نماذج حيوانية لتصلّب الشرايين أساسية لفهم الآلية والتحقيق في النهج الجديدة لمنع تطوير اللوحة أو تمزق، سبب الرئيسي للوفاة في العالم الصناعي. هذا البروتوكول يستخدم مزيجاً من الإصابة بالون وحمية الكولسترول الغنية للحث على لويحات تصلب الشرايين في شريان حرقفي الأرانب.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج أرنب من تسارع تصلب الشرايين: منظور منهجية من إصابة شريان حرقفي بالون
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
متلازمة الشريان التاجي الحادة الناتجة عن الانسداد التاجي بعد وضع لوحة تصلب الشرايين وتمزق هو السبب الرئيسي للوفاة في العالم الصناعي. أرانب نيوزيلندا الأبيض (نزو) تستخدم على نطاق واسع كنموذج لحيوانات لدراسة تصلب الشرايين. أنها تتطور الآفات عفوية عند تغذية مع نظام غذائي أثيروجينيك؛ ومع ذلك، وهذا يتطلب وقت طويل من 4 إلى 8 أشهر. لزيادة تعزيز وتسريع أثيروجينيسيس، غالباً ما تستخدم مزيجاً من الحمية أثيروجينيك وإصابة غشائي الميكانيكية. يستخدم الإجراء المقدم لحفز لويحات تصلب الشرايين في الأرانب قسطرة بالون لعرقلة البطانة في شريان حرقفي الأيسر نزو الأرانب التي تتغذى على النظام الغذائي أثيروجينيك. هذه الأضرار الميكانيكية بالقسطرة بالون الحث على سلسلة من ردود الفعل الملتهبة بدء تراكم الدهن نيوينتيمال بطريقة تعتمد وقت. البلاك تصلب الشرايين بعد بالون الإصابة تظهر سماكة نيوينتيمال مع تسلل واسعة النطاق في الدهون والعضلات الملساء ارتفاع محتوى الخلية ووجود سنخية اشتقاق خلايا الرغاوي. هذه التقنية بسيطة واستنساخه وتنتج لوحة طول التي تسيطر عليها داخل شريان حرقفي. يتم إكمال الإجراء بأكمله داخل 20-30 دقيقة. الإجراءات آمنة مع انخفاض معدلات الوفيات، ويقدم أيضا نجاح عالية في الحصول على الآفات إينتيمال كبيرة. إجراء قثطرة البالون الناجمين عن نتائج الإصابة الشريانية في تصلب الشرايين خلال أسبوعين. يمكن استخدام هذا النموذج للتحقيق في أمراض المرض، التصوير التشخيصي وتقييم استراتيجيات علاجية جديدة.
المقدمة
تمزق لويحات تصلب الشرايين الضعيفة واحد من الأسباب الرئيسية للوفاة في الدول الصناعية1. ورغم أن البحوث على مدى العقود الماضية قد تكشفت عدة الآليات الجزيئية والخلوية التي تشارك في تطور اللوحة، استمرت الجهود لا تزال هناك حاجة ليس فقط لكشف الآلية المعقدة لتطور المرض ولكن أيضا لاختبار جديد العلاجية النهج. واقترحت عدة نماذج حيوانية لدراسة تصلب الشرايين. التلاعب بالجينات، الكولسترول التغذية أو ميكانيكية إصابة البطانة هي الاستراتيجيات الموحدة تتقاسمها نماذج حيوانية أكثر من تصلب الشرايين بما في ذلك الفئران والأرانب أو مينيبيجس. ومن بين هذه حساسة الأرانب نزو الكولسترول الغذائي بينما العادي الفئران والجرذان لا تستوعب كثيرا الكولسترول الغذائي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
هذا البروتوكول التجريبي قد أقرها مكتب الطب البيطري الكانتونات وفريبورغ السويسرية الاتحادية البيطري المكتب، سويسرا (2015 الأب/58)-
ملاحظة: استخدمت الأرانب نزو الذكور تزن بين 2.8 إلى 3.2 كجم. تم إيواء الحيوانات تحت ظروف التقليدية (12 ح الضوء ودورة الظلام، قدمت متواصلة للمياه والغذاء). قبل تعرية بالون، وقد تأقلم الحيوانات لمدة أسبوع واحد خلالها غذيت مع النظام الغذائي العادي تشاو. بعد أسبوع واحد من التأقلم، الأرانب كانت تحولت إلى النظام الغذائي أثيروجينيك تتكون من الدهون عالية (8.6%)، والأحماض الدهنية المشبعة بحمية الكولسترول (1%) 205 مغ/كغ لمدة الدراسة كاملة. أنجز الإصابة بالون في شريان حرقفي اليسرى 1 أسبوع بعد بدء النظام الغذائي وضحى الحيوا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
إصابة البالون من شريان حرقفي أنجز بنجاح دون مضاعفات (الشكل 1). تنفيذ إجمالي الوقت المنطوق تتراوح من 20 إلى 30 دقيقة للإصابات في شريان حرقفي واحد فقط، و 35 إلى 45 دقيقة للإصابات في كلا الشرايين. الأرنب استردادها ضمن ح 1 بعد إصابة البالون. وبدأ جميع الحيوانات صحية دون فقدان الوزن الكبير. تمت مصادفة لا عدوى أو ذمة أو تجلط الدم الشرياني. وكان منطقة الجرح العادي إلى جانب بعض التليف معتدل في موقع خياطة الجروح. وبعد 4 أسابيع من التغذية النظام الغذائي atherogenic، عر.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
نموذج تصلب شريان حرقفي أرنب يستخدم على نطاق واسع في أبحاث تصلب الشرايين. مع هذا البروتوكول وضع الأرانب سرعة لويحات أكثر شديدة ومتقدمة بالمقارنة مع آفات عفوية مع فقط الكولسترول الغذائي. الأهم من ذلك، استعادة الحيوانات بسرعة من الجراحة.
هو الحافز الرئيسي ل atherogenesis أضرار ميكانيكية قثطرة البالون الذي يضر بالبطانة وديستيندس الجدار السفينة26. يدفع هذا الإجراء استجابة إعادة تتميز بالتهاب مع تجنيد بلعم وتراكم الدهون عند المرتبطة بالنظام الغذائي هايبرتشوليستوروليميك والهجر.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب يعلن لا تضارب المصالح المالية.
شكر وتقدير
وأيد هذا العمل 150271 منحة مؤسسة العلوم الوطنية السويسرية.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| نيوزيلندا الأرانب البيضاء | تشارلز ريفر مختبرات ، فرنسا | Cre: KBL (NZW) | |
| نظام غذائي غني بالكوليسترول | Ssniff spezialdi ä عشرة | Ssniff EF K معقم حبة زجاجية عالية الدهون والكوليسترول | |
| - بربات 500 | VWR ، ليسيسترشاير ، المملكة المتحدة | 101326-488 | |
| قسطرة استئصال صصمة بالون فوغارتي ، 2 | إدواردز لايف ساينس الفرنسية ، سويسرا | 120602F | للاستخدام الفردي فقط |
| حقنة Luer Lock | Becton ، Dickinson and Company ، الولايات المتحدة الأمريكية | 309628 | |
| Thermopad Type 226 | Solis ، سويسرا AG | 397387 | |
| بوبرينورفين- Temgesic | Reckitt Benckiser AG ، سويسرا | 7.68042E + 12 | |
| Isoflurane | Piramal Critical Care، Inc ، بيت لحم ، بنسلفانيا 18017 | 2667-46-7 | |
| التخدير - كومبي بيطري نظام التخدير الأساسي | Rothacher Medical GmbH ، سويسرا | CV 30-301-A | |
| Cardell Touch Veterinary Vital Monitor | ميدمارك ، أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية | 8013-001 | |
| مرهم العيون - Humigel | Virbac ، فرنسا | ||
| ماكينة قص شعر | Aesculap AG ، ألمانيا | GT420 | |
| محلول مطهر - بيتادين | MundipharmaMedical ، سويسرا | 14671-1203 | |
| Dumont # 7 ملقط | FST ألمانيا | 11274-20 | |
| متوسط وصغير مقص دقيق | Medline International سويسرا S & agrave ؛ rl | UC4337 | |
| مشابك الأوعية الدموية الدقيقة | FST ، ألمانيا | 18051-28 | |
| Papaverine | ESCA Chemicals ، سويسرا | RE 356 803 | |
| Vein Pick | Harvard Apparatus ، كامبريدج ، المملكة المتحدة | 72-4169 | للاستخدام الفردي فقط |
| الملحي | Dr. G. Bichsel AG ، سويسرا | 1330055 | |
| خياطة | Polysorb 5-0Covidien AG ، سويسرا | UL 202 | Monofilament |
| Sulfadoxine و Trimethoprim-Trimethazol | Werner Stricker AG ، سويسرا | Swissmedic Nr. 50'361 | |
| مطهر - Octenisept | Sch ü lke & Mayr AG ، سويسرا | GTIN: 4032651214068 | |
| فوسفات مخزن محلول | ملحي روث | 1058.1 | |
| Isobutanol-2-Methylbutane | Sigma-Aldrich ، سويسرا | M32631-1L | |
| درجة حرارة القطع المثلى - Tissue-Tek | VWR Chemicals ، بلجيكا | 25608-930 | |
| Cryostat | Leica ، Glattbrugg ، سويسرا | Leica CM1860 UV | |
| شريحة زجاجية- Superfrost Plus | Thermo Scientific | 4951PLUS4 | |
| Mayer's Haematoxylin | Sigma-Aldrich ، سويسرا | MHS32-1L | |
| Eosin 0.5٪ aq. | سيجما ألدريتش ، سويسرا | HT110232-1L | |
| Oil Red O | Sigma-Aldrich ، سويسرا | O0625-25G | |
| & alpha - الأجسام المضادة للأكتين في العضلات الملساء | Abcam ، المملكة المتحدة. | ab7817 | |
| استنساخ البلاعم الجسم المضاد RAM11 | DAKO ، سويسرا | M063301 | |
| Hoechst | Abcam ، المملكة المتحدة. | ab145596 | |
| الجسم المضاد الثانوي متعدد النسيلة للماعز (Chromeo 546) | Abcam ، المملكة المتحدة. | ab60316 | |
| Alexa Fluor 488/547 | Abcam ، المملكة المتحدة. | ||
| Glycergel Mounting Medium ، DAKO المائي | ، سويسرا | C056330 | |
| Hematoxylin ل Movat pentachrome تلطيخ | Sigma-Aldrich ، سويسرا | H3136-25G | |
| كلوريد الحديديك ل Movat خماسي التلوين | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 157740-100G | |
| اليود لتلوين Movat | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 207772-100G | |
| يوديد البوتاسيوم لتلوين Movat pentachrome | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 60400-100G-F | |
| Alcian blue for Movat تلطيخ | Sigma-Aldrich ، سويسرا | A5268-10G | |
| أمونيا قوية لتلوين Movat pentachrome | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 320145-500ML | |
| Crocein اللامع MOO لتلوين Movat pentachrome | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 210757-50G | |
| حمض فوكسين لتلوين Movat خماسي | Sigma-Aldrich ، سويسرا | F8129-50G | |
| ثيوسلفات الصوديوم لتلوين Movat pentachrome | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 72049-250G | |
| حمض الفوسفوتونغستيك لتلوين Movat pentachrome | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 79690-100G | |
| Crocin ل Movat pentachrome تلطيخ | سيجما ألدريتش ، سويسرا | 17304-5G | |
| EUKITT لتلطيخ Movat pentachrome | Sigma-Aldrich ، سويسرا | 03989-100ML |
المراجع
- Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131, e29-e322 (2015).
- Boone, L. R., Brooks, P. A., Niesen, M. I., Ness, G. C. Mechanism of resistance to dietary cholesterol. J Li....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
