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Matrix-assisted Autologous Chondrocyte Transplantation for Remodeling and Repair of Chondral Defects in a Rabbit Model

Articular cartilage defects are considered a major health problem because articular cartilage has a limited capacity for self-regeneration 1. Untreated ...

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Treatment of Osteochondral Defects in the Rabbit's Knee Joint by Implantation of Allogeneic Mesenchymal Stem Cells in Fibrin Clots

The treatment of osteochondral articular defects has been challenging physicians for many years. The better understanding of interactions of articular ...

Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München

Bone formation and remodeling in vivo can be assessed by polychrome labeling using calcium-binding fluorescent dyes. The number of fluorochromes, however, limits this technique due to the fact that with increasing number, fluorescent spectra inevitably overlap, which makes discrimination more difficult. In order to enhance discrimination, we performed spectral image analysis. Non-critical size defects of the femur of male Wistar rats served as a model for bone formation. Eight different fluorochromes (calcein blue, xylenol orange, calcein, alizarine complexone, doxycycline, rolitetracycline, hematoporphyrin, and BAPTA) were administered sequentially subcutaneously every third day starting at day 4 after surgery. Following, bone specimen were embedded in methylmethacrylate and analyzed by spectral image acquisition using a Sagnac type interferometer (ASI, Israel). Seven of the eight applied fluorochromes could be resolved using spectral image examination. With BAPTA, we present a new fluorochrome suitable for bone labeling. Due to the superior sensitivity of the spectral image acquisition, the thickness of the bone sections could be reduced so that 5 mum thick sections could be analyzed. Spectral decomposition and subsequent linear unmixing allows depiction of each individual fluorochrome without interference of any other, enabling a reliable and superior morphometric analysis of labeled regions.

Polychrome labeling of bone with seven different fluorochromes: enhancing fluorochrome discrimination by spectral image analysis.

La formation osseuse et remodelage in vivo peuvent &ecirc;tre &eacute;valu&eacute;es par polychrome, marquage &agrave; l&#39;aide de colorants fluorescents liant le calcium. Le nombre des fluorochromes, limite cependant, cette technique tient au fait qu&#39;avec l&#39;augmentation de nombre, spectres fluorescents se chevauchent in&eacute;vitablement, qui complique la discrimination. Afin d&#39;accro&icirc;tre la discrimination, nous avons effectu&eacute; l&#39;analyse d&#39;images spectrales. Les d&eacute;fauts de taille non critiques du f&eacute;mur de rats Wistar m&acirc;les a servi de mod&egrave;le pour la formation des os. Huit fluorochromes diff&eacute;rents (calc&eacute;ine bleu, orange de xyl&eacute;nol calc&eacute;ine, au complexone alizarine, doxycycline, rolit&eacute;tracycline, h&eacute;matoporphyrine et BAPTA) ont &eacute;t&eacute; administr&eacute;es successivement par voie sous-cutan&eacute;e tous les trois jours &agrave; partir de J4 apr&egrave;s la chirurgie. Qui suit, sp&eacute;cimen d&#39;os ont &eacute;t&eacute; incorpor&eacute; en m&eacute;thacrylate de m&eacute;thyle et analys&eacute;s par acquisition d&#39;images spectrales &agrave; l&#39;aide d&#39;un interf&eacute;rom&egrave;tre de Sagnac type (ASI, Isra&euml;l). Sept d&#39;entre les fluorochromes appliqu&eacute;es huit pourrait &ecirc;tre r&eacute;solu &agrave; l&#39;aide de l&#39;examen une image spectrale. Avec BAPTA, nous pr&eacute;sentons un nouveau fluorochrome appropri&eacute; pour l&#39;&eacute;tiquetage des os. En raison de la sensibilit&eacute; sup&eacute;rieure de l&#39;acquisition de l&#39;image spectrale, l&#39;&eacute;paisseur des sections OS pourrait &ecirc;tre r&eacute;duit pour que 5 coupes &eacute;paisses maman peuvent &ecirc;tre analys&eacute;es. D&eacute;composition spectrale et d&eacute;convolution lin&eacute;aires ult&eacute;rieures permet la repr&eacute;sentation de chaque fluorochrome individuel sans interf&eacute;rence de n&#39;importe quel autre, permettant une analyse morphom&eacute;trique fiable et de qualit&eacute; sup&eacute;rieure de r&eacute;gions marqu&eacute;es.

&Eacute;tiquetage polychrome d&#39;OS avec sept fluorochromes diff&eacute;rents : renforcer la discrimination fluorochrome par analyse d&#39;image spectrale.

La formazione ossea e rimodellamento in vivo pu&ograve; essere valutati dalla policromia etichettatura utilizzando tinture fluorescenti associazione calcio. Il numero di fluorocromi, tuttavia, limita questa tecnica dovuta al fatto che con l&#39;aumento di numero, gli spettri di fluorescenza si sovrappongono inevitabilmente, che rende pi&ugrave; difficile la discriminazione. Al fine di migliorare la discriminazione, abbiamo eseguito analisi dell&#39;immagine spettrale. Dimensione non critico i difetti del femore di ratti Wistar maschi, servita come modello per la formazione del tessuto osseo. Otto diversi fluorocromi (calceina blu, Arancio xilenolo calceina, metiltimolo di alizarine, doxiciclina, rolitetracycline, ematoporfirina e BAPTA) sono stati somministrati in sequenza per via sottocutanea ogni terzo giorno a partire da 4 giorno dopo l&#39;intervento chirurgico. Seguente, campione di osso sono stati incorporati in metilmetacrilato e analizzati da acquisizione immagine spettrale usando un interferometro di tipo Sagnac (ASI, Israele). I fluorocromi applicate otto e sette possono essere risolti utilizzando esame immagine spettrale. Con BAPTA, vi presentiamo un fluorocromo nuovo adatto per l&#39;etichettatura di osso. A causa della sensibilit&agrave; superiore dell&#39;acquisizione immagine spettrale, lo spessore delle sezioni osso potrebbe essere ridotto cos&igrave; che 5 sezioni spesse mamma potrebbero essere analizzati. Decomposizione spettrale e successive unmixing lineare permette di rappresentazione di ogni fluorocromo individuo senza interferenze di qualsiasi altra, consentendo un&#39;analisi morfometrica affidabile e superiore delle regioni con etichette.

Etichettatura policromo dell&#39;osso con sette diversi fluorocromi: migliorare la discriminazione fluorocromo di analisi dell&#39;immagine spettrale.

Since efficient transfer of foreign genes into primary articular chondrocytes (CC) is difficult, a VSV.G pseudotyped retroviral vector (Bullet) was developed for marker and growth factor gene transfer. Transduction efficiency was analysed by FACS. BMP2 production was determined by specific hBMP2-ELISA. BMP2 effect on cells regarding proteoglycan production was measured by alcian blue staining and dye quantification. Alkaline phosphatase activity was determined by enzymatic reaction with p-nitrophenyl phosphate at OD 405nm and proliferation rate was analysed by MTT-assay. ATDC5 cells (98.3+/-0.6%SD) were transduced to express the reporter gene eGFP. After 52 weeks 94.7+/-0.6%SD of cells were positive. Retroviral transduction efficiency for nlslacZ exceeded 92.3+/-6.1%SD in rabbit CC and expression remained high after 15 weeks (75.7+/-14.2%SD). ATDC5 cells and CC expressed the growth factor gene hBMP2 after retroviral transduction at different time-points. BMP2 led to an increase in proteoglycan and alkaline phosphatase production. Initially, the proliferation rate detected by MTT-assay increased in both the cell types; afterwards the proliferation rate was similar to controls. The described retroviral vector system achieved high initial transduction rates in ATDC5 cells and CC. Gene transfer was very stable over the time period analysed, rendering it a useful tool for future in vitro and in vivo studies on cartilage remodelling.

Efficient and stable gene transfer of growth factors into chondrogenic cells and primary articular chondrocytes using a VSV.G pseudotyped retroviral vector.

&Eacute;tant donn&eacute; que le transfert efficace de g&egrave;nes &eacute;trangers dans les chondrocytes articulaires primaires (CC) est difficile, un VSV.Vecteur r&eacute;troviral Pseudo de G (Bullet) a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute; pour le marqueur et le transfert de g&egrave;ne de facteur de croissance. Efficacit&eacute; de la transduction a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e par les FACS. BMP2 production d&eacute;pendait de hBMP2-ELISA sp&eacute;cifique. BMP2 effet sur les cellules au sujet de la production de prot&eacute;oglycanes a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e par quantification de coloration et de colorant bleu alcian. Activit&eacute; de la phosphatase alcaline a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e par une r&eacute;action enzymatique avec p-nitroph&eacute;nyl phosphate &agrave; 405nm OD et la vitesse de prolif&eacute;ration a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e par MTT-essai. Les cellules ATDC5 (98,3 +/-0.6%SD) &eacute;taient transduites pour exprimer l&#39;eGFP de g&egrave;ne de journaliste. Apr&egrave;s 52 semaines, 94.7+/-0.6%SD des cellules &eacute;taient positifs. Efficacit&eacute; de la transduction r&eacute;troviral pour nlslacZ ont d&eacute;pass&eacute; 92.3+/-6.1%SD en lapin CC et expression sont demeur&eacute;s &eacute;lev&eacute;e apr&egrave;s 15 semaines (75,7 +/-14.2%SD). ATDC5 cellules et CC exprim&eacute; le hBMP2 de g&egrave;ne du facteur de croissance apr&egrave;s transduction retroviral &agrave; diff&eacute;rents moments. BMP2 a conduit &agrave; une augmentation dans la production de la phosphatase alcaline et de prot&eacute;oglycanes. Initialement, le taux de prolif&eacute;ration d&eacute;tect&eacute; par analyse de MTT a augment&eacute; dans les deux types de cellules ; Ensuite, le taux de prolif&eacute;ration &eacute;tait similaire aux contr&ocirc;les. Le syst&egrave;me d&eacute;crit vecteur r&eacute;troviral atteint des taux de transduction initiale &eacute;lev&eacute;e dans les cellules ATDC5 et transfert de g&egrave;nes de CC a &eacute;t&eacute; tr&egrave;s stable sur la p&eacute;riode analys&eacute;e, rendant un outil utile pour de futures &eacute;tudes in vitro et in vivo sur le remodelage du cartilage.

Transfert de g&egrave;ne efficace et stable de facteurs de croissance dans les cellules chondrog&eacute;niques et des chondrocytes articulaires primaires utilisant un VSV.Pseudo vecteur r&eacute;troviral G.

Poich&eacute; il trasferimento efficiente di geni stranieri in condrociti articolari primari (CC) &egrave; difficile, un VSV.Vettore retrovirale pseudotyped (Bullet) di G &egrave; stato sviluppato per il marcatore e trasferimento di geni del fattore di crescita. L&#39;efficienza di trasduzione &egrave; stato analizzato da FACS. Produzione BMP2 &egrave; stato determinato da specifica hBMP2-ELISA. BMP2 effetto sulle cellule per quanto riguarda la produzione di proteoglicano &egrave; stata misurata mediante quantificazione di colorazione e la tintura di alcian blu. Attivit&agrave; della fosfatasi alcalina &egrave; stato determinato dalla reazione enzimatica con p-nitrofenil fosfato presso OD 405nm e tasso di proliferazione &egrave; stato analizzato da analisi di MTT. Per esprimere il reporter gene eGFP erano transduced ATDC5 cellule (98.3 + 0.6%SD). Dopo 52 settimane 94.7+/-0.6%SD delle cellule sono stati positivi. L&#39;efficienza di trasduzione retrovirale per nlslacZ nel coniglio CC ha superato 92.3+/-6.1%SD ed espressione rimase alta dopo 15 settimane (75,7 + 14.2%SD). Cellule ATDC5 e CC espresso il hBMP2 di gene del fattore di crescita dopo la trasduzione retrovirale in tempo-punti diversi. BMP2 port&ograve; ad un incremento nella produzione di fosfatasi alcalina e proteoglicano. Inizialmente, il tasso di proliferazione rilevato da analisi di MTT &egrave; aumentato in entrambi i tipi di cellule; in seguito il tasso di proliferazione era simile ai controlli. Il sistema descritto vettore retrovirale raggiunto tassi di trasduzione iniziale alta nelle cellule ATDC5 e trasferimento genico CC. era molto stabile nel periodo di tempo analizzato, rendendolo uno strumento utile per futuri studi in vitro e in vivo su rimodellamento della cartilagine.

Trasferimento genico stabile ed efficiente di fattori di crescita in cellule chondrogenic e primari condrociti articolari utilizzando un VSV.Pseudotyped vettore retrovirale G.

Consegna del gene da biomateriali &egrave; diventato uno strumento importante nell&#39;ingegneria tissutale. Lo scopo di questo studio era di generare una colla di fibrina stravedeva vettore gene come un versatile impianto iniettabile per essere utilizzato nella rigenerazione del tessuto sostenuta la terapia genica.

Una composizione di colla di fibrina come elemento portante per i vettori dell&#39;acido nucleico.

Gene delivery from biomaterials has become an important tool in tissue engineering. The purpose of this study was to generate a gene vector-doted fibrin glue as a versatile injectable implant to be used in gene therapy supported tissue regeneration.

A fibrin glue composition as carrier for nucleic acid vectors.

Livraison de g&egrave;ne de biomat&eacute;riaux est devenu un outil important en g&eacute;nie tissulaire. Cette &eacute;tude visait &agrave; g&eacute;n&eacute;rer une colle de fibrine dot&eacute; de vecteur de g&egrave;ne comme un implant injectable polyvalent &agrave; utiliser dans le g&egrave;ne th&eacute;rapeutique soutenu la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration des tissus.

Une composition de colle de fibrine comme support pour l&#39;acide nucl&eacute;ique vecteur.

Growth factors like BMP2 have been tested for osteochondral repair, but transfer methods used until now were insufficient. Therefore, the aim of this study was to analyse if stable BMP2 expression after retroviral vector (Bullet) transduction is able to regenerate osteochondral defects in rabbits. Fibrin clots colonized by control or BMP2-transduced chondrocytes were generated for in vitro experiments and implantation into standardized corresponding osteochondral defects (n=32) in the rabbit trochlea. After 4 and 12 weeks repair tissue was analysed by histology (HE, alcian-blue, toluidine-blue), immunohistochemistry (Col1, Col2, aggrecan, aggrecan-link protein), ELISA (BMP2), and quantitative RT-PCR (BMP2, Col1, Col2, Col10, Cbfa1, Sox9). In vitro clots were also analysed by BMP2-ELISA, histology (alcian-blue), quantitative RT-PCR and in addition by electron microscopy. BMP2 increased Col2 expression, proteoglycan production and cell size in vitro. BMP2 transduction by Bullet was efficient and gene expression was stable in vivo over at least 12 weeks. Proteoglycan content and ICRS-score of repair tissue were improved by BMP2 after 4 and 12 weeks and Col2 expression after 4 weeks compared to controls. However, in spite of stable BMP2 expression, a complete repair of osteochondral defects could not be demonstrated. Therefore, BMP2 is not suitable to regenerate osteochondral lesions completely.

The influence of the stable expression of BMP2 in fibrin clots on the remodelling and repair of osteochondral defects.

Facteurs de croissance comme BMP2 ont &eacute;t&eacute; test&eacute;s pour la r&eacute;paration de l&#39;ost&eacute;o, mais les m&eacute;thodes de transfert utilis&eacute;s jusqu&#39;&agrave; pr&eacute;sent &eacute;taient insuffisantes. Par cons&eacute;quent, le but de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;analyser si l&#39;expression BMP2 stable apr&egrave;s que transduction vecteur r&eacute;troviral (Bullet) est capable de r&eacute;g&eacute;n&eacute;rer cartilagineuses d&eacute;fauts chez le lapin. Les caillots de fibrine colonis&eacute;s par contr&ocirc;le ou chondrocytes BMP2-transduites g&eacute;n&eacute;r&eacute;s pour les exp&eacute;riences in vitro et de la greffe sur normalis&eacute; correspondant cartilagineuses d&eacute;fauts (n = 32) dans la trochl&eacute;e de lapin. Apr&egrave;s 4 et 12 semaines, r&eacute;paration tissulaire a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e par l&#39;histologie (HE, bleu alcian,-bleu de toluidine), immunohistochimie (Col1, Col2, AGGRECANE, prot&eacute;ine de liaison AGGRECANE), ELISA (BMP2) et RT-PCR quantitative (BMP2, Col1, Col2, Col10, Cbfa1, Sox9). Caillots in vitro ont &eacute;galement &eacute;t&eacute; analys&eacute;s par ELISA BMP2, histologie (bleu alcian), RT-PCR quantitative et en outre en microscopie &eacute;lectronique. BMP2 augment&eacute; Col2 expression, production de prot&eacute;oglycanes et taille des cellules in vitro. BMP2 transduction par balle a &eacute;t&eacute; efficace, et l&#39;expression des g&egrave;nes a &eacute;t&eacute; stable en vivo pendant au moins 12 semaines. Teneur en prot&eacute;oglycanes et score ICRS du tissu de r&eacute;paration ont &eacute;t&eacute; am&eacute;lior&eacute;es par la BMP2 apr&egrave;s 4 &agrave; 12 semaines et Col2 expression apr&egrave;s 4 semaines, par rapport aux t&eacute;moins. Cependant, en d&eacute;pit de l&#39;expression de BMP2 stable, une r&eacute;paration compl&egrave;te des anomalies cartilagineuses impossible de d&eacute;montrer. BMP2 n&#39;est donc pas adapt&eacute; pour r&eacute;g&eacute;n&eacute;rer compl&egrave;tement les l&eacute;sions cartilagineuses.

L&#39;influence de l&#39;expression stable du BMP2 en caillots de fibrine sur la r&eacute;novation et la r&eacute;paration des anomalies cartilagineuses.

Fattori di crescita come BMP2 sono stati testati per la riparazione di innesti osteocondrali, ma metodi di trasferimento utilizzati fino ad ora non erano sufficienti. Pertanto, lo scopo di questo studio era di analizzare se stabile BMP2 espressione dopo trasduzione del vettore retrovirale (proiettile) &egrave; in grado di rigenerare osteocondrali difetti nei conigli. Colonizzarono da controllo dei coaguli di fibrina o condrociti transduced BMP2 sono stati generati per gli esperimenti in vitro e l&#39;impianto in standardizzati corrispondenti difetti osteocondrali (n = 32) nella troclea coniglio. Dopo 4 e 12 settimane tessuto di riparazione &egrave; stato analizzato da istologia (HE, alcian blu-toluidina-blu), immunoistochimica (Col1, Col2, aggrecan, proteina aggrecan-link), ELISA (BMP2) e RT-PCR quantitativa (BMP2, Col1, Col2, Col10, Cbfa1, Sox9). Coaguli in vitro sono stati analizzati da ELISA BMP2, istologia (alcian blu), RT-PCR quantitativa e in aggiunta alla microscopia elettronica. BMP2 aumentata espressione Col2, produzione proteoglycan e dimensione delle cellule in vitro. Trasduzione BMP2 da proiettile era efficiente ed espressione genica era stabile in vivo almeno 12 settimane. Contenuto proteoglycan e ICRS-punteggio del tessuto di riparazione sono stati migliorati da BMP2 dopo 4 e 12 settimane e Col2 espressione dopo 4 settimane rispetto ai controlli. Tuttavia, nonostante stabile BMP2 espressione, una completa riparazione dei difetti osteocondrali potrebbe non essere dimostrata. Pertanto, BMP2 non &egrave; adatto per rigenerare completamente le lesioni osteocondrali.

L&#39;influenza dell&#39;espressione stabile di BMP2 in coaguli di fibrina sul rimodellamento e la riparazione di difetti osteocondrali.

The acellularization of tendons using detergents (sodium dodecyl sulfate, Triton-X, tri-nitro-butyl-phosphate) is a new source of scaffolds for tissue engineering in anterior cruciate ligament (ACL) repair. In vitro testing demonstrated that acellular tendon scaffolds are biocompatible and show good biomechanical properties, but in vivo confirmation of these results is not yet available. Therefore, the aim of this study was to see in vivo if an acellular allogenic construct colonized with autologous fibroblasts improves the quality of ACL reconstruction. ACL replacement was performed in 31 New Zealand White rabbits using a standardized model. Fifteen animals received autologous semitendinosus tendon, whereas 16 animals were treated with a tissue-engineered construct. This construct was made by acellularization of allogenic semitendinosus tendons using sodium dodecyl sulfate and subsequent in vitro colonization with autologous fibroblasts. Eight weeks postoperatively, macroscopic, biomechanical (ultimate load to failure, elongation, stiffness; n = 8/9), and histological (n = 5) examinations were performed. Biomechanical testing showed decreasing strength of the constructs at 8 weeks after implantation compared with the direct postsurgical strength. However, tissue-engineered constructs (F = 19.7 +/- 20.3 N) were significantly weaker than autologous tendons (F = 61.2 +/- 31.2 N). Histologically, the autologous tendons showed signs of partial necrosis and tissue remodeling. The tissue-engineered constructs exhibited an inflammatory reaction and showed both repopulated and acellular regions. In conclusion, in vivo results were much more unfavorable than in vitro results had suggested. Further studies have to be performed to test if modifications of the acellularization process yield better results in vivo.

Tissue engineering of the anterior cruciate ligament-sodium dodecyl sulfate-acellularized and revitalized tendons are inferior to native tendons.

L&#39;acellularization des tendons &agrave; l&#39;aide de d&eacute;tergents (sodium dod&eacute;cyl sulfate, Triton-X, tri-nitro-butyle-phosphate) est une nouvelle source d&#39;&eacute;chafaudages pour l&#39;ing&eacute;nierie tissulaire en r&eacute;paration du ligament crois&eacute; ant&eacute;rieur (LCA). Tests in vitro ont d&eacute;montr&eacute; que tendon acellulaire &eacute;chafaudages sont biocompatibles et montrent les bonnes propri&eacute;t&eacute;s biom&eacute;caniques, mais in vivo confirmation de ces r&eacute;sultats n&#39;est pas encore disponible. Par cons&eacute;quent, le but de cette &eacute;tude &eacute;tait de voir in vivo si une construction allog&eacute;nique acellulaire colonis&eacute;s par les fibroblastes autologues am&eacute;liore la qualit&eacute; de la reconstruction du LCA. Remplacement de l&#39;ACL a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e dans 31 lapins n&eacute;o-z&eacute;landais blancs &agrave; l&#39;aide d&#39;un mod&egrave;le normalis&eacute;. Quinze animaux ont re&ccedil;u autologues semi-tendineux tendon, alors que 16 animaux ont &eacute;t&eacute; trait&eacute;s avec une construction tissulaire. Cette construction a &eacute;t&eacute; faite par acellularization des tendons semitendinosus allog&egrave;nes &agrave; l&#39;aide de dod&eacute;cyl sulfate de sodium et de colonisation in vitro subs&eacute;quente avec fibroblastes autologues. Huit semaines apr&egrave;s l&#39;op&eacute;ration, macroscopique, biom&eacute;canique (charge de rupture &agrave; l&#39;&eacute;chec, &eacute;longation, raideur; n = 8/9) et histologique (n = 5) les examens ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;s. Biom&eacute;canique essai a montr&eacute; baisse force des constructions &agrave; 8 semaines apr&egrave;s l&#39;implantation par rapport &agrave; la puissance postchirurgicale direct. Cependant, tissulaire construit (F = 19,7 +/-20,3 N) &eacute;taient significativement plus faibles que les tendons autologues (F = 61,2 +/-31,2 N). Sur le plan histologique, les tendons autologues montraient des signes de n&eacute;crose partielle et le remodelage des tissus. Les constructions tissulaire pr&eacute;sentaient une r&eacute;action inflammatoire et a montr&eacute; des r&eacute;gions des repeuplements et acellulaires. En conclusion, les r&eacute;sultats in vivo ont &eacute;t&eacute; beaucoup plus d&eacute;favorables que les r&eacute;sultats obtenus in vitro avaient sugg&eacute;r&eacute;. D&#39;autres &eacute;tudes doivent &ecirc;tre effectu&eacute;es afin de v&eacute;rifier si les modifications du processus acellularization donnent mieux des r&eacute;sultats in vivo.

G&eacute;nie tissulaire de l&#39;anterior cruciate ligament-sodium dod&eacute;cyl sulfate-acellularized et revitalis&eacute;es tendons sont inf&eacute;rieurs aux tendons natives.

La acellularization dei tendini utilizzando detergenti (sodio dodecil solfato, Triton-X, tri-nitro-butil-fosfato) &egrave; una nuova fonte di biomateriali per ingegneria tissutale nella riparazione del legamento crociato anteriore (LCA). Test in vitro hanno dimostrato che tendine acellulare ponteggi sono biocompatibili e mostrano buone propriet&agrave; biomeccaniche, ma in vivo conferma di questi risultati non &egrave; ancora disponibile. Pertanto, lo scopo di questo studio era di vedere in vivo se un costrutto allogenico acellulare colonizzato con fibroblasti autologhi migliora la qualit&agrave; della ricostruzione ACL. Sostituzione di ACL &egrave; stata eseguita in 31 conigli bianca di Nuova Zelanda utilizzando un modello standardizzato. Quindici animali ricevuto tendine semitendinoso autologhi, considerando che 16 animali sono stati trattati con un costrutto tessutale. Questo costrutto &egrave; stata fatta da acellularization dei tendini semitendinoso allogenico utilizzando solfato dodecilico di sodio e la successiva colonizzazione in vitro con fibroblasti autologhi. Otto settimane dopo l&#39;operazione, macroscopica, biomeccanici (carico ultimo fallimento, allungamento, rigidit&agrave;; n = 8/9) e istologiche (n = 5) gli esami sono stati eseguiti. Biomeccanica test ha mostrato diminuzione forza dei costrutti a 8 settimane dopo l&#39;impianto rispetto con la forza diretta post-chirurgica. Tuttavia, tessutale costruisce (F = 19,7 + 20,3 N) erano significativamente pi&ugrave; debole di tendini autologhi (F = 61,2 + 31,2 N). Istologicamente, i tendini autologhi ha mostrati segni di necrosi parziale e il rimodellamento del tessuto. I costrutti tessutale esposto una reazione infiammatoria e ha mostrato regioni sia ripopolate e acellulare. In conclusione, risultati in vivo sono stati molto pi&ugrave; sfavorevole che avevano suggerito risultati in vitro. Ulteriori studi devono essere eseguiti per verificare se le modifiche del processo di acellularization meglio producono risultati in vivo.

Ingegneria tissutale dell&#39;anteriore del legamento crociato-sodio dodecil solfato-acellularized e rivitalizzati tendini sono inferiori ai tendini nativi.

Treatment of cartilage defects is still challenging, primarily because of the poor self-healing capacity of articular cartilage. Gene therapy approaches have gained considerable attention, but, depending on the vector system used, they can lead to either limited or unrestrained gene expression, and therefore regulation of gene expression is necessary. This study was undertaken to construct an efficient tetracycline (Tet)-regulated, lentivirally mediated system for the expression of growth factor bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) in primary rabbit chondrocytes that will allow for the induction and termination of growth factor gene expression once cartilage regeneration is complete.

Tetracycline-regulated bone morphogenetic protein 2 gene expression in lentivirally transduced primary rabbit chondrocytes for treatment of cartilage defects.

Traitement des d&eacute;fauts de cartilage est toujours difficile, principalement en raison de la faible capacit&eacute; d&#39;auto-gu&eacute;rison du cartilage articulaire. Approches de th&eacute;rapie g&eacute;nique ont gagn&eacute; beaucoup d&#39;attention, mais, selon le syst&egrave;me de vecteur utilis&eacute;, elles peuvent entra&icirc;ner soit l&#39;expression des g&egrave;nes de limit&eacute; ou sans retenue, et donc la r&eacute;gulation de l&#39;expression de g&egrave;ne est n&eacute;cessaire. Cette &eacute;tude a &eacute;t&eacute; entreprise pour construire une t&eacute;tracycline efficace (Tet)-r&eacute;gis, lentivirally v&eacute;hicul&eacute;e par le syst&egrave;me d&#39;expression de la prot&eacute;ine morphog&eacute;n&eacute;tique de facteur de croissance osseuse 2 (BMP-2) dans les chondrocytes primaire de lapin qui permettra pour l&#39;induction et la cessation d&#39;emploi de l&#39;expression g&eacute;nique de facteur de croissance, une fois termin&eacute;e la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration du cartilage.

Expression des g&egrave;nes de prot&eacute;ine morphog&eacute;n&eacute;tique 2 OS r&eacute;gl&eacute; par la t&eacute;tracycline dans les chondrocytes lentivirally transduite lapin primaire pour le traitement des d&eacute;fauts de cartilage.

Trattamento dei difetti della cartilagine &egrave; ancora difficile, principalmente a causa della scarsa capacit&agrave; di autoguarigione della cartilagine articolare. Approcci di terapia genica hanno guadagnato l&#39;attenzione considerevole, ma, a seconda del sistema vettore utilizzato, possono portare a sia espressione del gene limitata o sfrenato, e pertanto &egrave; necessaria la regolazione dell&#39;espressione genica. Questo studio &egrave; stato intrapreso per costruire un&#39;efficiente tetraciclina (Tet)-regolato, mediata da lentivirally sistema per l&#39;espressione del fattore di crescita bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) nei condrociti primari coniglio che consentiranno per l&#39;induzione e la terminazione dell&#39;espressione di gene del fattore di crescita, una volta completata la rigenerazione della cartilagine.

Espressione di gene morphogenetic protein 2 osso tetraciclina-regolato in condrociti lentivirally trasdotte coniglio primario per il trattamento dei difetti della cartilagine.

Polychrome sequential labeling with fluorochromes is a standard technique for the investigation of bone formation and regeneration processes in vivo. However, for human application, only tetracycline and its derivates are approved as fluorochromes. Therefore, the aim of this study was to determine the fluorescence characteristics of the different tetracycline derivates to assess the feasibility of sequential in vivo bone labeling using distinguishable fluorochromes. Eight different tetracycline derivates were injected subcutaneously into growing rats as a single dose or sequentially in different combinations. After preparation of resin-embedded undecalcified bone sections, the fluorescence properties of the tetracycline derivates in bone were analyzed using conventional fluorescence microscopy, spectral image analysis and confocal laser scanning microscopy. Each tetracycline derivate exhibited a characteristic fluorescence spectrum, but the differences between them were small. Chlortetracycline could be discriminated reliably from all other derivates and could therefore be combined with any other tetracycline derivate for reliably distinguishable double labeling. Tetracycline itself exhibited the brightest fluorescence of all the investigated derivates. Interestingly, in conventional microscopy the same tetracycline derivative can appear in different colours to the human eye, even if spectral analysis confirmed identical emission peaks. In conclusion, the data suggest that fluorescence double labeling of bone is feasible using appropriate tetracycline derivates in combination with spectral imaging modalities.

Characterization of eight different tetracyclines: advances in fluorescence bone labeling.

Un marquage s&eacute;quentiel polychrome avec fluorochromes est une m&eacute;thode standard pour l&#39;&eacute;tude des os formation et r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration processus in vivo. Toutefois, pour l&#39;application humaine, seulement la t&eacute;tracycline et ses d&eacute;riv&eacute;s sont homologu&eacute;s fluorochromes. Par cons&eacute;quent, le but de cette &eacute;tude &eacute;tait de d&eacute;terminer les caract&eacute;ristiques de la fluorescence de la d&eacute;riv&eacute;s de la t&eacute;tracycline diff&eacute;rents pour &eacute;valuer la faisabilit&eacute; d&#39;OS in vivo s&eacute;quentiel, marquage &agrave; l&#39;aide de fluorochromes distinguables. Huit d&eacute;riv&eacute;s de la t&eacute;tracycline diff&eacute;rents ont &eacute;t&eacute; inject&eacute;es par voie sous-cutan&eacute;e en rats de plus en plus en une seule dose ou successivement dans diff&eacute;rentes combinaisons. Apr&egrave;s pr&eacute;paration des sections de r&eacute;sine incorpor&eacute; enrobement osseuse, les propri&eacute;t&eacute;s de fluorescence de la d&eacute;riv&eacute;s de la t&eacute;tracycline dans les os ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es &agrave; l&#39;aide de la microscopie de fluorescence conventionnels, analyse spectrale et confocal laser scanning microscopy. Chaque t&eacute;tracycline derivate montrent un spectre de fluorescence caract&eacute;ristique, mais les diff&eacute;rences entre elles &eacute;taient petites. Chlort&eacute;tracycline pouvait &ecirc;tre distingu&eacute; de mani&egrave;re fiable de tous les autres d&eacute;riv&eacute;s et pourrait donc &ecirc;tre combin&eacute; avec n&#39;importe quel autre t&eacute;tracycline d&eacute;riv&eacute; pour distinguer de fa&ccedil;on fiable un double marquage. T&eacute;tracycline elle-m&ecirc;me expos&eacute;e la fluorescence plus brillante de tous les d&eacute;riv&eacute;s &eacute;tudi&eacute;s. Fait int&eacute;ressant, en microscopie conventionnelle le m&ecirc;me d&eacute;riv&eacute; de t&eacute;tracycline peut appara&icirc;tre dans diff&eacute;rentes couleurs pour le &oelig;il humain, m&ecirc;me si l&#39;analyse spectrale a confirm&eacute; les pics d&#39;&eacute;mission identique. En conclusion, les donn&eacute;es sugg&egrave;rent qu&#39;il est possible &agrave; l&#39;aide de d&eacute;riv&eacute;s de la t&eacute;tracycline appropri&eacute; en combinaison avec les modalit&eacute;s d&#39;imagerie spectrales de fluorescence double marquage de l&#39;OS.

Caract&eacute;risation des huit t&eacute;tracyclines diff&eacute;rents : avances dans l&#39;&eacute;tiquetage des os de fluorescence.

Etichettatura sequenziale policromo con fluorocromi &egrave; una tecnica standard per l&#39;indagine di osso formazione e rigenerazione processi in vivo. Tuttavia, per l&#39;applicazione sull&#39;uomo, solo tetracicline e derivati sono approvati come fluorocromi. Pertanto, lo scopo di questo studio era di determinare le caratteristiche di fluorescenza della tetraciclina diversi derivati per valutare la fattibilit&agrave; dell&#39;osso in vivo sequenza etichettatura tramite fluorocromi distinguibili. Otto diverse tetracicline derivati erano iniettati per via sottocutanea in ratti in crescita come singola dose o in sequenza in diverse combinazioni. Dopo la preparazione delle sezioni di osso undecalcified resina incorporati, le propriet&agrave; di fluorescenza dei derivati della tetraciclina in osso sono state analizzate utilizzando la microscopia di fluorescenza convenzionali, analisi spettrale immagine e microscopia confocal del laser. Ciascuna tetraciclina opacizzare esposto uno spettro di fluorescenza caratteristico, ma le differenze tra di loro erano piccole. Clorotetraciclina potrebbe essere discriminata in modo affidabile da tutti gli altri derivati e pertanto potrebbe essere combinata con altre tetracicline opacizzare per attendibilmente distinguibile doppia etichettatura. Tetraciclina stessa esposta la fluorescenza pi&ugrave; brillante di tutti i derivati investigati. &Egrave; interessante notare che, nella microscopia convenzionale il derivato stesso tetracycline pu&ograve; apparire in diversi colori per l&#39;occhio umano, anche se l&#39;analisi spettrale ha confermato i picchi di emissione identici. In conclusione, i dati suggeriscono che la fluorescenza doppia etichettatura dell&#39;osso &egrave; fattibile utilizzando appropriati tetraciclina derivati in combinazione con modalit&agrave; di imaging spettrale.

Caratterizzazione di otto diverse tetracicline: advances in fluorescenza ossea etichettatura.

To evaluate single centrifuge platelet concentrate as additive for improved tendon healing. Platelet-rich plasma has been reported to improve tendon healing. Single centrifuge platelet concentration may increase platelet concentration enough to positively affect tendon healing. A single centrifuge process will lead to a blood product with increased platelet concentrations which, when added to a surgically created tendon injury, will improve tendon healing when compared with a saline control.

Platelet concentrate vs. saline in a rat patellar tendon healing model.

Evaluer concentr&eacute; plaquettaire centrifugeuse unique en tant qu&#39;additif pour am&eacute;lior&eacute; la gu&eacute;rison du tendon. Plasma riche en plaquettes a &eacute;t&eacute; signal&eacute; &agrave; favoriser la gu&eacute;rison du tendon. Concentration plaquettaire centrifugeuse unique peut augmenter la concentration plaquettaire assez pour influer positivement sur la gu&eacute;rison du tendon. Un processus unique de centrifugeuse conduira &agrave; un produit sanguin, avec des concentrations accrues de plaquettes qui, lors de l&#39;ajout d&#39;une blessure au tendon chirurgicalement cr&eacute;&eacute;, am&eacute;liorera le tendon de gu&eacute;rison par rapport &agrave; un contr&ocirc;le de salin.

Concentr&eacute; de plaquettes par rapport &agrave; une solution saline dans un tendon rotulien rat mod&egrave;le de gu&eacute;rison.

Per valutare il concentrato piastrinico centrifuga singola come additivo per migliore guarigione del tendine. Plasma ricco di piastrine &egrave; stato segnalato per migliorare la guarigione del tendine. Concentrazione piastrinica centrifuga singola pu&ograve; aumentare la concentrazione delle piastrine abbastanza influenzi la guarigione del tendine. Un processo di centrifuga singola porter&agrave; ad un prodotto di sangue con una concentrazione maggiore delle piastrine che, quando aggiunto a un infortunio al tendine creato chirurgicamente, migliorer&agrave; tendine di guarigione rispetto ad un controllo di salino.

Concentrato piastrinico vs soluzione salina in un tendine rotuleo ratto modello di guarigione.

The aim of the study was to develop a standardized rat model for chronic rotator cuff tears. Therefore, a time point of degenerative changes that shows comparable histological changes to the chronic tendon tears in humans had to be determined. The rat shoulder has already been described as a standardized model for investigation of the healing behavior in acute supraspinatus lesions. Little data exist about the possibility of generating a chronic rotator cuff lesion.

Rotator cuff changes in a full thickness tear rat model: verification of the optimal time interval until reconstruction for comparison to the healing process of chronic lesions in humans.

L&#39;&eacute;tude visait &agrave; &eacute;laborer un mod&egrave;le de rat normalis&eacute;s pour la chronique des rotateurs. Par cons&eacute;quent, un point de temps des changements d&eacute;g&eacute;n&eacute;ratifs qui montre les changements histologiques comparables aux larmes tendon chronique chez l&#39;&ecirc;tre humain devait &ecirc;tre tranch&eacute;e. L&#39;&eacute;paule de rat a d&eacute;j&agrave; &eacute;t&eacute; d&eacute;crit comme un mod&egrave;le normalis&eacute; pour l&#39;enqu&ecirc;te sur le comportement de gu&eacute;rison des l&eacute;sions aigu&euml;s sus-&eacute;pineux. Peu de donn&eacute;es existe sur la possibilit&eacute; de g&eacute;n&eacute;rer une l&eacute;sion de la coiffe des rotateurs chronique.

Changements de la coiffe des rotateurs dans une pleine &eacute;paisseur tear mod&egrave;le de rat : v&eacute;rification de l&#39;intervalle de temps optimale jusqu&#39;&agrave; la reconstruction pour les comparer avec la cicatrisation des l&eacute;sions chroniques chez l&#39;homme.

L&#39;obiettivo dello studio era quello di sviluppare un modello di ratto standardizzato per lacrime cronica della cuffia dei rotatori. Pertanto, un punto di tempo di alterazioni degenerative che mostra i cambiamenti istologici paragonabile alle lacrime tendine cronica negli esseri umani doveva essere determinato. La spalla di ratto &egrave; gi&agrave; stato descritto come un modello standardizzato per l&#39;analisi del comportamento guarigione nelle lesioni acute sovraspinoso. Pochi dati esistono circa la possibilit&agrave; di generare una lesione cronica della cuffia dei rotatori.

Modifiche della cuffia dei rotatori in uno spessore pieno strappano modello del ratto: verifica dell&#39;intervallo di tempo ottimale fino alla ricostruzione per confronto con il processo di guarigione delle lesioni croniche negli esseri umani.

Matrix-assisted chondrocyte transplantation (m-ACI) still lacks any standardization in its execution in terms of cell passage (P), cell yield (C) and in vitro membrane-holding time (T). It was the goal of this study to analyze the effect of shifting cell culture parameters (P, C, T) on the in vitro as well as in vivo effort of a regulated animal m-ACI. Autologous rabbit knee articular chondrocytes were seeded within bilayer collagen I/III 3-D matrices in variation of P, C and T. Each time, 2 PCT-identical by 2 PCT-identical cell-matrix-constructs (CMC)/animal were created. Simultaneously 2 (PCT-distinct) were re-implanted (CMC-e) autologous into artificial trochlear pristine chondral defects in vivo to remain for 12 weeks while the remaining 2 were harvested (CMC-i) for immediate in vitro analysis at the time of transplantation of their identical twins. mRNA of both, CMC-e regenerates and CMC-i membranes, was analyzed for Collagen-1,-2,-10, COMP, Aggrecan, Sox9 expression by use of a mixed linear model, multiple regression analysis. Generally, CMC-i values were higher than CMC-e values for differentiation targets; the opposite was true for dedifferentiation targets. Regarding individual gene expression, in vivo regenerate cell-matrix properties were significantly dependent on initial cell-matrix in vitro values as a sign of linearity. The parameter membrane-holding time (T) had strongest effects on the resulting mRNA expression with slightly less impact of the parameter passage (P), whereas cell yield (C) had clearly less effects. Noting differences between in vitro and in vivo data, in general, optimal expression patterns concerning chondrogenic differentiation were achieved by few passages, medium cellular yield, short membrane-holding time. Clinical m-ACI may benefit from optimal orchestration of the cell culture parameters passage, yield and time.

The dependence of autologous chondrocyte transplantation on varying cellular passage, yield and culture duration.

Greffe de chondrocytes assist&eacute;e par matrice (m-ACI) manque encore toute normalisation dans son ex&eacute;cution en termes de passage (P) de la cellule, rendement cellulaire (C) et temps de membrane-retenue in vitro (T). C&#39;&eacute;tait le but de cette &eacute;tude d&#39;analyser l&#39;effet de d&eacute;placer les param&egrave;tres de culture cellulaire (P, C, T) sur l&#39;effort in vitro comme in vivo d&#39;une animale r&eacute;glement&eacute;e m-ACI. Lapin autologue genou chondrocytes articulaires ont &eacute;t&eacute; ensemenc&eacute;es dans le collag&egrave;ne de la bicouche je / matrices 3D III en variation de P, C et T. Chaque fois, 2 PCT identiques par 2 PCT-identique cellule-matrice-constructions (CMC) / animal ont &eacute;t&eacute; cr&eacute;&eacute;s. En m&ecirc;me temps 2 (PCT-distinctes) ont &eacute;t&eacute; r&eacute;implant&eacute;s (MCC-e) autologues d&eacute;fauts artificiels chondrales vierges trochl&eacute;en in vivo de rester pour 12 semaines alors que les 2 autres ont &eacute;t&eacute; r&eacute;colt&eacute;s (MCC-i) pour l&#39;analyse in vitro imm&eacute;diate au moment de la transplantation de leurs jumeaux identiques. ARNm des deux, r&eacute;g&eacute;n&egrave;re MCC-e et les membranes de CMC-i, a &eacute;t&eacute; analys&eacute; pour collag&egrave;ne-1, -2, -10, COMP, AGGRECANE, Sox9 expression par l&#39;utilisation d&#39;un mod&egrave;le lin&eacute;aire mixte, analyse de r&eacute;gression multiple. G&eacute;n&eacute;ralement, valeurs de CMC-i &eacute;taient plus &eacute;lev&eacute;s que les valeurs de MCC-e pour les cibles de diff&eacute;renciation ; le contraire est vrai pour les cibles de d&eacute;diff&eacute;renciation. Au sujet de l&#39;expression des g&egrave;nes individuels, propri&eacute;t&eacute;s de la matrice cellulaire in vivo r&eacute;g&eacute;n&eacute;rer d&eacute;pendaient significativement cellule-matrice initiale en vitro valeurs comme un signe de la lin&eacute;arit&eacute;. Le temps de membrane-retenue de param&egrave;tre (T) ont des effets plus forts sur l&#39;expression des ARNm obtenue avec l&eacute;g&egrave;rement moins de cons&eacute;quences du passage du param&egrave;tre (P), alors que le rendement de la cellule (C) avait nettement moins d&#39;effets. Tenant compte des diff&eacute;rences entre les donn&eacute;es in vitro et in vivo, en g&eacute;n&eacute;ral, les profils d&#39;expression optimale concernant chondrog&eacute;niques distinction ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;es par quelques passages, moyen rendement cellulaire, membrane-tenue peu de temps. Clinique m-ACI peut-&ecirc;tre b&eacute;n&eacute;ficier d&#39;une orchestration optimale du passage de param&egrave;tres cell culture, rendement et le temps.

La d&eacute;pendance de la greffe de chondrocytes autologues adapter la dur&eacute;e de passage, de rendement et de la culture cellulaire.

Trapianto di condrociti Matrix-assisted (m-ACI) manca ancora qualsiasi standardizzazione nella sua esecuzione in termini di passaggio cella (P), rendimento di cella (C) e in vitro membrana-azienda tempo (T). E &#39; stato l&#39;obiettivo di questo studio per analizzare l&#39;effetto di spostare i parametri di coltura delle cellule (P, C, T) sullo sforzo oltre in vitro che in vivo di un animale regolamentato m-ACI. Coniglio autologo ginocchio condrociti articolari sono stati seminati all&#39;interno di collagene doppio strato I / matrici tridimensionali III variazione di P, C e T. Ogni volta, 2 PCT-identici da 2 PCT-identica cellula-matrice-costrutti (CMC) / animale sono stati creati. Contemporaneamente 2 (PCT-distinti) erano re-implanted (CMC-e) autologo in artificiale trocleare incontaminate condrali in vivo di rimanere per 12 settimane, mentre i restanti 2 sono stati raccolti (CMC-i) per l&#39;analisi in vitro immediata al momento del trapianto dei loro gemelli identici. mRNA di entrambi, rigenera e CMC e membrane CMC-i, &egrave; stato analizzato per collagene-1, -2, -10, COMP, Aggrecan, Sox9 espressione dall&#39;uso di un modello lineare misto, analisi di regressione multipla. In genere, CMC-i valori erano superiori valori di CMC-e per gli obiettivi di differenziazione; l&#39;opposto &egrave; stato vero per le destinazioni di indifferenziazione. Per quanto riguarda l&#39;espressione del gene individuali, rigenera in vivo delle cellule-matrice propriet&agrave; erano significativamente dipendente iniziale cellula-matrice in vitro valori come un segno della linearit&agrave;. Il tempo di tenuta di membrana di parametro (T) aveva pi&ugrave; forti effetti sull&#39;espressione del mRNA risultante con leggermente meno impatto del passaggio di parametri (P), considerando che il rendimento della cella (C) aveva chiaramente meno effetti. Notando le differenze tra i dati in vitro e in vivo, in generale, i modelli di espressione ottimale relativa differenziazione chondrogenic sono stati raggiunti da alcuni passaggi, resa media cellulare, breve tempo di membrana-azienda. Clinica m-ACI possono beneficiare di orchestrazione ottimale del passaggio di parametri cultura cellulare, resa e tempo.

La dipendenza del trapianto autologo di condrociti su varia durata passaggio, resa e coltura cellulare.

Bisphosphonate related osteonecrosis of the jaw (BRONJ) is rare but potentially severe, and the etiopathology and risk factors are poorly defined. To date, it has not been possible to induce BRONJ in a large animal model, a shortfall this study aims to redress. Ten two-year-old adult GÃ¶ttingen minipigs were split into two groups. Five pigs (group 1) were administered intravenously a weekly dose of a bisphosphonate (zoledonate 0.05mg/kg body weight, approximating the oncologic dose in humans) and five pigs (group 2) served as controls. After 6 weeks, tooth extractions were performed in the upper and lower jaw (both groups) and the bisphosphonate administration continued for a further 10 weeks (group 1 only). Clinical and blood parameters were monitored throughout the entire experiment; thereafter, the jaw-bones were subjected to macroscopic, radiological (CT) and histological investigations. Whilst the extraction sites in the control group healed within two weeks, all animals in the bisphosphonate group exhibited exposed bone and impaired wound healing, indicators that are synonymous of macroscopically advanced osteonecrosis. Radiological and in particular histological investigations confirmed the presence of BRONJ in the animals from group 1. This paper demonstrates that the administration of bisphosphonates, in combination with tooth extractions, induces BRONJ in a minipig model. The ability to study BRONJ in miniature pigs, animals with a bone structure not dissimilar to humans, may improve our knowledgebase regarding the etiopathology, the prophylaxis and potentially uncover new therapies of BRONJ.

Bisphosphonate related osteonecrosis of the jaw: A minipig large animal model.

Bisphosphonate li&eacute; ost&eacute;on&eacute;crose de la m&acirc;choire (BRONJ) est rare mais potentiellement grave, et les etiopathology et les facteurs de risque sont mal d&eacute;finis. A ce jour, il n&#39;a pas &eacute;t&eacute; possible d&#39;induire BRONJ dans un mod&egrave;le animal grand, cette &eacute;tude vise &agrave; rem&eacute;dier &agrave; un manque &agrave; gagner. Dix deux ans adultes G&ouml;ttingen minipigs &eacute;taient divis&eacute;s en deux groupes. Cinq cochons (groupe 1) ont &eacute;t&eacute; administr&eacute;es par voie intraveineuse une dose hebdomadaire d&#39;un bisphosphonate (zoledonate 0,05 mg/kg de poids corporel, se rapprochant de la dose oncologique chez l&#39;homme) et cinq cochons (groupe 2) ont servi de t&eacute;moins. Apr&egrave;s 6 semaines, les extractions de dents ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;es dans la maxillaire et la mandibule (deux groupes) et l&#39;administration de bisphosphonate a continu&eacute; pendant encore 10 semaines (groupe 1 uniquement). Les param&egrave;tres cliniques et de sang ont &eacute;t&eacute; suivis tout au long de l&#39;exp&eacute;rience enti&egrave;re ; par la suite, les os de la m&acirc;choire ont &eacute;t&eacute; soumis &agrave; macroscopiques, radiologique (CT) et les &eacute;tudes histologiques. Tandis que les sites d&#39;extraction dans le groupe t&eacute;moin gu&eacute;ri en deux semaines, tous les animaux dans le groupe de bisphosphonate expos&eacute;es expos&eacute;s osseuse et r&eacute;duite &agrave; la cicatrisation des plaies, des indicateurs qui sont synonymes de macroscopiquement avanc&eacute;es ost&eacute;on&eacute;crose. Investigations radiologiques et histologiques en particulier ont confirm&eacute; la pr&eacute;sence de BRONJ chez les animaux du groupe 1. Cet article d&eacute;montre que l&#39;administration des bisphosphonates, en combinaison avec les extractions de dents, induit BRONJ dans un mod&egrave;le miniature. La capacit&eacute; d&#39;&eacute;tudier BRONJ en cochons miniatures, animaux avec une structure osseuse pas dissemblable aux humains, peut am&eacute;liorer notre base de connaissances au sujet de l&#39;etiopathology, la prophylaxie et potentiellement d&eacute;celer des nouvelles th&eacute;rapies de BRONJ.

Bisphosphonate li&eacute; l&#39;ost&eacute;on&eacute;crose de la m&acirc;choire : un mod&egrave;le animal grande miniature.

Bifosfonati correlati osteonecrosi della mascella (BRONJ) sono rara, ma potenzialmente gravi, e l&#39;eziopatologia e fattori di rischio sono mal definiti. Ad oggi, non &egrave; possibile indurre BRONJ in un modello animale grande, una carenza di questo studio mira a porre rimedio. Due dieci-anno-vecchio adulto G&ouml;ttingen minipigs furono divise in due gruppi. Cinque suini (gruppo 1) sono stati somministrati per via endovenosa una dose settimana di un bifosfonato (zoledonate 0,05 mg/kg di peso corporeo, approssimandosi la dose oncologico in esseri umani) e cinque suini (gruppo 2) serv&igrave; come controlli. Dopo 6 settimane, sono state eseguite estrazioni di denti nella mascella superiore e inferiore (entrambi i gruppi) e la somministrazione di bifosfonati continu&ograve; per altre 10 settimane (solo gruppo 1). Parametri clinici e di sangue sono stati monitorati durante l&#39;intero esperimento; da allora in poi, la mascella-ossa furono sottoposti a macroscopica, radiologica (CT) e indagini istologiche. Mentre i siti di estrazione nel gruppo di controllo guarito entro due settimane, tutti gli animali del gruppo di bifosfonati esposto esposti osseo e con problemi di guarigione della ferita, gli indicatori che sono sinonimi di macroscopicamente avanzati osteonecrosi. Indagini radiologiche ed in particolare istologiche ha confermato la presenza di BRONJ negli animali da gruppo 1. Questo libro dimostra che la somministrazione di bifosfonati, in combinazione con estrazioni di denti, induce la BRONJ in un modello minipig. La possibilit&agrave; di studiare la BRONJ nei maiali in miniatura, animali con una struttura ossea non dissimile agli esseri umani, pu&ograve; migliorare la nostra knowledge base per quanto riguarda l&#39;eziopatologia, la profilassi e potenzialmente scoprire nuove terapie della BRONJ.

Bifosfonati correlati osteonecrosi della mandibola: un modello animale grande minipig.

The purpose was to evaluate histological changes of the supraspinatus tendon (SSP) after refixation under continuous growth factor application over 20 days in comparison to the native healing process. In a chronic rat tendon tear model (15 rats/group), a transosseous SSP refixation was performed and growth factors (control, G-CSF, b-FGF, combination) were continuously released into the subacromial space by an osmotic pump. Tendon healing was evaluated histologically by a modified MOVIN-Score, and Collagen I/III content was determined by immunohistology at 6 weeks. A modified MOVIN sum score showed significant lower counts for G-CSF and b-FGF in comparison to the control group (p = 0.050/p = 0.027) and the combined group (p = 0.050/p = 0.043). Collagen III was significantly reduced in the combined group compared to the control group (p = 0.028). Collagen I showed no significant differences. The Collagen I/III ratio was nearly doubled for b-FGF and the combined group compared to the control. At the study endpoint, 33% of pump dislocations were detected. The continuous application of both isolated growth factors (G-CSF/b-FGF) achieved improved tendon-remodeling. However, the continuous application via an osmotic pump showed a relative high dislocation rate when applied in the rat model.

Refixation of the supraspinatus tendon in a rat model--influence of continuous growth factor application on tendon structure.

Le but &eacute;tait d&#39;&eacute;valuer des modifications histologiques du tendon sus-&eacute;pineux (SSP) apr&egrave;s refixation sous l&#39;application de facteur de croissance continu sur une p&eacute;riode de 20 jours en comparaison avec le processus de gu&eacute;rison indig&egrave;ne. Dans un mod&egrave;le de d&eacute;chirure des tendon chronique chez le rat (15 rats/groupe), a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e une refixation du SSP transosseuse et facteurs de croissance (contr&ocirc;le, G-CSF, b-FGF, combinaison) ont &eacute;t&eacute; lib&eacute;r&eacute;s en continu dans l&#39;espace sous-acromiale par une pompe osmotique. Gu&eacute;rison tendon a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e sur le plan histologique par une mis &agrave; jour le MOVIN-Score et le collag&egrave;ne I / III teneur a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e par immunohistologie &agrave; 6 semaines. A modified MOVIN r&eacute;sultat a montr&eacute; des d&eacute;nombrements plus faibles significatives pour le G-CSF et FGF-b par rapport au groupe t&eacute;moin (p = 0,050/p = 0,027) et le groupe combin&eacute; (p = 0,050/p = 0,043). Collag&egrave;ne III a &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duite dans le groupe combin&eacute; par rapport au groupe t&eacute;moin (p = 0,028). Collag&egrave;ne, j&#39;ai ne montr&eacute; aucune diff&eacute;rence significative. Le collag&egrave;ne I / ratio III a &eacute;t&eacute; presque doubl&eacute; pour b-FGF et le groupe combin&eacute; par rapport au contr&ocirc;le. Au point de terminaison de l&#39;&eacute;tude, 33 % des luxations de pompe ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s. L&#39;application continue des deux facteurs de croissance isol&eacute;s (G-CSF/b-FGF) atteint tendon-retouche am&eacute;lior&eacute;e. Toutefois, l&#39;application continue via une pompe osmotique ont montr&eacute; un taux de luxation haute relative lorsqu&#39;elle est appliqu&eacute;e dans le mod&egrave;le de rat.

Refixation du tendon sus-&eacute;pineux dans un mod&egrave;le de rat--influence du facteur de croissance continu application sur la structure du tendon.

Lo scopo era di valutare i cambiamenti istologici del tendine sovraspinoso (SSP) dopo battiscopa sotto fattore di crescita continua applicazione oltre 20 giorni rispetto al processo di guarigione nativo. In un cronica tendine strappo modello del ratto (15 ratti/gruppo), &egrave; stato eseguito un battiscopa SSP transosseo e fattori di crescita (controllo, G-CSF, b-FGF, combinazione) sono stati continuamente liberati nello spazio subacromial da una pompa osmotica. Guarigione del tendine &egrave; stato valutato istologicamente da una modificata MOVIN-Score e collagene I / III contenuto &egrave; stato determinato per il immunohistology a 6 settimane. A modificato MOVIN punteggio di somma ha mostrato significative inferiore conta per G-CSF e b-FGF rispetto al gruppo di controllo (p = 0,050/p = 0,027) e il gruppo combinato (p = 0,050/p = 0.043). Collagene III &egrave; stato ridotto significativamente nel gruppo combinato rispetto al gruppo controllo (p = 0,028). Collagene ha mostrato differenze significative. Il collagene I / rapporto III &egrave; stato quasi raddoppiato per b-FGF e il gruppo combinato rispetto al controllo. L&#39;endpoint di studio, sono stati rilevati 33% delle dislocazioni pompa. L&#39;applicazione continua di entrambi isolati fattori di crescita (G-CSF/b-FGF) raggiunto migliore rimodellamento del tendine. Tuttavia, l&#39;applicazione continua tramite una pompa osmotica ha mostrato un tasso di dislocazione relativa alta quando applicate nel modello di ratto.

ArticleTotal : 2	Year
Publication title Cited by 5	2013
Publication title Cited by 32	2013

Article	Year
Polychrome labeling of bone with seven different fluorochromes: enhancing fluorochrome discrimination by spectral image analysis. Bone\| PubMed ID: 16046209	2005
Efficient and stable gene transfer of growth factors into chondrogenic cells and primary articular chondrocytes using a VSV.G pseudotyped retroviral vector. Biomaterials\| PubMed ID: 18078987	2008
A fibrin glue composition as carrier for nucleic acid vectors. Pharmaceutical research\| PubMed ID: 18781379	2008
The influence of the stable expression of BMP2 in fibrin clots on the remodelling and repair of osteochondral defects. Biomaterials\| PubMed ID: 19185914	2009
Tissue engineering of the anterior cruciate ligament-sodium dodecyl sulfate-acellularized and revitalized tendons are inferior to native tendons. Tissue engineering. Part A\| PubMed ID: 19845462	2010
Tetracycline-regulated bone morphogenetic protein 2 gene expression in lentivirally transduced primary rabbit chondrocytes for treatment of cartilage defects. Arthritis and rheumatism\| PubMed ID: 20309869	2010
Characterization of eight different tetracyclines: advances in fluorescence bone labeling. Journal of anatomy\| PubMed ID: 20456523	2010
Platelet concentrate vs. saline in a rat patellar tendon healing model. Knee surgery, sports traumatology, arthroscopy : official journal of the ESSKA\| PubMed ID: 20953759	2011
Rotator cuff changes in a full thickness tear rat model: verification of the optimal time interval until reconstruction for comparison to the healing process of chronic lesions in humans. Archives of orthopaedic and trauma surgery\| PubMed ID: 21190029	2011
The dependence of autologous chondrocyte transplantation on varying cellular passage, yield and culture duration. Biomaterials\| PubMed ID: 21592563	2011
Bisphosphonate related osteonecrosis of the jaw: A minipig large animal model. Bone\| PubMed ID: 22575441	2012
Refixation of the supraspinatus tendon in a rat model--influence of continuous growth factor application on tendon structure. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society\| PubMed ID: 22912341	2013

Gabriele Wexel

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