يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تضيق أذينية الأيسر الناجم عن أرتيرياليزيشن الوريدي الرئوي وارتفاع ضغط الدم الرئوي المجموعة 2 في الفئران

7.2K مشاهدة

DOI:

10.3791/58787

نوفمبر 18, 2018

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

تضيق أذينية الأيسر (جامعة الدول العربية) تقنية جراحية رواية تستخدم لدراسة آليات الكامنة وراء أرتيرياليزيشن وريدي رئوي وارتفاع ضغط الدم الرئوي المجموعة 2 (PH). نقدم هنا، بروتوكولا لانقباض الاذين الأيسر استخدام قصاصة تيتانيوم تسبب أرتيرياليزاتيون وريدي رئوي ومعتدلة الحموضة في الفئران.

الملخص

إليه أرتيرياليزيشن الوريدي الرئوي الناجم عن تضيق التاجي وارتفاع ضغط الدم الرئوي المجموعة 2 (PH) غير واضح. لا يوجد أي نموذج القوارض من المجموعة 2 درجة الحموضة، بسبب تضيق التاجي (مللي ثانية)، لتسهيل عملية التحقيق لآليات المرض والاستراتيجيات العلاجية المحتملة. نحن نقدم نموذج الفئران رواية الرئوي الوريدي التي يسببها الازدحام الرئوي وريدي أرتيرياليزيشن والمجموعة 2 درجة الحموضة الناجمة عن تضيق أذينية الأيسر (جامعة الدول العربية). ويتحقق لاس بتقيد الاذين الأيسر استخدام قصاصة تيتانيوم نصف مغلقة. بعد عملية جراحية لاس، فأر نموذجية مع سرعة تدفق ترانسميترال أكبر من أو يساوي 2.0 m/s في ضربات القلب يتطور تدريجيا أرتيرياليزيشن وريدي رئوي والمجموعة 2 درجة الحموضة لفترة 8 إلى 10 أسابيع. في هذا البروتوكول، ونحن نقدم إجراءات خطوة بخطوة كيفية إجراء عملية جراحية لاس. نموذج الفئران لاس قدم يقلد مرض التصلب العصبي المتعدد في البشر وهي مفيدة لدراسة الآلية الجزيئية الكامنة من أرتيرياليزاتيون وريدي رئوي والتقييم السريري للعلاجات للمجموعة 2 درجة الحموضة.

المقدمة

والغرض من هذه المقالة لإثبات الإجراء خطوة بخطوة كيفية إجراء عملية جراحية لاس في الفئران. جراحيا الناجمين عن جامعة الدول العربية عن كثب يحاكي مرض التصلب العصبي المتعدد وكور ترياترياتوم في البشر، والتي تنطوي على خلق عقبة الميكانيكية في الاذين الأيسر1. عرقلة تدفق البطين الأيسر (LV) غالباً ما يسبب احتقان في الدورة الدموية الوريدية الرئوية، والمرضى تدريجيا وضع الأس الهيدروجيني. تصنف "منظمة الصحة العالمية" PH بسبب أمراض القلب الأيسر كمجموعة 2، وهي المجموعة الأكثر انتشارا لدرجة الحموضة2،،من34. تشخيص درجة الحموضة في المرضى الذين يعانون من أمراض القلب الأيسر يرتبط بأكبر من زيادة بنسبة سبعة إضعاف في الوفيات الموحد 1-السنة4. حاليا، لا يوجد أي العلاج المعتمد للمجموعة 2 درجة الحموضة وبصرف النظر عن علاج الكامنة وراء ترك أمراض القلب (مثلاً، استبدال جراحيا ضيق الصمام التاجي). ومع ذلك، استبدال الصمام التاجي فعالة حتى لا حل PH تماما في حوالي نصف المرضى الذين يعانون من مرض التصلب العصبي المتعدد5. هذا الرقم الهيدروجيني المستمر سبب المعاكسة انسداد الأوعية الدموية يعيد البناء، الذي غير مفهومة. ومن ثم فنماذج حيوانية هامة لتعزيز فهمنا للآليات الجزيئية الكامنة سلبية انسداد الأوعية الدموية يعيد البناء في المجموعة 2 درجة الحموضة.

وهناك عدد قليل من النماذج الحيوانية من المجموعة 2 الأستاذ الشريان التاجي ربط6،7 وعرضية الابهري النطاقات8،،من910 في القوارض الأكثر استخداماً في نماذج حيوانية PH المجموعة 2. أما العيب الرئيسي لهذه النماذج هو إشراك LV، مما يجعل من الصعب تفسير نتائج الدراسات الأس الهيدروجيني المجموعة 2. على النقيض من ذلك، يظل الوقف سليمة في نموذج جامعة الدول العربية. وعلاوة على ذلك، نموذج جامعة الدول العربية ذات الصلة سريرياً نظراً لأنه يؤدي إلى تنمية بطيئة وتدريجية لدرجة الحموضة أكثر من 10 أسابيع فترة11. في البشر، ويعتبر مرض التصلب العصبي المتعدد كبيرة إذا ترانسميترال سرعة تدفق دوبلر أكبر من 2.0 m/s11، ونحن أيضا استخدام هذا الرقم كوقف لتحديد ما إذا كانت عملية جراحية لاس قد أنتجت تضيق كبير. وعلاوة على ذلك، على الرغم من أن ينشئ نموذج جامعة الدول العربية الرقم الهيدروجيني أو معتدلة، فإنه يوضح التغيرات النسجية مميزة، مماثلة لتلك الموجودة في البشر المرضى، إلا وهي تنمية أرتيرياليزيشن وريدي الخزعات11. وهو نموذج الفئران لاس رواية ومجموعة ذات الصلة سريرياً 2 PH نموذج مع الحفاظ على وظيفة LV. ومناسبة لدراسة الفسيولوجيا المرضية لاستمرار انسداد الأوعية الدموية يعيد البناء، وتحديد أهداف جزيئية واختبار علاجات جديدة للمجموعة 2 درجة الحموضة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

قد أقرها البروتوكول التجريبي لاس جيكي جامعة مدرسة من الطب الحيوان رعاية اللجنة والبحوث الجامعية ولجنة الأخلاقيات (بروتوكول #2015-118).

1-قبل العملية إعداد

  1. بعد وصوله إلى مرفق الحيوانية، تقديم ذكور الفئران "سبراغ داولي" عمرها 5 الأسبوع بين 150 إلى 200 جرام بالأسبوع 1 إلى تأقلم إلى منزلهم الجديد قبل العملية.
  2. إعداد المعدات التالية قبل الجراحة بالتعقيم: 1) تنفس حيوانات صغيرة، 2) جهاز تخدير، 3) طقم تنبيب (تتألف من زوج من الملقط هيموستات وخافضة اللسان أنجيوكاثيتير ز 18)، والأدوات الجراحية 4) (الذي تشمل زوج من منحنى ملقط، وزوج من الملقط مستقيم، سائق إبرة، ضام صدر، مقص، خياطة شعيرات 5-0، قضيب مقطع، مقاطع متوسطة-كبيرة، وأنبوب صدر ز 23).
  3. قد العقيمة Q-نصائح وشاش مستعدة للتعامل مع النزيف.
  4. استخدم وسادة تدفئة للحفاظ على درجة حرارة جسم الحيوان حوالي 37 درجة مئوية خلال الجراحة.

2-التخدير والتنبيب داخل الرغامى

  1. تخدير الفئران في تشكيل غرفة التعريفي مع إيسوفلوراني 5% مختلطة مع هواء الغرفة 2 لتر في الدقيقة.
  2. قبل التنبيب، حلق شعر الصدر في الفئران مع ماكينة حلاقة شعر وتطبيق كريم لإزالة الشعر لإزالة الشعر الجميلة.
  3. تحقق منعكس دواسة لتأكيد نجاح التخدير قبل تنبيب.
  4. ربط الأسنان الأمامية مع سلسلة وتأمين السلسلة مع دبابيس اثنين.
  5. فتح الفم في الفئران باستخدام الملقط هيموستات وإدراج خافضة اللسان في الفم.
  6. رفع خافضة اللسان لتصور الحبل الصوتية.
    ملاحظة: من المفيد تسليط ضوء الشديد على منطقة الرأس من الفئران للمساعدة في تصور الحبل الصوتية.
  7. إدراج أنجيوكاثيتير ز 18 كأنبوب داخل رغامى إلى القصبة الهوائية، ومن ثم، بسرعة، الاتصال القسطرة جهاز تنفس اصطناعي.
  8. تعيين حجم المد ميليلتر 10 جرام بمعدل تنفسي نفسا 100/دقيقة.
  9. المحافظة على التخدير مع إيسوفلوراني 2% مختلطة مع هواء الغرفة 2 لتر في الدقيقة.

3-إعداد موقع الجراحية

  1. إعداد الموقع الجراحي مع دعك الكلورهيكسيدين والكحول x3 بالتناوب.
  2. إعطاء البوبرينورفين 0.01 مغ/كغ تحت الجلد.
  3. تغطية الفئران مع ثني عقيمة.
  4. تحقق منعكس دواسة للتأكد من تنبيب ناجحة وصيانة للتخدير.

4-جراحة تضيق الرجفان الأيسر

  1. وضع علامة على موقع شق 2 سم تحت الإبط الأيسر في الفئران مع قاعدة.
  2. جعل سم 2 ترك شق جدار الصدر الجانبي مع زوج من مقص.
  3. فصل العضلات ربية بين الرابع والضلع الخامس، باستخدام المستقيم ومنحني ملقط, حتى دخول تجويف الصدر.
  4. إدراج ضام الصدر في تجويف الصدر. الاستمرار في استخدام الملقط مستقيمة ومنحنية لفصل العضلات ربية للحصول على مرئيات مباشرة الغدة الصعترية والقلب.
  5. رفع الغدة الصعترية مع زوج من الملقط على التوالي. إزالة الغدة الصعترية تغطي القلب مع زوج من مقص. تجنب قطع أو دس في أي الأوعية الدموية الرئيسية.
  6. تمرير خياطة شعيرات 5-0 من خلال سطح البطين الأيسر، حق أدناه أطرافهم أذينية الأيسر بعناية. تجنب تمرير إبرة عن طريق الشرايين التاجية الرئيسية.
  7. بعد الخياطة في مكان، وليس هناك أي نزيف كبير، قرانهما فضفاضة.
  8. سحب الخيط خياطة، وإلى الأمام لإخراج القلب من الصدر.
  9. حالما يتم انتشال القلب من الصدر، بسرعة تطبيق قصاصة متوسطة كبيرة الاذين الأيسر، فقط فوق الصمام التاجي.
    ملاحظة: المقطع هو نصف الطريق مغلقة، بطرف القصاصة معسر الاذين الأيسر، تسبب تضيق أذينية الأيسر.
  10. وضع بسرعة مرة أخرى القلب في صدره. التأكد من القلب ليس خارج الصدر لمدة أطول من 30 ثانية.
  11. إزالة خياطة إقامتهم تستخدم لرفع القلب.
  12. إغلاق الصدر مع خياطة الجروح شعيرات 5-0، استخدام نمط توقف بسيطة.
  13. إدراج أنبوب صدر ز 23 يعلق على حقنه 10 مل في صدره، ومن ثم المضي قدما مع إغلاق عضلات جدار الصدر والجلد بخيوط توقف بسيطة.
  14. استخلاص أي الهواء والدم، والانصباب الجنبي عبر أنبوب الصدر المدرج، استخدام المحاقن cc 10 المرفقة، ومن ثم، سحب الأنبوب.
  15. إغلاق طبقة الجلد بخياطة الجروح شعيرات 5-0، استخدام نمط توقف بسيطة.
  16. إعطاء البوبرينورفين 0.01 مغ/كغ تحت الجلد.
  17. إيقاف تشغيل في إيسوفلوراني.
  18. قطع الاتصال جهاز تنفس اصطناعي بعد هو لاحظ التنفس العفوي.
  19. الحفاظ على الفئران تنبيب والسماح له باسترداد على لوحة تدفئة حتى أنه يستيقظ.
  20. أمان اكستوباتي الفئران بعد واحد أو أكثر من العلامات التالية/هي ملاحظة: الفئران يبدأ التحرك على أطرافه الأربعة، تستعيد بها منعكس رايتينج، تستعيد به منعكس هفوة أو يعرض يفرغ عفوية.

5-بعد العمليات الجراحية الرعاية

  1. كل ح 8-12، البوبرينورفين تعطي 0.01 مغ/كغ تحت الجلد. والايبوبروفين يعطي 5 ملغ/كغ تحت الجلد يوميا لمدة يومين، وبعد ذلك، حسب الحاجة، إذا الفئران لم يتحرك جيدا ويبدو أنها في الألم.
  2. إعطاء 5 مل من المحلول الملحي العادي تحت الجلد مباشرة بعد الجراحة، كما الفئران قد يجدون صعوبة في الشرب من حنفية الماء، فورا بعد العملية الجراحية.

6-تأكيد نجاح تضيق أذينية الأيسر مع تخطيط صدى القلب

  1. القيام تخطيط صدى القلب عبر الصدر 2 أسابيع بعد الجراحة لتحديد سرعة التدفق المنخفض.
  2. تخدير الفئران اتباع الخطوات المذكورة في القسم 1.
  3. وبعد إدخال التخدير، المحافظة على التخدير استخدام مخروط الآنف مع إيسوفلوراني 2% مختلطة مع هواء الغرفة 2 لتر في الدقيقة.
  4. يحلق جدار الصدر في الفئران مع ماكينة حلاقة شعر واستخدام كريم لإزالة الشعر لإزالة الشعر المتبقية أي.
  5. وضع مسبار الموجات فوق الصوتية على قمة القلب، والذي حول الفضاء ربية الخامس على الجانب الأيسر من الصدر. نقل التحقيق في هذه المنطقة حتى يتم الحصول على عرض الدائرة أربعة جيد.
  6. قياس سرعة التدفق LV استخدام طريقة دوبلر موجه نابض فقط فوق الحلقة الصمام التاجي.
  7. مطلوب سرعة تدفق LV أكبر من 2.0 m/s لتطوير ارتفاع ضغط الدم الرئوي معتدلة في 8-10 أسابيع لاس بعد الجراحة.

7-شام العملية

  1. باستثناء تطبيق القصاصة (الخطوة 4.9)، القيام بجميع الخطوات المذكورة أعلاه لخلق الفئران التحكم مطابقة العمر، تعمل بالشام (شركة نفط الجنوب).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

ويؤكد فعالية جامعة الدول العربية باستخدام تخطيط صدى القلب، 2 أسابيع بعد العملية الجراحية. وتعتبر الفئران سرعة تدفق LV أكبر من 2.0 m/s، تقاس بوجهة نظر الدائرة أربعة، وضعت تضيق كبيرة (الشكل 1) ووضع موثوق PH معتدلة وأرتيرياليزيشن وريدي رئوي 8-10 أسابيع لاس بعد الجراحة.

جراحة لاس بعد عشرة أسابيع، تظهر الفئران في المجموعة لاس توسيع أذينية اليسرى (الشكل 2) واحتقان رئوي (

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الفئران لاس هو نموذج PH رواية مجموعة 2 التي تلقت بالفعل تحظى باهتمام كبير من الباحثين في الحقل12،13. مقارنة بالنماذج الموجودة المجموعة 2 اثنين، هما الوريد الرئوي تضيق (PVS) نموذج14، استخدام الخنازير، وسوبراكوروناري الابهري النطاقات (SAB) الفئران النموذجي8،9،10، نموذج الفئران لاس قد عدة والمزايا. مقارنة بالنموذج خنزير صغير PVS، نموذج الفئران لاس تك...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

الكتاب يعترف "المجتمع" ميتكس واليابان للبرنامج الصيفي للنهوض بالعلوم (JSPS). وكان شيونغ يو بينغ مدعومة بتمويل من "البرنامج الصيفي" JSPS ميتكس بزيارة "كلية الطب بجامعة جيكي". الدكتور ميناميساوا معتمد جزئيا بوزارة التربية والتعليم، والثقافة والرياضة، والعلوم والتكنولوجيا في اليابان (س. م.)، البرنامج ميكستسوبورتيد "مؤسسة الأبحاث الاستراتيجية" في القطاع الخاص الجامعات (س. م.)، "سيارة سباق التذكارية" مؤسسة (س. م.)، وجيكي جامعة الدراسات العليا البحوث الصندوق (س. م.) بتقديم الدعم المالي لهذا المشروع. الدكتور آرتشر معتمد جزئيا بالولايات المتحدة الوطنية معاهد للصحة (المعاهد الوطنية للصحة) منح المعاهد الوطنية للصحة 1R01HL113003-01A1 (جيش)، والمعاهد الوطنية للصحة 2R01HL071115-08 (جيش)، المؤسسة الكندية للابتكار، والطبقة 1 كرسي أبحاث كندا في ديناميات Mitochondrial ويشغل الطب (جيش) ومؤسسة ويليام ج. هندرسون، شبكة الأوعية الدموية الكندي، ووحدة القلب للملكة (قكبو).

الكتاب يعترف السيد كوكوبو تاداشي، "رئيس خدمات التصوير الفوتوغرافي" لمركز المعلومات الأكاديمية في "جيكي جامعة مدرسة الطب"، لتصوير الفيديو.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
5-0 برولين خياطةجونسون & أمبير جونسون -8725HHEMO-SEAL Technology
Wakenyaku Co.، Ltd.BRTK-100Aمضخة الهواء وآلة التخدير
سلك توجيه قسطرة وعائية سلكتوجيه عصامي10 سم يتم لصقه على حقنة 1 سم مكعب ؛
ضام الصدرNatsume Seisakusho المحدودةF-2
أنبوب الصدر 23Gحقنة ذاتية الصنع10 سم مكعب متصلة بإبرة 23G بالإضافة إلى أنبوب بلاستيكي
ملقط منحنيNatsume Seisakusho Co.، Ltd.A-14
وسادة التدفئةVivariaMP-916-NVحافظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية
Horizon Ligating ClipsTeleflexREF 003200حجم متوسط وكبير
الأفق اليدوي تحميل ربط كليب التطبيق لمتوسط الحجم HorizonTeleflexREF 337085مقاطع ربط الفك بزاوية ، (20 سم)
حامل إبرةNatsume Seisakusho Co.، Ltd.MC-40
جهاز التنفس الصناعي للقوارضCWE IncSAR-830 / Pجهاز التنفس الصناعي للحيوانات الصغيرة
Natsume Seisakusho Co.، Ltd.B-12مقص مستقيم بشكل مثالي مع أطراف مستديرة
ملقط مستقيمNatsume Seisakusho Co.، Ltd.A-7
خافض اللسانUchida Yoko Co.، Ltd.8-615-2417استخدم الطرف العريض
خياطة البولي بروبلين Ethicon مع آلة التخدير مقص

المراجع

  1. McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease. Circulation. 31, 263-272 (1965).
  2. Strange, G., et al. Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort. Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).
  3. Moreira, E. M., et al. Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study. PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).
  4. Wijeratne, D. T., et al. Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada. Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).
  5. Briongos Figuero, S., et al. Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement. Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).
  6. Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure. European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).
  7. Dayeh, N. R., et al. Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice. Scientific Reports. 8, (2018).
  8. Yin, J., et al. Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure. Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).
  9. Wang, Q., et al. The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease. PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).
  10. Hunt, J. M., et al. Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease. American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).
  11. Fujimoto, Y., et al. Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).
  12. Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).
  13. Alsoufi, B. Not a Cinderella story. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).
  14. Kato, H., et al. Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of "upstream" pulmonary veins. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم