هنا نطرح على بروتوكول لتنفيذ لوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في C. ايليجانس مع البكتيريا قتل.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
اللوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في انواع معينة ايليجانس
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ومن المعروف الحد من تناول الطعام من دون سوء التغذية أو المجاعة لزيادة العمر وتأخير ظهور الأمراض المرتبطة بالعمر المختلفة في مجموعة واسعة من الأنواع ، بما فيها الثدييات. كما أنه يسبب انخفاض في وزن الجسم والخصوبة ، وكذلك انخفاض مستويات السكر في البلازما ، والانسولين ، وIGF - 1 في هذه الحيوانات. وكثيرا ما يشار إلى هذا العلاج وتقييد الغذائية (DR) أو الحد من السعرات الحرارية (CR). برزت ايليجانس انواع معينة الخيطية باعتبارها كائن نموذجا هاما لدراسة بيولوجيا الشيخوخة. وقد استخدمت التلاعب الناحيتين البيئية والوراثية للدكتور النموذجية وأظهرت لتمديد عمر في C. ايليجانس. ومع ذلك ، فإن العديد من الدراسات التي أعلن عنها في DR C. تم القيام به عن طريق الترويج ايليجانس الحيوانات السائل في وسائل الإعلام ، في حين تم القيام به معظم الدراسات الوراثية في مجال الشيخوخة على أجار الصلبة القياسية في لوحات بتري. هنا نقدم بروتوكول DR باستخدام معيار الصلبة NGM آغار المستندة وحة مع البكتيريا قتل.
البروتوكول
1. إنشاء منحنى المعايرة لتقدير تركيزات البكتيريا
هذا المقطع يصف طريقة لتقدير تركيز البكتيريا عن أي سلالة بكتيريا معينة (مثلا OP50 ، HT115) التي سيتم استخدامها كمصدر للغذاء للتجارب تقييد الغذائية في C. ايليجانس. وينبغي وضع منحنيات المعايرة منفصلة لكل سلالة البكتيريا المستخدمة.
- تلقيح مستعمرة واحدة من E. اختار القولونية OP50 البكتيريا من مسحة جديدة من البكتيريا على أجار LB في 3 مل مرق LB السائل.
- مك....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ومن المعروف تقييد الغذائية (DR) لزيادة العمر وتأخير ظهور الأمراض المرتبطة بالعمر المختلفة في مجموعة واسعة من الأنواع ، بما فيها الثدييات 5-7. وقد استخدمت التلاعب الناحيتين البيئية والوراثية للدكتور النموذج في C. ايليجانس ، بما فيها الديدان زراعة في وسط شبه السائلة 8،9 المعرفة ، التخفيف من مصدر الغذاء البكتيرية في السائل المتوسط 10-12 ، واستخدام السلوك المسوخ التي تتغذى بمعدل أبطأ 13. ومع ذلك ، قد يقلد الوراثية الدكتور انتاج ال.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
وأيد هذا العمل من قبل على جائزة التجريبية من مركز الصدمات ناثان (P30 AG13283) ومنحة R01 (R01 AG028516) من المعهد الوطني للشيخوخة (NIA) إلى A. - LH
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم كاشف | شركة | فهرس العدد | تعليقات |
| كربنيسيلين | Duchefa Biochemie | C0109.25 | الذائبة في الماء. |
| الكاناميسين | روش | 10106801001 | الذائبة في الماء. |
| Bacto - ببتون | بيكتون ، ديكنسون ، وشركة | DF0118072 | |
| Bacto - تريبتون | بيكتون ، ديكنسون ، وشركة | DF0123075 | |
| Bacto ، خلاصة الخميرة | بيكتون ، ديكنسون ، وشركة | DF0127071 | |
| آغار | بيكتون ، ديكنسون ، وشركة | DF00145170 | |
| ثقافة العقيمة أنبوب | الولايات المتحدة الأمريكية والعلم | 1485-0810 | |
| معمل | أمرشام العلوم البيولوجية | الجينات كوانت الموالية | أمرشام هي الآن جزء من شركة جنرال الكتريك للرعاية الصحية. |
| تشريح مجهر | زايس | Stemi 2000 | |
| الطرد المركزي | بيكمان كولتر | Accuspin FR |
المراجع
- Hsu, A. L., Murphy, C. T., Kenyon, C. Regulation of aging and age-related disease by DAF-16 and heat-shock factor. Science. 300, 1142-1145 (2003).
- Kenyon, C., Chang, J., Gensch, E., Rudner, A., Tabtiang, R. A C. elegans mutant that lives twice as long as wild type. Nature. 3....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
