تقييم استعمار جذور شتلات الطماطم بواسطة بكتيريا ممرضة باستخدام عدد الخلايا القابل للحياة

الملخص

المصدر: ماتيس، أ. ج. التصاق البكتيريا بأسطح النباتات تم قياسه في المختبر. J. Vis. Exp.، (2018)

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لقياس استعمار جذور شتلات الطماطم بواسطة البكتيريا الممرضة البرية وذات البكتيريا الممرضة التي تفتقر إلى السليلوز. تظهر أعداد البكتيريا المثبتة بإحكام التصاقات أكبر وتكوين مستعمرات دقيقة بواسطة السلالة البرية، مما يبرز دور السليلوز في استقرار الجذور.

البروتوكول

1. قياس الالتصاق باستخدام عدد الخلايا القابل للحياة

1. تحديد عدد البكتيريا الحية المرتبطة بالنباتات المزروعة في الرمال
   1. أزل النبات من الحاوية واصنفر. لإزالة النباتات من الحاويات، قم أولا بإزالة مواد الإغلاق من أعلى وأسفل الحاوية. ضع الحاوية فوق قطعة من الورق المعقم وقم بإزالة الرمل أو التربة بالكامل برفق وازرع كأسطوانة كبيرة مدببة عن طريق ضرب الحاوية بلطف على سطح لتخفيف المادة.

1. إذا لزم الأمر، استخدم ملعقة أو قضيب لفك المادة حول الحواف التي تدخل من قاع الحاوية.

2. عندما تكون أسطوانة الرمل أو التربة التي تحتوي على النبات حرا على الورق، اقسمها إلى المنتصف لتكشف عن جذر النبات. إذا رغبت، خذ عينات من الرمل بالقرب من حافة الحاوية وكذلك بالقرب من الجذر. قد يكون هذا مفيدا لتحديد انتشار (وتراكم ونمو) البكتيريا.
3. قس طول الجذر. ارفع الجذر وأزل الرمل والبكتيريا الملتصقة بشكل فضفاض بالجذر (مادة الجذور) عن طريق غمره في كمية محددة من الماء أو الحاجز ورزه بلطف. تحديد عدد الخلايا الحية للبكتيريا في التعليق الناتج عن طريق الطلاء على وسط مناسب مثل لوريا أجار. يمثل هذا عدد البكتيريا المرتبطة بشكل فضفاض بالجذر.
4. قم بإزالة البكتيريا المرتبطة بإحكام عن طريق السونيك وتحديد أعدادها.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
البذور	أي	لا يوجد	دون رقم الدفعة والصنف
الرمل	صيادي رمال البحر العلمية	S25
الرمل	سيغما-ألدرتش	S9887
المخاريط	شركة ستوو وأولاده، إنك.	مخروطات راي-ليتش	تتوفر العديد من الأحجام المختلفة لتناسب نوع النبات الذي ترغب في زراعته
باث سونيكاتور	أي شركة توريد علمية	لا يوجد
بارافيلم	أي شركة توريد علمية	لا يوجد