نقدم هنا، بروتوكول للإعداد وإدارة ستيريوتاكسيك للخلايا الليمفاوية البشرية متمكنة في الفئران العوز تحمل أورام الدماغ الأولية البشرية أورثوتوبيك. وتوفر هذه الدراسة من بين مفهوم إثبات للجدوى وفعالية تسليم إينترابرين إيمونوثيرابيس الخلوية انتيتومور.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نقل الخلايا المناعية السامة للخلايا في نماذج مورين لتكثيفها عديدة الأشكال جليوبلاستوما أورثوتوبيك الإنسان التبني المناظير باستخدام الأشعة
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
جليوبلاستوما عديدة الأشكال (GBM)، سرطان الدماغ الأولية الأكثر تواترا والعدوانية لدى البالغين، يرتبط عموما سوء تشخيص، وقد اقترحت العلاجات الفعالة النادرة على مدى العقد الماضي. بين المرشحين الواعدين لتصميم استراتيجيات علاجية جديدة، إيمونوثيرابيس الخلوية قد استهدفت القضاء على الغازية عاليا والكيماوي راديوريسيستانت الخلايا السرطانية، يحتمل في الارتداد السريع وقاتلة من هذا النوع من السرطان. وهكذا، سوف يمثل فرصة فريدة لتحقيق كفاءة administration(s) متمكنة من الخليج للحاسبات الآلية--رد الفعل الخلايا المناعية المستجيبة، مثل الخلايا اللمفية تي Vϒ9Vδ2 البشرية، محيط الورم والتركز الشديد للعوامل العلاجية مباشرة في الموقع من الأورام الخبيثة في الدماغ. نقدم هنا، بروتوكول للإعداد وإدارة ستيريوتاكسيك للخلايا الليمفاوية البشرية متمكنة في الفئران العوز تحمل أورام الدماغ الأولية البشرية أورثوتوبيك. وتوفر هذه الدراسة السريرية من-مفهوم إثبات للجدوى وفعالية هذه إيمونوثيرابيس الخلوية التي تعتمد على حقن المناظير باستخدام الأشعة من الخلايا الليمفاوية البشرية متمكنة داخل أسرة الورم إينترابرين انتيتومور.
المقدمة
الخليج للحاسبات الآلية (من الصف الرابع astrocytoma)، هو سرطان الدماغ الأولية الأكثر تواترا والعدوانية لدى البالغين. على الرغم من العلاجات العدوانية التي تجمع بين الجراحة والعلاج الكيميائي الإذاعة، ما زال GBM مقترنة تكهن سيئة للغاية (متوسط بقاء 14.6 شهرا و ٪ 2-السنة-وفيات > 73)1. وهذا يدل على أن السلف علاجية فعالة قليلة وقد تم التحقق من صحة على مدى العقد الماضي2. ومن بين المرشحين لتصميم استراتيجيات علاجية أكثر فعالية3،،من45، يتم استكشاف إيمونوثيرابيس6 حاليا لتعقب والقضاء على درجة عالية من الورم الغازية ومق....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وأجرى الإجراء التي تشمل الحيوان المواضيع التالية وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية (اتفاق #00186.02؛ ولجنة الأخلاقيات الإقليمية لوار de la يدفع [فرنسا]). وكانت ببمكس البشرية المعزولة من الدم التي جمعت من الجهات المانحة صحية مستنيرة (المؤسسة الفرنسية دو سانغ نانت، فرنسا). يتم تنفيذ كافة الخطوات تحت ظروف معقمة.
1-غير محددة توسيع لمفاوية المستجيب السامة للخلايا T
- إعداد وتشعيع الخلايا المغذية في غراي 35. للحث على 2 × 105 -4 × 105 خلايا المستجيب، وإعداد ببمكس 10 × 106 و 1 × 106 بلكلس من ثلاث جهات مانحة متميزة وصحية.
- ريسوسبيند تغذية الخلايا والخلايا المستجيب في 15 مل ربمي تستكمل مع الس....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تصف هذه الدراسة استراتيجية نقل التبني المستجيب المناعي الخلوي الخلايا داخل دماغ الفئران الحاملة للورم، استناداً إلى المناظير باستخدام الأشعة الحقن مباشرة داخل السرير الورم.
للحد من أي خطر لإصابة في الدماغ المرتبطة بكمية كبيرة من حقن، تعليق خلية المستجيب يحتاج إلى تركيز (20 × 106 خلايا في 15-20 ميليلتر من برنامج تلفزيوني). للتحقق من ما إذا كانت هذه الخطوة تركيز الخلية قد تؤثر على بقاء خلايا المستجيب، وأعدت وفقا لبروتوك.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تحديد تحويل التبني بشكل أصلي أو خلايا المستجيب مأمن هندسيا يمثل نهجاً واعداً لكفاءة علاج الأورام، مثل سرطان الدماغ إينفيلتراتيفي، العناية بالحد من ريكتيفيتيس ضد الخلايا غير تحويل15، 17،،من 1618. ومع ذلك، النظام العصبي المركزي الذي يشمل الدماغ، قد وضعا محصنة خاصة، لا سيما بسبب وجود حاجز الدم في الدماغ وعدم وجود نظام التصريف اللمفاوي الكلاسيكية19،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
يشكر المؤلفون موظفي المستشفى الجامعي الحيوانية المرفق (يوت) نانت لتربية الحيوانات والرعاية والخلوية و tissular التصوير المرافق الأساسية من جامعة نانت (ميكروبيسيل) للتصوير، ومرفق الخلوي (سيتوسيل) من مدينة نانت لخبراء المساعدة التقنية. تم تمويل هذا العمل من INSERM ويزأر، جامعة نانت، معهد السرطان الوطني دو (INCa #PLBio2014-155)، الرابطة الوطنية le مكافحة السرطان (AO الأقاليمي 2017) والاتحاد الأوروبي Transcan2 العصر-صافي (إيمونوجليو). وتمول الفريق بلوس أنجليس من أجل مؤسسة "بحوث ميديكال" (DEQ20170839118). وقد أدركت هذا العمل في سياق لابيكس مكتب المفتش العام ودعم برامج رامي سيستي، قبل "يشرف وكالة الأبحاث الوطنية" دعفينير عن طريق البرامج ANR-11-لابكس-0016-01 و ANR-1....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| PBMCs | من 3 متبرعين أصحاء مختلفين | ||
| BLCLs | من 3 مانحين مختلفين معهد | ||
| روزويل بارك التذكاري المتوسط (RPMI) | Gibco | 31870-025 | |
| FCS | Dutscher | S1810-500 | |
| L-glutamine | Gibco | 25030-024 | |
| البنسلين / الستربتومايسين | جيبكو | 15140-122 | |
| IL-2 | Novartis | proleukin | |
| PHA-L | Sigma | L4144 | |
| الإطار التجسيمي | Stoelting Co. | 51600 | |
| محول الماوس للإطار التجسيمي ؛ | شركة ستويلتينج | 51624 | |
| حاقن مضخة المحقنة الدقيقة | WPI | UMP3-4 | |
| NanoFil حقنة | WPI | NF34BV-2 | |
| NSG الفئران | تشارلز ريفر | NSGSSFE07S | |
| الكيتامين | Merial | Imalg & egrave ؛ ني 1000 | |
| زيلازين | باير | رومبور 2٪ | |
| مقص | WPI | 201758 | |
| ملقط | WPI | 501215 | |
| OmniDrill 115 / 230V | WPI | 503598 | |
| Vicryl 4-0 | Ethicon | VCP397H | |
| Xylocaine | Astrazeneca | 3634461 |
المراجع
- Stupp, R., Roila, F. Malignant glioma: ESMO clinical recommendations for diagnosis, treatment and follow-up. Annals of Oncology. 20 Suppl 4, 126-128 (2009).
- Weller, M., Cloughesy, T., Perry, J. R., Wick, W. Standards of care for treatment of....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
