يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

علاج الإصابات العظمية الغضروفية في مفصل الركبة الأرنب عن طريق زرع خيفي الخلايا الجذعية الوسيطة في الجلطات الليفين

17.2K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/4423

⸱

مايو 21, 2013

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopaedic Sports Medicine, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 2Department of Radiology, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 3Institute of Experimental Oncology and Therapy Research, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 4Department of Radiology, Uniklinik Köln

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

يوصف تقنية تجريبية لعلاج العيوب عظمي غضروفي في مفصل الركبة الأرنب. غرس خيفي الخلايا الجذعية الوسيطة إلى عيوب عظمي غضروفي يوفر تطور واعد في مجال هندسة الأنسجة. إعداد الليفين خلايا-جلطات في المختبر يوفر طريقة موحدة لزرع.

الملخص

لقد شكل علاج العيوب الغضروفية العظمية المفصلية تحدياً للأطباء لسنوات عديدة. وقد أدى الفهم الأفضل للتفاعلات بين الغضروف المفصلي والعظم تحت الغضروفي في السنوات الأخيرة إلى زيادة الاهتمام باستعادة الوحدة الغضروفية العظمية بأكملها. وبالمقارنة مع الآفات الغضروفية، فإن تجديد العيوب الغضروفية العظمية أكثر تعقيداً بكثير ويمثل تحدياً جراحياً وعلاجياً أكبر بكثير. فالنسيج التالف لا يشمل الطبقة الغضروفية السطحية فحسب، بل يشمل أيضاً العظم تحت الغضروفي. وبالنسبة للتلف الغضروفي العظمي العميق، كما يحدث على سبيل المثال في حالة osteochondrosis dissecans، يجب استبدال كامل سمك العيب لاستعادة سطح المفصل 1. لذا، يجب أن تأخذ الإجراءات العلاجية المؤهلة في الاعتبار هذين النسيجين المختلفين مع قدراتهما الجوهرية المختلفة على الشفاء 2. وفي العقود الأخيرة، ظهرت عدة خيارات علاجية جراحية تم ترسيخها سريرياً بالفعل 3-6.

تتكون عمليات زرع الغضروف والعظم ذاتية المنشأ أو خيفية المنشأ من الغضروف المفصلي والعظم تحت الغضروفي، وهي تتيح استبدال وحدة الغضروف والعظم بالكامل. يتم ملء العيوب بطعوم أسطوانية من الغضروف والعظم تهدف إلى توفير سطح مغطى بغضروف زجاجي متطابق 3,7,8. ومن بين عيوب هذه الطريقة محدودية كمية الطعوم المتاحة، والمراضة في موقع المتبرع (بالنسبة للزرع ذاتي المنشأ)، وعدم تطابق السطح؛ وبناءً على ذلك، يقتصر تطبيق هذه الطريقة بشكل خاص في حالات العيوب الكبيرة.

فتحت المناهج الجديدة في مجال هندسة الأنسجة آفاقاً واعدة للعلاج التجديدي للعظم والغضروف. وقد شكل زرع الخلايا الغضروفية الذاتية أول نهج بيولوجي قائم على الخلايا لعلاج آفات الغضروف كاملة السماكة، وهو نهج معتمد الآن عالمياً بنتائج سريرية جيدة حتى بعد مرور 10 إلى 20 سنة على الزرع 9,10. ومع ذلك، فإن هذه التقنية حتى الآن ليست مناسبة لعلاج جميع أنواع الآفات، مثل العيوب العميقة التي تشمل العظم تحت الغضروفي 11.

تجمع تقنية الساندوتش (sandwich-technique) بين تطعيم العظام والنهج الحالية في هندسة الأنسجة 5,6. ويبدو أن هذا الدمج قادر على التغلب على المحدوديات التي تظهر في طعوم العظم والغضروف وحدها. فبعد إجراء تطعيم عظمي ذاتي في منطقة العيب تحت الغضروفي، يتم خياطة غشاء مستزرع بخلايا غضروفية ذاتية فوقه، مما يسهل مطابقة تضاريس الطعم مع الموقع المصاب. وبالطبع، تتطلب عملية إعادة بناء العظام السابقة وقتاً جراحياً إضافياً، وفي كثير من الأحيان تتطلب جراحة إضافية. علاوة على ذلك، تفتقر البيانات حتى الآن إلى نتائج طويلة المدى 12.

تهدف هندسة الأنسجة دون الحاجة إلى تطعيم عظمي إضافي إلى استعادة البنية والخصائص المعقدة للغضروف المفصلي الأصلي من خلال القدرات الغضروفية والعظمية للخلايا المزروعة. ومع ذلك، فغالباً ما يتم تجديد نسيج الغضروف فقط بشكل متفاوت. أما التلف العظمي الغضروفي الإضافي فيتطلب علاجاً إضافياً محدداً. ومن أجل تحقيق تجديد للبنية متعددة الطبقات للعيوب العظمية الغضروفية، قد توفر منتجات هندسة الأنسجة ثلاثية الأبعاد الملقحة بخلايا ذاتية أو خيفية قدرة تجديدية جيدة 11.

إلى جانب الخلايا الغضروفية الذاتية، تبدو الخلايا الجذعية الميزنكيمية (MSC) بديلاً جذاباً لتطوير نسيج غضروفي كامل السماكة. وفي العديد من الدراسات قبل السريرية in vitro و in vivo، أظهرت الخلايا الجذعية الميزنكيمية إمكانات ممتازة لتجديد الأنسجة 13,14. وتكمن الميزة الهامة للخلايا الجذعية الميزنكيمية، خاصة في علاج العيوب العظمية الغضروفية، في قدرتها على التمايز إلى خلايا عظمية بالإضافة إلى الخلايا الغضروفية. وبناءً على ذلك، فإنها تتيح إمكانية تجديد متعدد الطبقات للعيب النسيجي.

لذلك، تم في السنوات الأخيرة تطوير وتقييم العديد من السقالات ذات القدرة على تجديد الغضروف العظمي مع نتائج أولية واعدة 1,15-18. علاوة على ذلك، أصبح غراء الفبرين كحامل للخلايا أحد التقنيات المفضلة في إصلاح الغضاريف التجريبي، وقد استُخدم بالفعل بنجاح في العديد من الدراسات الحيوانية 19-21 وحتى في التجارب البشرية الأولى 22.

سيوضح البروتوكول التالي تقنية تجريبية لعزل الخلايا الجذعية الميزنشيمية من نخاع عظم الأرنب، لغرض تكثيرها لاحقاً في المزارع الخلوية وإعداد نموذج in vitro معياري لتجلطات الفيبرين الخلوية. وفي الختام، سيتم وصف تقنية لزراعة تجلطات الفيبرين الخلوية المُعدة مسبقاً في عيوب غضروفية عظمية اصطناعية في مفصل ركبة الأرنب.

البروتوكول

A. إعداد الأرنب المانحة لعزل الخلايا الجذعية الوسيطة (غرفة الجراحة)

  1. يتم عزل الخلايا من الذكور نيوزيلندا الأبيض (NZW) الأرانب جديد في عمر 4 أشهر وحوالي 3 كجم من وزن الجسم.
  2. لحث على التخدير من البروبوفول (10 ملغ / كغ من وزن الجسم الرابع) وتضحية مع الصوديوم بنتوباربيتال (100 ملغ / كغ من وزن الجسم الرابع).
  3. حلاقة فرو من أطرافه الخلفية والظهر والبطن مع المقص الكهربائي والفراغ الفراء.
  4. تطهير المنطقة حليق تماما مع الايثانول 70٪.
  5. استخدام ملقط حادة، مقص حاد (أو مشرط) وقواطع العظام للأنسجة والأربطة.
  6. إجراء شق على طول سطح الجمجمة من الساق والساق.
  7. تعكس الجلد والنسيج تحت الجلد إما عن طريق تشريح حادة أو غير حادة.
  8. العضلات والأربطة منفصلة من الساق وعظم الفخذ. الحفاظ على التخفيضات أقرب إلى عظم قدر ممكن لجعل تشريح نظيفة. لا فصل عظم الفخذ من الساق في هذا الوقت.
  9. قطع عبتيOUGH مفصل الورك للفصل بين رأس عظم الفخذ من الحق.
  10. رفع المجمع الظنبوب-الفخذ.
  11. استخدام شفرة مشرط لكشط أي نوع من الأنسجة الناعمة المتبقية من العظام أو فرك العظام مع الأنسجة قماش معقمة. عند هذه النقطة، عظم الفخذ والساق لا تزال متصلة.
  12. إزالة الرضفة من قبل القطع، ثم تقطع الأربطة مفصل الركبة إلى عظام منفصلة في نهاية المطاف.
  13. رذاذ فصل العظام مع الايثانول 70٪، والسماح الهواء الجاف ووضع كل عظم في أنبوب الطرد المركزي 50 مل مع خلية ثقافة المتوسط ​​(DMEM + 1٪ البنسلين / الستربتوميسين (القلم / بكتيريا)) للاحتفاظ بها رطبة.
  14. الآن التبديل ظل ثقافة خلية العقيمة تدفق الصفحي هود.

B. فلاشينغ من MSC الأرنب من العظام والتوسع (هود الثقافة الخليوي)

  1. جمع العظام من الأنابيب ووضعها في 150 مم الأطباق باستخدام ملقط معقم.
  2. إزالة كلا الطرفين مع منشار معقمة وقطع خطوة جديدة لملم أطباق 150 العظام.
  3. ملء حقنة 10 مل مع ميدىأم (DMEM)، إرفاق إبرة قياس 18 و إدراج في افتتاح نخاع العظام.
  4. ثم، شطف تجويف نخاع مع المتوسطة لطرد نخاع العظام في طبق. بعد ذلك، شطف من الطرف الآخر، إذا كان ذلك ممكنا. إذا لزم الأمر، ورأى قبالة أكثر من نهايات. إذا عظم ينبغي كسر، فقط شطف داخل العظام.
  5. نضح المتوسطة تعليق خلية في حقنة وشطف نخاع العظام بشكل متكرر حتى التعليق هو التعويم الحر من خلال تجويف نخاع العظام والعظام لا تظهر المزيد من نخاع الجلطات.
  6. مرة واحدة وقد تم جمع نخاع العظم من جميع العظام، وتعطيل كتل نخاع عن طريق تمرير من خلال إبرة قياس 18: ملء المحاقن مع إبرة المرفقة وطرد في المتوسط.
  7. بعد ذلك، تعليق تصفية من خلال مرشح الخلية في أنبوب مل 50. من أجل منع فقدان الخلية، وغسل الثقافة طبق 2X مع 10 مل المتوسطة وتصنف كذلك.
  8. أجهزة الطرد المركزي في 500 x ج التعليق لمدة 5 دقائق على RT.
  9. إزالة طاف و resuspend خلية بيلوآخرون في 10 مل المتوسطة (DMEM + 1٪ القلم / بكتيريا).
  10. خلايا الدم منفصلة من خلايا الدم المحيطية وحيدات النوى (PBMC) والخلايا الجذعية الوسيطة (MSC) باستخدام محلول فصل Biocoll.
  11. ملء 5 مل من Biocoll فصل الحل في أنبوب مل 15 وإضافة بعناية 5 مل من خلية تعليق على رأس وأجهزة الطرد المركزي في 800 x ج لمدة 20 دقيقة في RT (بدون فرامل).
  12. النتائج الممكنة انظر الشكل 1: كثافة يجري من Biocoll، وخلايا الدم الحمراء الرواسب إلى أسفل بينما تبقى الخلايا الجذعية PBMC والوسيطة في واجهة.
  13. بعناية إزالة واجهة في أنبوب مل 15 و تغسل مع 5 مل PBS.
  14. أجهزة الطرد المركزي كما هو موضح في الخطوة 22، في resuspend 5 مل PBS وكرر 2-3X.
  15. ثم، أجهزة الطرد المركزي مرة أخرى في 350 x ج لمدة 10 دقيقة في RT (مع الفرامل).
  16. resuspend في 10 مل المتوسطة وعد الخلايا في عدادة الكريات.
  17. لوحة الخلايا في لكثافة البذر الأولية ما يقرب من 5 × 10 6 في 150 ملم الأطباق.
  18. بعد 2-3 أيام، وإعادةنقل الخلايا غير ملتصقة. قد يكون لديك لشطف مع PBS الأول من أجل إزالة الحطام الخلية. أضف المتوسطة كاملة الطازجة (DMEM + 10٪ مصل العجل الجنين (FCS) + 1٪ القلم / بكتيريا) بعد ذلك.
  19. تغذية الخلايا كل 3-4 أيام (الشكل 2).
  20. بعد 5-10 أيام، ومرور الخلايا لأول مرة.

C. إعداد جلطات الليفين في المختبر

  1. في يوم من زرع، والإفراج عن الخلايا الملتصقة من قوارير / أطباق من قبل 3 دقائق التعرض إلى 0.25٪ التربسين EDTA-. وقف trypsinization بإضافة المتوسطة كاملة.
  2. توزيع الخلايا في أنبوب 50 مل فالكون وغسلها مرتين مع برنامج تلفزيوني.
  3. تحديد بقاء الخلية والأرقام عن طريق التريبان الأزرق تلطيخ.
  4. إضافة 50،000 خلية / أنبوب microcentrifuge وجمع الكريات بواسطة الطرد المركزي في 500 x ج لمدة 5 دقائق على RT. إعداد mastermix واحد على الأقل أكثر تجلط حسب الحاجة.
  5. Resuspend وبيليه الخلية في 17 ميكرولتر PBS وخلط 25 ميكرولتر من الفيبرينوجين مكون من TISSUCOL-كيت مع هذا 17 ميكرولتر التعليق MSC.
  6. تأخذ لوحة العقيمة مع الثقوب قبل حفر (3x3.6 مم) وفقا لحفر ثقوب في الجسم الحي (الشكل 3).
  7. أولا، تطعيم 4 ميكرولتر حل الثرومبين (500 وحدة دولية / مل) في فتحة واحدة، تليها إضافة الفوري ل42 ميكرولتر الفيبرينوجين-الخلوي التعليق ومرة ​​أخرى 4 ميكرولتر حل الثرومبين على القمة. لا تخلط تعليق لتجنب تخثر الدم في الطرف ماصة. أولا، فإن حجم 50 ميكرولتر من pipetted الفيبرينوجين-الخلوي تعليق تبرز حافة الثقوب قبل حفر دون ذوبان بسبب التوتر السطحي. ومع ذلك، بعد تخثر كاملة (بعد 60 دقيقة) الجلطة هو التعاقد وتناسبها في حفرة قبل حفر.
  8. إزالة تجلط بعناية باستخدام ملقط كليلة ومكان في أنبوب microcentrifuge مع برنامج تلفزيوني. إعداد 2 جلطات / حيوان.
  9. خذ جلطات إلى غرفة الجراحة.

D. زرع خيفي الخلايا الجذعية الوسيطة في الجلطات الليفين

  1. لحث على التخدير لأرنب (NZW، ذكر، 3،5-4،0 كجم من وزن الجسم، 5-6 أشهر من العمر) من قبل الرابع حقن البروبوفول (10 ملغ / كغ من وزن الجسم).
  2. يحلق في الركبة وسيتم تشغيلها على مع المقص الكهربائي والفراغ الفراء. يتم تنفيذ كافة الإجراءات اسمه من قبل في غرفة تحضير لعملية جراحية لتجنب تلوث بيئة معقمة من غرفة العمليات.
  3. بعد التنبيب، والحفاظ على التخدير مع 1.5 ملغ / كغ / دقيقة البروبوفول و 0.05 مغ / كغ / دقيقة الفنتانيل عن طريق الوريد. رصد التخدير باستخدام capnography، التأكسج النبض ومعدل النبض.
  4. تطهير الركبة حليق تماما، وتغطي بقية الأرانب بضمادة معقمة.
  5. جس الرضفة وإجراء شق الجلد الإنسي إلى الرضفة.
  6. فتح مفصل الركبة قبل بضع المفصل المحيط بالرضفة الإنسي تحت ظروف معقمة. في محاولة لتجنب قطع أي الأوعية الدموية السطحية الصغيرة.
  7. تهجير الرضفة أفقيا (الشكل 4).
  8. بعد inspeكشن من مفصل الركبة عن أي آفات أو الغضروف يصاحب ذلك الشذوذ مشتركة، إنشاء اثنين من العيوب عظمي غضروفي (3 ملم عميق، على شكل الرقم ثمانية) في الأخدود البكرية مع التشغيل الهواء المعقم الحفر الطاقة (3.6 مليمتر في القطر) مع الجهاز توقف (الشكل 5).
  9. تنظيف العيوب وشطف لهم مع ملحي معقم.
  10. قبل الزرع، وملء 20 ميكرولتر من الليفين الغراء في العيوب وتوزيعها بالتساوي على الجزء السفلي من خلل.
  11. ثم زرع جلطات الصحافة المجهزة في الشكل عيب على شكل ثمانية.
  12. بعد تخثر الدم، انتقال الرضفة داخل أخدود البكرية وثني الركبة وامتداد عدة مرات.
  13. تهجير الرضفة أفقيا مرة أخرى وتحقق IF-جلطات الفيبرينوجين خلايا لا تزال في مكانها.
  14. استبدال الرضفة مرة أخرى، وإنهاء العملية مع إغلاق الجرح في طبقات مع الغرز زر واحد (VICRYL 4-0) وخياطة الجلدي المستمر (Monocryl 4-0) (على حد سواء مع خياطة للامتصاصمادة).
  15. وأخيرا، ختم الجرح مع رذاذ خلع الملابس نفاذا إلى بخار الماء.
  16. للحصول على الرعاية اللاحقة للعمليات الجراحية، يتم فحص الجرح يوميا لمدة 7 أيام. الأرانب تلقي اللاحقة للعمليات تسكين كاربروفين 4 ملغ / كغ كل 24 ساعة SC (لمدة 4 أيام) وBuprenorphin 0.03 مغ / كغ كل 12 ساعة SC (لمدة 2.5 أيام). لتحقيق الاستقرار في الركبة (مثل خلع الملابس) ليست ضرورية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يسمح تقنية جراحية وصفت العزلة الناجحة وزرع خيفي الخلايا الجذعية الوسيطة إلى عيب عظمي غضروفي الاصطناعي. نتج عن الإعداد التجريبية في الاندماج الناجح للزرع في الغضروف المحيطة بها.

وقد شغل هذا العيب عن طريق إصلاح الأنسجة مع خصائص النشاط الحيوي مماثلة والمتانة مماثلة بالمقارنة مع الغضروف المحيطة بها. وقد أعد الليفين خلايا الملابس الداخلي في المختبر على لوحة العقيمة مع الثقوب قبل حفر، التي كان لها نفس حجم الخل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

في السنوات الأخيرة، وإمكانية علاج العيوب المعقدة مفصلي عظمي غضروفي - أصبح مع نهج هندسة الأنسجة أكثر وأكثر جاذبية - مثل تلك الناجمة عن التهاب العظم و الغضروف المسلخ، تنخر العظم والصدمة. في الكيانات المرضية التي سبق ذكرها، تلف الأنسجة تمتد إلى العظم تحت الغضروف وتنطوي على اثنين من الأنسجة التي تتميز مختلف قدرات الشفاء الذاتية 1. هناك اهتمام متزايد في دور العظم تحت الغضروف للعمليات المسببة للأمراض من ضرر مفصلي عظمي غضروفي 11،23. الشروط الفنية للالغضروف المفصلي و...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

شكر وتقدير

وقد تم تمويل هذا المشروع من قبل جمعية البحوث الألمانية (منحة سعادة 4578/3-1) وجزئيا من قبل الاتحاد الأوروبي FP7-مشروع "GAMBA" NMP3-SL-2010-245993.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
DMEMBiochrom AGF 0415
FCSPAN Biotech GmbH0401
PropofolFresenius Kabi
بنسلين/ستريبتومايسينBiochrom AGA 22101,000 وحدة/10 μg/μl في 0.9% NaCl
محلول PBS Dulbecco (1X)Biochrom AGL1815
إيثانول (70%)Merck KGaA410230
محلول صبغة تريبان الزرقاء (0.4%)Sigma-AldrichT8154
محلول فصل BiocollBiochrom AGL6115محلول متساوي التوتر، الكثافة: 1,077 g/ml
تربسين-EDTA 0.05%Invitrogen GmbH25300-054
فنتانيلDeltaSelectGmBH1819340
محلول NaCl (0.9%)BBraun8333A193
محاقن (Injekt)BBraun4606108V
إبر (Sterican)BBraun4657519
ملاقط (ثلمة/حادة)Aesculap
مقصاتAesculap
مشارطFeather Safety Razor Co02.001.30.022
ماصات بحثيةEppendorf
قاطع عظامAesculap
أطباق زراعة أنسجة 100 مم/150 ممTPP AG93100/93150مساحة النمو 60.1 مم2/147.8 مم2
دوارق زراعة أنسجة 25/75 مم2TPP AG90025/9007525 مم2, 75 مم2
أنابيب طرد مركزي (50 مل)TPP AG91050معقمة بأشعة غاما
حضّانة CO2Forma Scientific Inc.
غطاء تدفق صفائحي لزراعة الخلايا Hera SafeHeraeus Instruments
منشار معقمAesculap
جهاز طرد مركزي Megafuge 2.0 RHeraeus Instruments
مقياس كرات الدم (Hemocytometer)Brand GmbH+Co KG717810Neubauer
مثقاب كهربائي يعمل بالهواءAesculap
مجموعة TISSUCOL-Kit 1.0 مل ImmunoBaxter2546648
خيوط جراحية (4-0 Monocryl, 4-0 Vicryl)Ethicon
ضمادة بخاخة (OpSite)Smith&Nephew66004978منفذة لبخار الماء

المراجع

  1. Kon, E., et al. Novel nano-composite multilayered biomaterial for osteochondral regeneration: a pilot clinical trial. The American Journal of Sports Medicine. 39, 1180-1190 (2011).
  2. Kon, E., et al. Orderly osteochondral regeneration in a sheep model using a novel nano-composite multilayered biomaterial. Journal of Orthopaedic Research: Official Publication of the Orthopaedic Research Society. 28, 116-124 (2010).
  3. Hangody, L., et al. Autologous osteochondral grafting--technique and long-term results. Injury. 39, 32-39 (2008).
  4. Marcacci, M., et al. Arthroscopic autologous osteochondral grafting for cartilage defects of the knee: prospective study results at a minimum 7-year follow-up. The American Journal of Sports Medicine. 35, 2014-2021 (2007).
  5. Ochs, B. G., et al. Remodeling of articular cartilage and subchondral bone after bone grafting and matrix-associated autologous chondrocyte implantation for osteochondritis dissecans of the knee. The American Journal of Sports Medicine. 39, 764-773 (2011).
  6. Aurich, M., et al. Autologous chondrocyte transplantation by the sandwich technique. A salvage procedure for osteochondritis dissecans of the knee. Unfallchirurg. 110, 176-179 (2007).
  7. Williams, R. J. 3rd, Ranawat, A. S., Potter, H. G., Carter, T., Warren, R. F. Fresh stored allografts for the treatment of osteochondral defects of the knee. The Journal of Bone and Joint Surgery. American Volume. 89, 718-726 (2007).
  8. Szerb, I., Hangody, L., Duska, Z., Kaposi, N. P. Mosaicplasty: long-term follow-up. Bull. Hosp. Jt. Dis. 63, 54-62 (2005).
  9. Brittberg, M., et al. Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation. N. Engl. J. Med. 331, 889-895 (1994).
  10. Peterson, L., Vasiliadis, H. S., Brittberg, M., Lindahl, A. Autologous chondrocyte implantation: a long-term follow-up. Am. J. Sports Med. 38, 1117-1124 (2010).
  11. Gomoll, A. H., et al. The subchondral bone in articular cartilage repair: current problems in the surgical management. Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18, 434-447 (2010).
  12. Steinhagen, J., et al. Treatment of osteochondritis dissecans of the femoral condyle with autologous bone grafts and matrix-supported autologous chondrocytes. Int. Orthop. 34, 819-825 (2010).
  13. Guo, X., et al. Repair of large articular cartilage defects with implants of autologous mesenchymal stem cells seeded into beta-tricalcium phosphate in a sheep model. Tissue Eng. 10, 1818-1829 (2004).
  14. Centeno, C. J., et al. Increased knee cartilage volume in degenerative joint disease using percutaneously implanted, autologous mesenchymal stem cells. Pain Physician. 11, 343-353 (2008).
  15. Niederauer, G. G., et al. Evaluation of multiphase implants for repair of focal osteochondral defects in goats. Biomaterials. 21, 2561-2574 (2000).
  16. Nagura, I., et al. Repair of osteochondral defects with a new porous synthetic polymer scaffold. J. Bone. Joint Surg. Br. 89, 258-264 (2007).
  17. Schlichting, K., et al. Influence of scaffold stiffness on subchondral bone and subsequent cartilage regeneration in an ovine model of osteochondral defect healing. The American Journal of Sports Medicine. 36, 2379-2391 (2008).
  18. Schagemann, J. C., et al. Cell-laden and cell-free biopolymer hydrogel for the treatment of osteochondral defects in a sheep model. Tissue Engineering. Part A. 15, 75-82 (2009).
  19. Vogt, S., et al. The influence of the stable expression of BMP2 in fibrin clots on the remodelling and repair of osteochondral defects. Biomaterials. 30, 2385-2392 (2009).
  20. Schillinger, U., et al. A fibrin glue composition as carrier for nucleic acid vectors. Pharm. Res. 25, 2946-2962 (2008).
  21. Ahmed, T. A., Giulivi, A., Griffith, M., Hincke, M. Fibrin glues in combination with mesenchymal stem cells to develop a tissue-engineered cartilage substitute. Tissue Engineering. Part A. 17, 323-335 (2011).
  22. Haleem, A. M., et al. The Clinical Use of Human Culture-Expanded Autologous Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Transplanted on Platelet-Rich Fibrin Glue in the Treatment of Articular Cartilage Defects: A Pilot Study and Preliminary Results. Cartilage. 1, 253-261 (2010).
  23. Pape, D., Filardo, G., Kon, E., van Dijk, C. N., Madry, H. Disease-specific clinical problems associated with the subchondral bone. Knee Surg Sports Traumatol. Arthrosc. 18, 448-462 (2010).
  24. Shirazi, R., Shirazi-Adl, A. Computational biomechanics of articular cartilage of human knee joint: effect of osteochondral defects. Journal of Biomechanics. 42, 2458-2465 (2009).
  25. Jorgensen, C., Gordeladze, J., Noel, D. Tissue Engineering through autologous mesenchymal stem cells. Curr. Opin. Biotechnol. 15, 406-410 (2004).
  26. Chen, F. H., Tuan, R. S. Mesenchymal stem cells in arthritic diseases. Arthritis Res. Ther. 10, 223(2008).
  27. Le Blanc, K., Tammik, C., Rosendahl, K., Zetterberg, E., Ringden, O. HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells. Exp. Hematol. 31, 890-896 (2003).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

علاج الإصابات العظمية الغضروفية في مفصل الركبة الأرنب عن طريق زرع خيفي الخلايا الجذعية الوسيطة في الجلطات الليفين
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.