ووصف طريقة مرحلتين لإنشاء مرض الكلى المزمن (كد) في الفئران لويس عن طريق إزالة جراحيا 5/6th من كتلة الكلوي. مزيج من إجراء العمليات الجراحية، NOS-تثبيط واتباع نظام غذائي غني بالملح يؤدي إلى نموذج يشبه كد الإنسان، والسماح دراسة الآليات السببية وتطوير تدخلات علاجية جديدة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
5/6th استئصال الكلية في تركيبة مع حمية عالية الملح والنيتريك أوكسيد تثبيط سينسيز للحث على مرض الكلى المزمن في الفئران لويس
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
مرض مزمن في الكلى (كد) هو مشكلة عالمية. تباطؤ التقدم كد من الأولويات الصحية الرئيسية. منذ يتميز كد بواسطة خللا المعقدة من التوازن، النماذج الحيوانية تكاملية ضرورية لدراسة تطور وتقدم من كد. لدراسة تطوير التدخلات العلاجية كد والرواية في كد، ونحن نستخدم نموذج الاجتثاث استئصال الكلية 5/6th، وهو نموذج تجريبي من المعروف جيدا من مرض الكلى التدريجي، تشبه عدة جوانب من كد الإنسان. ويصل إجمالي التخفيض في كتلة الكلوي الكبيبي يسبب التدريجي وإصابة انبوبية-الخلالي، وفقدان النيفرون بقايا والتنمية من ارتفاع ضغط الدم النظامية والكبيبي. كما انه يرتبط مع تقدمية ضمن الكلية الشعرية الخسارة، التهاب الكبيبات و. عوامل الخطر لكد دائما تأثير على وظيفة بطانة الأوعية الدموية. لتقليد هذا، ونحن الجمع بين إزالة 5/6th من كتلة الكلوي مع أكسيد النيتريك (NO) استنزاف واتباع نظام غذائي عالي الملح. بعد وصول والتأقلم، وإعادة الحيواناتالوقت المتفق عليه لNO المانع سينسيز (NG-نيترو-L-أرجينين) (L-NNA) تستكمل لمياه الشرب (20 ملغم / لتر) لمدة 4 أسابيع، تليها استئصال إحدى الكليتين جانب الحق. بعد أسبوع واحد، يتم إجراء استئصال الكلية المجموع الفرعي (SNX) على الجانب الأيسر. بعد SNX، يسمح للحيوانات لاسترداد لمدة يومين تليها LNNA في مياه الشرب (20 ملغم / لتر) لفترة أخرى مدتها 4 أسابيع. واصلت اتباع نظام غذائي عالية من الملح (6٪)، على أن تستكمل في الأرض تشاو (انظر الإطار الزمني الشكل 1)، في كافة مراحل التجربة. ويتبع تطور الفشل الكلوي مع مرور الوقت من خلال قياس البلازما اليوريا، وضغط الدم الانقباضي وبروتينية. من قبل ستة أسابيع بعد SNX، وقد وضعت الفشل الكلوي. يتم قياس وظائف الكلى باستخدام حبوب "المعيار الذهبي" وحمض الهيبوريك شبه الأمينية (PAH) تكنولوجيا إزالة الألغام. ويتميز هذا النموذج من كد من انخفاض في معدل الترشيح الكبيبي (GFR) وتدفق البلازما الكلوي الفعال (ERPF)، ارتفاع ضغط الدم (ضغط الدم الانقباضي> 150 مم زئبق)، بروتينية (> 50 mg/24 ساعة) ويوريمية معتدل (> 10 ملم). وتشمل الميزات النسيجية الضرر انبوبية-الخلالي التي تعكسها التهاب، ضمور أنبوبي وتليف وتصلب الكبيبات التنسيق مما أدى إلى انخفاض كبير من الكبيبات صحي بين السكان بقايا (<10٪). المتابعة حتى بعد 12 أسبوعا تبين SNX مزيد من التقدم من كد.
المقدمة
ونظرا لطبيعته التقدمية، التي تلت نهاية المرحلة مرض الكلى، والاعتلال القلب والأوعية الدموية المرتبطة بها والوفيات، كد هي مشكلة متنامية للصحة العامة 1. وبالتالي تباطؤ التقدم كد من الأولويات الصحية الرئيسية. منذ يتميز كد بواسطة خللا المعقدة من التوازن، النماذج الحيوانية تكاملية ضرورية لدراسة تطور وتقدم من كد. تتكون الكلى من مجموعة واسعة من أنواع مختلفة من الخلايا التي تتفاعل مع بعضها البعض. لا يمكن أن تحاكي هذا التعقيد في المختبر.
لدراسة التدخلات العلاجية رواية في كد، ونحن نستخدم نموذج 5/6th استئصال الكلية الاجتثاث، وهو نموذج تجريبي معروفة من ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
يتم تنفيذ جميع التجارب وفقا لدليل تجريبي خطوط الأخلاقية الحيوانية للجنة الحيوان أوتريخت التجريبية. يتم تنفيذ البروتوكول بتوجيه وموافقة من مؤسسة رعاية الحيوان المؤلف واللجنة الاستخدام.
هو فعل كد في ذكر الفطرية لويس الفئران (تشارلز ريفر، Sulzfeld، ألمانيا) في سن 8 أسابيع. يتم إيواء الفئران تحت الظروف القياسية في بيئة، وعلى ضوء درجة الحرارة والرطوبة التي تسيطر عليها.
1. التحضير لعملية جراحية
- تعقيم الأدوات ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بعد استئصال الكلية المجموع الفرعي، يتم ترك حوالي 1/6th من مجموع كتلة الكلوي. ويبين الشكل 4 وزن الجزء إزالة من الكلية اليمنى مع المتوسط والانحراف المعياري في اثنين من التجارب السابقة. ينبغي للمرء أن نضع في اعتبارنا أنه في الأسبوع بعد UNX، يحدث تضخم في الكلية اليسرى؛ مشيرا إلى أن الوزن الذي يحتاج إلى إزالتها محسوبة على أساس وزن الكلية اليمنى دائما النتائج في أقل من إزالة 5/6th. ومع ذلك، لأنه ليس من الممكن تحديد وزن الكلية اليسرى أثناء الجراحة، وهذا هو السبيل الأكث.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الاستئصال الجراحي لل5/6th من كتلة الكلوي في الفئران لويس، جنبا إلى جنب مع اتباع نظام غذائي غني بالملح وNOS تثبيط مؤقت يؤدي إلى نموذج من كد كد يشبه الإنسان وتسمح دراسة الآليات السببية ونجاعة التدخلات العلاجية في كد.
نموذج استئصال الكلية 5/6th هو نموذج معروف وصفت على نطاق واسع لكد. ومع ذلك، ببساطة إزالة 5/6th من كتلة الكلى لا تؤدي إلى الفشل الكلوي الفوري في جميع سلالات الفئران. نحن نستخدم الفئران لويس إلى دراسة آثا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
نشكر كريستا دن Ouden لها المساعدة التقنية الممتازة. وأيد هذه التقنية ماليا من قبل مؤسسة الكلى الهولندية، ومنحة C06.2174. ويدعم MCV من قبل المنظمة الهولندية للأبحاث العلمية (NWO) VIDI-منحة 016.096.359.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوي > كاشف < / قوي> | |||
| L-NNA | سيجما ألدريتش | N5501 | ؛ |
| أسنان إسفنجية: ضمادات رغوة جل 1x1x1 سم | جونسون آند جونسون | Ms0005 | |
| Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p / 36 | Ethicon | V303H | |
| Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p / 36 | Ethicon | V392H | |
| بوبرينورفين (0.3 مجم / مل) | عن طريق صيدلي محلي بطلب من شركة ريكيت بينكيزر للمستحضرات الصيدلانية | غير معروفة | ؛ |
| <قوي > معدات < / قوي> | |||
| ملقط أنسجة الطلاب - أسنان 1x2 12 سم | أدوات العلوم الدقيقة (FST) | 91121-12 | ؛ |
| ملقط نمط الطالب القياسي | FST | 91100-12 | |
| Scissors | FST | 14010-15 | |
| 2X ملقط سيمكين | FST | 11008-13 | ؛ |
| مقص الطالب سوسن | FST | 91460-11 | |
| إبرة أولسن هيغار | FST | 12002-14 | |
< / p> |
المراجع
- AS, G. o, Chertow, G. M., Fan, D., McCulloch, C. E., Hsu, C. Y. Chronic kidney disease and the risks of death, cardiovascular events, and hospitalization. N. Engl. J. Med. 351 (13), 1296-1305 (2004).
- Fleck, C., Appenroth, D., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
