يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

القياسات المكانية للالإرواء، الخلالي الضغط السائل والليبوزومات تراكم في الأورام الصلبة

7.3K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/54226

⸱

أغسطس 18, 2016

 ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Biophysics, University of Toronto, 2Leslie Dan Faculty of Pharmacy, University of Toronto, 3STTARR Innovation Centre, Princess Margaret Cancer Centre, 4Institute of Biomaterials and Biomedical Engineering, University of Toronto, 5Techna Institute, University Health Network, 6Radiation Medicine Program, Princess Margaret Cancer Centre

في هذه المقالة

ملخص

تم ربط التراكم غير المتجانس داخل الورم للجسيمات الشحمية ببيئة مكروية غير طبيعية للورم. يتم تقديم طرق هنا لقياس دوران الأوعية الدقيقة للورم عن طريق تصوير التروية وضغط السائل الخلالي المرتفع (IFP) باستخدام نظام آلي موجه بالصور. تتم مقارنة القياسات بالتراكم داخل الورم للجسيمات الشحمية ، والتي يتم تحديدها باستخدام التصوير المحظوظ الحجمي.

الملخص

تراكم غير متجانسة داخل ورمي من الجسيمات الشحمية هو عامل حاسم من فعاليتها. وترتبط كل من دوران الأوعية الدقيقة الورم الفوضى ورفع IFP للتوزيع داخل ورمي غير متجانسة من أنظمة توصيل الدواء القائمة على تكنولوجيا النانو مثل الجسيمات الشحمية. في هذه الدراسة، تم التحقيق العلاقة بين دوران الأوعية الدقيقة الورم، IFP مرتفعة، وتراكم الجسيمات النانوية من خلال في الجسم الحي التجريب. وقد تحقق ذلك من خلال تقييم دوران الأوعية الدقيقة الورم باستخدام تباين ديناميكية معززة التصوير المقطعي (DCE-CT) وقياس IFP الورم باستخدام نظام إبرة الروبوتية صورة موجهة رواية التنسيب متصلا الماسح الصغير-CT. تم تحديد تراكم داخل ورمي من الجسيمات الشحمية التي كتبها التقييم المستندة إلى الصور المقطعية للصياغة liposomal جسيمات متناهية الصغر التي تغلف مستقر وiohexol عامل تباين (CT-الجسيمات الشحمية). CT التصوير يسمح للمشاركة في توطين التوزيع المكاني للديناميكا الدم السرطانية، IFP وتراكم CT-الحويصلية في نموذج طعم أجنبي الماوس تحت الجلد الفردية من سرطان الثدي. أدت القياسات إلى اكتشاف أن نضح وحجم البلازما جزء وسطاء قوية للتوزيع داخل ورمي من الجسيمات الشحمية. وعلاوة على ذلك، تشير النتائج إلى أن IFP يلعب دورا غير مباشر في التوسط توزيع الحويصلية من خلال تحوير تدفق الدم.

المقدمة

قياس تراكم داخل ورمي نظم تسليم المخدرات جسيمات متناهية الصغر يمكن أن توفر أداة هامة لتحديد ما إذا كان قد تحقق تركيز كاف من المخدرات السامة للخلايا داخل الورم. تطوير نظم liposomal "صورة قادرة" تسمح لغير الغازية والكمي في الجسم الحي الكشف عن سيارة لتوصيل الدواء باستخدام طرائق التصوير مثل التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET) 1، مضان البصرية 2، والتصوير المقطعي (CT) 3، (4) والتصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) 5. وقد استخدم التصوير لتحديد الدوائية وbiodistribution أنظمة توصيل الحويصلية والكشف عن مدى التجانس بين الموضوع وداخل ورمي في تراكم جسيمات متناهية الصغر 6،7. ومع ذلك، والتصوير الجسيمات النانوية وحدها لا تحدد الحواجز البيولوجية التي ساهمت في ضعف التراكم وتوزيعها. هذه المعرفة أمر بالغ الأهمية لصتطوير الاقلية البرلمانية من الصيغ أكثر فاعلية، واستراتيجيات لتحسين تراكم داخل ورمي 8. وقد ثبت أن استراتيجيات علاجية يمكن تطبيقها لتعديل الحواجز البيولوجية المحددة مما أدى الى تحسين النقل جسيمات متناهية الصغر 9. بالإضافة إلى ذلك، تم تطوير الصيغ جسيمات متناهية الصغر للتغلب على وجه التحديد الحاجز النقل بيولوجية معينة (10). في كلتا الحالتين، والقياسات الحواجز البيولوجية يمكن أن تستخدم لتوجيه استخدام استراتيجية مناسبة تسليم المخدرات جسيمات متناهية الصغر.

ويعتقد أن دوران الأوعية الدقيقة الورم وارتفاع IFP أن اثنين من المحددات الرئيسية لتراكم داخل ورمي النانوية، مثل الجسيمات الشحمية، في الأورام الصلبة 9،11. ومع ذلك، والحواجز الأخرى التي لتساهم في تراكم الحويصلية الفقراء وتشمل مصفوفة كثيفة خارج الخلية، الأوعية الدموية غير منفذة، وضغط الأنسجة الصلبة 12. وترتبط هذه الحواجز في والزمانية المكانيةالطريقة، مع تدفق الدم غير طبيعي وارتفاع ضغط السائل الخلالي يجري عاملين مهمين القيادة التسليم المبدئي والتسرب من الجسيمات النانوية. كما نوقش سابقا، وتحدد العلاقة بين دوران الأوعية الدقيقة الورم، IFP مرتفعة، وتراكم داخل ورمي من الجسيمات الشحمية لا بد للتفسير السليم للبيانات الحويصلية التصوير. هنا الأساليب الكمية لقياس العلاقة بين دوران الأوعية الدقيقة الورم، IFP مرتفعة، وتراكم جسيمات متناهية الصغر في الأورام الصلبة يتم عرض. يتم ذلك عن طريق إجراء القياسات المحلية المشتركة للتوزيع داخل ورمي من وكيل الحويصلية النقيض CT باستخدام التصوير الحجمي CT، دوران الأوعية الدقيقة الورم باستخدام تباين ديناميكية تعزيز حسابها التصوير المقطعي، وورم IFP باستخدام الروبوت نظام إبرة المواقع الموجهة الصورة، ووصف الروبوت CT-IFP 13.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

أجريت جميع التجارب المجراة في إطار بروتوكول افقت عليها لجنة رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام شبكة الصحة جامعة.

1. نموذج حيواني

  1. الثقافة بين 5-7 × 10 6 MDA-MB-231 خلايا غدية الثدي السرطانية في DMEM مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS) و100X التخفيف من البنسلين ستربتومايسين.
  2. حصاد الخلايا عندما تكون 80٪ متموجة باستخدام 0.05٪ حل التربسين-EDTA. بعد 3-5 دقائق تحييد التربسين-EDTA مع حجم بقوة 3x من DMEM. اتخاذ قسامة 15 ميكرولتر من الخلايا والعد باستخدام عدادة الكريات. خلايا الطرد المركزي في بيليه لمدة 5 دقائق في 200 x ج، وإعادة تعليق في HBS بتركيز 10 × 10 6 خلايا لكل مل.
  3. زرع تحت الجلد (SC) الأورام عن طريق حقن 1-2 × 10 6 خلايا في أطرافهم هند من كل 8 إلى 12 أسبوع من العمر فئران SCID (ن = 5). استخدام معيار إبرة 25 G للحقن.
  4. مراقب رumor الفرجار النمو باستخدام (المجلد = 0.5 × طول × العرض 2) وتبدأ القياسات مرة واحدة الأورام SC قد وصلت إلى حجم> 200 مم 3 (حوالي 7-9 أيام).

2. CT-الحويصلية تحضير وتوصيف

  1. إعداد الحويصلية
    1. حل مكونات الدهون (200 مليمول / لتر) لCT-الجسيمات الشحمية، بما في ذلك 1،2-dipalmitoyl-SN-glycero-3-phosphocholine (DPPC)، والكولسترول (CH)، و1،2-distearoyl-SN-glycero-3 -phosphoethanolamine-N-بولي (جلايكول الإثيلين) 2000 (DSPE-PEG2000) في الإيثانول لا مائي عند 70 درجة مئوية في نسبة المولي من 55: 40: 5 DPPC: CH: DSPE-PEG2000.
    2. تتبخر الإيثانول عن طريق الحفاظ على الحرارة عند 70 درجة مئوية، ثم إضافة وكيل iohexol CT النقيض من (300 ملغ / مل من اليود) في حل مثل أن تركيز الدهون النهائي هو 100 ملم.
    3. الحفاظ على الحل عند 70 درجة مئوية لمدة 4 ساعات مع vortexing لكثرة.
    4. للحصول على الحويصلات unilamellar، قذف العينة 5 تيموفاق من خلال اثنين من مكدسة 200 الأغشية حجم نانومتر مسام عند ضغط 250 رطل وقذف مرة أخرى بنسبة 5 دورات من خلال اثنين من مكدسة 80 نانومتر الأغشية حجم المسام في 400 رطل باستخدام 10 مل الدهون الطارد. ماصة لحجم 10 مل من الجسيمات الشحمية في الطارد في بداية كل دورة قذف وجمع في العقيمة المخروطية أنبوب أو زجاج القارورة بعد كل دورة قذف.
    5. إزالة iohexol مغلفة الامم المتحدة قبل 16 ساعة من غسيل الكلى باستخدام 100 كيلو دالتون الوزن الجزيئي قطع (MWC) كيس غسيل الكلى مقابل وحدة تخزين فائض 250 أضعاف من 0.02 حل مخزنة HEPES ملم المالحة (HBS، ودرجة الحموضة 7.4). على سبيل المثال، ضع 1 مل من محلول الحويصلية داخل كيس غسيل الكلى مع 250 مل من HBS خارج الكيس في كوب.
    6. تركيز CT-الجسيمات الشحمية باستخدام نظام MWC nomical 750،000 التجاري عرضية تدفق وفقا لتعليمات الشركة الصانعة. التركيز إلى تركيز اليود النهائي من حوالي 55 ملغ مل -1.
  2. الحويصلية توصيف
    1. قياس كفاءة التغليف من قبل تمزيق CT-الجسيمات الشحمية باستخدام فائض حجم 10 أضعاف من الإيثانول للافراج عن ioxehol ثم تمييع باستخدام فائض حجم 100 أضعاف من الماء منزوع الأيونات (أي 10 ميكرولتر من الجسيمات الشحمية تمزق باستخدام 100 ميكرولتر من الإيثانول ثم يخفف إلى الحجم النهائي من 10 مل).
    2. تحديد تركيز iohexol باستخدام مطياف الأشعة فوق البنفسجية مع الكشف عند طول موجي 245 نانومتر. حساب الكفاءة التلخيصات بأخذ كمية نسبة كيل iohexol صدر لكمية من وكيل وأضاف أثناء التحضير.
    3. قياس القطر وزيتا الهيدروديناميكية إمكانية استخدام تشتت الضوء حجم الجسيمات نظام تحليل ديناميكية وفقا لتعليمات الشركة الصانعة. تمييع الحل CT-الحويصلية من قبل 200X (أي 5 ميكرولتر من الجسيمات الشحمية في 1 مل من الحجم النهائي) في الماء منزوع الأيونات لتسهيل القياسات.

3. التصوير المقطعي للدوران الأوعية الدقيقة ورم وCT-الحويصليةتوزيع

ملاحظة: اتبع تعليمات الشركة الصانعة لإجراء فحص الحجمي إذا تم استخدام مختلف إصدار البرنامج أو المعدات.

  1. تخدير كل فأر باستخدام 2٪ الأيزوفلورين مختلطة مع الهواء الطبي أو الأكسجين وتأكيد عن طريق معسر أخمص قدميها، ومراقبة أي رد فعل. تطبيق مرهم للعين لمنع جفاف بينما تحت التخدير. شل الحيوان في وضعية الرقود عن طريق تسجيل الكفوف إلى لوحة رقيقة من البلاستيك.
  2. وضع مخصص 27 G القسطرة، متصلا 20 سم على PE10 أنابيب، إلى الوريد الذيل الأفقي وآمنة في مكان مع عدة قطع من الشريط.
  3. تحضير حقنة 1 مل لاحتواء لا يقل عن 200 ميكرولتر من CT-الجسيمات الشحمية. تحضير حقنة 1 مل مع المياه المالحة لاستخدامها لمسح القسطرة. وأخيرا، وإعداد حقنة 1 مل مع لا يقل عن 150 ميكرولتر من iohexol مجانا مختلطة مع المياه المالحة (9: 1 نسبة من حيث الحجم).
  4. ضع الماوس عرضة على السرير الماسح الضوئي CT الجزئي. استخدام نظام تحديد المواقع ليزر لوضع tumo(ص) في حوالي نفس التوجه لكل المسح الضوئي.
  5. وضع حقنة CT-الحويصلية في ضخ حقنة وإرفاق القسطرة إلى الحقنة. تعيين معدل ضخ 10 ميكرولتر لكل ثانية.
  6. تهيئة النظام عن طريق إجراء فحص المعايرة مشرق الظلام باستخدام برنامج حدة CT-الماسح الضوئي. حدد الخيار مسح مشرق الظلام لكل بروتوكول التصوير من الفائدة، حدد مشرق الظلام من القائمة المنسدلة واضغط على زر المسح الضوئي لبدء المعايرة.
  7. إجراء الحجمي التشريحية-CT الجزئي للورم قبل أي حقن عامل تباين. نظرة على مؤشر البرمجيات وحدة CT الماسح الضوئي لضمان سلامة CT-الماسح الضوئي تم تطهيرها المتداخلة. على CT الماسح الضوئي وحدة التحكم حدد مسح تحديد الطاقة الأشعة السينية من 80 كيلو فولت، تيار أنبوب من 70 مللي أمبير، ويلتقط 1000 توقعات صورة مع مرور الوقت و 16 ثانية. اضغط على زر المسح الضوئي لبدء المسح الضوئي.
  8. استخدام مضخة الحقن لحقن البلعة من CT-الجسيمات الشحمية بتركيز 400 كجم اليود ملغ-1. تعيين مضخة لضخ وبلغ حجم التداول حوالي 150 ميكرولتر (على افتراض 25 غ الماوس). اضغط على زر "البدء" على مضخة لضخ. طرد يدويا القسطرة مع 50 ميكرولتر من المياه المالحة (ضعف حجم القسطرة) للتأكد من كمية وكيل بأكمله تم حقن والقسطرة واضح.
  9. انتظر لمدة 10 دقيقة بعد حقن CT-الجسيمات الشحمية ثم إجراء فحص تشريحي الثاني باستخدام نفس الطريقة والإعدادات الموضحة في 3.5.
  10. إجراء فحص DCE-CT عن طريق تعيين ضخ حقنة لحقن حجم 100 ميكرولتر من iohexol مجانا مختلطة مع المياه المالحة (9: 1 نسبة من حيث الحجم) باستخدام نفس الإعداد معدل الحقن وصفها في 3.3.
    1. على وحدة CT-الماسح الضوئي حدد مسح الديناميكي 5 دقائق يستخدم إعداد طاقة الأشعة السينية من 80 كيلو فولت، وهي طاقة أنبوب من 90MA، ويلتقط 416 توقعات صورة كل ثانية لمدة 30 ثانية الأولى وتليها عملية استحواذ كل 10 ثانية . القبض على 5 ثانية من البيانات DCE-CT ثم اضغط على زر البداية على مباشرة صبن مضخة.
    2. بعد الفحص DCE-CT إجراء التشريحية المسح الجزئي-CT الحجمي.
  11. التقاط الصور المقطعية التشريحية بين 48 و 72 ساعة بعد الحقن من CT-الجسيمات الشحمية، باستخدام نفس الإعدادات CT الحجمي كما هو موضح في الخطوات 3.5.
  12. اعادة البيانات المقطعية وDCE-CT التشريحية باستخدام برنامج GPU-إعادة الإعمار.
    1. تحميل الصورة في برنامج إعادة الإعمار. تحديد المنطقة التي تهم إعادة بنائها من خلال الاعتماد على العائد على الاستثمار فوق الصورة باستخدام الماوس. تعيين موقع حفظ واسم لإعادة بنائها تصوير وتحديد المخرجات نوع ملف باسم '.mat ".
      ملاحظة: سوف يقوم البرنامج تلقائيا تعيين حجم فوكسل أعيد إلى 0.153 س 0.153 س 0.153 مم 3 لاجراء الفحوصات التشريحية و 0.153 س 0.153 س 0.462 مم 3 لاجراء الفحوصات DCE-CT. انقر على "بدء إعادة الإعمار 'زر.
  13. استخدم قبل حقن و 10 دقيقة بالاشعة بعد حقن CT-الحويصلية لحساببلازما حجم جزء كما هو موضح سابقا 3. وعلاوة على ذلك، استخدم قبل حقن و 5 دقائق بالاشعة بعد الحقن من iohexol لحساب نسبة حجم الخلالي كما هو موضح سابقا 7.
  14. الحصول على الوقت كثافة منحنيات (الحيازات) عن طريق استيراد البيانات DCE-CT في البرامج التي توفر القدرة على تحديد المنطقة ذات الاهتمام (ROI) ضمن حجم الورم. ثم حساب متوسط ​​CT تعزيز في العائد على الاستثمار بوصفها وظيفة من الزمن. في هذه التجربة تم تطوير برامج مخصصة لتحديد العائد على الاستثمار وحساب TIC.
  15. الحصول على تقديرات كمية لنضح ونفاذية الأوعية الدموية عن طريق تركيب الحيازات قياسها باستخدام نموذج حركي التتبع في أقسام اثنين. تركيب يمكن تنفيذها باستخدام DCE-CT برامج التحليل واستخدام التقديرات APRIORI من نسبة حجم البلازما وكسور حجم الخلالي كمعلمات الثابت في النموذج الحركي التتبع في أقسام اثنين. استخدام أساليب ذكرت سابقا للحصول على تقديرات APRIORI من بلازماووكسور حجم فراغي 14.

4. المقاييس المكانية من ورم الخلالية ضغط السائل

  1. لقياس IFP ربط إبرة في العمود الفقري 25 G لمحول الضغط ولنظام الحصول على IFP خلال 50 سم من PE20 البولي ايثيلين أنابيب. مسح نظام كامل مع الحل الهيبارين كبريتات / المالحة (01:10). تعقيم الإبرة مع 70٪ الآيزوبروبيل قبل الاستخدام.
  2. تشغيل نظام الحصول وإطلاق برنامج الحصول على IFP وتحميل ملفات الإعدادات لمعايرة نظام للحصول على قياسات IFP في مم زئبق. انقر على زر اكتساب لجمع البيانات بشكل مستمر IFP.
  3. إجراء قياسات IFP بين 48 و 72 ساعة بعد الحقن من CT-الجسيمات الشحمية (وهذا يتوافق مع الوقت التقريبي للذروة تراكم CT-الجسيمات الشحمية في الورم)، وذلك باستخدام الأساليب المذكورة في 4.8. إرفاق الإبرة IFP للروبوت CT-IFP.
  4. القيام بمسح المعايرة لمواءمة نظم تنسيق لالروبوت CT-IFP وماسح التصوير المقطعي. إضافة المرفق علامة إيمانية للروبوت CT-IFP وإجراء الاشعة المقطعية أربعة الحجمي مع علامة الإيمانية في أربعة مواقع مختلفة.
    1. إطلاق برنامج تحكم الروبوت CT-IFP، تهيئة الروبوت، وتحريك الروبوت إلى المراكز الثلاثة عن طريق إدخال س، ص، ض يستهدفون مواقع والنقر على زر 'اذهب'.
    2. أخذ الاشعة المقطعية في س التالية، Y، Z إحداثيات: (1) 0،0،0. (2) -10،0،0. (3) 0،7،0. و (4) 0،0،10. اختيار 90 كيلو فولت، 10 أمبير، 16 ثانية المسح الضوئي باستخدام برنامج CT-الماسح الضوئي ثم اضغط على "ابدأ" لبدء المسح الضوئي. إعادة الفحص كما هو موضح في 3.10.
  5. إطلاق CT-IFP برنامج المواءمة الروبوت. انقر على زر "إضافة" تحميل في المنطقة "بيانات التسجيل" وحدد أربعة بمسح تسجيل أعيد بناؤها تم الحصول عليها في 4.3، ثم انقر على 'فتح'.
    ملاحظة: سيتم تلقائيا موقع بكسل من علامة إيمانية إدخالها في softwaإعادة.
    1. انقر على زر "حساب تحويل" ثم انقر فوق الزر "تطبيق تحويل". وهذا يولد البيانات موازنة التي سيتم استخدامها لتحويل الروبوت CT-IFP تنسيق النظام إلى ماسح التصوير المقطعي تنسيق النظام. بعد معايرة كاملة، ونعلق على منصة الحيوان إلى الإنسان الآلي CT-IFP.
  6. تخدير كل فأر باستخدام 2٪ الأيزوفلورين مختلطة مع الهواء الطبي أو الأكسجين وتأكيد عن طريق معسر أخمص قدميها، ومراقبة أي رد فعل. شل الحيوان على منصة الروبوت CT-IFP ووضع مؤشر الماوس مثل أن الورم هو الوصول إلى نظام الروبوت CT-IFP. لشل حركة الورم باستخدام الشريط بحيث لا تتحرك أثناء IFP إبرة الإدراج.
  7. إجراء مسح الدقيقة CT التشريحي قبل إدخال الإبرة IFP. اعادة البيانات المقطعية باستخدام الخطوات الموضحة في 3.10.
  8. تحميل قبل إبرة بيانات الإدراج CT في البرنامج محاذاة الروبوت CT-IFP. ضبط النافذة ومستوى لتصور الورم. انقر على الالبريد حافة الورم في أي صورة، ثم انقر على موقع حافة الثاني.
    ملاحظة: يقوم البرنامج بحساب سلسلة من المواقف على طول خط الخطي بين الموقفين. لاحظ x و y و z إحداثيات سلسلة من 5-8 المواقف متباعدة بشكل متساو من القائمة.
  9. إعداد نظام IFP عن طريق تنظيف الإبرة مع الحل الهيبارين المالحة قبل الإدراج.
  10. أدخل الأولى المواقف إبرة محددة مسبقا في س، ص، ض، في برنامج حاسوبي لمراقبة الروبوت CT-IFP والصحافة الانتقال إلى زر 'اذهب' لتحريك الروبوت إلى الموضع المطلوب. انقر فوق الزر "إدراج إبرة" لادخال الإبرة في النسيج.
    1. بعد إدخال الإبرة ضمان الاتصال السائل الجيد بين إبرة IFP والأنسجة عن طريق معسر والافراج عن أنابيب PE20، مشيرا إلى أن الزيادات قياس IFP وترجع إلى ما قبل معسر القيمة على اقتناء البرمجيات IFP. رفض القياسات التي لا عودة إلى خط الأساس.
  11. اكتسابالاشعة المقطعية التشريحي مع إبرة، ثم انقر على زر "تتراجع عن إبرة" على برنامج حاسوبي لمراقبة الروبوت CT-IFP لسحب الإبرة من الأنسجة. رفض أي قياسات حزب انكاثا للحرية حيث لا يرجع قيمة IFP إلى القيمة الإدراج قبل إبرة بعد الانسحاب من الإبرة. هذا يعني قد يكون انسداد الإبرة أثناء القياس. كرر الخطوات من 4،8 حتي 4،10 لكل موقف إبرة.
  12. تحديد موقف إبرة داخل حجم الورم عن طريق حساب س، ص المواقف، و z من ميناء إبرة نسبة إلى مركز كتلة حجم الورم على النحو المحدد في مرحلة ما بعد الإدراج المسح الضوئي التصوير الضوئي الحجمي من الإبرة.
  13. عودة الحيوانات إلى القفص بعد كل القياسات كاملة. لا تترك الحيوانات غير المراقب، ورعاية للاطلاع عليها حتى يتم استعاد وعيه وأنها قادرة على الحفاظ على الاستلقاء القصية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

البروتوكول المذكور ينبغي أن تسفر CT-الجسيمات الشحمية مع التركيز مغلفة من iohexol، يعني قطر الحويصلية، وإمكانات زيتا من 55 ملغ مل -1، 91.8 ± 0.3 نانومتر، و-45.5 ± 2.5 فولت، على التوالي. ويتضمن الشكل 1A التمثيلي التصوير DCE-CT النتائج، مما أسفر عن سلسلة زمنية من البيانات الحجمي التي تظهر التغيرات الزمانية في تراكم داخل ورمي من iohexol. اختيار العائد على الاستثمار داخل الورم تعطي TIC التي يمكن كميا باستخدام التتبع أساليب ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أساليب لقياس الصورة القائمة المقدمة هنا تمكن تحديد التوزيع المكاني للخصائص الورم دوران الأوعية الدقيقة، IFP، وتراكم CT-الحويصلية. وقد اعتمدت المحاولات السابقة لربط هذه الخصائص على أداء قياسات السائبة عبر عدة الحيوانات الحاملة للورم، وبالتالي تفتقر إلى الحساسية لتوضيح الآليات المسؤولة عن عدم التجانس في تراكم داخل ورمي الذي عادة وحظ لأنظمة توصيل الدواء نانو الحجم 15. DCE-CT يوفر أداة لقياس الاختلافات داخل ورمي في خصائص دوران الأوعية الدقيقة الورم، ويوفر التصوير الضوئي الح...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه

شكر وتقدير

يود المؤلفون أن يشكروا الدكتور جاويد محمود على المساعدة في زراعة خلايا MDA-MB-231 وزرع الطعوم الغريبة MDA-MB-231 ، Linyu Fan لإعداد الجسيمات الشحمية المقطعية المحوسبة. يعرب شون ستابلتون عن امتنانه للتمويل المقدم من برنامج المنح الدراسية للدراسات العليا في العلوم الطبيعية والبحوث الهندسية والمبادرة الاستراتيجية لمؤسسة تيري فوكس للتميز في أبحاث الإشعاع للقرن الحادي والعشرين (EIRR21) في CIHR. تم دعم هذه الدراسة بمنح من برنامج Terry Fox New Frontiers (020005) والمعاهد الكندية للبحوث الصحية (102569).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
MDA-MB-231 خلايا ورم سرطان غدي النقيلي للثدي ATCCHTB-26
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)  Life Technologies11965-092
مصل الأبقار الجنيني (FBS)Sigma-AldrichF1051
HyClone Penicillin-Streptomycin 100x SolutionGE Healthcare Life SciencesSV30010
Trypsin-EDTA (0.05٪) ، الفينول الأحمرThermoFisher Scientific25300-054
1،2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC)AvantiLipids Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية850355P
الكوليسترول (CH)Avanti Lipids Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية700000P
1،2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-poly (الإيثيلين جلايكول) 2000 (DSPE-PEG2000) AvantiLipids Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية880128P
Omnipaque (Iohexol) 300 مجم من اليود / مل & nbsp ؛GE Healthcare ، CA
80 نانومتر حجم المسام أغشية البولي كربونات Track-Etch WhatmanInc. ، الولايات المتحدة الأمريكية
200 نانومتر حجم المسام أغشية البولي كربونات Track-EtchWhatman Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية
10 م Lipex Extruder   ؛Nothern Lipids Inc ، CA
كيس غسيل الكلى قطع الوزن الجزيئي (MWCO) من 8 كيلو دالتونمختبرات الطيف ، الولايات المتحدة الأمريكية & nbsp ؛
750,000 عمود التدفق المماسي للوزن الجزيئي الاسمي (NMWC)  خرطوشة الترشيح الفائق MidGee ، GE Healthcare ، CA
المضخة التمعجية   ؛Watson Marlow Inc., الولايات المتحدة الأمريكية
مطياف الأشعة فوق البنفسجيةHelios γ, Spectronic Unicam,  الولايات المتحدة الأمريكية
محلل حجم الجسيمات 90Plus بروكهافن ، هولتسفيل ، الولايات المتحدة الأمريكية
eXplore Locus Ultra micro-CT system GE Healthcare ، CAتم التلاعب بها باستخدام برنامج CT-Console
AxRecon المستند إلى وحدة معالجة الرسومات إعادة الإعمار  ؛ Acceleware Corp. CA
27 G قسطرة SURFLO مجموعة التسريب المجنحTerumo Medical Products ، الولايات المتحدة الأمريكيةSV * 27EL
PE20 أنابيب البولي إيثيلينBecton Dickinson ، الولايات المتحدة الأمريكية427406
طرف القلم 25 جم & مرات ؛ 3.5 & prime; ″ إبرة ويتاكر الشوكية Becton Dickinson, USA405140IFP إبرة
P23XL  محول الضغط هارفارد للأجهزة ، كاليفورنياP23XL
PowerLab 4/35 ، Bridge Amp ، مع LabChart Pro 7.0ADInstruments Pty Ltd. ، الولايات المتحدة الأمريكيةPL3504 ، FE221IFP نظام الاستحواذ وبرنامج الاستحواذ
CT-Sabre Small Animall Intervention System (CT-IFP RobotParallax Innovations ، CAتم التلاعب به باستخدام CT-IFP الروبوت
CT-IFP لمحاذاةمخصص برنامج Matlab
برنامج تحليلبرنامج Matlab مخصص
Matlab 2013bMathworks ، الولايات المتحدة الأمريكية
) التحكم في برنامج الروبوت DCE-CT

المراجع

  1. Seo, J. W., Zhang, H., Kukis, D. L., Meares, C. F., Ferrara, K. W. A novel method to label preformed liposomes with 64Cu for positron emission tomography (PET) imaging. Bioconjugate chemistry. 19 (12), 2577-2584 (2008).
  2. Huang, H., Dunne, M., Lo, J., Jaffray, D., Allen, C. Comparison of Computed Tomography- and Optical Image-Based Assessment of Liposome Distribution. Molecular Imaging. 12 (3), 148-160 (2013).
  3. Stapleton, S., et al. A mathematical model of the enhanced permeability and retention effect for liposome transport in solid tumors. PloS one. 8 (12), e81157(2013).
  4. Zheng, J., et al. A multimodal nano agent for image-guided cancer surgery. Biomaterials. 67, 160-168 (2015).
  5. Zheng, J., Liu, J., Dunne, M., Jaffray, D. A., Allen, C. In vivo performance of a liposomal vascular contrast agent for CT and MR-based image guidance applications. Pharmaceutical research. 24 (6), 1193-1201 (2007).
  6. Harrington, K. J., et al. Effective targeting of solid tumors in patients with locally advanced cancers by radiolabeled pegylated liposomes. Clinical Cancer Research. 7 (2), 243-254 (2001).
  7. Stapleton, S., Allen, C., Pintilie, M., Jaffray, D. A. Tumor perfusion imaging predicts the intra-tumoral accumulation of liposomes. J Control Release. 172 (1), 351-357 (2013).
  8. Lammers, T., Kiessling, F., Hennink, W. E., Storm, G. Nanotheranostics and image-guided drug delivery: current concepts and future directions. Mol. Pharm. 7, 1899-1912 (2010).
  9. Stapleton, S., Milosevic, M. F. Cancer Targeted Drug Delivery. , Springer. 241-272 (2013).
  10. Blanco, E., Shen, H., Ferrari, M. Principles of nanoparticle design for overcoming biological barriers to drug delivery. Nature biotechnology. 33 (9), 941-951 (2015).
  11. Heldin, C. H., Rubin, K., Pietras, K., Ostman, A. High interstitial fluid pressure - an obstacle in cancer therapy. Nat Rev Cancer. 4 (10), 806-813 (2004).
  12. Chauhan, V. P., Stylianopoulos, T., Boucher, Y., Jain, R. K. Delivery of molecular and nanoscale medicine to tumors: transport barriers and strategies. Annual review of chemical and biomolecular engineering. 2, 281-298 (2011).
  13. Bax, J. S., et al. 3D image-guided robotic needle positioning system for small animal interventions. Medical physics. 40 (1), 011909(2013).
  14. Stapleton, S., Milosevic, M., Tannock, I. F., Allen, C., Jaffray, D. A. The intra-tumoral relationship between microcirculation, interstitial fluid pressure and liposome accumulation. Journal of Controlled Release. 211, 163-170 (2015).
  15. Stapleton, S., Allen, C., Pintilie, M., Jaffray, D. A. Tumor perfusion imaging predicts the intra-tumoral accumulation of liposomes. J Control Release. 172 (1), 351-357 (2013).
  16. Brix, G., Zwick, S., Kiessling, F., Griebel, J. Pharmacokinetic analysis of tissue microcirculation using nested models: multimodel inference and parameter identifiability. Medical physics. 36 (7), 2923-2933 (2009).
  17. Brix, G., Griebel, J., Kiessling, F., Wenz, F. Tracer kinetic modelling of tumour angiogenesis based on dynamic contrast-enhanced CT and MRI measurements. European journal of nuclear medicine and molecular imaging. 37 (1), 30-51 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

القياسات المكانية للالإرواء، الخلالي الضغط السائل والليبوزومات تراكم في الأورام الصلبة
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.