ذبابة الفاكهة السوداء البطن هو وراثيا وسلوكيا نظام نموذج قابل للطرق التي استخدمت لفهم الأساس الجزيئي والخلوي من العديد من العمليات البيولوجية الهامة لأكثر من قرن 1. ذبابة الفاكهة قد تم استغلالها بشكل جيد للحصول على نظرة ثاقبة الأساس الجيني للسلوك الذباب.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وقد استخدمت ذبابة الفاكهة السوداء البطن، ذبابة الفاكهة، لدراسة الآليات الجزيئية لمجموعة واسعة من الأمراض التي تصيب الإنسان مثل السرطان وأمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض العصبية المختلفة 1. وقد الأمثل نحن المقايسات سلوكية بسيطة وقوية لتحديد تنقل اليرقات، البالغ قدرة تسلق (فحص RING)، والسلوكيات التودد من ذبابة الفاكهة. هذه المقايسات سلوكية قابلة للتطبيق على نطاق واسع لدراسة دور العوامل الوراثية والبيئية على سلوك الذباب. ويمكن استخدام اليرقات القدرة الزحف موثوق بها لتحديد التغيرات في مرحلة مبكرة قدرات الزحف من يرقات ذبابة الفاكهة، وأيضا لدراسة تأثير الأدوية أو الجينات الأمراض التي تصيب البشر (في الذباب المعدلة وراثيا) في تحرك لهم. الفحص الزحف اليرقات ويصبح أكثر قابلية للتطبيق في حالة التعبير أو إلغاء الجين يسبب الفتك في مراحل العذراء أو الكبار، حيث أن هذه الذباب لا البقاء على قيد الحياة إلى سن البلوغ حيث أنها على خلاف ذلك يمكن تقييم. هذا الأساسية 1ويمكن أيضا ssay استخدامها جنبا إلى جنب مع الضوء الساطع أو الضغط لدراسة الاستجابات السلوكية إضافية في يرقات ذبابة الفاكهة. وقد المغازلة على نطاق واسع للتحقيق في الأساس الجيني للسلوك الجنسي، ويمكن أن تستخدم أيضا لدراسة نشاط والتنسيق، فضلا عن التعلم والذاكرة. ذبابة الفاكهة المغازلة ينطوي على تبادل للتنمية مداركه الحسية المختلفة بما في ذلك البصرية والسمعية، وإشارات حسي كيميائي بين الذكور والإناث التي تؤدي إلى سلسلة معقدة من التصرفات الحركية تتميز بشكل جيد وبلغت ذروتها في جماع ناجح. المقايسات الكبار التقليدية التسلق (انجذاب بالجاذبية السلبية) هي شاقة، تتطلب عمالة مكثفة، وتستغرق وقتا طويلا، مع تفاوت كبير بين التجارب المختلفة 2-4. السريع تكرارية انجذاب بالجاذبية السلبية (RING) فحص 5 مزايا كثيرة اكثر من البروتوكولات المستخدمة على نطاق واسع أكثر، وتوفير نهج الإنتاجية استنساخه، الحساسة، وارتفاع لتحديد الحركي الكبار والسلبية ب انجذاب بالجاذبيةehaviors. في مقايسة RING، ويمكن اختبار المورثات أو عدة أدوية في وقت واحد باستخدام عدد كبير من الحيوانات، مع اقتراب عالية الإنتاجية مما يجعلها أكثر قابلية للتجارب الفرز.
البروتوكول
A. الفحص اليرقات الزحف
1. اليرقات مجموعة
- انشاء زجاجة اوقية (الاونصة) 8 من الذباب (10-15 ذكور + إناث 10-15).
- اسمحوا الذباب تضع بيضها لمدة 24 ساعة، ثم زجاجة واضح من الذباب. (نقل من البالغين في زجاجة جديدة، وكرر حسب الضرورة).
- احتضان زجاجة لمدة 3-4 أيام، أو حتى 3 يرقات الطور مرئية.
- إضافة 50 - في زجاجة مع يرقات 100 مل من السكروز بن....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وينظم بإحكام ذبابة الفاكهة السلوك بعوامل وراثية وبيئية. لقد كنا، وغيرها، وسبق للفحوصات وصفها هنا لجمع البيانات لدراسة الجينات المرتبطة بالطيران السلوكيات وأمراض الاعصاب على غرار الإنسان في ذبابة الفاكهة 5-19. لفحص الزحف، واختيار دقيق من 3 يرقات العمر الثالث هو خطوة حاسمة. إذا علاج بعقار، وسوف يستغرق 10-15 دقيقة (أو أكثر تبعا لنوع وطبيعة الدواء) لتحقيق أقصى تأثير إذا كان لديه القابلية للذوبان جيد. ولذلك، فإننا إطعام بشكل روتيني الذباب الدواء .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدينا ما يكشف.
شكر وتقدير
نود أن نشكر Astha Maltare لتوليد البيانات الزحف اليرقات. نود أن نشكر الدكتور نيكولاس Lanson الابن لإعطاء تعليقاته على المخطوطة. وأيد هذا العمل من قبل المركز باكارد روبرت لALS في جامعة جونز هوبكنز (لUBP) وتصلب جانبي ضموري جمعية (UBP)، وR01MH083689 من المعاهد الوطنية للصحة العقلية (كندي).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم كاشف | شركة | فهرس العدد | |
| سكر القصب | فيشر العلمية | S5-500 | |
| الاغاروز | إينفيتروجن | 16500-500 | |
| 6 زجاجة أوقية ذبابة الفاكهة | جينيسي العلمية | 32-130 | |
| فرشاة الدهان (# 1) | تيد بيلا، شركة | 11859 | |
| يطير المكونات الغذائية | |||
| دقيق الذرة | فيشر العلمية | NC9109741 | |
| أجار | جينيسي العلمية | 66-104 | |
| دبس السكر | فيشر العلمية | NC9349176 | |
| حامض البروبيونيك | Acros | 14930-0010 | |
| Tegosept | قمة | 20-258 | |
| الإيثانول | الصيادعلمي | BP2818-4 | |
| خميرة | جينيسي العلمية | 62-107 |
المراجع
- Pandey, U. B., Nichols, C. D. Human disease models in Drosophila melanogaster and the role of the fly in therapeutic drug discovery. Pharmacol. Rev. 63 (2), 411-436 (2011).
- Feany, M. B., Bender, W. W. A Drosophila model of Parkinson's disease. Nature Mar.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
