تقدم هذه الدراسة نموذجا حيوانيا كبيرا قابلا للاستنساخ للغاية لإصابة نقص التروية الكلوية في الخنازير باستخدام انسداد ثنائي ثنائي مؤقت للقسطرة بالون عن طريق الجلد للشرايين الكلوية لمدة 60 دقيقة وإعادة التروية لمدة 24 ساعة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج حيواني كبير لإصابة الكلى الحادة عن طريق انسداد الشريان الكلوي الثنائي المؤقت
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ترتبط الإصابات الكلوية الحادة بارتفاع خطر الإصابة بالمراضة والوفيات بعد الجراحة. إصابة الإسكيمية والتشويش (IRI) هي السبب الأكثر شيوعا ل AKI. لمحاكاة هذا السيناريو السريري، تقدم هذه الدراسة نموذجا حيواني كبير قابل للاستنساخ للغاية من IRI الكلوي في الخنازير باستخدام انسداد ثنائي ثنائي عن طريق الجلد مؤقت للقسطرة بالون من الشرايين الكلوية. يتم انسداد الشرايين الكلوية لمدة 60 دقيقة عن طريق إدخال قسطرات البالون عبر الشريان الفخذي وال السباتي ودفعها إلى الجزء القريب من الشرايين. يتم حقن التباين Iodinated في الشريان الأورطي لتقييم أي عتامة في الأوعية الكلوية وتأكيد نجاح انسداد الشريان. ويؤكد ذلك كذلك من خلال تسطيح شكل الموجات النبضية في طرف قسطرة البالون. يتم تفريغ البالونات وإزالتها بعد 60 دقيقة من انسداد الشريان الكلوي الثنائي ، ويسمح للحيوانات بالتعافي لمدة 24 ساعة. في نهاية الدراسة ، يزداد الكرياتينين البلازما ونيتروجين اليوريا في الدم بشكل كبير ، في حين ينخفض إنتاج eGFR والبول بشكل كبير. الحاجة إلى التباين iodinated هو الحد الأدنى ولا يؤثر على وظيفة الكلى. الانسداد الشريان الكلوي الثنائي يحاكي بشكل أفضل السيناريو السريري لنقص التروية الكلوية في العراء ، ويقلل النهج عن طريق الجلد من تأثير الاستجابة الالتهابية وخطر العدوى التي ينظر إليها بنهج مفتوح ، مثل استئصال البطن. القدرة على إنشاء وإعادة إنتاج هذا النموذج الخنازير ذات الصلة سريريا يخفف من الترجمة السريرية للبشر.
المقدمة
إصابة الكلى الحادة (AKI) هي حالة يتم تشخيصها عادة بين المرضى الجراحيين المرتبطين بالمراضة والوفيات الكبيرة1،2. وتظهر البيانات المتاحة أن AKI يمكن أن تؤثر حتى على نصف جميع المرضى في المستشفيات في جميع أنحاء العالم ويؤدي إلى 50٪ معدل الوفيات في المرضى في وحدة العناية المركزة1،3. على الرغم من انتشاره المرتفع، لا يزال العلاج الحالي ب AKI يقتصر على الاستراتيجيات الوقائية، مثل إدارة السوائل وغسيل الكلى. لذلك ، هناك اهتمام مستمر باستكشاف العلاجات البديلة ل AKI4و5و6.<....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
أجريت جميع الدراسات الحية وفقا للمبادئ التوجيهية للمعاهد الوطنية للصحة بشأن رعاية الحيوانات واستخدامها ووافقت عليها لجنة رعاية الحيوانات واستخدامها في مستشفى بوسطن للأطفال (البروتوكول 18-06-3715). وتلقى جميع الحيوانات رعاية إنسانية امتثالا لدليل رعاية واستخدام المختبر. يوضح الشكل 1 الجدول الزمني بما في ذلك التخدير والتحضير الجراحي والنقاط الزمنية لقياسات النتائج الأولية لهذه الدراسة.
1. الحث والتخدير والتنبيب
- لمنع الإجهاد وعدم الراحة لا لزوم لها، وتخدير الخنازير عن طريق الحقن العضلي من خليط من tiletamine / zolazepam 4-6 ملغ / كغ وxylazine 1.1-2.2 ملغ / كغ، فضلا عن isoflurane 3٪ باستخدام قناع الوجه.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
التحليل الوظيفي
النتائج التمثيلية لهذه الدراسة تنشأ من 6 والبيانات المعروضة هي متوسط ± خطأ قياسي في المتوسط. يتم تقييم وظيفة الكلى عن طريق تحديد إخراج البول، ومعدل الترشيح الكبيبي المقدر (eGFR)، والكرياتين البلازما، ونيتروجين اليوريا في الدم (BUN). يتم تقييم المؤشرات الحيوية للوظيفة الكلوية باستخدام محلل كيمياء محمول. يتم حساب eGFR وفقا للصيغة التالية: eGFR = 1.879 × BW1.092/ PCr0.6 (BW: وزن الجسم بالكيلوغرام؛ PCr: الكرياتينين البلازما في ملغم / ديسيلت)
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
AKI هو اضطراب سريري شائع يؤثر على ما يصل إلى 50٪ من المرضى البالغين في المستشفى في جميع أنحاء العالم6،12. وهناك حاجة إلى نموذج حيواني ذي صلة سريريا لمواصلة التحقيق في الفيزيولوجيا المرضية للمرض والأهداف العلاجية المحتملة. على الرغم من أن هناك العديد من نماذج مورين تكرار AKI، وهذه لا تحاكي تماما سيناريوهات السريرية الخاصة بهم وتشريح الكلى البشرية. تقترح هذه الدراسة نموذج الخنازير ذات الصلة سريريا للسماح للترجمة إلى البشر13.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ولا يعلن صاحبا البلاغ عن وجود مصالح مالية متنافسة.
شكر وتقدير
ونود أن نشكر الدكتور آرثر نيدر على مساعدته وتوجيهاته. وقد دعم هذا العمل جائزة ريتشارد أ. وسوزان ف. سميث للابتكار، ومايكل ب. كلاين والأسرة، ومؤسسة سيدمان العائلية، ومؤسسة مايكل ب. روكين الخيرية، وصندوق كينيث غريفين للبحوث الخيرية، ومجلس الاستثمار في بوسطن.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 0.9٪ حقن كلوريد الصوديوم ، USP ، حاوية بلاستيكية 100 مل viaflex | Baxter | 2B1302 | لترطيب الحيوان |
| تباين العامل 100.0 مل وسائط الحقن btl ioversal 74٪ | CARDINAL HEALTH | 133311 | لتصور الأوعية |
| Bard Bardia حقيبة تصريف البول ذات النظام المغلق | BARD Inc | 802001 | لجمع البول |
| BD Vacutainer K2 EDTA | BD BD | 367841 | لتخزين عينات الدم |
| BD Vacutainer ليثيوم الهيبارين | BD | 366667 | لتخزين عينات |
| الدم Betadine | Henry Schein | 6906950 | لتطهير الجلد |
| ضام Bookwalker | Codman | لتراجع الجلد | |
| Bupivacaine 0.25٪ | Hospira | تدار في موقع الشق للتسكين | |
| بوبرينورفين SR | Zoo Pharm | زجاجة 10 مجم / مل ، الجرعة: 0.2 مجم / كجم SC | |
| القسطرة الوعي 5.0 Fr x100.0 سم 0.038 في JR4 | MERIT MEDICAL SYSTEM INC | 7523-21 | لتحديد الشرايين الكلوية أنبوب |
| القصبة الهوائية المقيد | Emdamed | لإنشاء مجرى هوائي آمن طوال مدة العملية | |
| EKG Medtronics- Physiocontrol LifePak 20 جهاز مراقبة تشبع الأكسجين | GE Healthcare Madison WI | لمراقبة تشبع الأكسجين | |
| Encore 26 منفاخ | بوسطن العلمي | 710113 | لتضخيم قسطرة البالون |
| الإيثانول 95٪ (كحول إيثيلي) | هنري شاين | لتطهير الجلد | |
| رقعة الفنتانيل | مايلان | الجرعة: 25-50 ميكروغرام / ساعة ، TD | |
| الذهب المغلفة بالسيليكون | فولي TELEFLEX MEDICAL INC | للبول مجموعة | |
| هيبارين الصوديوم | LEO Pharma A / S | الجرعة: 200 وحدة دولية / كجم | |
| IV i33 آلة الموجات فوق الصوتية | فيليبس | استخدم إرشادات الموجات فوق الصوتية لكسطرة الفخذ إذا لزم الأمر | |
| سلك دليل التشخيص Inqwire - 0.035 بوصة (0.89 مم) - 260 سم (102 بوصة) - 1.5 مم J-tip | MERIT MEDICAL SYSTEM INC | 6609-33 | لتوجيه قسطرة البالون إلى الشرايين |
| الكلويةقسطرة وريدية ، مقاس 20 | مقياس سانتا كروز للتكنولوجيا الحيوية | SC-360097 | لإدارة السوائل |
| Isoflurane | Patterson Veterinary Supply، Inc. | جرعة 21283620 | : 3٪ ، INH |
| Metzenbaum حادة منحنية 14.5 سم - 5 (3/4) " | رودولف ميديكال | RU-1311-14M | لتشريح الأنسجة وقطعها |
| مجموعة محول الطاقة القابل للتصرف لحديثي الولادة مع جهاز تدفق 30 مل / ساعة ومحبس مزدوج رباعي الاتجاهات للمراقبة المستمرة | Argon Medical | 041588505A | لقياس الضغط |
| قسطرة التوسع Powerflex pro PTA 6 × 20 مم - طول العمود (135 سم) | CARDINAL HEALTH | 4400602X | لانسداد الشرايين الكلوية |
| خطوط مراقبة الضغط mll / mll - 12 بوصة واضحة ، mll / mll | Smiths Medical | B1571 / MX571 | لقياس الضغط |
| حزمة الإجراء | Molnlycke Health | Care 97027809 | الستارة الجراحية ، وسادات الشاش ، والمحاقن ، والدورق ، إلخ |
| البروتامين | هنري شاين | 1044148 | لعكس الهيبارين |
| شفرة مشرط - مقاس # 10 | صحة الكاردينال (الولاء) | 32295-010 | لشقوق الجلد |
| محبس الرابع 4 اتجاهات lrg تجويف rotg ذكر ll adptr strl | Peoplesoft | 1550 | لتوصيل الأنابيب |
| ضام جانبي مستقيم | Codman | لسحب الجلد | |
| خياطة perma hnd 18in 2-0 جديلة الحرير blk | CARDINAL HEALTH 1 | A185H | لخياطة موقع الشق وتأمينها القسطرة |
| حقنة حقنة التباين 10 مل ثابت ذكر لور أحمر | MERIT MEDICAL SYSTEM INC | MSS111-R | لإدارة عامل التباين |
| حقنة طبية 60 مل ll plst strl ltx disp free | CARDINAL HEALTH 1 | BF309653 | لجمع البول وتنظيف الأوعية |
| Tilzolan (تيلتامين / زولازيبام) شركة | باترسون للإمدادات البيطرية، إنك. | 07-893-1467 | الجرعة: 4-6 مجم / كجم ، IM |
| Xylazine | Putney ، INC | الجرعة: 1.1-2.2 مجم / كجم ، IM |
المراجع
- Ali Pour, P., Kenney, M. C., Kheradvar, A. Bioenergetics consequences of mitochondrial transplantation in cardiomyocytes. Journal of the American Heart Association. 9 (7), 014501(2020).
- Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
