يمكن أن يكون منشأ الشريان الحنكي الخروج من ICA مرتبطة مباشرة قبالة ، إذا كان يفضل ، من أجل تجنب التنبيب عرضي هذه السفينة مع خياطة داخل اللمعة.
- بدء موقت ووقت قياسي بدء انسداد.
- إزالة microclip من التقييم القطري المشترك.
- إغلاق شق (الأدمة ، السبلة carnosus ، طبقات الأنسجة تحت الجلد) بسرعة مع خياطة الحرير 3-0 (نمط بسيط المستمر سيسهل إعادة فتح لضخه) والمكان بعناية الفئران في قفص الانتعاش. تأكد من أن الكلمة قفص حول الأنف والفم تكون خالية من المواد الفراش ورصد الانتعاش من التخدير.
استعادة تدفق الدم MCA (ضخه)
- قبل فترة وجيزة من فترة الغلق يجب أن تنتهي ، وإعادة تخدير الفئران وتطهير الموقع مع شق Betadine والايثانول 70 ٪ (3 دورات ، كما في السابق) وفتح شق طريق إزالة الغرز الختامية.
- مكان microclip على التقييم القطري المشترك ، كما كان من قبل.
- سحب اقعة في المنتصف خياطة غالقة من ICA حتى نهاية خياطة مرئيا من خلال ICA. لا إزالة تماما من خياطة ICA / اللجنة الاقتصادية لأفريقيا!
- مكان microclip على ICA أعلاه نهاية خياطة داخل اللمعة.
- تماما إزالة خياطة وربط محكم الاغلاق قبالة الجذع اللجنة الاقتصادية لأفريقيا. سجل نهاية إطباق (بدء ضخه) الوقت.
- إزالة microclip من ICA.
- إزالة microclip من التقييم القطري المشترك.
- ترطيب المنطقة مع عدة قطرات من المياه المالحة عقيمة وإغلاق شق طبقات (الأدمة ، السبلة carnosus ، تحت الجلد) مع خياطة الحرير 3-0 باستخدام نمط بسيط مقاطعته.
- إدارة 0.05 ملغم / كغم البوبرينورفين (أو غيرها من المسكنات المناسبة بعد العملية التالية المبادئ التوجيهية الخاصة بك المؤسسية) في الفضاء البريتوني.
- حقن 5cc من intraperitoneally المالحة prewarmed. هذا وسوف توفر الماء خلال مرحلة الانتعاش.
- رصد الانتعاش من الفئران من التخدير.
- بعد الفئران تعافى ، واختبار للدلالة السلوكية للذبحة من خلال عقد الفأر من ذيله ومراقبة ما إذا كانت الفئران يمكن أن تتحول لكلا الجانبين. الشباك لجانب واحد فقط هو متوقع. ويمكن استخدام جداول سجل بسيط لتسجيل الأولي في مرحلة ما بعد احتشاء سير behavorial (انظر مناقشة).
- وينبغي إعطاء حقن إضافية من البوبرينورفين (الجرعة نفسها على النحو الوارد أعلاه) كل 6-8 ساعات لمدة 24 ساعة لتخفيف الألم. تمديد حالة وعي الحيوانية التي تظهر عليها علامات الانزعاج.
ممثل النتائج

الشكل 1. انسداد الشريان الدماغي الأوسط خياطة اللف. يظهر رسم تخطيطي مبسط لنظام الدورة الدموية في الجمجمة من الفئران مع خياطة السيليكون المغلفة داخل اللمعة غالقة أصل MCA. وقد ligated على الزراعة العضوية والفروع ST الخروج من اليسار واللجنة الاقتصادية لأفريقيا التعادل خياطة حول الجذع تتولى اللجنة الاقتصادية لأفريقيا خياطة داخل اللمعة في المكان. ACA ، الشريان المخي الأمامي ؛ BA ، الشريان القاعدي ؛ CCA ، الشريان السباتي المشترك ؛ اللجنة الاقتصادية لأفريقيا ، الشريان السباتي الخارجي ؛ ICA ، الشريان السباتي الداخلي ؛ MCA الشريان الوسطى ، الدماغي ، الزراعة العضوية ، الشريان القذالي ؛ PCA ، الشريان المخي الخلفي ؛ PComA ، الخلفي التواصل الشريان ؛ PPA ، الشريان الحنكي ؛ ST ، شريان الغدة الدرقية متفوقة. الرقم مقتبس من ساساكي وآخرون (4) ولي 3.

الشكل 2. ممثل التصوير بالرنين المغناطيسي للأقسام الاكليلية ساعات الجرذان المخ بعد 24 MCAO عابر 1 ساعة. ذمة الدماغ المصاحبة الإسكيمية التنسيق هو تصور في T2 المرجحة صور الرنين المغناطيسي. المنطقة احتشاء يظهر hyperintense (مشرق) على الصور T2. ويمكن رؤية نماذج مشابهة مع احتشاء تقنيات التصوير بالرنين المغناطيسي أكثر تقدما مثل التصوير ، ونشر المرجح فيما يبدو معامل نشر الخرائط 5.

الشكل 3. أقسام الاكليلية ممثل الدماغ الفئران ملطخة بعد 24 ساعة TTC MCAO عابر 1 ساعة. TTC تلطيخ يكشف الأبيض (غير ملوثين) من المناطق احتشاء قشرة الدماغ والمخطط في الفأر نفسه كما هو موضح في الشكل 2. علما بأن النمط العام للآفات الدماغية تنسيق مشابهة لتلك التي شوهدت في صور الرنين المغناطيسي T2 المرجحة ، على الرغم من أن المنطقة احتشاء النهائية تحدد تشريحيا قد يكون أصغر قليلا من آفة T2.