ممارسة قادر على إحداث موت الخلايا المبرمج في الخلايا المناعية. هناك حدود القياس المختلفة ، لا سيما فيما يتصل مقدار الوقت اللازم لعزل ومعالجة عينة من الدم قبل التقييم. تظاهر هو إجراء سريع ومينيملي لتحليل ممارسة النشاط الخلايا اللمفاوية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الاصبع العصا منهجية أخذ عينات من الدم لتحديد بممارسة المستحثة الأبوطوزيس اللمفاويات
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
هو ممارسة التحفيز الفسيولوجية قادرة على إحداث موت الخلايا المبرمج في الخلايا المناعية. حتى الآن ، وقد تم تحديد أوجه القصور المختلفة مع قياس هذه الظاهرة ، لا سيما فيما يتصل مقدار الوقت اللازم لعزل ومعالجة عينة من الدم قبل تقييم موت الخلايا. وبسبب هذا ، فمن الصعب تحديد ما إذا كان يمكن ساهمت الزيادات التي أعلن عنها في موت الخلايا المبرمج للخلايا المناعية الأثر الفعلي لممارسة على النظام ، أو هي انعكاس للوقت وتجهيزها في نهاية المطاف من الضروري الحصول على هذا القياس. في هذه المقالة أن نبرهن إجراء سريع ومينيملي لتحليل ممارسة النشاط الخلايا اللمفاوية. خلافا لغيرها من التقنيات ، إضافة إلى الدم الكامل وحة الضد فور الحصول على العينة. بعد فترة الحضانة ، وlysed خلايا الدم الحمراء ومستعدون عينات لتحليلها. استخدام إجراء المعاينة الاصبع العصا يقلل من حجم الدم المطلوبة ، ويقلل من عدم الراحة لمواضيع.
البروتوكول
1. الإصبع عصا الدم أخذ العينات
- عادة ما يتم اتخاذ مجموعة من الدم الكامل في بقية لقياس خط الأساس (عادة بعد 10-15 دقيقة بقية الجذور) ، أثناء أو بعد المباراة على الفور وممارسة ، وطوال فترة ما بعد العملية (عادة من 1-3 ساعات بعد وقف ممارسة الرياضة).
- باستخدام الاحتياطات العالمي ، تعقيم لأول مرة مع الإصبع ايزوبروبيل 70 ٪.
- المقبل ، ثقب موقع باستخدام مشرط الآلي أو جهاز مماثل. على الرغم من أننا استخدام مشرط عيار 30 لتوفير الراحة للموضوع ، يمكن استخدام....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وأظهر جمع العينات مينيملي الداخلي والتحليل اللاحق لتحليل كل من المراحل المبكرة والمتأخرة من ممارسة النشاط الخلايا اللمفاوية. ومن الممكن أيضا أن تستبعد بوضوح تلك الخلايا ، والتي هي نخرية ، وأفكارك لا. هذا الإجراء يتغلب على السلبيات وعدم الراحة المرتبطة بزل الوريد الغازية من المنطقة المرفقية في نقطة زمنية متعددة قبل وأثناء وبعد التمرين مباشرة ، أو تأمين قسطرة لمدة نوبة ممارسة الرياضة. حيث من المحققين ، مثل هذه الإجراءات عادة ما تتطلب تدريبا متخصصا في الفصد ، والتي لا يكون لجميع الأف.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
وأيد هذا البحث من قبل منحة كلية جديدة من مجلس المنح الدراسية في كلية جامعة كنتاكي الغربية.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات | |
|---|---|---|---|---|
| محلول ربط قياس التدفق الخلوي | eBioscience | 00-4222-26 | ||
| محلول تحلل كريات الدم الحمراء | eBioscience | 00-4333-57 | ||
| جهاز وخز | Accu Check Soft Touch | Roche Group | ||
| أنابيب شعرية | أنابيب شعرية مهبرنة | Chase Scientific Glass, Inc. | 501 | |
| جهاز طرد مركزي | GmC Lab | Gilson, Inc. | PMS-880 | |
| Annexin V-FITC مقترن | Biovision Inc. | K201-400-1 | ||
| CD4-PE مقترن | مضاد بشري، نسخة RPA-T4 | eBioscience | 12-0049-42 | |
| CD8-PE مقترن | مضاد بشري، نسخة OKT8 | eBioscience | 12-0086-73 | |
| CD19-PE مقترن | مضاد بشري، نسخة HIB19 | eBioscience | 12-0199-42 | |
| محلول صبغ الحيوية 7-AAD | eBioscience | 00-6993-50 | ||
| CD45RA-APC مقترن | مضاد بشري، نسخة HI100 | eBioscience | 17-0458-42 | |
| مقياس التدفق الخلوي | C6 | Accuri |
المراجع
- Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans. Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).
- Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
