يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

استخدام لل فيفو السابقين جهاز تشاندلر حلقة لتقييم توافق مع الحياة من التعديل أنابيب الدم البوليمرية

11.8K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/51871

⸱

أغسطس 20, 2014

 ,  ,  , 
1Division of Cardiology, Department of Pediatrics, The Children's Hospital of Philadelphia, 2University of Pennsylvania Perelman School of Medicine

في هذه المقالة

ملخص

يؤدي التعرض للدم لقنوات الدم البوليمرية إلى بدء تفاعل الجسم الغريب المتورط في المضاعفات السريرية. هنا ، يتم وصف جهاز Chandler Loop ، وهو أداة تجريبية تحاكي نضح الدم من خلال هذه القنوات. ينتج عن ملحق CD47 المؤتلف انخفاض الأدلة على تفاعل الجسم الغريب على هذه القنوات.

الملخص

يحدث رد فعل جسم غريب عند تقديم سطح الاصطناعية للجسم. يتميز امتصاص البروتينات في الدم والمرفق اللاحق وتفعيل الصفائح الدموية، الوحيدات / التصاق البلاعم والخلايا الأحداث يشير التهابات، مما يؤدي إلى مضاعفات ما بعد الإجرائية. جهاز تشاندلر حلقة هو نظام التجريبية التي تسمح للباحثين لدراسة التفاعلات الجزيئية والخلوية التي تحدث عند و perfused كميات كبيرة من الدم خلال قنوات البوليمرية. تحقيقا لهذه الغاية، وقد استخدم هذا الجهاز لتكون نموذجا فيفو السابقين السماح تقييم خصائص مضادة للالتهابات من مختلف التعديلات سطح البوليمر. وقد أظهرت مختبرنا أن قنوات الدم، تعديل تساهميا عبر الكيمياء تنشيط ضوئي مع CD47 المؤتلف، يمكن أن تمنح توافق مع الحياة على الأسطح البوليمرية. يمكن إلحاق CD47 على الأسطح البوليمرية تكون وسيلة فعالة لتعزيز فعالية قنوات الدم البوليمرية. لهاعين هي المنهجية التي تفصل الكيمياء تنشيط ضوئي يستخدم لإلحاق CD47 المؤتلف إلى قنوات الدم البوليمرية ذات الصلة سريريا واستخدام تشاندلر حلقة كنموذج خارج الحي التجريبي لدراسة التفاعلات الدم مع CD47 تعديل وسيطرة القنوات.

المقدمة

تتطلب العديد من الإجراءات السريرية، مثل تغيير شرايين القلب وغسيل الكلى، واستخدام قنوات الدم البوليمرية، وغالبا ما يترافق مع مضاعفات ما بعد الإجرائية 1. عندما مع perfused الدم، وهذه البوليمرات غير المشروع رد فعل جسم غريب (FBR)، مما أدى إلى امتصاص البروتينات في الدم والصفائح الدموية، الوحيدات / التصاق البلاعم، وإطلاق سراح السيتوكينات الموالية للالتهابات، وكلها تساهم مضاعفات ما بعد الإجرائية و / أو فشل الجهاز 2،3. وبالتالي، لا تزال استراتيجيات لمعالجة هذه المسألة مجالا هاما والمستمرة لبحوث المواد الحيوية. وقد حاول الباحثون لمعالجة هذه المشكلة عن طريق تعديل الدم الاتصال مع الأسطح النشطة بيولوجيا الجزيئات أو bioinert 4-6. وقد ركزت البحوث في المختبر لدينا على إلحاق CD47 المؤتلف (recCD47) إلى المواد الحيوية البوليمرية كاستراتيجية للتخفيف من FBR وزيادة فعالية هذه المواد. CD47 هو transmembr أعرب بتواجد مطلقالبروتين انو مع دور المعروفة في التهرب المناعي، منح صفة "الأنا" على التعبير عن خلايا 7-10 والعروض نعد في منح توافق مع الحياة عندما إلحاق السطوح البوليمرية 11-13. ، وأعرب عن إشارة التنظيمية بروتين ألفا (SIRPα)، وما شابه ذلك لمستقبلات CD47، وعضوا في عزر مثبط التيروزين استنادا-immunoreceptor (ITIM) المحتوية عائلة من البروتينات عبر الغشاء على خلايا المنشأ النخاعي 14. لقد أثبتنا سابقا أن CD47، عبر SIRPα بوساطة إشارات الخلية، بانخفاض ينظم-الاستجابات المناعية لالبولي يوريثان (PU) والبولي فينيل كلورايد (PVC) في في المختبر، خارج الحي، ونماذج في الجسم الحي 11-13.

المركزي للتحقيقات لدينا هو الكيمياء تنشيط ضوئي جديد نسبيا، الموصوفة هنا، في أي المجموعات ثيول رد الفعل كيميائيا يتم إلحاق تساهميا لأنابيب البوليمرية بتفاعل مع أنابيب البوليمر متعدد الوظائف (PDT بيسةفتاه)، تتألف من 2 pyridyldithio (PDT)، وبينزفينون photoreactive (BzPh) وpolyallylamine المعدلة كربوكسي 11-13. الحد المجموعات PDT إلحاق تساهميا مع تريس (2 carboxyethyl) الفوسفين هيدروكلوريد (TCEP) 11 غلة سطح thiolated التي يمكن أن تكون في وقت لاحق مع رد فعل الأنصاف العلاجية. وسبق تفصيله هنا 12،13، وكان رد فعل recCD47، مما تعديل مع إضافة بولي ذيل يسين-C محطة 12،13، مع Sulfosuccinimidyl-4- [N -maleimidomethyl] الهكسان الحلقي-1-الكربوكسيل (سلفو-SMCC) لمدة 1 ساعة لتوليد مجموعات ثيول رد الفعل، والسماح لتشكيل السندات monosulfide بين أنابيب وrecCD47 11. تم اختبار القدرة المضادة للالتهابات من السطوح CD47 بين functionalized، بحكم فيف س، وذلك باستخدام جهاز تشاندلر حلقة مع الدم البشري كله، الذي وصف في الأصل في عام 1958 لتكون نموذجا في المختبر من التخثر الخثاري 15. ويعتمد الجهاز علىنظام أنابيب مغلقة مملوءة جزئيا مع الهواء ومحرك دوار تعميم الدم عبر أنابيب 15. يوفر هذا النموذج التجريبي الفرصة لدراسة تأثير التعرض الدم على أسطح المعدلة وغير المعدلة وكذلك تأثير تلك التعديلات السطحية على علم وظائف الأعضاء من خلايا الدم.

recCD47 يمكن إلحاق مجموعة متنوعة من السطوح البوليمرية باستخدام هذه الكيمياء تنشيط ضوئي، ويمكن تقييم قدرتها المضادة للالتهابات من خلال الاستفادة من فيفو السابقين نموذج محاكاة ذات الصلة سريريا نضح الدم فوق السطوح البوليمرية 11،12. السريرية قنوات الدم تعديل درجة مع recCD47 تظهر أقل بكثير الصفائح الدموية والتهاب مرفق الخلية بالمقارنة مع البوليمرات غير معدلة عند التعرض للدم البشري في الجهاز. ووصف بالتفصيل خطوة بخطوة من هذه العملية تعديل أدناه.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. التعديل البوليمرية السطوح مع recCD47

ملاحظة: يتم تلخيص بروتوكول تخطيطي في الشكل رقم 1 يوضح الشكل 1A توليد-ثيول رد الفعل السطوح البوليمرية يوضح الشكل 1B-ثيول جيل من رد الفعل recCD47.

  1. يوم 1
    1. تحضير محلول PDT-BzPh (1 ملغ / مل) وبيكربونات البوتاسيوم (KHCO 3) (0.7 ملغ / مل) في الماء المعقم. يقلب بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية (حماية من الضوء).
  2. يوم 2
    1. قطع أنابيب البوليمرية إلى 40 سم قطع طويلة (طويلة بما يكفي لتناسب جميع أنحاء عجلات الدورية).
    2. نقع الأنابيب في محلول مائي 0.1٪ من hexacylpyridinium لمدة 90 دقيقة في درجة حرارة الغرفة على شاكر أو على جهاز تشاندلر حلقة. شطف الأنابيب مع 3X المياه المعقمة بعد 90 دقيقة نقع.
    3. تحمض حل PDT-BzPh من يوم 1 وذلك بإضافة 15٪ البوتاسيوم أحادي القاعدة فوسفات مائي (KH 2 ص 4). إضافة 50 ميكرولتر KH 2 PO 4 في مل من PDT-BzPh، وتشكيل الحل micellar غائم.
    4. نقع الأنابيب في حل PDT-BzPh لمدة 40 دقيقة في درجة حرارة الغرفة المحمضة على شاكر أو على الجهاز.
    5. شطف الأنابيب مع حمض الخليك المخفف (1: 1،000) مرة واحدة.
    6. فضح أنابيب للأشعة فوق البنفسجية لمدة إجمالية قدرها 60 دقيقة. تدوير أنابيب ¼ تتحول كل 15 دقيقة لأشرق المساحة بأكملها.
    7. نقع الأنابيب في حل 20 ملغ / مل بيكربونات البوتاسيوم (KHCO 3) لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة على شاكر أو على الجهاز.
    8. شطف الأنابيب مع 3X الماء المعقم وتخزينها في 4 درجة مئوية في الماء المعقم.
  3. يوم 3
    1. حل 5 ملغ سلفو-SMCC في 200 ميكرولتر ثنائي الميثيل (DMF) (تنبيه: نفذ في غطاء الدخان).
    2. إضافة 50 ميكرولتر من الحل سلفو-SMCC أعدت في الخطوة 1 و 0.1 مغم / مل من recCD47 حل بولي يسين، ويقلب لمدة 60 دقيقة في ريال عمانيدرجة الحرارة أوم.
    3. خلال 60 دقيقة ضجة، ديغا العقيمة Dulbecco والفوسفات مخزنة المالحة (DPBS) وتوضع جانبا.
    4. رد تنقية سلفو-SMCC recCD47 باستخدام 7K الوزن الجزيئي قطع تدور تحلية العمود فقا لتعليمات الشركة الصانعة. جمع النهائي التدفق من خلال (عالية الجودة ثيول رد الفعل recCD47) وتمييع إلى وحدة تخزين الضروري معطف الداخل من الأنبوب مع DPBS.
    5. شطف الأنابيب من يوم 2 مع عقيمة، نزع الغاز DPBS 3X.
    6. رد فعل السطح معدلة من أنابيب بمحلول مكون من 20 ملغ / مل مع تريس (2 carboxyethyl) الفوسفين هيدروكلوريد (TCEP) في DPBS نزع الغاز لأقل من 2 دقيقة. شطف مع أنابيب معقمة نزع الغاز DPBS 4X.
    7. إضافة recCD47 سلفو-SMCC رد فعل للأنابيب واحتضان بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية على شاكر أو على الجهاز.

2. المناعية الكمي لrecCD47 على السطوح التعديل

  1. شطف الأنابيب تعديلها ليكون كميا من يوم 3 الطرافةح DPBS 3X. مخزن الأنابيب لا تستخدم في القياس الكمي في DPBS في 4 درجات مئوية.
  2. استخدام 4 ملم خزعة لكمة لجعل عينات أنبوب مكررة ووضع اللكمات الخزعة في الآبار من 96 لوحة جيدا.
  3. إعداد سيطرة سلبية تتكون من أنبوب عينة معدلة لا تعامل مع الأجسام المضادة الكشف. يعد عنصر تحكم الأجسام المضادة التي تتكون من أنبوب عينة معدلة تعامل مع الأجسام المضادة الكشف. إعداد تعديل اختبار عينات أنابيب تعامل مع الأجسام المضادة الكشف.
  4. عينات كتلة مع ألبومين المصل البقري بنسبة 0.4٪ (BSA) في DPBS لمدة 60 دقيقة في درجة حرارة الغرفة على شاكر.
  5. بعد حظر، نضح BSA وشطف مع مخزنة المالحة تريس زائد 1٪ (TBST) 3X-20 توين، 10 دقيقة لكل منهما على شاكر.
  6. إعداد تخفيف العمل من الأجسام المضادة في 0.4٪ BSA فقا لتخفيف المصنعة الموصى بها لالمناعية. تمييع الأجسام المضادة البشرية CD47 B6H12-FITC 1: 100 في 0.4٪ BSA.
  7. إضافة 200 ميكرولتر من الأجسام المضادة لتخفيف الآبار المناسبة. Incubaضوابط السلبية مع الشركة المصرية للاتصالات 0.4٪ BSA فقط. يحضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 60 دقيقة على شاكر (حماية من الضوء).
  8. شطف مع TBST 3X، 10 دقيقة لكل منهما على شاكر. نضح TBST الماضي شطف وإضافة 200 ميكرولتر DPBS إلى الآبار عينة الأنبوب.
  9. جمع من خلال تدفق النهائي، الذي هو عالية الجودة ثيول رد الفعل CD47 المؤتلف وتمييع إلى وحدة تخزين الضروري معطف الداخلية من الأنابيب مع DPBS.
  10. قراءة FITC كثافة إشارة باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية مع الإثارة FITC (485 نانومتر) والانبعاثات (538 نانومتر) الإعدادات.
  11. حساب recCD47 بد أن سطح البوليمر على أساس القيم القياسية، وهو ما يمثل صناعة السيارات في مضان وغير محددة ملزمة من العينة الضابطة الأجسام المضادة.

بروتوكول جهاز 3. حلقة تشاندلر

يسعى مجلس المراجعة المؤسسية (IRB) الموافقة على بروتوكول جمع الدم وأبلغ الأوراق موافقة قبل الشروع في جمع عينات دم الإنسان. الحصول على المعلوماتrmed من موافقة المتبرع بالدم البشري.
ملاحظة: يظهر رسم بياني يصور الجهاز في الشكل 2.

  1. ملء حمام الماء مع الماء المقطر حتى حوالي 1/2 من العجلات قطر والمغمورة. إضافة ما يكفي من التبييض إلى حمام الماء لجعل محلول التبييض 10٪. مجموعة حمام المياه إلى 37 درجة مئوية ودرجة حرارة تسمح للتوازن.
  2. جمع محولات المعادن (كما هو موضح في الشكل 1B)، وأنابيب وأنابيب معدلة تعديل، والتجمع حول العجلات جهاز، كما هو مبين في الشكل 1C. التأكد من أن أنابيب يناسب سنججلي حول عجلة مع محول المعدنية في المكان.
  3. الحصول على 30 مل عينة الدم باستخدام بروتوكول افق IRB، في قارورة مملوءة مسبقا مع 2 مل من سترات مضادة للتخثر أو غيرها، ومزيج من قبل انقلاب لمنع تخثر مرة واحدة تم جمع العينة.
  4. إضافة حوالي 10 مل من الدم إلى كل أنبوب باستخدام صمام معدني والمحاقن، وترك بعض الهواء في الأنبوب. تأمين غطاء صمام وصدوير في اتجاه لمدة 3 ساعة.
  5. استنزاف الدم في كوب العادمة المعالجة باستخدام محلول التبييض 10٪ (أو على النحو المطلوب في السياسة المؤسسية).
  6. شطف بلطف الأنابيب الداخلية مع DPBS لإزالة كل آثار الدم. جمع من خلال تدفق في الدورق النفايات. التخلص من الدم وفقا لسياسة مؤسسية.
  7. تطهير أجهزة وأي دم الاتصال الأسطح باستخدام محلول التبييض 10٪ أو وفقا لسياسة مؤسسية.
  8. نماذج عملية لفلوري المجهر أو المجهر الإلكتروني كما هو موضح أدناه.

4. نيون المجهر والفرز الخلية

  1. إعداد بارافورمالدهيد 4٪ (PFA) حل (تنبيه: إجراء في غطاء الدخان).
  2. احتضان الأنابيب في حل PFA 4٪ بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية.
  3. بعد مرور فترة الحضانة بين عشية وضحاها، وإزالة 4٪ PFA وشطف الأفلام بلطف شديد مع DPBS.
  4. قطع الأنابيب إلى أقسام لفضح سطح التجويف للتلطيخ.
  5. وصمة عارقسم من أنابيب مع بضع قطرات من تصاعد سائل الاعلام مع 4 '، 6 diamidino-2-phenylindole (دابي) لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (حماية من الضوء). بعد تلطيخ، وشطف الأنبوب بلطف شديد مع DPBS للحد خلفية إشارة دابي.
  6. الصورة باستخدام المجهر الفلورسنت مجهزة مرشح دابي وكاميرا رقمية لحساب عدد الخلايا في 9 الحقول المحددة عمياء نظر تحت 200X التكبير.
  7. خلية سجل بحساب في مجال الرؤية وأداء التحليلات الإحصائية المناسبة لتحديد الدلالة الإحصائية للنتائج.

5. المجهر الإلكتروني

  1. إعداد 2٪ محلول غلوتارالدهيد (تنبيه: إجراء في غطاء الدخان).
  2. احتضان الأنابيب في حل غلوتارالدهيد 2٪ بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية.
  3. بعد مرور فترة الحضانة بين عشية وضحاها، وشطف بلطف 3X أنابيب مع DPBS.
  4. إعداد محلول 1٪ من رباعي أكسيد الأوزميوم (تحذير: خطر استنشاق حاد! استخدام في غطاء الدخان).
  5. احتضان الأنابيب في محلول 1٪ من رباعي أكسيد الأوزميوم لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.
  6. شطف بلطف 3X أنابيب مع DPBS.
  7. إعداد سلسلة من تركيزات الإيثانول (25٪، 50٪، 75٪، 95٪، والإيثانول بنسبة 100٪).
  8. يذوى الأنابيب بواسطة حضانة في سلسلة من تركيزات الإيثانول. في احتضان 25٪، 50٪، 75٪، و 95٪ من الإيثانول لمدة 20 دقيقة لكل منهما. احتضان في الإيثانول بنسبة 100٪ لمدة 30 دقيقة.
  9. نقطة فوق الحرجة تجف أنابيب مع CO 2 لمدة 45 دقيقة لإزالة كل الرطوبة.
  10. أقسام أنبوب جبل على كعب عينة مع عجينة الفضة أو الجرافيت.
  11. أقسام أنبوب معطف مع 12.5 نانومتر من الذهب والبلاديوم.
  12. دراسة في المجهر الإلكتروني الماسح.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

المدرة للثيول رد الفعل السطوح البوليمرية من خلال استخدام PDT-BzPh وTCEP جنبا إلى جنب مع ثيول رد الفعل recCD47 بولي يسين باستخدام SMCC يسمح المرفق من recCD47 على الأسطح البوليمرية. تتلخص عملية التعديل تخطيطي في الشكل 1. راحة من هذه العملية تعديل هو أنه يمكن تطبيقها على العديد من البروتينات المختلفة والعديد من الأسطح البوليمرية المختلفة، على افتراض البروتين يمكن تعديلها مع ما يكفي من مجموعات متفاعلة كيميائيا مثل lysines التي تحتوي على الأمينات و أن البوليمر لديه اله...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الكيمياء تنشيط ضوئي (ملخصة في الشكل 1) يسمح لتعديل أي سطح تقريبا البوليمر التي تحتوي الهيدروكربونات كافية لتسهيل PDT-BzPh التعلق واللاحقة الأشعة فوق البنفسجية إلى الصور تفعيل PDT-BzPh. Functionalizing سطح البوليمر مع جماعات ثيول تفاعلية تسمح للمرفق لاحق مجموعة من جزيئات قابلة للاختبار من الفائدة. في دراساتنا معينة اخترنا المؤتلف CD47 11-13. الكيمياء اقتران معين التي استخدمناها المشاركة رد فعل مجموعات أمين البروتين مع الصليب رابط bifunctional SMCC 1...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

وأيد البحث عنها في هذا المنشور من قبل المعهد الوطني للتصوير الطبية الحيوية والهندسة الحيوية، تحت رقم R21 جائزة EB015612 (SJS)، والوطني للقلب والرئة والدم المعهد، تحت رقم جائزة T32 HL007915 (JBS وRJL) من الوطني معهد الصحة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
16٪ بارافورمالدهيد (PFA)Thermo Scientific58906تحذير! استخدم في غطاء الدخان
25٪ GlutaraldehydeVWRAAA17876-AP   ؛أنذر! استخدم في شفاط الدخان
2-بيريديلديثيو، البنزوفينون (PDT-BzPH)يتم تصنيعه في المختبرغير
ألبومين مصل الأبقار (BSA)سيجماA3059-100G
ستراتسيجماS5770-50ML
كاميرا رقميةلايكاDC500خارج الإنتاج
ثنائي ميثيل فورماميد (DMF)سيجما270547-100 ملالحذر! استخدم في غطاء الدخان
Dulbecco s محلول ملحي مخزن بالفوسفات (DPBS)Gibco / Life Technologies14190-136
مجهر الفلورسنتنيكونTE300
حمض الخليك الجليديفيشر ScientificA38-212الحذر! استخدم في غطاء الدخان
Human CD47 (B6H12) &ndash ؛ FITC الأجسام المضادةسانتا كروز التكنولوجيا الحيويةSC-12730
أوزميوم رباعي أكروسالعضوية197450050الحذر! استخدم في غطاء الدخان
بيكربونات البوتاسيوم (KHCO3< / sub>)Sigma237205-100G
فوسفات البوتاسيوم أحادي القاعدة (KH2< / sub>PO4< / sub>)SigmaP5655-100G
PVC Tubing (طقم إجراءات القلب والأوعية الدموية)Terumo CardiovascularSystems 60050ستعمل معظم الأنابيب السريرية
مسح الإلكترون مجهرJEOLJSM-T330A
كلوريد الصوديوم (NaCl) فيشرScientificBP358-212
MicroplateReader الأجهزة الجزيئيةSpectramax Gemini EM & nbsp ؛
Sulfo-SMCCSigmaM6035-10MGحساسة للرطوبة!
تريس (2-كربوكسي إيثيل) فوسفين (TCEP-HCl)Thermo Scientific20491
Tween-20Bio-Rad170-6531
Vectashield مع DAPIFisher ScientificH-1200حساس للضوء!
زيبا سبين ديساليت كول – 7 كيلو MWCOحراري علمي89891
متوفر

المراجع

  1. Bruck, S. D. Medical applications of polymeric materials. Med. Prog. Technol. 9 (1), 1-16 (1982).
  2. Anderson, J. M., Rodriguez, A., Chang, D. T. Foreign body reaction to biomaterials. Semin. Immunol. 20 (2), 86-100 (2008).
  3. Levy, J. H., Tanaka, K. A. Inflammatory response to cardiopulmonary bypass. Ann. Thorac. Surg. 75, S715-S720 (2003).
  4. Sperling, C., Maitz, M. F., Talkenberger, S., Gouzy, M. F., Groth, T., Werner, C. In vitro blood reactivity to hydroxylated and non-hydroxylated polymer surfaces. Biomaterials. 28, 3617-3625 (2007).
  5. Sperling, C., Schweiss, R. B., Streller, U., Werner, C. In vitro hemocompatibility of self-assembled monolayers displaying various functional groups. Biomaterials. 26, 6547-6457 (2005).
  6. Vasita, R., Shanmugam, I. K., Katt, D. S. Improved biomaterials for tissue engineering applications: surface modification of polymers. Curr. Top. Med. Chem. 8, 341-353 (2008).
  7. Subramanian, S., Parthasarathy, R., Sen, S., Boder, E. T., Discher, D. E. Species- and cell type-specific interactions between CD47 and human SIRPalpha. Blood. 107 (6), 2548-2556 (2006).
  8. Tsai, R. K., Discher, D. E. Inhibition of 'self' engulfment through deactivation of myosin-II at the phagocytic synapse between human cells. J Cell Biol. 180 (5), 989-1003 (2008).
  9. Berg, T. K., vander Schoot, C. E. Innate immune 'self' recognition: a role for CD47-SIRPalpha interactions in hematopoietic stem cell transplantation. Trends Immunol. 29 (5), 203-206 (2008).
  10. Oldenborg, P. A., Zheleznyak, A., Fang, Y. F., Lagenaur, C. F., Gresham, H. D., Lindberg, F. P. Role of CD47 as a marker of self on red blood cells. Science. 288 (5473), 2051-2054 (2000).
  11. Stachelek, S. J., et al. The effect of CD47 modified polymer surfaces on inflammatory cell attachment and activation. Biomaterials. 32 (19), 4317-4326 (2001).
  12. Finley, M. J., Rauva, L., Alferiev, I. S., Weisel, J. W., Levy, R. J., Stachelek, S. J. Diminished adhesion and activation of platelets and neutrophils with CD47 functionalized blood contacting surfaces. Biomaterials. 33, 5803-5811 (2012).
  13. Finley, M. J., Clark, K. A., Alferiev, I. S., Levy, R. J., Stachelek, S. J. Intracellular signaling mechanisms associated with CD47 modified surfaces. Biomaterials. 34, 8640-8649 (2013).
  14. Ravetch, J. V., Lanier, L. L. Immune inhibitory receptors. Science. 290, 84-89 (2000).
  15. Chandler, A. B. In vitro thrombotic coagulation of blood: a method for producing a thrombus. Lab Invest. 7, 110-114 (1958).
  16. Thorsen, T., Klausen, H., Lie, R. T., Holmsen, H. Bubble-induced aggregation of platelets: effects of gas species, proteins, and decompression. Undersea Hyperb Med. 20 (2), 101-119 (1993).
  17. Ritz-Timme, S., Eckelt, N., Schmidtke, E., Thomsen, H. Genesis and diagnostic value of leukocyte and platlet accumulations around “air bubbles” in blood after venous air embolism. Intl J of Legal Med. 111 (1), 22-26 (1998).
  18. Miller, R., Fainerman, V. B., Wüstneck, R., Krägel, J., Trukhin, D. V. Characterization of the initial period of protein adsorption by dynamic surface tension measurements using different drop techniques. Colloids and Surfaces A. 131 (1-3), 225-230 (1998).
  19. Oeveren, W. V., Tielliu, I. F., de Hart, J. Comparison of modified chandler, roller pump, and ball valve circulation models for in vitro testing in high blood flow conditions: application in thrombogenicity testing of different materials for vascular applications. Int J Biomater. 2012, (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

نموذج خارج الجسم الحيتعديل CD47 المؤتلفكيمياء التنشيط الضوئيتقييم التوافق الحيويتحليل التصاق الخلاياالمجهر الفلوريالمجهر الإلكتروني الماسحنموذج تروية الدم
استخدام لل فيفو السابقين جهاز تشاندلر حلقة لتقييم توافق مع الحياة من التعديل أنابيب الدم البوليمرية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.