مقالة منهجية

توليد نموذج فأر الورم الأرومي الدبقي

أبريل 28, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Bolcaen, J., et. al. ، التشعيع الموجه بالتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني والتصوير بالرنين المغناطيسي لنموذج فأر الورم الأرومي الدبقي باستخدام مشعاع دقيق. J. Vis. Exp. (2017)

يوضح هذا الفيديو إجراء إنشاء نموذج فأر الورم الأرومي الدبقي عن طريق حقن خلايا الورم الأرومي الدبقي المسببة لورم الدماغ في قشرة الفص الجبهي.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالنماذج الحيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية في JoVE.

1. نموذج خلية الفئران F98 جيجابايت

  1. زراعة خلايا F98 GB ، التي تم الحصول عليها من ATCC ، في طبقات أحادية باستخدام Eagle Medium المعدل من Dulbecco ، ومصل العجل 10٪ ، و 1٪ بنسلين ، و 1٪ ستربتومايسين ، و 1٪ L-glutamine ، و 0.1٪ أمفوتريسين ب ، وضعها في حاضنة CO2 (5٪ CO2 و 37 درجة مئوية).
  2. تلقيح خلايا الورم الدبقي في دماغ إناث فئران فيشر F344 (وزن الجسم 170 جم).
    1. استخدم أدوات معقمة وارتد قفازات معقمة في جميع الأوقات.
    2. تخدير الفئران عن طريق حقن خليط من 74 ملغم/كغ من الكيتامين و11 ملغم/كغ زيلازين داخل الصفاق (IP) مع حقنة الأنسولين (1 مل، 29 جم). تأكيد التخدير من خلال عدم الاستجابة لمنعكس الانسحاب للطرف. شل حركة الفئران في جهاز تجسيمي باستخدام نقاط تثبيت للأنف والأذنين. ضع جل العين كاربومر لمنع جفاف العينين أثناء التخدير.
    3. احلق الجرذ من مستوى العين إلى الجزء الخلفي من الجمجمة وقم بتطهير الجلد باستخدام بوفيدون اليود.
    4. كشف الجمجمة من خلال شق فروة الرأس في خط الوسط بطول 2 سم ، وقم بعمل ثقب 1 مم (مثقاب ماسي) 2 مم خلفي و 2.5 مم جانبيا للبريجما في نصف الكرة الأمامي الأيمن.
    5. أدخل إبرة أنسولين موجهة تجسيميا (29 جم) وحقن معلق خلية 5 ميكرولتر (20,000 خلية F98 جيجابايت) بعمق 3 مم باستخدام وحدة تحكم في مضخة الحقنة الدقيقة (الإعدادات: الحقن (I50) ، معدل 1 نانولتر / ثانية (001 SDN)).
    6. اسحب المحقنة ببطء وأغلق الشق بشمع العظام. خياطة الجلد وتطهيره ببوفيدون اليود.
    7. استقرار درجة حرارة جسم بعد الجراحة باستخدام مصباح أحمر. راقب استيقاظ الجرذ حتى يستعيد وعيه الكافي للحفاظ على الاستلقاء القصي. لا تعيد إلى صحبة الأخرى حتى يتعافى تماما. احتفظ بجميع في ظروف خاضعة للرقابة البيئية (12 ساعة من دورات الضوء / الظلام العادية ، 20-24 درجة مئوية ، و 40-70٪ رطوبة نسبية) مع الطعام والماء ad libitum . تأكد من متابعة عن كثب من خلال مراقبة وزن الجسم وطعامها وتناولها للماء ونشاطها وسلوكها الطبيعي. استخدم جرعة قاتلة من البنتوباربيتال الصوديوم للقتل الرحيم للحيوانات (160 مجم / كجم) إذا لوحظ انخفاض بنسبة 20٪ في وزن الجسم أو عندما يتدهور السلوك الطبيعي بشدة ( على سبيل المثال ، قلة الاستمالة).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

< فئة الشكل = نمط "الجدول" = "العرض: 486pt;'> frame frame< td style='العرض:127pt;'>FS-2, 4-0, 3/8, 19 ملم

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
GB RAT model
F98 خط خلية الورم الأرومي الدبقيATCCCRL-2397
Fischer F344/Ico crl RatsCharles RiverN/Ahttp://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/fischer-344-rat
Micropump systemWorld Precision InstrumentsUMP3Micro 4: https://www.wpiinc.com/products/top-products/make-selection-ump3-ultramicropump/#tabs-1
StereotacticKopf902Model 902 Dual Small Animal Stereotaxic
Diamond drillVellemanVTHD02https://www.velleman.eu/products/view/?id=370450
Bone waxAesculap1029754https://www.aesculapusa.com/products/wound-closure/hemostatic-bone-wax
insulin حقنة ميكروفينBeckton-Dickinson3209241 mL, 29G
InfraPhil IR lampPhilipsHP3616/01
EthilonEthicon662G/662H

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة