انسداد الشريان السباتي الثنائية إلى جانب انخفاض ضغط الدم النظامية ينتج نقص التروية الدماغية العالمية في الفئران، مما يؤدي إلى تلف الحصين مع شدة استنساخه. يتم تخفيض قيمة المواد الحيوانية مع أنماط يمكن التنبؤ بها من تلف في الدماغ، وسرعة في استرداد، ومعدلات وفيات منخفضة نسبيا.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
2 الأوعية الدموية الانسداد / انخفاض ضغط الدم: نموذج الفئران من نقص التروية الدماغية العالمية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
السكتة القلبية تليها الإنعاش في كثير من الأحيان يؤدي إلى تلف في الدماغ الناجم عن نقص التروية درامية وضخه لاحقة من الدماغ. نقص تروية الدماغ العالمية تنتج الأضرار التي لحقت مناطق محددة في الدماغ أظهرت أن تكون حساسة للغاية لنقص التروية 1. الخلايا العصبية قرن آمون لديهم حساسية أعلى للإهانات الدماغية مقارنة مع السكان الخلية الأخرى، وعلى وجه التحديد، المنطقة CA1 من الحصين هو عرضة بشكل خاص لنقص التروية / ضخه 2.
تصميم التدخلات العلاجية، أو دراسة الآليات التي تشارك في الضرر الدماغي، يتطلب نموذج الذي ينتج الضرر مماثلة لحالة سريرية وبطريقة استنساخه. الثنائية انسداد الأوعية السباتية مع انخفاض ضغط الدم (2VOH) هو النموذج الذي ينتج عكسها نقص تروية الدماغ الأمامي، ليحاكي الأحداث الدماغية التي يمكن أن تحدث أثناء توقف القلب والإنعاش. وصفنا نموذجا معدلة من سميث وآخرون. (1984) 2، كما قدم لأول مرة في شكله الحالي في ساندرسون وآخرون (2008) 3، التي تنتج اصابة استنساخه إلى انتقائي مناطق الدماغ عرضة 3-6. موثوقية هذا النموذج تمليه مراقبة دقيقة من النظامية ضغط الدم انخفاض ضغط الدم أثناء تطبيقها، ومدة نقص التروية، على مقربة التحكم في درجة الحرارة، وهو نظام التخدير محددة، والاجتهاد الرعاية اللاحقة للعمليات الجراحية. إهانة الدماغية 8 دقائق تنتج من موت الخلايا CA1 الخلايا العصبية الحصين أن تقدم على مدى 6-24 ساعة من ضخه، بينما تعف عن مناطق الدماغ أقل عرضة للخطر. وكميا هذا موت الخلايا التدريجي بسهولة بعد 7-14 أيام من ضخه، باعتبارها خسارة كاملة بالقرب من CA1 الخلايا العصبية هو واضح في هذا الوقت.
وبالإضافة إلى هذا النموذج إصابات الدماغ، ونحن نقدم وسيلة لCA1 الضرر الكمي باستخدام بسيطة، ولكنها وافية، ومنهجية. الأهم من ذلك، الكمي ويمكن تحقيق ذلك باستخدام مجهر بسيط كاميرا محمولة، وهودا مجانا يماغيج (NIH) المساعد البرمجيات، مما يغني عن الحاجة إلى باهظة التكلفة البرامج التجسيم ومرحلة المجهرية الآلية لتقييم الأضرار.
المقدمة
تلف في الدماغ نتيجة لسكتة قلبية والسكتة الدماغية هي السبب الرئيسي للوفاة والعجز على المدى الطويل. بينما إنعاش القلب والرئة لضحايا السكتة القلبية ينجح في استعادة الدورة الدموية عفوية في حوالي 70،000 مريض سنويا في الولايات 7،8 على الأقل 60٪ من هؤلاء المرضى يموتون في وقت لاحق في المستشفى نتيجة لتلف في الدماغ واسعة و٪ فقط 3-10 من المرضى أحيا يمكن استئناف أنماط حياتهم السابقة 9،10. بوضوح، وفهم الآليات التي تؤدي إلى تلف في الدماغ بعد نقص التروية الدماغية العالمية وتصميم التدخلات العلاجية لتقليل الصدمة العصبية له أهمية حاسمة.
نقص تروية الدماغ يم....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. إعداد
يجب على جميع التجارب على الحيوانات تتفق مع المبادئ التوجيهية المؤسسية والحصول على الموافقة من قبل لجنة رعاية الحيوان المعنية قبل البدء. وقد تمت الموافقة على جميع الإجراءات المعروضة هنا من قبل جامعة واين ستيت المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام اللجنة واتباع المبادئ التوجيهية بشأن معاملة الأخلاقية للحيوانات كما طرح في دليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية وإلى مبادئ حكومة الولايات المتحدة لل استخدام ورعاية الحيوانات الفقارية المستخدمة في اختبار والبحث والتدريب. قبل البدء في عملية جراحية، وإعداد المواد الجراحية الضرورية وانتعاش قفص الجراحة. هذا الإجراء هو ع....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
نموذج 2VOH من نقص تروية الدماغ العالمية / ضخه يؤدي إلى وفاة الخلايا العصبية في المنطقة CA1 من الحصين. يمثل الشكل 2 من الاصابة التي تنتجها 8 دقائق من نقص تروية الدماغ العالمي، وتجهيزها بعد 14 يوما ضخه. أرقام 2A و 2B مقارنة الحصين من الشام و أدمغة آخر الدماغية، ملطخة البنفسجي الكريزيل. الشكل 2A يظهر الحصين من الفئران الشام التي تديرها الذي يسلك مورفولوجيا العادي، بما في ذلك CA1 سليمة. يوضح الشكل 2B .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
نموذج الموصوفة هنا تنتج إهانة الدماغية الى الدماغ التي يمكن أن تحدث نتيجة لتوقف القلب والإنعاش، وتوفير اصابة مماثلة لتلك الموجودة في البشر. هذه الطريقة لإنتاج نقص تروية الدماغ العالمية هي واحدة من بروتوكولات متعددة. علينا الاستفادة من هذا البروتوكول قبل كل شيء لسعره المنخفض نسبيا وفيات، والانتعاش السريع، ونتائج قابلة للتكرار. اعتقال / الإنعاش القلبي نموذج يمكن القول إن النموذج الأكثر ذات الصلة سريريا، ولكن من الناحية الفنية الأكثر صعوبة في إعادة إنتاج باستمرار. نموذج 4VO من نقص تر.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم الصراعات المالية من الفائدة.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم المادة< / قوي> | |||
| 5-0 خياطة VICRYL ، قطع عكسي | Ethicon | J391H | |
| مشرط ، رقم 10 | Swann-Morton | 6601 | |
| إسفنج شاش | فيشر | 22-362-178 | |
| 18G x 1 ½ ؛ في إبرة | BD | 305201 | |
| 23G × 1 في إبرة | BD | 305145 | |
| 26 جم × 3/8 بوصة إبرة | BD | 305110 | |
| 18 جم × 1 &# 188; قسطرة | EXEL | 26735 | |
| 1 مل حقنة | BD | 309659 | |
| 10 مل حقنة | BD | 309604 | |
| 60 مل حقنة | BD | 309653 | |
| Surgilube | Henry Schein | 1152666.9 | |
| ٪ محلول ملحي ، بلاستيك IV حقيبة | هنري شاين | 1537468 | |
| خياطة 3-0 الحرير | هنري شاين | 1007842 | |
| مرهم العيون Puralube | هنري شاين | 3390017 | |
| بيتالدين | هنري شاين | 6903564 | |
| ثنى منشفة معقمة | مور الطبية | 14170 | |
| أنابيب البولي إيثيلين ، 50 | مسعف 427411 | ||
| Stopcock ، 3 طرق | سميث | الطبية MX9311L | |
| <قوي>اسم الدواء< / قوي> | |||
| AERRANE (إيزوفلوران)هنري | شاين | 2091966 | |
| سائل Mapap (تايلينول) | المستحضرات الصيدلانية الرئيسية | 1556 | |
| Kedavet (الكيتامين) | Ketathesia Butney | NDC 50989-996-06 | |
| Butorphic (butorphanol) | Lloyd Labs | 4881 | |
| Heparin | APP Pharmaceuticals | 504011 | |
| الاسم الكيميائي < / strong> | |||
| Paraformaldehyde prills | Elecron Microscopy Sci. | 19202 | |
| 2-ميثيل بوتان | سيجما | 270342 | |
| كريسيل البنفسجي خلات | سيجما | C5042 | |
| السكروز | سيجما | S9378 | |
| <قوي>البرمجيات | |||
| ImageJ | المعاهد الوطنية للصحة | ||
المراجع
- Kirino, T., Sano, K. Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia. Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).
- Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. The density and distribution of....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
