وسط انسداد الشريان الدماغي داخل اللمعة (MCAO) النموذج هو النموذج الأكثر شيوعا المستخدمة بين النماذج التجريبية السكتة الدماغية. هنا سوف نظهر نموذج كامل بالتفصيل مع دليل flowmetry دوبلر ليزر ، والنتائج ممثلها.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
وسط انسداد الشريان الدماغي داخل اللمعة (MCAO) النموذج هو النموذج الأكثر شيوعا المستخدمة بين النماذج التجريبية السكتة الدماغية. هنا سوف نظهر نموذج كامل بالتفصيل مع دليل flowmetry دوبلر ليزر ، والنتائج ممثلها.
السكتة الدماغية هي ثالث سبب رئيسي للوفاة والسبب الرئيسي للعجز في العالم ، بتكلفة تقدر ب 70 مليار دولار قرب في الولايات المتحدة في عام 2009 ، 1،2. وقد وضعت وسط انسداد الشريان الدماغي داخل اللمعة (MCAO) نموذج من قبل كويزومي 4 في عام 1986 لمحاكاة هذه الحالة المرضية تأثيرا الإنسان في الفئران. وقدم في وقت لاحق لتعديل الطريقة التي MCAO ونجا 3. وقد تم كل من التقنيات المستخدمة على نطاق واسع لتحديد الآليات الجزيئية لإصابات الدماغ الناجمة عن السكتة الدماغية والطرائق العلاجية المحتملة 5. وقد تم تمديد هذا الأسلوب موسع نسبيا في الفئران لاستخدامها في الفئران للاستفادة من والسلالات المعدلة وراثيا 6،7 خروج المغلوب. إلى نقص التروية الدماغية نموذج الاتصال ، متقدمة an خياطة داخل اللمعة عن طريق الشريان السباتي الداخلي لتسد قاعدة MCA. التراجع في الدرز بعد فترة محددة من الوقت يحاكي ضخه عفوية ، ولكن يمكن أيضا أن تكون خياطة الاحتفاظ بشكل دائم. وسوف يكون هذا الفيديو يدل على النهجين الرئيسية لأداء داخل اللمعة MCAO الداخلي في الفئران بطريقة متدرجة ، فضلا عن تقديم رؤى للعيوب والمطبات المحتملة. وبعد ذلك أنسجة الدماغ الإقفاري تكون ملطخة بواسطة 2،3،5 - triphenyltetrazolium كلوريد (TTC) لتقييم مدى احتشاء دماغي 8.
وكان هذا البروتوكول التي وافقت عليها رعاية الحيوان واستخدام اللجنة المؤسسية (IACUC) في جامعة فلوريدا ومتوافق مع "مبدأ رعاية الحيوان المعملية" (NIH المنشور رقم 86-23 ، المعدل عام 1985).
1. مواد
2. خطوات ما قبل العمليات الجراحية
3. MCA إطباق الجراحة :
كويزومي 4 الأسلوب
لونغا لأسلوب 3
بقية الإجراء هو متقاربة الى حد كبير :
4. بعد اوب التقييم العصبية
بعد يستعيد الحيوان وعيه الكلي ، يمكن تقييم العجز العصبي بواسطة مقياس بسيط (مقياس من خمس نقاط) على النحو التالي : 3
5. تلوين والقياس الكمي لحجم احتشاء الدماغ
6. ممثل النتائج
بعد انسداد وضخه عبر عن MCA CCA اليسار إلى نقص التروية الدماغية إقامة عابرة ، يتم التضحية الحيوانات والملون أدمغتهم مقطوع coronally مع TTC لتقييم حجم احتشاء (الشكل 1).

الشكل 1. TTC الملطخة المسلسل أقسام الدماغ الاكليلية (2 ملم) من الفئران تعرض لانسداد MCA.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
نموذج MCAO هو نموذج يثبت أن يعيد نقص التروية الدماغية في أنواع الفئران. كان أول من استخدم هذا النموذج في الجرذان والفئران بعد ذلك إلى تكييف. تجنب قطع القحف للقضاء على نفوذ التلاعب جراحية في الدماغ بالدم نفاذية الجدار والضغط داخل القحف هو الاستفادة من هذه التقنية. ومع ذلك ، يمكن أن العديد من المتغيرات ، مثل سلالة ذات الصلة الاختلافات 10 ، حجم غيض خياطة 11 ، انسداد مدة 6 ، 12 درجة حرارة الجسم ، والتخدير 13 ، وغيرها من العوامل تؤ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات | |
|---|---|---|---|---|
| اسم كاشف | نوع | شركة | فهرس العدد | تعليقات (اختياري) |
| ذكر C57BL / 6 الفئران | حيوان | هارلان مختبرات ، انديانابوليس ، IN ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 20-26 غرام | |
| تشريح المجهر | مجهر | مجهر لايكا ستيريو MZ6 | 6.3:1 التكبير | |
| الألياف البصرية منار | منار | TechniQuip كورب ، ليفرمور ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | FO1 - 150 | |
| Isoflurane | خدر | الصيدلانيات باكستر ، ديرفيلد ، IL | 1001936060 | |
| SuperCut إيريس مقص ، على التوالي | أداة جراحية | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 14218 | |
| Vannas المقص الصغير ، على التوالي | أداة جراحية | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 14003 | |
| ملقط دومون غيض غرامة | أداة جراحية | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 503290 | |
| سفينة كليب | أداة جراحية | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 14120 | |
| عالية التردد المجفف 900 | أداة جراحية | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 500397 | |
| 7-0 حيدة النايلون الجراحية خاط | خاط | Ethicon ، شركة ، سوميرفيل ، ونيو جيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | 1647G | خياطة للإطباق |
| 7-0 خياطة الحرير الجراحية | خاط | Ethicon ، شركة ، سوميرفيل ، ونيو جيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | 7733G | خياطة لربط |
| سيليكون RTV لاصقة | سيليكون المطاط | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 1571 | |
| Vetbond | نسيج لاصق | 3M الشركة ، وسانت بول ، مينيسوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 70200746587 | |
| Puralube مرهم البيطرية | مرهم العين | Pharmaderm ، ميلفيل ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية. | ||
| البوبرينورفين hydrochlorode | المسكنات | هوسبيرا ، وشركة ليك فورست ، IL ، الولايات المتحدة الأمريكية. | NDC 0409-2012-32 | |
| وحدة حرارية الكي | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 501292 | ||
| PeriFlux نظام 5000 | TCD flowmetry | Perimed وستوكهولم وSweeden | ||
| BAT - 12 | مقياس الحرارة المستقيمي | العالم الآلات الدقيقة ، وشركة ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية. | BAT - 12R | |
| T / مضخة ، TP600 | بطانية حرارية | Gaymar ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية. | ||
| 2،3،5 - triphenyltetrazolium كلوريد | الكاشف | سيغما الدريخ شركة ، وسانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية. | T8877 | |
| الفئران الدماغ مصفوفة تقطيع | الدماغ تقطيع | Zivic ميلر معمل ، شركة ، أليسون بارك ، والسلطة الفلسطينية ، الولايات المتحدة الأمريكية | BSMAS001 - 1 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.