يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

نقص المحرك استنساخه بعد أوكلوسيون الأبهر في نموذج الجرذ من الحبل الشوكي نقص التروية

6.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/55814

⸱

يوليو 22, 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Anesthesiology and Pain Medicine, SMG-SNU Boramae Medical Center, Seoul National University College of Medicine, Seoul, 2Department of Anesthesiology and Pain Medicine, SNU Bundang Hospital, Seongnamsi, Gyeonggido, Republic of Korea

في هذه المقالة

ملخص

هذه الدراسة يدل على تقنية لجعل نموذج الغازية الحد الأدنى بسهولة استنساخه من نقص تروية الحبل الشوكي في الفئران. يمكن أن تنتج درجات مختلفة من عجز المحرك أطرافهم الخلفية عن طريق التحكم في وقت انسداد الأبهر.

الملخص

الحبل الشوكي نقص التروية هو مضاعفات قاتلة التالية ثوروكابدومينال الأبهر جراحة جراحية. يمكن للباحثين التحقيق في استراتيجيات لمنع ومعالجة هذه المضاعفات باستخدام نماذج تجريبية من نقص تروية الحبل الشوكي. النموذج الموصوف هنا يدل على درجات متفاوتة من الشلل النصفي التي تتعلق طول انسداد التالية انسداد الأبهر الصدري في نموذج الفقر الفقري الحبل التروية الحبل.

A-فر. تقدمت قسطرة البالون ذات الرؤوس من خلال الشريان الفخذي في الشريان الأورطي الهابط حتى وضعت طرف القسطرة في الشريان تحت الترقوة الأيسر في تخدير الذكور سبراغ داولي الفئران. كان سبب نقص تروية الحبل الشوكي عن طريق تضخيم بالون القسطرة. بعد فترة محددة من الانسداد (9، 10، أو 11 دقيقة)، تم تناقص البالون. تم إجراء التقييم العصبي باستخدام مؤشر العجز الحركي في 24 ساعة بعد الجراحة، وتم حصاد الحبل الشوكي للفحص النسيجي. jove_content "> الفئران التي خضعت لمدة 9 دقائق من انسداد الأبهر أظهرت ضعف حركي خفيف وعكس في الطرف الخلفي.الجرذان المعرضة ل 10 دقيقة من انسداد الأبهر قدمت مع إعاقة حركية معتدلة ولكن عكسها.الجرذان تعرضوا لمدة 11 دقيقة من انسداد الأبهر عرض كاملة ومستمرة وقد تم الحفاظ على الخلايا العصبية الحركية في أقسام الحبل الشوكي أكثر في الفئران التي تتعرض لفترة أقصر من انسداد الأبهر.

يمكن للباحثين تحقيق عجز المحرك أطرافهم الخلفية استنساخه بعد انسداد الأبهر الصدري باستخدام هذا النموذج نقص تروية الحبل الشوكي.

المقدمة

الشلل النصفي هو مضاعفات قاتلة لجراحة تمدد الأوعية الدموية الأبهر الصدري. أنه ينتج عن الحبل الشوكي إصابة نقص التروية ضخ التي تحدث خلال عبر لقط و أونكلامبينغ من الشريان الأورطي. 1 وقد أدخلت عدة استراتيجيات بما في ذلك انخفاض حرارة الجسم النظامية والصرف النخاعي لحماية الحبل الشوكي، 2 ، 3 ، 4 ولكن العديد من المرضى لا تزال تتأثر الإصابة.

وقد أدخلت العديد من نماذج نقص تروية الحبل الشوكي الحيوانية للتحقيق في المرضية ووضع استراتيجيات وقائية ضد الإصابة. في الدراسة الحالية، ونحن الخطوط العريضة نموذج الفئران من نقص تروية الحبل الشوكي على أساس طريقة تايرا ومارسالا ل. 5 نظام الدورة الدموية في العمود الفقري في الفئران تشبه الى حد بعيد الحبل الشوكي الوعائي ونظام الضمان في البشر، على الرغم من أن هناك بعض الاختلافات في حجم وموقعك. 6 ، 7 وهكذا، الفئران هو حيوان مناسب تشريحيا للاستفادة من نموذج تجريبي التحقيق في المرضية، والمضاعفات، وعلاج نقص تروية الحبل الشوكي. وعلاوة على ذلك، وهذا نموذج نقص تروية الحبل الشوكي تنتج انسداد الأبهر يمكن الاعتماد عليها مع الحد الأدنى من التدخل عن طريق الاستفادة من انسداد البالون داخل الأوعية من الشريان الأورطي الصدري.

في هذه الدراسة، أثبتنا أن هذا النموذج الفئران من نقص تروية الحبل الشوكي يدفع العجز في السيارات استنساخه في الأطراف الخلفية التي تختلف في شدة اعتمادا على الوقت انسداد الأبهر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام مستشفى سيول الوطنية جامعة بوندانغ. وقد أجريت رعاية الحيوان والتجارب وفقا للمعاهد الوطنية للولايات المتحدة دليل الصحة لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.

1. إعداد الجراحي

  1. قبل الجراحة، طرد القسطرة مع محلول ملحي معقم لضمان المباح.
  2. وضع بطانية التدفئة على طاولة التشغيل، وتغطية الجدول مع ثنى العقيمة.
  3. مكان الذكور سبراغ داولي الفئران (270-330 ز) في مربع الاكريليك مع 3.0٪ -4.0٪ من الأيزوفلورين في الأكسجين 100٪.
  4. تطبيق زيوت التشحيم لعيون الفئران.
  5. وضع الفئران على طاولة العمليات في موقف ضعيف، والحفاظ على التخدير باستخدام قناع الوجه مع الإدارة المستمرة من إيسوفلوران استنشاق (1.0٪ -2.5 فول٪).
  6. وضع التحقيق المستقيم لمراقبة والحفاظ على درجة حرارة الجسم بين 37.0-38.0 درجة مئوية.

2. الفخذية الشريان القسطرة

  1. فرك بلطف المنطقة الأربية اليمنى باستخدام بيتادين و 70٪ من الإيثانول.
  2. جعل 2 سم شق الجلد الأفقي باستخدام مقص على المنطقة الأربية اليمنى.
  3. باستخدام ضام، وفضح المجال الجراحي.
  4. تشريح الشريان الفخذي من الوريد والعصب المحيطة بها. عزل مقطع 1 سم من الشريان باستخدام ملقط منحني وملقط مضعف.
  5. باستخدام خياطة الحرير الأسود 4.0، ووضع ربطة عنق فضفاضة على كل من الغايات القريبة والقاصي من الشريان لتعظيم التعرض.
  6. إجراء شق على الشريان الفخذي باستخدام مقص الصغيرة.
  7. إدراج 2-الاب. البالون ذات الرؤوس القسطرة في الشريان الفخذي باستخدام ملقط الصغرى. تأمين القسطرة إلى السفينة حوالي 1 سم من رئيس القسطرة مع ربطة القريبة، ومن ثم ربط ربطة عنق البعيدة.

3. القسطرة الشريان السباتي

  1. فرك الرقبة الأمامية اليمنى باستخدام بيتادإين و 70٪ من الإيثانول، ومن ثم جعل شق الجلد.
  2. باستخدام ضام، وفضح المجال الجراحي. عزل مقطع 1 سم من الشريان، وربطه فضفاضة باستخدام خياطة الحرير على حد سواء القريبة والغايات البعيدة من الشريان لتعظيم التعرض.
  3. ثقب الشريان السباتي باستخدام 24 G القسطرة في الوريد، وتقدم الداني 1 سم من القسطرة نحو القلب.
  4. تأمين القسطرة مع ربطة القريبة، ومن ثم ربط ربطة عنق البعيدة.
  5. باستخدام محبس 3 في اتجاه، وربط نهاية البعيدة للقسطرة إلى أنبوب مليء بالملحية المالحة وخزان خارجي.

4. قسطرة الشريان الذيل

  1. فرك المنطقة البطني من الذيل باستخدام بيتادين و 70٪ من الإيثانول، وجعل شق الجلد 2 سم.
  2. تشريح الشريان الذيل من الهياكل المحيطة وعزل مقطع 1 سم من الشريان باستخدام ملقط منحني وملقط مقلوب.
  3. باستخدام خياطة الحرير الأسود 4.0، ضع فضفاضةالتعادل على حد سواء القريبة والغايات البعيدة من الشريان لتعظيم التعرض.
  4. ثقب الشريان الذيل باستخدام 24 G القسطرة في الوريد، وتقدم القسطرة في الشريان.
  5. تأمين القسطرة إلى السفينة (حوالي 1 سم من رأس القسطرة) مع ربطة القريبة، وربط ربطة عنق البعيدة.
  6. ربط الجزء البعيدة من القسطرة إلى جهاز مراقبة الضغط الشرياني.

5. التعريفي من الحبل الشوكي نقص التروية

  1. بعد اكتمال قسطرة، تقدم 2 الأب. البالون ذات الرؤوس القسطرة في الأبهر الصدري الهابط بحيث غيض من القسطرة تصل إلى الشريان تحت الترقوة الأيسر.
  2. أدخل إلى عمق 10 سم من موقع الإدراج.
  3. حقن 150 وحدة من الهيبارين في تركيز 100 وحدة / مل في القسطرة السباتية.
  4. تضخيم البالون القسطرة مع 0.05 مل من المياه المالحة.
  5. وفي الوقت نفسه، استنزاف الدم في حاوية الدم الخارجية من جالشريان النخاعي لتنظيم الضغط الشرياني القريبة إلى 80 ملم زئبق.
  6. ربط نظام مراقبة ضغط الشرايين إلى التجويف المتبقية من 3-طريقة وقف الديك، والسيطرة على كمية من تصريف الدم مع مراقبة الضغط الشرياني.
  7. تأكيد نجاح انسداد الأبهر عن طريق انخفاض مفاجئ وفقدان مستمر من الضغط الشرياني البعيدة.
  8. بعد انسداد الأبهر من 9، 10، أو 11 دقيقة، تنفخ بالون فوجارتي القسطرة، و ريينفوس الدم المجففة.

6. الرعاية بعد الجراحة والتقييم العصبي

  1. في حين رصد الضغط الشرياني من خلال الشريان الذيل، وإزالة القسطرة من الشرايين الفخذ والشريان السباتي وإغلاق الجروح مع خيوط الحرير.
  2. بعد التأكد من أن يتم استرداد الضغط الشرياني إلى المعدل الطبيعي، وإزالة القسطرة من الشريان الذيل وإغلاق الجرح.
  3. بعد الانتعاش من التخدير، والعودة الفئران إلى قفصها.
  4. تقييم مرحباو ظيفة الطرف الأطراف في 24 ساعة بعد الجراحة باستخدام مؤشر العجز المحرك ( الجدول 1 ). ويعرف مؤشر العجز الحركي على أنه مجموع درجة الامتناع ووضع النتيجة / منعكس خطوة. مؤشر العجز الحركي 6 يشير إلى العجز الأقصى.

7. تقييم هيستوباثولوجيك

  1. بعد التقييم العصبي، تخدير الفئران مع إيسوفلوران تسليم قناع، التضحية لهم عن طريق نضح ترانسكارديال مع 100 مل من المياه المالحة هبارينيزد تحت التخدير، واستخراج الحبل الشوكي. 8
  2. تضمين أقسام الحبل من مستوى الفقرات القطنية 3-5 في البارافين.
  3. أقسام عرضية وصمة عار مع الهيماتوكسيلين ويوزين (H & E).
  4. مراقبة إصابة الخلايا العصبية الحركية تحت المجهر. 9

8 - التحليل الإحصائي

  1. إجراء التحليل الإحصائي باستخدام الحزمة الإحصائية للعلوم الاجتماعية الإصدار 20. محرك الدفاعتم مقارنة مؤشر إيسيت من المجموعات الثلاث باستخدام اختبار كروسكال-واليس، تليها مان-ويتني U -test. واعتبر أن قيمة P- <0.05 دلالة إحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

خلال فترة من نقص تروية الحبل الشوكي، تم تنفيذ انسداد الأبهر لمدة 9 دقائق (ن = 3)، 10 دقيقة (ن = 3)، أو 11 دقيقة (ن = 3). يظهر مؤشر العجز الحركي في الفئران في الجدول 2. الفئران التي خضعت 9 دقائق من انسداد الأبهر أظهرت ضعف المحرك خفيفة وعكسها في الطرف الخلفي. الفئران تعرض ل 10 دقيقة من انسداد الأبهر عرضت مع العجز المحرك المعتدل، ولكن ليس الشلل الكامل. الفئران التي خضعت 11 دقيقة من وقت الانسداد عرض الشلل الكامل والمستمر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

في الدراسة الحالية، أثبتنا نموذج الفئران من نقص تروية الحبل الشوكي على أساس طريقة تايرا ومارسالا 5 التي تحفز درجات متفاوتة من العجز الحركي في الطرف الخلفي اعتمادا على الوقت انسداد الأبهر.

يمكن أن يؤثر طول انسداد الأبهر على درجة العجز الحركي. إذا كان وقت انسداد الأبهر أطول، يصبح العجز المحرك أكثر شدة. وهكذا، يمكن للباحثين تحقيق درجة معينة من العجز الحركي من خلال السيطرة على الوقت انسداد الأ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين مصالح مالية متنافسة. وأيد هذا العمل من خلال منحة 2012R1A1A3014010 من مؤسسة البحوث الوطنية في الحكومة الكورية.

شكر وتقدير

المؤلفين ليس لديهم اعترافات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
قسطرة استئصال الانسداد الشرياني فوغارتيإدوارد علوم الحياة120602Fقسطرة ذات رؤوس بالون يتم إدخالها في الشريان الفخذي
BD Insyte-N Autoguard Shielded IV قسطرة  BD 381411قسطرة وريدية عيار 24
50 مل حقنةلقاح كوريا  KOVAX-SYRINGE 50 ملقناع الوجه
1 مل حقنةلقاح كورياKOVAX-حقنة 1 مل
مسبار Recalجهاز هارفارد50-7221Fمسبار المستقيم لمراقبة درجة الحرارة
مقص زنبركيدقيق Jeung do bio & co.LTD النباتية.JD-S-10مقص صغير
مقص (حاد حاد)Jeungdo bio & co.LTD النباتية.S-51-12-Sمقص
ضامJeung do bio & co.LTD النباتية.JD-S-74Aضام
الملقط الجزئي  Jeung do bio & co.LTD النباتية.JD-S-29ملقط صغير
ملقط البعوض (منحني)Jeung do bio & amp co.LTD النباتية.S-44-CPKملقط منحني
ملقط خلع الملابس   ؛Jeung do bio & co.LTD النباتية.S-37-16Sملقط حاد
4/0 حرير أسود   ؛Woori MedicalS4314.0 خياطة حريرية سوداء
3-WAY STOCKSeonwon MedcalD-98-013-way stopcock
مراقبة المريضPHILIPSMP20جهاز مراقبة الضغط الشرياني.
بطانية التدفئةالإنتاجبطانية التدفئة
Microtube والخزان الخارجيالإنتاجMicrotube والخزان الخارجي
HeparinJW PharmaceuticalHeparin
0.9٪ NS 1000mlJW PharmaceuticalNormal Saline
IsofluraneHana MedIsoflurane
تشريح الذاتي الذاتي

المراجع

  1. Greenberg, R. K., et al. Contemporary analysis of descending thoracic and thoracoabdominal aneurysm repair: a comparison of endovascular and open techniques. Circulation. 118 (8), 808-817 (2008).
  2. Okita, Y. Fighting spinal cord complication during surgery for thoracoabdominal aortic disease. Gen Thorac Cardiovasc Surg. 59 (2), 79-90 (2011).
  3. Fleck, T. M., et al. Improved outcome in thoracoabdominal aortic aneurysm repair: the role of cerebrospinal fluid drainage. Neurocrit Care. 2 (1), 11-16 (2005).
  4. Kouchoukos, N. T., et al. Hypothermic bypass and circulatory arrest for operations on the descending thoracic and thoracoabdominal aorta. Ann Thorac Surg. 60 (1), 67-76 (1995).
  5. Taira, Y., Marsala, M. Effect of proximal arterial perfusion pressure on function, spinal cord blood flow, and histopathologic changes after increasing intervals of aortic occlusion in the rat. Stroke. 27 (10), 1850-1858 (1996).
  6. Tveten, L. Spinal cord vascularity. III. The spinal cord arteries in man. Acta Radiol Diagn (Stockh). 17 (3), 257-273 (1976).
  7. Woollam, D. H., Millen, J. W. The arterial supply of the spinal cord and its significance. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 18 (2), 97-102 (1955).
  8. Kennedy, H. S., Puth, F., Van Hoy, M., Le Pichon, C. A method for removing the brain and spinal cord as one unit from adult mice and rats. Lab Anim (NY). 40 (2), 53-57 (2011).
  9. Umehara, S., Goyagi, T., Nishikawa, T., Tobe, Y., Masaki, Y. Esmolol and landiolol, selective β1 adrenoreceptor antagonists, provide neuroprotection against spinal cord ischemia and reperfusion in rats. Anesth Analg. 110 (4), 1133-1137 (2010).
  10. De Ley, G., Nshimyumuremyi, J. B., Leusen, I. Hemispheric blood flow in the rat after unilateral common carotid occlusion: evolution with time. Stroke. 16 (1), 69-73 (1985).
  11. Coyle, P., Panzenbeck, M. J. Collateral development after carotid artery occlusion in Fischer 344 rats. Stroke. 21 (2), 316-321 (1990).
  12. Levine, S. Anoxic-ischemic encephalopathy in rats. Am J Pathol. 36, 1-17 (1960).
  13. Prior, B. M., et al. Time course of changes in collateral blood flow and isolated vessel size and gene expression after femoral artery occlusion in rats. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (6), H2434-H2447 (2004).
  14. Yang, H. T., Feng, Y., Allen, L. A., Protter, A., Terjung, R. L. Efficacy and specificity of bFGFincreased collateral flow in experimental peripheral arterial insufficiency. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 278 (6), H1966-H1973 (2000).
  15. Kakinohana, M., Fuchigami, T., Nakamura, S., Sasara, T., Kawabata, T., Sugahara, K. Intrathecal administration of morphine, but not small dose, induced spastic paraparesis after a noninjurious interval of aortic occlusion in rats. Anesth Analg. 96 (3), 769-775 (2003).
  16. Horiuchi, T., et al. The effects of the delta-opioid agonist SNC80 on hind-limb motor function and neuronal injury after spinal cord ischemia in rats. Anesth Analg. 99 (1), 235-240 (2004).
  17. Griepp, R. B., Griepp, E. B. Spinal cord perfusion and protection during descending thoracic and thoracoabdominal aortic surgery: the collateral network concept. Ann Thorac Surg. 83 (2), S865-S869 (2007).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

مؤشر العجز الحركيشلل الطرف الخلفيالأبهر الصدريقثطرة بالونيةالتقييم العصبيالفحص الهيستوباثولوجينموذج قابل للتكرار
نقص المحرك استنساخه بعد أوكلوسيون الأبهر في نموذج الجرذ من الحبل الشوكي نقص التروية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.