فيفو السابقين تقييم من تعب، وانقباض في عضلات الهيكل العظمي تناوب متفرقة

ملخص

وصفنا طريقة لقياس قوة العضلات مباشرة، القوة العضلية، وتعب حركية مقلص من العضلات الهيكلية معزولة في في المختبر النظام باستخدام التحفيز المجال. معلومات عن قيمة كا ^{2 + خصائص وآليات التعامل مع تقلص في العضلات باستخدام بروتوكولات تحفيز مختلفة.}

الملخص

الموصوفة هنا هو وسيلة لقياس انقباض عضلات الهيكل العظمي معزولة. ويمكن الحصول على المعلمات مثل قوة العضلات، قوة العضلات، وحركية مقلص، تعب، والانتعاش بعد التعب لتقييم جوانب محددة من اقتران الاستثارة و التقلص (ECC) عملية مثل استثارة، والآلات ومقلص كا ^{2 +} قدرة المناولة. هذا الأسلوب يزيل أعصاب والدم، ويركز على العضلات والهيكل العظمي عزلت نفسها. ونحن نستخدم هذه الطريقة بشكل روتيني لتحديد المكونات الجينية التي تغير الخاصية مقلص من الهيكل العظمي والعضلات على الرغم من تحوير مسارات الكالسيوم ^{+ 2} الإشارة. هنا، نحن تصف والتي تم تشخيصها حديثا النمط الظاهري العضلات والهيكل العظمي، أي تناوب ميكانيكي، كمثال على المعلومات المختلفة والغنية التي يمكن الحصول عليها باستخدام مقايسة في العضلات المختبر انقباض. مزيج من هذا الاختبار مع المقايسات خلية واحدة، والنهج الوراثية وbiochemiيمكن المقايسات stry تقدم معلومات هامة في آليات ECC في الهيكل العظمي والعضلات.

المقدمة

عضلات الهيكل العظمي نعلق على عظام الهيكل العظمي وتوليد القوى مقلص تحت سيطرة الجهاز العصبي المركزي. تقارن الاستثارة و التقلص (ECC) يشير إلى عملية تحويل حافزا الكهربائية إلى ميكانيكية استجابة. كاليفورنيا ^{2 +} إشارات يعتبر عنصرا أساسيا من وظيفة العضلات والهيكل العظمي في مقلص. كا ^{2 +} فعالة من تعبئة شبكية الهيولى العضلية (SR) هو عنصر هام لECC في خلايا العضلات ^{1، 2،} والتغيرات في الخلايا الكالسيوم ^{2 +} إشارات تكمن وراء ضعف المقابل تقلص في عدد من أمراض العضلات ^3-5. التقييم السليم لانقباض العضلات والضروري مجانية إلى ك....

البروتوكول

حل التركيب:

2.5 ملم CA ^{2 +} حل Tyrode: 140 مم كلوريد الصوديوم، 5 ملي بوكل، HEPES 10 مم، 2.5 مم CaCl _{2، 2} ملم MgCl ₂ و 10 ملي الجلوكوز

0 ملي CA ^{2 +} حل Tyrode: 140 مم كلوريد الصوديوم، 5 ملي بوكل، HEPES ملي 10، 2 ملم MgCl _2، 0.1 ملي جلايكول الإثيلين tetraacetic حمض (EGTA) و 10 ملي الجلوكوز

ملاحظة: يجب أن تكون مشبعة حل الاستحمام مع O 100٪ ₂ إذا باستخدام الحل أعلاه، ول....

المناقشة

قياس قوة مقلص وتعب المهم لتقييم شامل من وظيفة العضلات والهيكل العظمي. والغرض الرئيسي من هذا الفحص هو تحديد التغيرات في قوة العضلات وخصائص مجهد في ظل ظروف مرضية معينة، مثل sarcopenia والتعب في العضلات، واختبار تأثير المخدرات / الكواشف على انقباض العضلات. منذ يرتبط ارتباطا وثيقا مع قوة العضلات الكالسيوم داخل الخلايا ^{2 +} الإصدار، خارج الخلية CA ^{2 +} دخول والحديث المتبادل بين هذين، يمكننا جمع أيضا معلومات عن حالة كا ^{2 +} الاشارات في العضلات والهيكل العظم.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
اسم كاشف	شركة	كتالوج رقم	التعليقات (اختياري)
2-APB	Tocris	1224	مانع لعدد من الكالسيوم 2 + قنوات الدخول بما في ذلك SOC وTRP الخ.
SKF96365	سيجما	SKF-96365	مانع لعدد من القنوات CA 2 + دخول SOC بما في ذلك ومستقبلات بوساطة كا 2 + دخول الخ.
BTP-2	ميليبور	203890-5MG	محددة نسبيا SOC مانع
CPA	سيجما	C1530	عكسها SERCA مانع
كافيين	سيجما	C0750	ناهض العمل بسرعة RyR
Radnoti الأنسجة الوحدة الرابعة الجهاز حمام النظام	Radnoti	159920
الجمع بين دعم الأنسجة / تحفيز الكهربائي	Radnoti	160151	الرأسي منعرج الزاك نوع بدعم الأنسجة
رباعية جسر الأمبير	ADInstruments	FE224
PowerLab/400	ADInstruments		هذا المنتج لم يعد متوفرا. اختيار نسخة أخرى من نظام الحصول على البيانات.
محولات القوة (5 ملغ - 25 ز)	ADInstruments	MLT0201/RAD
الرسم البياني v4.02	ADInstruments		LabChart 7.3 هو أحدث إصدار من برنامج الرسم البياني.
S8800 المزدوج نبض الرقمية محفز	GRASS TECHNOLOGIES		هذا المنتج لم يعد متوفرا. S88X المزدوجه الناتج ساحة نبض محفز هو أحدث مشجعا.
RF حدة محول العزل	GRASS TECHNOLOGIES	نموذج SIU5