نحن تصف طريقة التصوير غير الغازية للتمييز مراحل التهابات. تسليم النظامية من كسيماترين يكشف مجالات التهاب حاد تعتمد على النشاط MPO في العدلات. في المقابل، حقن lucigenin يسمح التصور من التهاب مزمن تعتمد على النشاط Phox في الضامة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
في الجسم الحي أسلوب التصوير لتميز الالتهاب الحاد والمزمن
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الالتهاب هو أحد الجوانب الأساسية لكثير من الأمراض التي تصيب الإنسان. في هذا التقرير الفيديو، ونحن لشرح تقنيات التصوير تلألؤ بيولوجي غير الغازية التي تميز الالتهاب الحاد والمزمن في نماذج الماوس. مع تلف الأنسجة أو غزو الممرض، العدلات هي خط الدفاع الأول، ولعب دورا رئيسيا في التوسط في الاستجابة الالتهابية الحادة. كما تقدم رد فعل للالتهابات، وحيدات تعميم تهاجر تدريجيا إلى موقع الإصابة وتفرق في الضامة ناضجة، الذي توسط الالتهابات المزمنة وتعزيز إصلاح الأنسجة عن طريق إزالة الحطام الأنسجة وإنتاج السيتوكينات المضادة للالتهابات. حقن داخل الصفاق من كسيماترين (5-الأمينية-2 ،3-ثنائي هيدرو-1 ،4-phthalazinedione، ملح الصوديوم) تمكن من الكشف عن التهاب حاد توسط إلى حد كبير من الأنسجة تسلل العدلات. كسيماترين يتفاعل على وجه التحديد مع الفائق المتولدة داخل phagosomes من العدلات منذ النتائج تلألؤ بيولوجي من الميلوبيروكسيديز (MPO) رد فعل بوساطة. Lucigenin (مكرر-N-methylacridinium نترات) يتفاعل أيضا مع الفائق من أجل توليد تلألؤ بيولوجي. ومع ذلك، lucigenin تلألؤ بيولوجي مستقل من الخطة الرئيسية للعمليات وأنها تعتمد فقط على أوكسيديز NADPH بلعمية (Phox) في الضامة أثناء الالتهابات المزمنة. معا، وكسيماترين وlucigenin سماح التصور غير الغازية وتقييم طولية من مجموعات سكانية مختلفة بلعمية عبر مراحل التهابات حادة ومزمنة. ونظرا للدور المهم من التهاب في مجموعة متنوعة من الأمراض التي تصيب الإنسان، ونحن نعتقد أن هذا الأسلوب التصوير غير الغازية يمكن أن تساعد في التحقيق في أدوار الفرق من العدلات والبلاعم في مجموعة متنوعة من الحالات المرضية.
المقدمة
الالتهاب هو استجابة بيولوجية درجة عالية من التنظيم تشارك في مجموعة متنوعة من الأمراض التي تصيب الإنسان، بما في ذلك العدوى الميكروبية 1، 2 التئام الجروح، ومرض السكري 3، 4 السرطان، القلب والأوعية الدموية 5، 6 الاعصاب، وأمراض المناعة الذاتية 7. يتطلب التهاب الأنسجة التنسيق السليم لمختلف الخلايا المناعية من أجل تحقيق إزالة العوامل المسببة للأمراض، وإصلاح الأنسجة، وقرار المرض. العدلات والضامة وسطاء المناعة مفتاح من التهاب الأنسجة. في المرحلة الحادة من الالتهاب، والعدلات هي أول المستجيبين لمختلف المنبهات الضارة وتلف الأنسجة 8. العدلات يتسرب بسرعة من التداول إلى موقع الإصابة، حيث ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
ملاحظة: تم تنفيذ كافة الدراسات على الحيوانات تحت بروتوكولات المؤسسية المعتمدة والمبادئ التوجيهية رعاية الحيوان.
1. الكواشف وحلول
- حل سلطة النقد الفلسطينية لSC التلقيح: إعداد محلول المخزون من phorbol 12-13-ميريستات خلات (سلطة النقد الفلسطينية) في 5 ملغ / مل في DMSO. تخزين محلول المخزون في -20 درجة مئوية. قبل التلقيح، وذوبان الجليد الحل الأوراق المالية وتمييع إلى 1 ملغ / مل في برنامج تلفزيوني سلطة النقد الفلسطينية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
أجرينا التصوير تلألؤ بيولوجي طولية لتقييم التهاب حاد ومزمن في النماذج التجريبية التهاب. Phorbol 12-13-ميريستات خلات (سلطة النقد الفلسطينية) هو بروتين كيناز C قوية (بي كي سي) ناهض الذي ينشط Phox لإنتاج أنيون الفائق ومشغلات الاستجابات الالتهابية الحادة الشديدة 21. تسبب SC حقن 50 ملغ من سلطة النقد الفلسطينية في المجلس الوطني للمقاومة الفئران عارية تهيج الجلد السريع والتهاب حاد في مواضع الحقن 18، 22، 23. أجرينا التصوير يوميا لمدة 4 أيام مع أول الصور التي تم الحصو.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في هذا التقرير، ونحن يبرهن على وجود طريقة للتصوير تلألؤ بيولوجي غير الغازية من التهاب في الحيوانات الحية. الاستفادة من الانارة اثنين من ركائز، كسيماترين وlucigenin، لا يمكن للطريقة تمييز مراحل مختلفة من الالتهابات. ويرتبط تلألؤ بيولوجي كسيماترين مع العدلات في المرحلة الحادة من التهاب، بينما توسط تلألؤ بيولوجي lucigenin بواسطة الضامة في المرحلة المزمنة. صغيرة نسبيا (MW = 177.16 جم / مول) وغير مشحونة كهربائيا، وكسيماترين يمكن ان تخترق بسهولة كل من البلازما وغشاء phagosomal 25-2.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح في هذه الدراسة.
شكر وتقدير
وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة نانسي لوري ماركس. نشكر الدكتور نانسي E. كول لقراءة نقدية للمخطوطة. نشكر كين K. ونغ لمساعدته في إعداد هذا التقرير الفيديو.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) | Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO | P8139 | |
| عديد السكاريد الدهني من السالمونيلا المعوية < / em> النمط المصلي المعوي | Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO | L2012 | |
| لومينول (5-أمينو-2،3-ثنائي هيدرو-1،4-فثالازينيديون ، ملح الصوديوم) شركة | سيجما ألدريتش ، سانت لويس ، ميزوري | A4685 | ؛ |
| لوسيجينين (نترات مهريس-N-ميثيل أكريدينيوم) شركة | سيجما ألدريتش ، سانت لويس ، ميزوري | M8010 | ؛ |
| نظام التصوير الطيفي IVIS مع حزمة برامج Living Imaging 4.2 | Caliper LS / Perkin Elmer ، Hopkinton ، MA | & nbsp ؛ |
المراجع
- Premack, B. A., Schall, T. J. Chemokine receptors: gateways to inflammation and infection. Nat. Med. 2, 1174-1178 (1996).
- Singer, A. J., Clark, R. A. Cutaneous wound healing. N. Engl. J. Med. 341, 738-746 (1999).
- Wellen, K. E., Hotamisligil, G. S.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
