يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

استرجاع الجراحية، عزل و

11K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/51597

⸱

أبريل 30, 2014

في هذه المقالة

ملخص

للتطبيقات المستقبلية بمثابة التصحيح لإصلاح الدموع الجزئي للالرباط المتصالب الأمامي (ACL)، تم عزل ACL الإنسان الخلايا المشتقة من الأنسجة التي تم الحصول عليها خلال إجراءات ترميمية، وسعت في المختبر، ونمت على الأنسجة المهندسة والسقالات. ثم تم إجراء التصاق الخلوية والتشكل لتأكيد توافق مع الحياة على سطح السقالة.

الملخص

إصابة في الرباط الصليبي الأمامي هي مشكلة واجهت شيوعا في الأفراد الناشطين. حتى الدموع جزئية من هذا داخل المفصل في اربطة الركبة تؤدي إلى أوجه القصور التي تعوق النشاط الحيوي وظيفة والاستقرار. الخيارات الحالية لعلاج الدموع ACL جزئية تتراوح بين اللاجراحي، وإدارة المحافظ إلى خيارات جراحية متعددة، مثل: التعديل الحرارية، وإصلاح واحد حزمة والتعمير كاملة، وإعادة بناء الجزء التالف من الرباط الأصلي. دراسات قليلة، إن وجدت، وقد أثبتت أي طريقة واحدة لإدارة لتكون متفوقة على الدوام، وفي كثير من الحالات تستمر المرضى لإثبات عدم الاستقرار المستمرة و comorbidities الأخرى.

الهدف من هذه الدراسة هو تحديد مصدر الخلايا المحتملة لاستخدامها في وضع التصحيح الأنسجة المهندسة والتي يمكن تنفيذها في إصلاح من ACL ممزقة جزئيا. وقد تم تطوير بروتوكول رواية لتوسيع الخلايا المشتقة من patieاليلة تمر بمرحلة إعادة البناء ACL. لعزل الخلايا، والأنسجة هضمها مفروم hACL تم الحصول عليها أثناء إعادة البناء ACL في حل كولاجيناز. تم تنفيذ التوسع باستخدام DMEM/F12 المتوسطة تستكمل مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS) و 1٪ البنسلين / الستربتوميسين (P / S). ثم تم تخزين الخلايا في -80 درجة مئوية أو في النيتروجين السائل في تجميد المتوسطة التي تتكون من DMSO، FBS ومتوسطة التوسع. بعد ذوبان الجليد، ثم تم المصنفة الخلايا المشتقة hACL على الأنسجة المهندسة السقالة، PLAGA (حمض اللبنيك المشترك، الجليكوليك بولي) والسيطرة الأنسجة الثقافة البوليسترين (برنامج التعاون الفني). بعد 7 أيام، تم تنفيذ SEM لمقارنة التصاق الخليوي الى PLAGA مقابل مشروعات برنامج التعاون الفني السيطرة. تم تقييم مورفولوجيا الخلوية باستخدام المناعي تلطيخ. أظهرت SEM (المسح المجهر الإلكتروني) الميكروسكوب أن الخلايا نمت والالتزام على حد سواء PLAGA وبرامج التعاون الفني والأسطح ومتموجة فوق السطوح بعد يوم كامل 7. أظهرت المناعي تلطيخ العادي، غير المورفولوجي شددأنماط القاعدة على كل السطوح. هذه التقنية واعدة للتطبيقات في دوري أبطال آسيا التجديد وإعادة البناء.

المقدمة

الرباط الصليبي الأمامي (ACL) هو جرح عادة الرباط داخل المفصل في الركبة. يتم الإبلاغ عن حوالي 200،000 (ACL) إصابات سنويا في الولايات المتحدة. أكثر من 75٪ من مرضى الذين يعانون من إصابة الرباط الصليبي الأمامي تختار لجراحة العظام 1،2،3،4. وكثيرا ما أشار التدخل الجراحي نظرا لإمكانات الشفاء الفقراء بطبيعتها 3. وعادة ما يتم إنجاز إعادة البناء ACL عن طريق لطعم ذاتي أو طعم خيفي وتر. طعم ذاتي وطعم خيفي تمثل المعيار الذهبي لإعادة الإعمار كما تباهى معدلات نجاح عالية، وإصلاح خياطة الأولية، خيار العلاج الأخرى، وقد أظهرت معدلات فشل تصل إلى 94٪ 5،6،7.

الدموع الجزئي للACL تمثل 10٪ إلى 28٪ من كل الدموع ACL 8. في دراسة استطلاعية، نويس وآخرون يقدر أن 50٪ من المرضى الذين يعانون من الدموع الجزئي التي تؤثر على أكثر من نصف دوري أبطال آسيا تقدما لاستكمال دوري أبطال آسيا بعد عدم كفاية غيرالمعالجة الجراحية 9. وتبلغ دراسات أخرى عدم الاستقرار المستمرة وانخفاض وظيفة مع أقل من 30٪ من المرضى قادرين على العودة إلى ما قبل الإصابة مستوى النشاط 9،10،11،12،13. خيارات العلاج محدودة وتشمل طرائق المحافظة، وانكماش الحراري المتبقية ACL، أو إعادة بناء الرباط الصليبي الأمامي. في الآونة الأخيرة، كانت هناك زيادة في الاهتمام في إصلاح الأساسي المعزز. استخدام هذه التقنيات البيولوجية لتعزيز الإصلاحات خياطة الابتدائية 14. وقد حاولت البحوث الحديثة لحصاد مثل الوسيطة hACL الخلايا الجذعية المشتقة للتحايل على القيود الكسب غير المشروع، ولكن 31،32 صلاحية وفعالية هذه الخلايا لا يزال مجهولا. يبدو أن مصدر خلية مثالية لتطبيقات هندسة الأنسجة لتكون غير mesechymal-hACL المستمدة الخلايا الليفية.

وتركز الأبحاث الحالية على تحديد المواد المصفوفة مناسبة ومصدر الخلية لالسقالة هندسيا. هو الإجراء القياسي لACL ممزقة ليتم التخلص منها كما سوالنفايات rgical أثناء الجراحة إعادة الإعمار، ومع ذلك، قد يكون هذا الرباط التالفة مصدر الجودة لاقتناء الخلايا اللازمة لتطوير وتعزيز والأنسجة المهندسة المثالي استبدال ACL. وقد وضعت لدينا مختبر بروتوكول للتوسع في المختبر من هذه hACL الخلايا المشتقة المقطوع. باستخدام مصفوفة 2D المهندسة يملؤه الخلايا المشتقة hACL، قمنا بتصميم تصحيحا التي يمكن أن تزيد من إصلاح ACL جزئية وتعزيز الأربطة الممزقة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. استرجاع الجراحية

ملاحظة: تم الحصول على موافقة الاتحاد الدولي للرجبي لجمع جدعة ACL أثناء الجراحة إعادة الإعمار ACL. تم منح إعفاء الاتحاد الدولي للرجبي كما الجدعة ACL المستخدمة عموما تم تجاهل كنفايات الجراحية. استخدمت 20 مريضا لجمع جدعة ACL.

  1. إدارة التخدير العام والمضادات الحيوية قبل العملية وفقا للبروتوكول المؤسسة للمريض.
  2. تطبيق وقف النزف وتضخيم 100 ملغ أعلاه ضغط الدم الانقباضي.
  3. وضعه المريض في موقف ضعيف. جعل شق أفقي الأمامي الوحشي مع الركبة في 30-45 درجة الانحناء عن 5 مم البوابة وإدخال مبزل بالمنظار والكاميرا في الحقيبة فوق الرضفة في 30 درجة.
  4. إجراء تنظير التشخيص الروتيني.
  5. أدخل الدرجة الأولى وينضر الغشاء الزليلي الغشائي خلال ACL ممزقة.
  6. استخدام ماكينة حلاقة 4.5 مم وablator لتحديد جدعة ACL.
  7. استخدام منقار البط مريرة مباشرة إلى جمع جمعية مهندسي البترول متعددةcimens من الجدعة ACL المتبقية.
  8. الحفاظ على العينة في محلول ملحي في حاوية معقمة.
  9. إرسال عينات لعلم الأمراض لفك والتسليم النهائي للمنشأة المختبر.
  10. استعادة المريض وأداء الرعاية اللاحقة للعمليات الجراحية وفقا لبروتوكول المؤسسة.

2. الهضم الأنسجة وعزل hACL

  1. نقل الأنسجة ACL الإنسان الواردة من علم الأمراض إلى طبق بتري مع ملحي معقم / برنامج تلفزيوني (الفوسفات مخزنة المالحة).
  2. اللحم المفروم والأنسجة باستخدام مقص العقيمة إلى 1-2 مم 3 قطع وغسل الأنسجة المفروم مع المالحة 3 مرات على الأقل.
  3. هضم الأنسجة المفروم مع 0.4٪ في كولاجيناز DMEM/F-12 (50/50، 1X) متوسطة تستكمل مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS) و 1٪ البنسلين / الستربتوميسين لمدة 4-6 ساعة عند 37 درجة مئوية.
  4. الطرد المركزي الخلايا في 1،000 x ج لمدة 5 دقائق ثم resuspend الخلايا في المتوسط.
  5. غسل الخلايا مع متوسطة لمدة 2-3 مرات ثم قعيد / الثقافة في T-25 قوارير لمدة 2-3 أيام.

3. التوسع الخلوية، وتجميد والذوبان

  1. استخدام المجهر الضوئي لتصور الخلايا المستزرعة لمدة 2-3 أيام في T-25 قارورة.
  2. الحفاظ على الخلايا عند 37 درجة مئوية في DMEM/F-12 (50/50، 1X) متوسطة تستكمل مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS) و 1٪ البنسلين / الستربتوميسين (P / S).
    ملاحظة: تغيير وسائل الإعلام عندما يظهر خلايا الالتزام والتشكل القياسية. استخدام المجهر الضوئي لمراقبة الخلايا.
  3. غسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني متكدسة في يوم 7 (~ 1.3 X 10 6 خلية / القارورة). إضافة التربسين (0.5 غرام / لتر)، واحتضان الخلايا عند 37 درجة مئوية لمدة 5 دقائق. إضافة إلى الخلايا وسائل الاعلام لتحييد التربسين تعليق. تقسيم الخليط خلية الإعلام بين ثلاثة T-25 قوارير.
  4. غسل الخلايا متموجة مع برنامج تلفزيوني، إضافة التربسين (0.5 غرام / لتر)، و resuspend منهم في المتوسط ​​تحتوي على تجميد DMSO، FBS والمتوسطة كاملة (DMEM/F-12 متوسطة + 10٪ + 1٪ FBS P / S) في نسبة 01:02:07.
  5. متجرقارورة المبردة في -80 درجة مئوية إذا كان سيتم استخدام الخلايا في غضون شهر، وفي النيتروجين السائل إذا كان سيتم تخزين الخلايا لفترات أطول.
  6. ذوبان الجليد قارورة في 37 ° C حمام الماء لإعادة استخدامها.
    ملاحظة: عادة خلايا 90-95٪ البقاء على قيد الحياة.

4. تلفيق الأنسجة المهندسة 2-D بولي اللبنيك المشترك، حمض الجليكوليك (PLAGA) سقالة

  1. حل 1 غرام من PLAGA في 12 مل ثنائي كلورو ميثان في 20 مل التلألؤ قنينة ودوامة الحل لمدة 8 ساعة بسرعة ثابتة (800 دورة في الدقيقة).
    ملاحظة: وصف مفصل في 15 غوبتا وآخرون.
  2. نقل الحل المنحل إلى طبق بتري الزجاج واصطف مع ورقة حماية المفلورة.
  3. وضع طبق بتري تحت غطاء الفراغ لمدة 30 دقيقة. يترك طبق بيتري في -20 درجة مئوية خلال الليل ثم في درجة حرارة الغرفة. وضع أطباق بتري في مجفاد لضمان التبخر كاملة من المذيب للحصول على أفلام رقيقة من البوليمر.
  4. وضع فاي البوليمرLMS في مجفف لمدة 24 ساعة.
  5. قطع والأفلام البلاستيكية إلى 12 أقراص دائرية قطرها ملم وتخزينها في مجفف لحين الحاجة إليها.

5. المجهر الإلكتروني (SEM)

  1. غسل الخلايا (50،000 خلية / القرص) المصنفة على مشروعات برنامج التعاون الفني والسيطرة السقالة PLAGA مع برنامج تلفزيوني 7 أيام لاحقة لالبذر.
  2. استخدام 1.5٪ في غلوتارالدهيد 0.1 M كاكوديلات عازلة لإصلاح الخلايا و 2.5٪ أوسو 4 في 0.1 M كاكوديلات عازلة لتثبيت آخر.
  3. غسل الخلايا الثابتة مع 0.1 M كاكوديلات العازلة. تجف الخلايا الثابتة باستخدام المسلسل الجفاف الايثانول (50٪، 70٪، 80٪، 90٪ و 100٪) لمدة 15 دقيقة لكل منهما، وزيادة الجفاف في Hexamethyldisilazane (HMDS) بين عشية وضحاها.
  4. تنفيس غرفة SEM نظام تفل طلاء مع صمام زر ورفع الصفيحة العلوية.
  5. وضع العينات المجففة في الغرفة. خفض الصفيحة العلوية.
  6. تبديل مفتاح التحكم في ضخ لبدء اخلاء القاعة.
  7. مفتوحة الأرجون تسرب صمام. انتظرللفراغ أن تنخفض إلى 0.05 م بار.
  8. معطف العينات المجففة مع طبقة رقيقة (0.13 نانومتر) من الذهب / البلاديوم.
  9. العودة صمام تسرب الأرجون لموقفها مغلقة.
  10. تبديل مفتاح التحكم لإيقاف تشغيله.
  11. تنفيس الغرفة مع صمام زر ورفع الصفيحة العلوية.
  12. إزالة العينات وتخزينها في مجفف لمدة 24 ساعة.
  13. مراقبة العينات تحت المجهر الإلكتروني الماسح.

6. المناعي تلطيخ

  1. غسل الخلايا (50،000 خلية / القرص) المصنفة على مشروعات برنامج التعاون الفني والسيطرة السقالة PLAGA مع برنامج تلفزيوني 7 أيام لاحقة لالبذر.
  2. إصلاح الخلايا باستخدام الايثانول 70٪ (الباردة) لمدة 10 دقيقة.
  3. احتضان الخلايا في درجة حرارة الغرفة ثابتة مع 1٪ الأبقار مصل الزلال (BSA) في برنامج تلفزيوني وجود 0.05٪ تريتون X-100 لمدة 20 دقيقة.
  4. تزج العينات في 1٪ توين في درجة حرارة الغرفة لمدة 20 دقيقة.
  5. إضافة الماوس وحيدة النسيلة المضادة للβ-أكتين الأضداد (1:400)، واحتضان خلايا بين عشية وضحاهار في 4 درجات مئوية.
  6. غسل الخلايا مع 0.05٪ توين. إضافة الأجسام المضادة الثانوية (الماعز المضادة للماوس F (أ ب ') 2 جزء من مفتش مترافق مع لجنة التحقيق مضان، 1:400) إلى الخلايا واحتضان لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة.
  7. غسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني. وصمة عار وصمة عار مع الخلايا النووية وجبل باستخدام 80٪ الجلسرين.
  8. مراقبة الخلايا تحت المجهر متحد البؤر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يظهر نموذج العمل لاسترجاع الجراحية، والهضم الأنسجة وعزلة الإنسان الرباط المتصالب الأمامي (hACL) الخلايا المشتقة في الشكل 1. الخلايا هاجروا من إإكسبلنتس وانضمت إلى T-25 قوارير. وكانت هذه الخلايا المستزرعة لمدة 3 أيام ثم تم تصور تحت المجهر ضوء (الشكل 2). تم الحصول على أحادي الطبقة متموجة بعد يوم 7. وجود، خلايا قابلة للحياة صحية أشارت استرجاع ناجحة وثقافة الخلايا hACL مشتقة.

تم تحدي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

كان الهدف الأساسي من هذه الدراسة سقالة hACL/2D لاستخدام الخلايا التي تم الحصول عليها في التصحيح لزيادة إصلاح الأولية من الدموع ACL جزئية. إدارة اللاجراحي من الدموع ACL الجزئية قد تشمل فترة قصيرة من الشلل، تستعد، برنامج إعادة التأهيل التدريجي، وتقييمات المتابعة العادية 13،16،17. ومع ذلك، تظهر العديد من الدراسات أن العلاج المحافظ في الرياضيين ارتبط مع النتائج السيئة والفشل. باكلي وآخرون. تقييمها 25 المرضى الذين يعانون من الدموع ACL جزئي في وسيطة المتابعة وجدت أن ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن الكتاب أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.

شكر وتقدير

فإن الكتاب أود أن أنوه بدء صندوق وقسم الجراحة منحة بحثية من جامعة جنوب إلينوي، كلية الطب؛ ومنحة مؤسسة ميموريال الطبية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
طبق بتريفيشر العلمي08-757-103C
محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) فيشرScientificBP3994
كولاجينازجيبكو17018-029مخزن في 4 &# 176 ؛ متجر C
DMEM / F-12Cellgro10-092-CVفي 4 &# 176 ؛ C. دافئ في 37 &# 176 ؛ ج حمام مائي قبل الاستخدام.
مصل الأبقار الجنيني (FBS)متجر Gibco10082في -80 &# 176; C
Penicillin / StreptomycinLonza17-602EStore at 4 &# 176 ؛
أنابيب الطرد المركزي C - 15 ملقوارير Corning430790
T-25 BDFalcon3013
خليط التربسين فيرسنLonza17-161Eمخزن في 4 &# 176 ؛ C. دافئ في 37 &# 176 ؛ ج حمام مائي قبل الاستخدام.
DMSOفيشر ScientificBP231-100سائل قابل للاحتراق. يمكن أن يسبب تهيج الجلد والعين والجهاز التنفسي.
قوارير مبردةCorning430489
PLAGAPurac BiomaterialsPurasorb PLG8523Store at -80 &# 176 ؛ C
أقراص TCPSفيشر Scientific12-545-82
ثنائي كلورو الميثانفيشر ScientificAC36423-0010خطر الإصابة بالسرطان المحتمل. يحفظ في مكان جاف وبارد.
Bytac ورقةسانت جوبين أداء البلاستيك1420652
قارورة التلألؤفيشر Scientific03-339-21G
ألبومين مصل البقر (BSA)متجر Sigma AldrichA7906في 4 &# 176; C
توينفيشر ScientificBP337-500
الفأر المضاد للأجسام المضادة للأكتين (1 & # 176 ؛ أب)Sigma AldrichA5441في -20 &# 176 ؛ C
الجسم المضاد للماعز المضاد للفأر (2&# 176; Ab)تخزين إشارات الخلية4408عند -20 &# 176 ؛ C
Hoechst صبغSigma Aldrich14530Store at -20 &# 176 ؛ C
GlycerolFisher ScientificBP229-1
GlutaraldehydeFisher ScientificBP2547-1سام عن طريق الاستنشاق وفي حالة ابتلاعه. يسبب الحروق من جميع طرق التعرض.
Hexamethyldisilazaneفيشر ScientificAC43085-1000سائل وبخار قابل للاشتعال. يسبب الحروق من جميع طرق التعرض.
مقص معقمMcKesson25-716
جهاز طرد مركزيEppendorf5804R
مجهر ضوئيأوليمبوسCK40
حمام مائيحراري علمي2845
VortexLabnetVX-200
ألواح بتري زجاجيةفيشر ScientificS31473
شركة Acu-PunchAcudermP1225Acu-Punch لقطع أقراص Cacodylate
BufferSigma Aldrich97068سائل قابل للاشتعال ومسرطن ومهيج.
رابع أكسيد الأوزميومSigma Aldrich201030شديد السمية
Triton X-100Sigma AldrichT8787ضار إذا تم ابتلاعه
الإيثانولDecon Labs2705الابتعاد عن الحرارة والشرر واللهب وأشكال أخرى من أشكال الاشتعال.
التخدير العام / الموضعيAmphastar المستحضرات الصيدلانية1٪ ليدوكائين ، 0.25٪ بوبيفاكائين ، عوامل التخدير للتحريض والصيانة
المضادات الحيويةHospira0409-0805-01Ancef 1 g iv.
تنظير المفاصل: المبزلسميث وابن أخيه
، تنظير المفاصل ، الكاميراسميث وابن أخيه
، مقبض بالمنظار ، ومريرة
4.5 مم ، ماكينة حلاقةArthrex
، مسامير الفولاذ المقاوم للصدأ ،
Sputter CoaterPolaronE5400
أداء متجر تم استخدام ، ، مسامير تداخل

المراجع

  1. Johnson, R. J. The anterior cruciate ligament: A dilemma in sports medicine. Int J Sports Med. 3, 71-79 (1982).
  2. Owings, M. F., Kozak, L. F. Ambulatory and inpatient procedures in the United States, 1996. Vital Health Stats. 13, 1-119 (1998).
  3. Frank, C. B., Jackson, D. W. The science of reconstruction of the anterior cruciate ligament. J Bone Joint Surg Am. 79, 1556-1576 (1997).
  4. Miyasaka, K. C., Daniel, D. M., Stone, M. L., Hirshman, P. The incidence of knee ligament injuries in the general population. Am J Knee Surg. 4, 3-8 (1991).
  5. Taylor, D. C., Posner, M., Curl, W. W., Feagin, J. A. Isolated tears of the anterior cruciate ligament: over 30 year follow-up of patients treated with arthrotomy and primary repair. Am J Sports Med. 37 (1), 65-71 (2009).
  6. Liljedahl, S. O., Lindvall, N., Wetterfors, J. Early diagnosis and treatment of acute ruptures of the anterior cruciate ligament: a clinical and arthrographic study of forty-eight cases. J Bone Joint Surg Am. 47, 1503-1513 (1965).
  7. Oensten, M., Lysholdm, J., Gillquist, J. Suture of fresh ruptures of the anterior cruciate ligament: A 5 year follow up. Acta Orthop Scan. 55, 270 (1984).
  8. Buckley, S. L., Barrack, R. L., Alexander, A. H. The natural history of conservatively treated partial anterior cruciate ligament tears. Am J Sports Med. 17 (2), 221-225 (1989).
  9. Noyes, F. R., Mooar, L. A., Moorman, C. T. 3rd, McGinnis, H. G. Partial tears of the anterior cruciate ligament. Progression to complete ligament deficiency. J Bone Joint Surg Br. 71 (5), 825-833 (1989).
  10. Bak, K., Scavenius, M., Hansen, S., Norring, K., Jensen, K. H., Jorgensen, U. Isolated partial rupture of the anterior cruciate ligament. Long term followup of 56 cases. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc. 5 (2), 66-71 (1997).
  11. Fritschy, D., Panoussopoulos, A., Wallensten, R., Peter, R. Can we predict the outcome of a partial rupture of the anterior cruciate ligament? A prospective study of 43 cases. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc. 5 (1), 2-5 (1997).
  12. Sommerlath, K., Odensten, M., Lysholm, J. The late course of acute partial anterior cruciate ligament tears. A nine to 15 year follow-up evaluation. Clin Orthop. , 281-2152 (1992).
  13. Barrack, R. L., Buckley, S. L., Bruckner, J. D., Kneisl, J. S., Alexander, A. H. Partial versus complete acute anterior cruciate ligament tears: the results of nonoperative treatment. J Bone Joint Surg Br. 72 (4), 622-624 (1990).
  14. Murray, M. M. Current status and potential of primary ACL repair. Clin Sports Med. 28 (1), 51-61 (2009).
  15. Gupta, A., et al. Single walled carbon nanotube composites for bone tissue engineering. J Orthop Res. 9, 1374-1381 (2013).
  16. Fruensgaard, S., Johannsen, H. V. Incomplete ruptures of the anterior cruciate ligament. J Bone Joint Surg Br. 71, 526-530 (1989).
  17. Sandberg, R., Balkfors, B., Nilsson, B., Westlin, N. Operative versus non-operative treatment of recent injuries to the ligaments of the knee. A prospective randomized study. J Bone Joint Surg Am. 69, 1120-1126 (1987).
  18. Lamar, D. S., Bartolozzi, A. R., Freedman, K. B., Nagda, S. H., Fawcett, C. Thermal modification of partial tears of the anterior cruciate ligament. Arthroscopy. 21 (7), 809-814 (2005).
  19. Indelli, P. F., Dillingham, M. F., Fanton, G. S., Schurman, D. J. Monopolar thermal treatment of symptomatic anterior cruciate ligament instability. Clin Orthop. 407, 138-147 (2003).
  20. Smith, D. B., Carter, T. R., Johnson, D. H. High failure rate for electrothermal shrinkage of the lax anterior cruciate ligament: a multicenter follow-up past 2 years. Arthroscopy. 24 (6), 637-641 (2008).
  21. Buda, R., Ferruzzi, A., Vannini, F., Zambelli, L., Di Caprio, F. Augmentation technique with semitendinosus and gracilis tendons in chronic partial lesions of the ACL: clinical and arthrometric analysis. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc. 14 (11), 1101-1107 (2006).
  22. Sekiya, J. K., Golladay, G. J., Wojtys, E. M. Autodigestion of a hamstring anterior cruciate ligament autograft following thermal shrinkage: a case report and sentinel of concern. J Bone Joint Surg Am. 82 (10), 1454-1457 (2000).
  23. Farquharson-Roberts, M. A., Osborne, A. H. Partial rupture of the anterior cruciate ligament of the knee. J Bone Joint Surg Br. 65, 32-34 (1983).
  24. Rue, J. P., Ghodadra, N., Bach, B. R. Jr Femoral tunnel placement in single-bundle anterior cruciate ligament reconstruction: a cadaveric study relating transtibial lateralized femoral tunnel position to the anteromedial and posterolateral bundle femoral origins of the anterior cruciate ligament. Am J Sports Med. 36, 73-79 (2008).
  25. Carey, J. L., Dunn, W. R., Dahm, D. L., Zege, S. L., Spindler, K. P. A systematic review of anterior cruciate ligament reconstruction with autograft compared with allograft. J Bone Joint Surg. 91, 2242-2450 (2009).
  26. Murray, M. M., Martin, S. D., Martin, T. L., Spector, M. Histological changes in the human anterior cruciate ligament after rupture. J Bone Joint Surg Am. 82, 1387-1397 (2000).
  27. Andrish, J., Holmes, R. Effects of synovial fluid on fibroblasts in tissue culture. Clin Orthop Relat Res. (138), 279-283 (1979).
  28. Murray, M. M., Spindler, K. P., Ballard, P., et al. Enhanced histologic repair in a central wound in the anterior cruciate ligamentwith a collagen-platelet-rich plasma scaffold. J Orthop Res. 25, 1007-1017 (2007).
  29. Carter, T. R. Anterior cruciate ligament thermal shrinkage. Clin Sports Med. 21, 693-700 (2002).
  30. Perry, J. J., Higgins, L. D. Anterior and posterior cruciate ligament rupture after thermal treatment. Arthroscopy. 16, 732-736 (2000).
  31. Cheng, M. T., Yang, H. W., Chen, T. H., Lee, O. K. Isolation and characterization of multipotent stem cells from human cruciate ligaments. Cell Prolif. 42 (4), 448-460 (2009).
  32. Matsumoto, T., et al. Isolation and characterization of human anterior cruciate ligament-derived vascular stem cells. Stem Cells Dev. 21 (6), 859-872 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

خلايا مشتقة من الرباط الصليبي الأماميعزل الخلاياالهضم بالكولاجينازتوسيع الخلاياسِقالة PLAGAالمجهر الإلكتروني الماسحصبغ التألق المناعيبولي ستيرين لزراعة الأنسجة