تفاصيل هذه المقالة الإجراءات لتحليل التصوير البصري للجسيمات متناهية الصغر للورم المستهدفة، HerDox. على وجه الخصوص، وصفت تفاصيل استخدام جهاز التصوير المتعدد للكشف عن الورم استهداف وتقييم تغلغل الورم هنا.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تحليل المستهدفة البروتين الفيروسي النانوية يسلم إلى HER2 + أورام
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
جسيمات متناهية الصغر HER2 + ورم المستهدفة، HerDox، يسلك تراكم الورم تفضيلية والاجتثاث الورم للنمو في نموذج حيواني من HER2 + سرطان. يتم تشكيل HerDox من قبل غير التساهمية التجميع الذاتي للورم استهدفت خلية البروتين اختراق مع وكيل العلاج الكيميائي، دوكسوروبيسين، عن طريق رابط صغير الحمض النووي. مزيج من بالإلكترونات، إقحام، والتفاعلات oligomerization تسهيل التجميع الذاتي في جولة 10-20 الجسيمات نانومتر. HerDox يسلك الاستقرار في الدم وكذلك في تخزين طويلة في درجات حرارة مختلفة. تسليم النظامية من HerDox في الفئران الحاملة للورم ينتج في موت خلايا الورم مع عدم وجود آثار ضارة يمكن كشفها إلى الأنسجة غير السرطانية، بما في ذلك القلب والكبد (التي تخضع الضرر تميزت دوكسوروبيسين تشتته). HER2 ارتفاع يسهل استهداف الخلايا معربا عن الإنسان مستقبلات عامل نمو البشرة، وبالتالي الأورام بعرض مستويات مرتفعة HER2 يحمل أكبر تراكم HerDox مقارنة اكسبريس الخلاياالغناء المستويات الدنيا، سواء في التجارب المختبرية والحية. وقد سمح التصوير كثافة مضان جنبا إلى جنب مع التحليل الطيفي ومتحد البؤر في الموقع لنا للتحقق من الورم في الجسم الحي استهداف واختراق الخلايا السرطانية من HerDox بعد الولادة النظامية. نحن هنا التفاصيل طرقنا لتقييم الورم عبر استهداف التصوير المتعدد بعد الولادة النظامية.
المقدمة
استهداف الورم من العلاج الكيميائي لديه القدرة على القضاء على الخلايا السرطانية في جرعة أقل بالمقارنة مع الأدوية غير مستهدفة لأن أكثر من العلاج تسليمها يمكن أن تتراكم في وجهتها المقصودة بدلا من توزيعها على الأنسجة غير السرطانية. حيث أن الوضع الأخير سيضعف من فعالية الدواء وبالتالي تتطلب جرعات أعلى لتكون فعالة، استهداف الورم على حد سواء مزايا علاجية والسلامة على معيار المعاملة غير المستهدفة.
استهداف العلاج الكيميائي عن طريق التغليف في الجسيمات النانوية الذاتي تجميعها يسمح للدواء أن تظل غير معدلة كيميائيا على النقيض من الأدوية التي ترتبط تساهميا إلى جزيئات الاستهد....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. النظامية التسليم في الجسم الحي
- خلط ما يكفي HerDox مع ملحي معقم لمساواة 0.2 مل من 0.004 ملغ / كغ جرعة من HerDox في حقن ل6-8 أسبوع من العمر NU / NU الماوس واضعة تحت الجلد الأورام طعم أجنبي الجهة الثنائية.
- رسم بلطف الخليط HerDox إلى حقنة الانسولين 3/10 سم مكعب مزودة إبرة 29G، وتجنب الفقاعات.
- وبفعل التخدير عن طريق التعرض isoflurane وجيزة في غرفة الاستقراء مجهزة بنظام الكسح الغاز (معدلات تدفق الأوكسجين: 0.5-1 لتر / دقيقة، وتركيز isof....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
ويبين الشكل 1 في الجسم الحي النموذج تصوير الضوئي، التي بنيت لغرض الحصول على الصور تحت طرائق متعددة، بما في ذلك كثافة مضان، الطيفية، والعمر، 2 الفوتون، متحد البؤر داخل الحيوية، والتصوير تلألؤ بيولوجي. وبالإضافة إلى ذلك، فإن تبريد الكاميرا حساسية عالية وخطوط ليزر عالية الطاقة الواردة في هذا النظام عائدات أعلى الصور مضان النقيض بالمقارنة مع أنظمة التصوير الضوئي التجارية 11، وخاصة بالنسبة للفي الكشف عن الجسم الحي من دوكسوروبيسين م.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
دوكس مضان يمكن كشفها في الجسم الحي باستخدام تصوير المتعدد عندما الأورام تحت الجلد. ومع ذلك، فإن جرعة علاجية فعالة من HerDox (0.004 ملغ / كلغ) تحت عتبة الكشف بعد جرعة واحدة. في المقابل، بعد 7 حقن يومية (1x/day لمدة 7 أيام)، وتراكم الورم والإبقاء على الجسيمات كافية لتمكين التصور من دوكس مضان.
فمن الأهمية بمكان عند العمل مع دوكس أو أي fluorophore أخرى لفي الجسم الحي التصوير التي تستخدم تقنية نظيفة........
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
المؤلف، دانيال فاركاس، هو رئيس مجلس إدارة التصوير الجزيئي الطيفي. الكتاب المتبقية ليس لها المصالح المتنافسة.
شكر وتقدير
وقد تم تمويل هذا العمل من المنح المقدمة إلى LKM-K من المعاهد الوطنية للصحة / المعهد الوطني للسرطان (R01CA129822 وR01CA140995). د. المدينة المنورة، وذلك بفضل C. Kauwe ري، M. M-Kauwe وD. Revetto لاستمرار الدعم.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مجهر متحد البؤر للمسح الضوئي بالليزر الفلوري | Leica | SPE | |
| em>In Vivo< / em> التصوير البصري | التصوير الجزيئي الطيفي | متعدد الأوضاع In Vivo< em> تصوير بصري | |
| Doxorubicin-HCl | Sigma-Aldrich | D4035 | |
| ماوس عاري (NU / NU) ، أنثى ، 6-8 أسابيع | نهر تشارلز | 088 | |
| MDA-MB-435 خلايا الورم البشرية HER2 + | NCI-Frederick Cancer DCTD مستودع الورم / خط الخلية | 0507292 | |
| 3/10 سم مكعب حقنة الأنسولين U-100 مع 29G × 1/2 "Ultra-FineIV إبرة متصلة بشكل دائم | BD | 309301 | |
| Delta T Chamber | Bioptechs | 04200417B |
المراجع
- Agadjanian, H., Chu, D., et al. Chemotherapy Targeting by DNA Capture in Viral Protein Particles. Nanomedicine. 7 (3), 335-352 (2012).
- Agadjanian, H., Ma, J., et al. Tumor detection and elimination by a targeted gallium corrole. Proc. Natl. Acad. Sci....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
