يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

العظام مكيفة المتوسطة: إعداد والأحيائي

11K مشاهدة

DOI:

10.3791/52707

يوليو 8, 2015

في هذه المقالة

ملخص

وصفنا هنا كيفية إعداد المتوسطة مكيفة العظام (BCM) واختبار نشاطه في المختبر.

الملخص

وتستخدم على نطاق واسع ترقيع العظام ذاتي في الفم والوجه والفكين جراحة، طب العظام، والكسور. ترقيع العظام ذاتي ليس فقط استبدال العظام في عداد المفقودين، كما أنها تدعم عملية معقدة من تجديد العظام. ويعزى هذا السلوك مواتية لطعم ذاتي لخصائص ثلاثة: osteoconductivity، osteogenicity، وosteoinductivity. ومع ذلك، هناك جانب آخر: العظام ترقيع الافراج عن عدد لا يحصى من الجزيئات، بما في ذلك عوامل النمو، والتي يمكن أن تستهدف خلايا اللحمة المتوسطة العاملة في تجديد العظام. خصائص نظير الصماوي من ترقيع العظام يمكن دراستها في المختبر عن طريق استخدام المتوسطة مكيفة العظام (BCM). هنا نقدم بروتوكول بشأن كيفية إعداد المتوسطة مكيفة العظام من الأصلي القشرية خنزير العظام، والعظام التي خضعت المعالجة الحرارية أو التنقية. الخلايا يمكن أن يتعرض مباشرة لBCM أو المصنف على المواد الحيوية، مثل الأغشية الكولاجين، غارقة في السابق مع BCM. نعطي أمثلة لفي المختبر bioassaيس مع خلايا اللحمة المتوسطة على التعبير عن TGF-β الجينات تنظيمها. يجب على البروتوكولات المعروضة يشجع على مواصلة الكشف عن الآثار نظير الصماوي من ترقيع العظام أثناء تجديد العظام وفتح مسار للأبحاث متعدية في مجال واسع من الجراحة الترميمية.

المقدمة

ويستخدم على نطاق واسع العظم ذاتي لسد العيوب التي حدثت نتيجة للتشوه، جراحة resective، والجراحة الترميمية الصدمة، وقبل الزرع وضع 1،2. فهم المبادئ البيولوجية لكيفية دعم ترقيع العظام عملية الكسب غير المشروع التوحيد ليست المفتاح الوحيد لفهم لماذا تعتبر طعم ذاتي لتكون معيار الذهب في الجراحة الترميمية، بل هو أيضا الكترونية لتصميم محسن للبدائل العظام 3. ومع ذلك، الكسب غير المشروع توحيد أسرع مع العظم ذاتي مقارنة بدائل العظام 4،5. وبالتالي، لا بد من الكشف عن الآليات الجزيئية والخلوية التي تجعل العظام ذاتي فعالة جدا لدعم تجديد العظام.

هنا....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. إعداد BCM

  1. الحصول على الفك السفلي الخنازير من جزار المحلية الطازجة قدر الإمكان. وضع الفك السفلي على سطح ثابت والافراج عن سمك رفرف كامل اهتماما خاصا بعدم مغادرة أي نوع من الأنسجة الرخوة أو السمحاق تعلق على العظام. العمل في بيئة نظيفة دون الحاجة للعمل تحت غطاء تدفق.
  2. مرة واحدة يتم تحريرها سمك رفرف كامل، واستخدام مكشطة العظام لحصاد رقائق العظام من الجانب الشدق. يرجى ملاحظة أن مكشطة العظام يجب أن تكون حادة. التعامل بحزم مكشطة العظام ومع الحركات الطويلة بجمع العظام. تجاهل رقائق العظام الصغيرة ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يتم إعداد العظام مكيفة المتوسطة من رقائق العظام الخنزير الطازج. يظهر محة عامة عن عملية لإعداد BCM واستخدام المواد الحيوية في تركيبة مع BCM في الشكل 1 والشكل 2 على التوالي. أثناء إعداد BCM، فمن المهم الحصول على رقائق العظام كبيرة مع الحركات طالما حركات قصيرة أو رقائق العظام الصغيرة جدا يمكن أن تؤثر على نوعية BCM النهائي. يمكن السيطرة على نوعية BCM عن طريق تحليل التعبير الجيني الجينات المستهدفة BCM: ADM، PTX3، IL11، IL33، NOX4 وPRG4 (الشكل 3). ADM و.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

مكيفة العظام المتوسطة يعكس النشاط التي تم إصدارها من ترقيع العظام خلال المراحل الأولى من تجديد العظام. بروتوكول الموصوفة هنا يمكن تكييفها لدراسة استجابة من أنواع مختلفة من الخلايا المشاركة في تجديد العظام. وعلاوة على ذلك، فإن بروتوكول يمكن استخدامها لإعداد المتوسطة مشروطة من معالجتها العظم أو العظام الحشو. طرق سهلة لأداء والاعتماد على مفهوم بسيط: العوامل المفرج عنهم من مختلف العظم الأصلي ومعالجتها. فهم كيفية BCM يؤثر على خلايا اللحمة المتوسطة يمكن أن تساعد في معرفة المزيد عن توحيد.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لديهم ما يكشف. تلقى جوردي Caballé-سيرانو على منحة دراسية من مؤسسة أبحاث طب الأسنان والتعليم، بازل، سويسرا.

شكر وتقدير

يود المؤلفون أن يشكروا كاثرين سوليوز على مساعدتها الماهرة.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مكشطة العظام المحلية للخنازير
Hu-FriedyPPBUSE2/36
المضادات الحيوية & amp; AntimicoticsAll Life Technologies15240-062
أغشية الكولاجين (Bio-Gide)Geistlich
Fetal CalfSerum Invitrogen Corporation16030074
DMEMInvitrogen Corporation21885-025

طقم عزل الحمض النووي الريبي عالي النقاء
Roche11828665001
Transcriptor First مجموعة توليف Strand cDNARoche4379012001
PrimersMicrosynth
SYBR Green (ل Q-RT-PCR)Roche4673484001
PBSRoche11666789001

المراجع

  1. Buser, D. Long-term Stability of Early Implant Placement with Contour Augmentation. Journal of dental research. , (2013).
  2. Chiapasco, M., Casentini, P., Bone Zaniboni, M. augmentation procedures in implant dentistry. The International jour....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

طعوم العظامالخلايا الجذعية الميزنكيميةتحليل التعبير الجينيتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقيأغشية الكولاجينتأشير عامل النمو التحويلي بيتاتجديد العظاممقايسة حيوية في المختبرالتأثيرات الجوارية