Method Article

السيليكون لمعالجة الرقائق خلية خلية التفاعل

DOI:

10.3791/268

August 30th, 2007

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توضح هذه المقالة نهج التجريبي لتنظيم دينامية خلية خلية التفاعلات بين الخلايا الملتصقة على نطاق ميكرون. ويتضح من الاتصالات بين الخلايا التلاعب بين خلايا الكبد والخلايا اللحمية. المنصة المتقدمة تمكن التحقيق من خلية خلية التفاعلات في مجموعة متنوعة من العمليات البيولوجية ، بما في ذلك تطوير والمرضية.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتم التعرف على دور المكروية الخليوي بانه حاسم في تحديد مصير الخلايا والأنسجة وظيفة في جميع الثدييات تقريبا من التنمية إلى التحول إلى أورام خبيثة. على وجه الخصوص ، وقد تورط التفاعل مع سدى المجاورة في عدد كبير من الظواهر البيولوجية ، إلا أن التقنيات التقليدية تحد من القدرة على استجواب العناصر المكانية والدينامية لهذه التفاعلات.

اعادة التشكيل في الثقافة الميكرو ميكانيكية (RC) ، ونحن توظيف ركيزة السيليكون مجهريا مع أجزاء متحركة لمراقبة حيوي خلية خلية التفاعلات من خلال إعادة الميكانيكية. سابقا ، وقد تم تطبيق هذا الأسلوب لتحقيق الاتصال بين الخلايا في الثقافات المشتركة لخلايا الكبد والخلايا غير متني ، مما يدل على الوقت التي تعتمد على التفاعل وعلى نطاق محدود للإشارة للذوبان 1.

هنا ، نحن تصف بالتفصيل إعداد واستخدام نظام المنسق المقيم. نبدأ من خلال البرهنة على التعامل مع أجزاء الجهاز باستخدام الملقط ، بما في ذلك التي تحرك بين الفجوة وتكوينات الاتصال (السكان خلية مفصولة فجوة 80 ميكرومتر الضيقة ، أو في اتصال حميم المباشر). المقبل ، ونحن بالتفصيل عملية تحضير ركائز للثقافة ، وبذر الخلية عملية متعددة الخطوات المطلوبة للحصول على monolayers الخلية متموجة. باستخدام المجهر العيش ، ثم نوضح في الوقت الحقيقي التلاعب في الخلايا بين تكوينات مختلفة التجريبية الممكنة. أخيرا ، علينا أن نظهر الخطوات المطلوبة من أجل تجديد سطح الجهاز لإعادة الاستخدام : التولوين وتنظيف سمكة البيرانا ، طلاء البوليسترين ، والأكسجين العلاج البلازما.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

إعداد الثقافات الخلية :

  1. تبدأ مع قطع السليكون مغلفة مع البلازما المعاملة البوليسترين.
  2. قطع معطف مع البروتينات المصفوفة خارج الخلية المناسبة لدعم مرفق من نوع من الخلايا المطلوبة. لخلايا الكبد ، يحضن في 50 جم / مل 1 - الكولاجين الحل عند 37 درجة مئوية لمدة 45 دقيقة. لالليفية 3T3 ، هناك حاجة إلى أي مصفوفة.
  3. تأمين قطع الغيار مع أجزاء مكملة في التكوين للإتصال به.
  4. نقع في الإيثانول 70 ٪ لمدة لا تقل عن ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هذا النظام هو فريد من نوعه من حيث أنه يتيح التنظيم المكاني للأنسجة لمعالجته بشكل حيوي على المستوى الخلوي. وبالتالي ، مكن هذا الجهاز عددا من التجارب البيولوجية الرواية ، والتي تمتد موضوعات مثل إشارات بين الخلايا الديناميات ، اتصل بوساطة مقابل إشارة للذوبان ، وقرارات مصير الخلية ، وعلم السموم ، والحديث المتبادل الخلوية. وينبغي أن يكون هذا الجهاز للتعميم على نطاق واسع منذ الركيزة الثقافة هو المعيار البلاستيكية زراعة الأنسجة ، وهذا النظام هو متوافق مع وسائل الثقافة والمقايسات الموحدة. وبالتالي ، فإننا نعت.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المؤلفان بالشكر سلمان Khetani ، ألن جاريد ، Flaim كريس وDerfus أوستن لإجراء مناقشات مفيدة خلال عملية تصميم هذا الجهاز. وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الوطنية كلية المبكر برنامج التطوير المهني والمعاهد الوطنية للصحة المعهد / الوطني للسكري وأمراض الجهاز الهضمي والكلى ، ومؤسسة ديفيد ولوسيل باكارد. كان مدعوما من قبل L. EEH روث الجائزة الوطنية كيرشتاين دائرة البحوث.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
تتوفر أجزاءركائز مشط السيليكونN / Aلمشاريع البحث التعاوني. يرجى الاتصال ب Elliot Hui (eehui @ alum . mit . edu) أو Sangeeta Bhatia (sbhatia @ mit . edu).

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Hui, E. E., Bhatia, S. N. Micromechanical control of cell-cell interactions. Proceedings of the National Academy of Sciences. 104, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=17389399&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Silicon MicrochipsCell cell InteractionMicromechanical Reconfigurable CultureHepatocyte Fibroblast Co cultureDynamic Cell ManipulationContact Gap ConfigurationToluene Piranha CleaningPolystyrene Coating Oxygen PlasmaLive Microscopy Cell SeedingConfluent Monolayer Formation

Related Articles