مقالة منهجية

احتياطات السلامة وإجراءات التشغيل في (A) مختبر BSL-4: 2. الممارسات العامة

17.2K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/53600

⸱

أكتوبر 3, 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Integrated Research Facility at Frederick, National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID), National Institutes of Health (NIH)

في هذه المقالة

إشعار تصحيح

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

ملخص

يعد إجراء المقايسات الفيروسية في مختبر BSL-4 أكثر تعقيدا مقارنة بالعمل في مختبر BSL-2 بسبب احتياطات السلامة الإضافية المطلوبة. هنا ، نقدم نظرة عامة على الممارسات والإجراءات المستخدمة داخل مختبر BSL-4 توضح الاستخدام المناسب لخزانة السلامة البيولوجية من الفئة الثانية ، وإدارة / التخلص من النفايات ، وإزالة العينات.

الملخص

عمل في مختبر الاحتواء مستوى السلامة الحيوية 4 (BSL-4) يتطلب وقتا واهتماما كبيرا بالتفاصيل. فإن العمل نفسه الذي يتم في مختبر BSL-2 مع مسببات الأمراض غير عالية نتيجة أن تتخذ لفترة أطول كثيرا في إعداد BSL-4. هذه الزيادة في متطلبات الوقت ويرجع ذلك إلى العديد من العوامل التي تهدف إلى حماية باحث من العدوى المكتسبة من المختبر، وبيئة العمل من التلوث المحتمل والمجتمع المحلي من احتمال إطلاق سراحهم من مسببات الأمراض عالية نتيجة. داخل المختبر، يتم تقييد الحركة بسبب خراطيم الهواء تعلق على الدعاوى سلامة كامل الجسم إلزامية. وبالإضافة إلى ذلك، لا بد من تطهير كل بند من البنود التي تم إزالتها من خزانات الدرجة الثانية للسلامة الأحيائية (BSCs). يجب تدريب المتخصصين مختبر في ممارسات مختبر BSL-4 ويجب أن تظهر عالية الكفاءة في المهارات التي تقوم بها. محور هذه المقالة هو لتوضيح الإجراءات والتقنيات لضمان مختبر ب المناسبةiosafety ودقة التجريبية باستخدام معيار فحص اللوحة الفيروسي كإجراء سبيل المثال. على وجه الخصوص، والتقنيات المناسبة للعمل بأمان في بيئة BSL-4 عند إجراء التجربة سيتم التركيز بصريا. وتشمل هذه التقنيات: إنشاء BSC الدرجة الثانية للتجارب، والتنظيف السليم للش.م.ب الدرجة الثانية عند الانتهاء من العمل، وإدارة النفايات والتخلص الآمن من النفايات المتولدة داخل مختبر BSL-4، وإزالة عينات المعطل من داخل BSL- 4 المختبر إلى المختبر BSL-2.

المقدمة

كما سلامة العاملين في المختبرات التعامل مع مسببات الأمراض عالية نتيجة (أي مواد الوقاية عدوى ولا خيارات العلاج موجودة) أمر بالغ الأهمية، أنشأت وزارة الصحة والخدمات البشرية مبادئ توجيهية لتشييد مرافق وأفضل الممارسات لإجراء آمن للعمل مع مسببات الأمراض في الطب الحيوي و المختبرات الطبية من منظور السلامة الأحيائية 1. من خلال التشريع والتنظيم، وأصبحت العديد من الممارسات والإجراءات المتطلبات الإلزامية التي يجب اتباعها للعمل مع هذه الجراثيم. في الولايات المتحدة، مسببات الأمراض التي تنتقل بسهولة من شخص لآخر، تؤدي إلى ارتفاع معدلات إماتة الحالات، و / أو لديها القدرة على التأثير كبيرا على الصحة العامة والإرهاب البيولوجي، يتم تصن....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. الدخول مختبر

  1. جمع جميع المستلزمات من مختبر BSL-2 للتجربة (على سبيل المثال، الخلايا، وسائل الإعلام، والمواد الاستهلاكية) قبل الدخول إلى المختبر BSL-4.
  2. استكمال إجراءات دخول BSL-4 (المبينة بالتفصيل في إشارة 7).

2. إعداد الدرجة الثانية للسلامة الأحيائية مجلس الوزراء في مختبر BSL-4

  1. مرة واحدة داخل المختبر BSL-4....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

وفقا للإجراءات المناسبة داخل المختبر BSL-4 حاسمة لضمان إنجاز آمنة وفعالة من المقايسات. من خلال الإشارة إلى المرجعية الداخلية اليومية الانتهاء (الشكل 1)، وموظفي المختبر التأكد من أن المعدات تعمل بشكل كامل. سليم المواقع الجسم في وسط ش.م.ب يضمن أن يتم تنفيذ هذه التجربة في ظل ظروف تدفق الهواء الأمثل (الشكل 2). يتم تخفيف عينة فيروس متسلسل للحصول على لوحات التي لديها 30-300 لويحات في لوحة (الشكل 3A) وتحد.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

عمل في مختبر BSL 4 يتطلب قدرا كبيرا من الوقت ومزيدا من الاهتمام بالتفاصيل. أي نوع من العمل في هذه البيئة تتطلب تدريبا جيدا وشاملة، وأصحاب الضمائر الحية. يوفر معيار لوحة الفحص الفيروسي نموذجا دقيقا لإجراء شائع للعمل مع مسببات الأمراض عالية نتيجة في مختبر BSL-4، كما ينطوي على فحص العديد من المفاهيم الرئيسية التي يجب تدريب العاملين في المختبرات.

أول مفهوم الرئيسي هو الاستخدام الصحيح وتطبيق الممارسات الآمنة في الدرجة.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

لا يعكس محتوى هذا المنشور بالضرورة وجهات نظر أو سياسات وزارة الصحة والخدمات الإنسانية الأمريكية (DHHS) أو المؤسسات والشركات التابعة للمؤلفين. تم تمويل هذا العمل جزئيا من خلال العقد الرئيسي لمعهد باتيل التذكاري مع المعهد الوطني الأمريكي للحساسية والأمراض المعدية (NIAID) بموجب العقد رقم. HHSN272200700016I. قام M.R.H. ، D.P. ، L.B. ، K.J. و JW بهذا العمل كموظفين في معهد باتيل التذكاري. المقاولون من الباطن لمعهد باتيل التذكاري الذين قاموا بهذا العمل هم: SM كموظف في MRI Global. M.G.L. كموظف في معهد لوفليس لأبحاث الجهاز التنفسي ، Inc. ؛ و J.H.K. كموظف في شركة Tunnell Government Services، Inc.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
ميكرو كيم بلسالوطنية للكيماويات255
إيثانولفيشر BP2818500
2 مل ألواح الآبار العميقة 96فيشر278743
10 مل ماصة فيشر المصلية13-678-11E
25 مل ماصة فيشر مصلية13-678-11
ألواح 6 آبارفيشر140675
كريستال البنفسجيسيجماHT90132-1 لتر
10٪ فورمالين محايدفيشر22-050-105
التراجاكانثفيشر50-702-2000   ؛
20 & مو ل نصائح الماصةفيشر21-402-550
200 & ل نصائح الماصةفيشر21-402-561
1,000 مو ؛ ل نصائح الماصةفيشر21-402-581
DMEMLonza12-604Q
FBSSigmaF2442-500mL
البنسلين / StreptomycinLonza17-602E
2x EMEMجودة البيولوجية115-073-101
ماصةدروموند4-000-101
1,000 & ل ماصة   ؛Rainin  L-1000XLS +
200 مو ؛ ل ماصة   ؛Rainin  L-200XLS +
12-Well ، متعدد القنوات 200 مو ؛ ل ماصةRaininL12-200XLS +
8-Well ، متعددة القنوات 1،000 مو ؛ ل ماصةRaininLA8-1200XLS
أتشهدإكسبرس للمستلزمات الطبية   ؛MMM12192
الأوتوكلافGetingeGEB 2404 AMB-2
حقيبة الأوتوكلاففيشر01-828E
2،000 مل دورقفيشر02-591-10H
علبة الأوتوكلاففيشر13-359-20B
ماصةفيشر13-361-5
37 درجة ؛ C حاضنةفيشرWU-39321-00
Biohazard يمكنRubbermaid التجاريةFG614500 الأحمر
الأوتوكلاف الشريطفيشر15-903
قضيب الأوتوكلافالمصنوع من IRF مرفقN / A
Light BoxFisherS11552
Heat SealerFisherNC9793612 
أكياس ختم الحرارةفيشر01-812-25H
حقيبة بيولوجيافيشر01-828E
مختبرات مخزن صينية

المراجع

  1. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. 5th edn. Chosewood, L. C., Wilson, D. E. , , U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. Available from: http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/ (2009).
  2. Bioterrorism agents/diseases by category. , Centers for Disease Control and Prevention. Atlanta, GA, USA. Available from: http://emergency.cdc.gov/agent/agentlist-category.asp (2014).
  3. Executive order 13546 -- Optimizing the security of Biologi....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

تصحيح


Formal Correction: Erratum: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices
Posted by JoVE Editors on 12/05/2016. Citeable Link.

A correction was made to the authors section in: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices

One of the authors names was corrected from:

Nicole Joselyn

to:

Nicole Josleyn

الوسوم

مقالات ذات صلة