يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

زراعة ونمو وصلاحية بكتيريا حمض اللاكتيك: منظور مراقبة الجودة

10.5K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/63314

⸱

يونيو 16, 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Food and Nutritional Sciences, North Carolina A&T State University, Greensboro, NC, USA, 2Department of Nanoscience, Joint School of Nanoscience and Nanoengineering, University of North Carolina, Greensboro, NC, USA, 3Department of Biotechnology, University of Food Technologies, Plovdiv, Bulgaria

في هذه المقالة

ملخص

تم تأكيد تقييم مراقبة الجودة لمزارع بكتيريا حمض اللاكتيك (LAB) كطريقة فعالة لتعزيز صلاحية ووظائف سلالات LAB لإجراءات التخمير. لدعم هذا التأكيد ، قمنا بتطوير بروتوكول يوضح كيفية تنشيط مزارع LAB وزراعتها لإجراءات التخمير والمعالجة الحيوية.

الملخص

بكتيريا حمض اللاكتيك (LAB) هي مزارع أساسية لبداية الألبان تستخدم بشكل كبير لتصنيع منتجات الألبان المخمرة مثل الزبادي والجبن. تنتج LAB في الغالب حمض اللاكتيك كمنتج نهائي رئيسي للتخمير ، وتقوم بتوليف المستقلبات المهمة التي تنقل الخصائص الحسية للمنتجات الغذائية المخمرة. LAB هي بكتيريا شديدة الحساسية تزدهر في العديد من البيئات عندما يتم تلبية المتطلبات الغذائية الكافية. أدى الطلب على مزارع بداية الألبان LAB المتفوقة لتطبيقات التخمير في صناعة الأغذية والألبان إلى الحاجة إلى توفير مزارع قابلة للحياة ونشطة لجميع عمليات المعالجة الحيوية. وبالتالي فإن تطوير بروتوكول قياسي لضمان الجدوى والوظائف المحسنة لمزارع LAB في المختبر وكذلك بيئات معالجة الألبان أمر بالغ الأهمية. في معالجة المخاوف المرتبطة بإنعاش خلايا زراعة LAB الضعيفة والمجهدة والمصابة ، فإن البروتوكول الذي يحدد بوضوح الخطوات البارزة للتعافي ، وتعزيز تجديد الخلايا ، وتحسين وظائف التمثيل الغذائي لسلالات LAB له أهمية قصوى. يعد الحفاظ على نقاء الثقافة ووظائفها وصلاحيتها لثقافات بداية LAB أمرا بالغ الأهمية أيضا. لذلك ، سيؤدي الالتزام بإرشادات بروتوكول فريدة إلى تعزيز أداء التخمير للعديد من سلالات LAB المخصصة لعمليات التخمير والتكنولوجيا الحيوية. نتيجة لذلك ، طور مختبر علم الأحياء الدقيقة الغذائية والتكنولوجيا الحيوية في جامعة ولاية كارولينا الشمالية للزراعة والتقنية بروتوكولا قياسيا لتنشيط ومراقبة جودة سلالات LAB المختارة التي أدت إلى سلالات ثقافة LAB عالية الأداء وقابلة للحياة تستخدم في أبحاث التخمير. سيساعد تكييف بروتوكول مثل هذا والتوصية به للاستخدام في صناعة الألبان والأغذية على ضمان صلاحية LAB ووظائفه للعديد من التطبيقات.

المقدمة

بكتيريا حمض اللاكتيك (LAB) هي مجموعة من البكتيريا المتنوعة بشكل فريد والتي لديها إمكانات صناعية. تستخدم السلالات التي تنتمي إلى Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus و Streptococcus thermophilus في الغالب كمزارع بداية الألبان لمنتجات الألبان الغذائية المخمرة مثل الزبادي1. تصنف سلالات LAB المختارة أيضا على أنها بروبيوتيك لأنها تمنح فوائد صحية للبشر عندما يتم إعطاء الجرعات بشكل كاف2. بكتيريا حمض اللاكتيك هي أيضا كائنات دقيقة إيجابية الجرام ، وغير مكونة للأبواغ ، وغير قابلة للتنفس ولكنها متحملة للهواء تتميز عموما بإنتاج حمض اللاكتيك كمنتج تخمير رئيسي. يقوم LAB أيضا بتصنيع المستقلبات الأساسية ، على سبيل المثال ، الأحماض العضوية ، والبكتيريا ، والمركبات المضادة للميكروباتالأخرى 3 التي يمكن أن تمنع مجموعة واسعة من مسببات الأمراض المنقولة بالغذاء4. حمض اللاكتيك ، وهو منتج نهائي رئيسي لهدم الكربوهيدرات ومنتج ثانوي لتخمير LAB ، هو مستقلب عضوي يمتلك خصائص مضادة للميكروبات ويحتمل أن يكون مفيدا لتطبيقات الحفظ الحيوي للأغذية3،5،6. علاوة على ذلك ، فإن الأحماض العضوية التي تنتجها LAB تضفي نكهة وملمس ورائحة الأطعمة ، وبالتالي تعزز خصائصها الحسية الشاملة 5,6. المتطلبات الغذائية المتميزة ل LAB إلى جانب طبيعتها في كل مكان ، تمكن البكتيريا في النهاية من الازدهار بسهولة في بيئات مختلفة مثل الأطعمة القائمة على الألبان والأطعمة المخمرة والخضروات وكذلك في الأمعاء البشرية7.

هناك طلب متزايد على الثقافات البادئة من LAB لإنتاج الزبادي والعديد من تطبيقات الألبان المتنوعة 8,9 ، وبالتالي يجب الالتزام بالاهتمام النقدي والتقنيات العلمية الراسخة ، في زراعة سلالات LAB ، وكذلك في تنشيط كل من السلالات المجففة بالتجميد والمعزولة لأن هذا النشاط حيوي لتحسين أداء التخمير. لذلك ، يشارك مختبر علم الأحياء الدقيقة الغذائية والتكنولوجيا الحيوية بنشاط في تطوير التكنولوجيا المناسبة الموجهة نحو التنشيط والنمو الفائق وخاصية التخمير لسلالات LAB المعزولة من منتجات الألبان المخمرة وكذلك من مزارع المبتدئين الصناعية المستخدمة لإنتاج الزبادي. علاوة على ذلك ، من الجدير بالذكر أن سلالات زراعة LAB المنتجة صناعيا تخضع لأنشطة حافظة مثل التجفيف بالتجميد والتخزين المجمد ، مما يتسبب في إجهاد الخلايا وإصابتها ، نتيجة لعملية الصدمة الباردة التي تتعرض لها10. في الحد من تحديات الجدوى وتحسين وظائف سلالات LAB التي تم الحصول عليها إما من المنتجات الغذائية المعزولة أو المنتجات المجففة بالتجميد ، من المهم تنشيط هذه الثقافات بشكل صحيح كشكل من أشكال مراقبة الجودة لتعزيز خصائصها التخمرية8. في هذه الدراسة ، كان الهدف هو تطوير بروتوكول داخلي لمراقبة الجودة لتنشيط ونمو سلالات الاستزراع البلغارية الفرعية L. delbrueckii التي عززت في النهاية نمو LAB القابل للحياة ، بالإضافة إلى تعزيز أداء التخمير والوظيفة الأيضية لسلالات LAB. يمكن تكييف هذا البروتوكول في النهاية (باستخدام وسائط النمو المثلى وظروف الزراعة المناسبة) لزراعة سلالات LAB الأخرى لأبحاث التخمير ، وكذلك للأغراض الصناعية أو عمليات المعالجة الحيوية. وبالتالي ، سيضمن بروتوكول تنشيط ومراقبة الجودة LAB هذا الحصول على ثقافات بداية منتجات الألبان الفائقة القابلة للتطبيق والتي يمكن أن تكون وظيفية لتطبيقات متنوعة في صناعة الألبان والأغذية العالمية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. المواد والأساليب العامة

  1. مصدر اكتوباسيلوس ديلبروكي subsp. البلغارية
    1. الحصول على سلالات L. bulgaricus من مصادر موثوقة.
      ملاحظة: في هذه الدراسة ، تم استخدام ما مجموعه خمس (5) سلالات L. bulgaricus في دراسة مراقبة الجودة (الجدول 1). تم توفير سلالتين من L. bulgaricus المجفف بالتجميد للإنتاج الصناعي لمنتجات الحليب المخمر من قبل الدكتور ألبرت كراستانوف ، قسم التكنولوجيا الحيوية في جامعة تقنيات الأغذية ، بلوفديف ، بلغاريا. تم الحصول على سلالتين معزولتين من منتجات الزبادي التجارية المتوفرة في سوق الولايات المتحدة من مخزون -80 درجة مئوية من مختبر علم الأحياء الدقيقة الغذائية والتكنولوجيا الحيوية في جامعة ولاية كارولينا الشمالية A&T وتم توفير سلالة واحدة مجففة بالتجميد من قبل البائع C. تم الاحتفاظ بجميع سلالات LAB عند -80 درجة مئوية حتى استخدامها مرة أخرى. كما تم تقييم سلالة بكتيرية أخرى (Limosilactobacillus reuteri) من مخزون -80 درجة مئوية من مختبر علم الأحياء الدقيقة الغذائية والتكنولوجيا الحيوية في جامعة ولاية كارولينا الشمالية A&T.
  2. معيار L. MRS مرق التخمير المتوسطة
    1. تحضير deMan، Rogosa Sharpe (MRS) المتوسطة عن طريق إذابة تماما 55 غرام من MRS، و 0.5 غرام من L-Cysteine في 1 لتر من الماء منزوع الأيونات (DW).
    2. قم بتوزيع 7 مل و 2 مل من محلول MRS المحضر في أنابيب الاختبار ، على التوالي ، الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، ثم تبرد في درجة حرارة الغرفة (RT).
  3. MRS أجار المتوسطة
    1. تحضير MRS أجار المتوسطة عن طريق إذابة تماما 55 غرام من MRS و 0.5 غرام من L-Cysteine في 1 L من DW. أضف مسحوق أجار (15 جم) ، وعقم وسط الآجار عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، ثم قم بتبريده في حمام مائي.
    2. صب جميع الوسائط الطازجة في أطباق بتري معقمة وتخزينها في 4 درجات مئوية حتى الحاجة إليها.
  4. تعديل كلوستريديال متوسط البيروفات المقوى (mRCM-PYR)
    1. تحسين وسط كلوستريديال مقوى وفقا ل Oyeniran et al.13 و Nwamaioha و Ibrahim18 ، من أجل الانتقائية والتعداد الدقيق ل L. bulgaricus عن طريق إذابة 10 جم من الببتون # 3 ، 10 جم من مستخلص اللحم البقري ، 5 جم من مستخلص الخميرة ، 5 جم من كلوريد الصوديوم ، 3 جم من أسيتات الصوديوم ، 2 جم من فوسفات البوتاسيوم ثنائي القاعدة ، 0.1 غرام من اليوراسيل ، 0.25 غرام من كلوريد الكالسيوم ، 5 غرام من سكر العنب ، 5 غرام من الفركتوز ، 10 غرام من المالتوز ، 2 غرام من بيروفات الصوديوم ، 0.2 ٪ توين 80 ، و 0.5 غرام من L- السيستين في 1 لتر من DW.
    2. اضبط الرقم الهيدروجيني النهائي (6.0 ± 0.2) للمحلول باستخدام 6 N HCl قبل إضافة 0.008٪ أزرق أنيلين و 15 جم من أجار. الأوتوكلاف الوسط عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، تبرد في حمام مائي ، وتصب في أطباق بتري معقمة. قم بتخزين جميع الوسائط الطازجة في أطباق بتري معقمة على حرارة 4 درجات مئوية لمجرد الحاجة.
  5. مخزون الجلسرين من مزارع LAB
    1. تحضير مخزون الجلسرين (50٪ جلسرين) عن طريق تخفيف 100٪ جلسرين في نفس الحجم من DW وتعقيمه عند 100 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة باستخدام دورة تعقيم جافة. قم بتبريد مخزون الجلسرين إلى RT وقم بتخزينه بشكل معقم للاستخدام مرة أخرى.
    2. استخدم النمو البكتيري (مستعمرة واحدة من L. bulgaricus تم الحصول عليها باستخدام بروتوكول مراقبة الجودة المطور) من الثقافات الليلية.
    3. ماصة 500 ميكرولتر من الثقافات الليلية إلى 50٪ جلسرين في أنبوب طرد مركزي سعة 2 مل واخلطها معا برفق. قم بتجميد وتخزين مخزون الجلسرين الذي يحتوي على مزارع LAB في درجة حرارة منخفضة للغاية تبلغ -80 درجة مئوية لآخر حاجة.
      ملاحظة: يظهر في الشكل 1 مخطط رسومي لبروتوكول مراقبة الجودة وتفعيل ثقافات LAB.
لارمز المنتجعينةمصدرالتركيب البكتيري كما هو موضح1
1م9سلالة صناعية نقيةبلغاريارطل بلغاريكوس
2رطل 6سلالة صناعية نقيةبلغاريارطل بولغاريكوس ،
3ATCC 11842سلالة صناعية نقيةإيه تي سي سيرطل بلغاريكوس
4داوزباديالولايات المتحدة الأمريكيةLb. بلغاريا ، ثقافة حية أخرى
5اي 22زباديالولايات المتحدة الأمريكيةLb. بلغاريا ، ثقافة حية أخرى
6روتيريزباديالولايات المتحدة الأمريكيةليموسيلاكتوباكيللوس روتيري
1رطل = الملبنة

الجدول 1: سلالات بروبيوتيك. يسرد الجدول سلالات البروبيوتيك المستخدمة في هذه الدراسة.

2. بروتوكول تفعيل ومراقبة جودة مزارع LAB

  1. خذ مخزون الجلسرين المحضر من سلالات LAB (في أنابيب طرد مركزي سعة 2 مل) من الفريزر المنخفض للغاية -80 درجة مئوية ، ولا تسمح لها بالذوبان قبل الاستخدام.
  2. قم بتنظيف وتطهير فتحة أنابيب الطرد المركزي بنسبة 70٪ كحول ، ودوامة بلطف قبل الاستخدام.
  3. ماصة حوالي 250 ميكرولتر (0.25 مل) من مخزون LAB من أنابيب الطرد المركزي إلى أنابيب اختبار MRS جديدة سعة 2 مل.
  4. دوامة برفق ، بارافيلم أنابيب الاختبار ، واحتضانها لاهوائيا طوال الليل عند 42 درجة مئوية لمدة 12-16 ساعة.
  5. خذ حوالي 500 ميكرولتر (0.5 مل) من المزارع المزروعة بين عشية وضحاها من أنابيب اختبار MRS سعة 2 مل إلى أنابيب اختبار MRS سعة 7 مل ، دوامة ، واحتضانها لاهوائيا طوال الليل عند 42 درجة مئوية لمدة 12-16 ساعة.
  6. تقييم النمو الميكروبي عن طريق قياس الكثافة البصرية (OD) أو نمو الثقافات عند 610 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي المرئي للأشعة فوق البنفسجية وتسجيل نتائج مقبولة بين 0.7 و 0.9.
  7. قم بترتيب المزارع الليلية من أنابيب MRS سعة 7 مل على ألواح أجار MRS و MRCM-PYR واحتضانها لاهوائيا لمدة 72 ساعة عند 42 درجة مئوية.
  8. اختر مستعمرات معزولة من ألواح الآجار ، وانقلها إلى أنابيب اختبار MRS جديدة سعة 7 مل ، ودوامة برفق ، واحتضنها لاهوائيا طوال الليل عند 42 درجة مئوية لمدة 12-16 ساعة.
  9. قم بتخزين ألواح الآجار التي تحتوي على السلالات المعزولة عند 4 درجات مئوية في الثلاجة لمدة أسبوع.
  10. قم بقياس وتأكيد OD (بين 0.7 و 0.9) من أنابيب اختبار MRS سعة 7 مل لمزارع LAB المعزولة عن الألواح المخططة عند 610 نانومتر واستخدمها كمزارع عمل لجميع التجارب ذات الصلة.
  11. قم بإجراء تخفيفات عشرة أضعاف (مخففة بشكل متسلسل) لمزارع LAB المزروعة من أنابيب اختبار MRS النهائية سعة 7 مل باستخدام 9 مل من ماء الببتون (مخزن مؤقت فسيولوجي) للحصول على نسبة 1:10.
  12. أخيرا ، خذ حوالي 250 ميكرولتر (0.25 مل) من التخفيفات التسلسلية المناسبة لجميع تجارب التخمير.
  13. قم بتنشيط المرق الذي يحتوي على سلالات (250 ميكرولتر) من الخطوة 2.12 عن طريق نقلها إلى مرق MRS طازج سعة 7 مل واحتضانها لاهوائيا عند 42 درجة مئوية لمدة 16 ساعة.
  14. استمر في تكرار الخطوات 2.6-2.12 لضمان نمو الخلايا القابلة للحياة والمتفوقة من مزارع LAB.
    ملاحظة: تم تنشيط جميع سلالات L. bulgaricus في مرق MRS المحضر حديثا ثم تم تحضينها لاهوائيا عند 42 درجة مئوية لمدة 16 ساعة من أجل الوصول إلى كثافة بصرية (OD610 نانومتر) من النمو البكتيري بين 0.7 و 0.9. تم قياس نمو البكتيريا باستخدام مقياس الطيف الضوئي المرئي للأشعة فوق البنفسجية عند 610 نانومتر. كانت قيم الأس الهيدروجيني للمزارع الليلية في حدود 3.5 إلى 5.3 نتيجة لإنتاج حمض اللاكتيك ، وهو منتج نهائي عضوي لتخمير LAB. تم الالتزام بإجراءات السلامة مثل الدوران السليم لتدفق الهواء في غطاء السلامة البيولوجية وتجنب الحروق أثناء استخدام موقد بنسن ومراعاتها.

مخطط عملية ثقافة LAB ؛ تحضير مرق MRS ، الحضانة ، قياس الكثافة البصرية.
الشكل 1: مخطط رسومي لبروتوكول تنشيط مزارع بكتيريا حمض اللاكتيك (LAB). يوفر المخطط التفاصيل والأدوات الأساسية اللازمة للتعامل مع سلالات زراعة LAB وتنشيطها. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

كان نمو الخلايا لسلالات LAB التي تم تقييمها المزروعة ببروتوكول مراقبة الجودة مختلفا بشكل كبير (P < 0.05) عن السلالات المزروعة بدون هذا البروتوكول القياسي. استخدم بروتوكول مراقبة الجودة لكل من L. bulgaricus و L. reuteri نهجا متعدد الاستزراع الفرعي (الاستزراع الفرعي ثلاث مرات قبل أن يخط على ألواح الآجار) ، في حين أن إجراء التحكم كان يتم الاستزراع الفرعي مرة واحدة فقط مع بقاء جميع الظروف الأخرى ثابتة. كان نمو المستعمرة أيضا أعلى ومحددا جيدا على ألواح وسائط النمو التي تمت زراعتها باستخدام بروتوكول مراقبة...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

كانت نتائج جميع السلالات التي تم تقييمها باستخدام بروتوكول مراقبة الجودة وبدون استخدام البروتوكول هي نفسها ، وعلى هذا النحو ، تم تقديم النتائج المرتبطة بالسلالات فقط (S9 و LB6). كان لسلالات LAB المنشطة نمو خلوي متفوق يتميز بكثافة عالية من الكتلة الحيوية للخلية ، مما تسبب في ظهور عكر لمرق MRS المخمر في أنبوب الاختبار11. كان نمو الخلايا المرصود بعد تنشيط المزرعة واضحا بين 12 ساعة و 16 ساعة عند درجة حرارة تخمر لاهوائية تبلغ 42 درجة مئوية. تم التأكيد أيضا على أن سلالات LAB التي تم تنشيطها بناء على هذ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

أصبح هذا المنشور ممكنا بفضل المنحة رقم NC. X-267-5-12-170-1 من المعهد الوطني للأغذية والزراعة (NIFA) وجزئيا من قبل NIZO Food Research BV ، هولندا ، Jarrow Formulas ، الولايات المتحدة الأمريكية ، وقسم علوم الأسرة والمستهلك ومحطة البحوث الزراعية في جامعة ولاية كارولينا الشمالية للزراعة والتقنية (جرينسبورو ، نورث كارولاينا ، الولايات المتحدة الأمريكية 27411). تم دعم هذا العمل أيضا ، جزئيا ، من خلال منحة برنامج بناء القدرات لعام 1890 رقم (2020-38821-31113 / مشروع الانضمام رقم 021765). كما تم دعم هذا العمل جزئيا من قبل وزارة التعليم والعلوم البلغارية في إطار برنامج البحث الوطني "أغذية صحية لاقتصاد حيوي قوي ونوعية حياة" الذي تمت الموافقة عليه من قبل DCM # 577 / 17.08.2018.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أنيلين بلوثيرمو ساينتيفيكR2152625 جم
مستخلص لحم البقرمنتجات الأبحاث الدولية50-197-7509500 جم
مستخلص الخميرةفيشر ScientificBP1422-500500 جم
هيدرات كلوريد الكالسيومفيشر ScientificC79-500500 جم
سكر العنب اللامائيفيشر BP350500 العلمي500 جرام
D-FructoseACROS OrganicsAC161355000500 جم
مسحوق أجار ديفكوديفكوDF0812-07-12 كجم
TPY أجارديفكو211921500 جم
أنبوب الطرد المركزي الدقيق Eppendorf (Snap-Cap Microcentrifuge Safe-Lock)فيشر ساينتفيك05-402-122 مل
PI17904 جلسرينحراري علمي500 مل
حاضنة CO2 بالأشعة تحتالحمراء Forma Scientific
Lactobacillus delbrueckii subsp. بلغاريةمجموعة الثقافة من النوع الأمريكي (ATCC)ATCC 11842
Lactobacillus delbrueckii subsp. بلغاريابلغاريا S9
Lactobacillus delbrueckii subsp. بلغارياLB6
Lactobacillus delbrueckii subsp.بلغاريةمختبر الأحياء الدقيقة والتكنولوجيا الحيوية للأغذية (NCATSU)DAW
Lactobacillus delbrueckii subsp. مختبر علمالأحياء الدقيقة للأغذية والتكنولوجيا الحيوية (NCATSU)E22
Limosilactobacillus reuteriBiogai ، Raleigh / مختبر الأغذية الدقيقة والتكنولوجيا الحيوية (NCATSU)RD2
L-Cysteine hydrochloride monohydrateSigma-AldrichC6852-25G25 جرام
مالتوز أحادي الهيدراتفيشر ScientificM75-100100 جرام
مرق MRSنيوجين50-201-56915 كجم
بيبتون رقم 3Hach50-199-6719500 جرام
فوسفات البوتاسيوم ثنائي القاعدة (K2HPO4)منتجات الأبحاث الدولية50-712-761500 جم
أسيتات الصوديوم ثلاثي هيدراتفيشر ScientificS220-11 كجم
كلوريد الصوديومفيشر ScientificBP358-11 كجم
بيروفات الصوديومفيشر ScientificBP356-100 100
جرام أنابيب اختبار مع أغطية لولبية مبطنة بالمطاطفيشرScientific FB7012515025 × 150 مم
توين 80فيشر ScientificT164-500500 مل
فريزر منخفض للغاية
Uracil منخفض جداأكروس أورجانكسAC157301000100 جرام
الطيف الضوئي المرئي للأشعة فوق البنفسجيةثيرمو فيشر سينتيفيكإيفولوشن 201
فورتكس جيني 2مستخلص
الخميرةفيشر سينتيفيكBP1422-500500 جرام
إيثانولفيشر ساينتفيكT08204K74 لتر
حمض الهيدروكلوريك (6N (معتمد) ، فيشر كيماويات)فيشر العلمية  SA56-500500 مل
ثنائي بلغاريا مقياس العلمية

المراجع

  1. Karakas-Sen, A., Karakas, E. Isolation, identification and technological properties of lactic acid bacteria from raw cow milk. Bioscience Journal. 34 (2), 385-399 (2018).
  2. Martin, R., Langella, P. Emerging health concepts in the probiotics field: Streamlining the definitions. Frontiers in Microbiology. 10, 1047(2019).
  3. Sadishkumar, V., Jeevaratnam, K. In vitro probiotic evaluation of potential antioxidant lactic acid bacteria isolated from idli batter fermented with Piper betle leaves. International Journal of Food Science & Technology. 52 (2), 329-340 (2017).
  4. Ayivi, R. D., et al. Lactic acid bacteria: Food safety and human health applications. Dairy. 1 (3), 202-232 (2020).
  5. Quinto, E. J., et al. Probiotic lactic acid bacteria: A review. Food and Nutrition Sciences. 5 (18), 1765-1775 (2014).
  6. Hayek, S. A., Gyawali, R., Aljaloud, S. O., Krastanov, A., Ibrahim, S. A. Cultivation media for lactic acid bacteria used in dairy products. Journal of Dairy Research. 86 (4), 490-502 (2019).
  7. Bintsis, T. Lactic acid bacteria as starter cultures: An update in their metabolism and genetics. Aims Microbiology. 4, 665-684 (2018).
  8. Shao, Y., Gao, S., Guo, H., Zhang, H. Influence of culture conditions and preconditioning on survival of Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus ND02 during lyophilization. Journal of Dairy Science. 97 (3), 1270-1280 (2014).
  9. Aryana, K. J., Olson, D. W. A 100-year review: Yogurt and other cultured dairy products. Journal of Dairy Science. 100 (12), 9987-10013 (2017).
  10. Kandil, S., El Soda, M. Influence of freezing and freeze-drying on intracellular enzymatic activity and autolytic properties of some lactic acid bacterial strains. Advances in Microbiology. 5 (6), 371-382 (2015).
  11. Malairuang, K., Krajang, M., Sukna, J., Rattanapradit, K., Chamsart, S. High cell density cultivation of Saccharomyces cerevisiae with intensive multiple sequential batches together with a novel technique of fed-batch at cell level (FBC). Processes. 8 (10), 1321(2020).
  12. Jeanson, S., Floury, J., Gagnaire, V., Lortal, S., Thierry, A. Bacterial colonies in solid media and foods: A review on their growth and interactions with the micro-environment. Frontiers in Microbiology. 6, 1284(2015).
  13. Oyeniran, A., et al. A modified reinforced clostridial medium for the isolation and enumeration of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus in a mixed culture. Journal of Dairy Science. 103, 5030-5042 (2020).
  14. Iguchi, A., et al. Effects of repeated subculturing and prolonged storage at room temperature of Enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7 on pulsed-field gel electrophoresis profiles. Journal of Clinical Microbiology. 40 (8), 3079-3081 (2002).
  15. Hayek, S. A., Ibrahim, S. A. Current limitations and challenges with lactic acid bacteria: a review. Food and Nutrition Sciences. 4 (11), 73-87 (2013).
  16. Ahmed, S. A., Ibrahim, S. A., Kim, C., Shahbazi, A. Significance of bile salt tolerant Lactobacillus reuteri. Proceedings of the 2007 National Conference on Environmental Science and Technology. , Springr, NY. 17-23 (2009).
  17. Gyawali, R., et al. A comparative study of extraction techniques for maximum recovery of β-galactosidase from the yogurt bacterium Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus. Journal of Dairy Research. 87 (1), 123-126 (2020).
  18. Nwamaioha, N. O., Ibrahim, S. A. A selective medium for the enumeration and differentiation of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus. Journal of Dairy Science. 101 (6), 4953-4961 (2018).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

MRS
زراعة ونمو وصلاحية بكتيريا حمض اللاكتيك: منظور مراقبة الجودة
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.