هناك العديد من الاختلافات بين البطينين الأيمن والأيسر. ومع ذلك ، لم يتم توضيح الفيزيولوجيا المرضية لاحتشاء البطين الأيمن (RVI). في هذا البروتوكول ، تم إدخال طريقة قابلة للتكرار لتوليد نموذج الماوس RVI ، والتي قد توفر وسيلة لشرح آلية RVI.
مقالة منهجية
هناك العديد من الاختلافات بين البطينين الأيمن والأيسر. ومع ذلك ، لم يتم توضيح الفيزيولوجيا المرضية لاحتشاء البطين الأيمن (RVI). في هذا البروتوكول ، تم إدخال طريقة قابلة للتكرار لتوليد نموذج الماوس RVI ، والتي قد توفر وسيلة لشرح آلية RVI.
احتشاء البطين الأيمن (RVI) هو عرض شائع في الممارسة السريرية. يمكن أن يؤدي RVI الشديد إلى خلل وظيفي في الدورة الدموية القاتلة وعدم انتظام ضربات القلب. على النقيض من نموذج احتشاء عضلة القلب (MI) المستخدم على نطاق واسع والذي تم إنشاؤه بواسطة ربط الشريان التاجي الأيسر ، نادرا ما يتم استخدام نموذج الماوس RVI بسبب الصعوبة المرتبطة بتوليد النموذج. تتطلب الأبحاث حول آليات وعلاج إعادة تشكيل RV الناجم عن RVI والخلل الوظيفي نماذج حيوانية لمحاكاة الفيزيولوجيا المرضية ل RVI في المرضى. تقدم هذه الدراسة إجراء ممكنا لتوليد نموذج RVI في الفئران C57BL/6J. علاوة على ذلك ، تم تمييز هذا النموذج بناء على ما يلي: تقييم حجم الاحتشاء عند 24 ساعة بعد MI ، وتقييم إعادة تشكيل القلب ووظيفته باستخدام تخطيط صدى القلب ، وتقييم ديناميكا الدم RV ، وعلم الأنسجة لمنطقة الاحتشاء في 4 أسابيع بعد RVI. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء جبيرة الأوعية الدموية التاجية لمراقبة ترتيب الشرايين التاجية في RV. هذا النموذج الفأر من RVI من شأنه أن يسهل البحث عن آليات قصور القلب الأيمن والبحث عن أهداف علاجية جديدة لإعادة تشكيل RV.
البطين الأيمن (RV) ، الذي كان يعتقد منذ فترة طويلة أنه أنبوب بسيط متصل بالشريان الرئوي ، تم إهماله بشكل خاطئ لسنوات عديدة1. ومع ذلك ، كان هناك اهتمام متزايد بوظيفة RV مؤخرا لأنها تلعب دورا أساسيا في اضطرابات الدورة الدموية 2,3 وقد تكون بمثابة مؤشر مستقل للمخاطر لأمراض القلب والأوعية الدموية 4,5,6,7. تشمل أمراض RV احتشاء RV (RVI) ، وارتفاع ضغط الدم في الشريان الرئوي ، وأمراض الصمامات8. على النقيض من الاهتمام الهائل بارتفاع ضغط الدم في الشريان الرئوي ، ظل RVI مهملا 7,9.
RVI ، عادة ما يكون مصحوبا باحتشاء عضلة القلب السفلي الخلفي10,11 ، ناتج عن انسداد الشريان التاجي الأيمن (RCA). وفقا للتحقيقات السريرية ، من المحتمل أن يؤدي RVI الحاد إلى اضطرابات الدورة الدموية وعدم انتظام ضربات القلب ، مثل انخفاض ضغط الدم ، وبطء القلب ، والكتلة الأذينية البطينية ، المرتبطة بارتفاع معدلات المراضة والوفيات في المستشفى12،13،14. يمكن أن تتعافى وظيفة RV تلقائيا إلى حد ما حتى في حالة عدم وجود إعادة تروية15,16. توجد العديد من الاختلافات المورفولوجية والوظيفية بين البطين الأيسر (LV) و RV17. يعتقد أن RV أكثر مقاومة لنقص التروية من LV8 ، ويرجع ذلك جزئيا إلى تكوين الدورة الدموية الجانبية الأكثر شمولا بعد RVI. إن توضيح الاختلافات بين احتشاء الجهد المنخفض (LVI) و RVI وتحديد الآليات الأساسية من شأنه أن يوفر أهدافا علاجية جديدة لتجديد القلب وفشل القلب الإقفاري. ومع ذلك ، نظرا للصعوبة المرتبطة بتوليد نموذج الماوس RVI ، فإن الأبحاث الأساسية حول RVI محدودة بشكل أساسي.
تم إنشاء نموذج حيواني كبير من RVI عن طريق ربط RCA في الخنازير18 ، وهو أسهل في التشغيل بسبب RCA المرئي. بالمقارنة مع النموذج الحيواني الكبير ، يتمتع نموذج الفأر بالمزايا التالية: المزيد من إمكانية الوصول في التلاعب بالجينات ، وانخفاض التكلفة الاقتصادية ، وفترة تجريبية أقصر19,20. على الرغم من أنه تم الإبلاغ سابقا عن نموذج RVI للماوس يركز على تأثير RVI على وظيفة LV ، إلا أن الخطوات التفصيلية للإجراء ، والصعوبات ونقاط التشغيل الرئيسية ، وخصائص النموذج مثل التغيرات الديناميكية الدموية لم يتم تقديمها بالكامل 9,21.
توفر هذه المقالة إجراءات جراحية مفصلة لإنشاء نموذج الماوس من RVI. علاوة على ذلك ، تميز هذا النموذج بقياس تخطيط صدى القلب ، وتقييم الدورة الدموية الغازية ، والتحليل النسيجي. علاوة على ذلك ، تم إجراء جبيرة الأوعية الدموية التاجية لمراقبة ترتيب الشرايين التاجية في RV. ستساعد التقنية التي تم إدخالها في هذه الورقة المبتدئين على فهم جيل نموذج RVI للماوس بسرعة مع معدل وفيات التشغيل المقبول ونهج التقييم الموثوقة. سيساعد نموذج الماوس من RVI في البحث عن آليات قصور القلب الأيمن والبحث عن أهداف علاجية جديدة لإعادة تشكيل RV.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم تنفيذ جميع الإجراءات وفقا لدليل رعاية واستخدام المختبر الذي نشرته المعاهد الوطنية الأمريكية للصحة (منشور المعاهد الوطنية للصحة رقم 85-23 ، المنقح في عام 1996) وتمت الموافقة عليه من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان في مستشفى نانفانغ ، الجامعة الطبية الجنوبية (قوانغتشو ، الصين). تم الحصول على الفئران الذكور السليمة C57BL / 6J (8-10 أسابيع من العمر ؛ وزن الجسم ، 25-30 جم) من مركز الحيوان في الجامعة الطبية الجنوبية. يمكن أيضا استخدام الفئران الإناث ، ولكن لا ينصح بخلط كلا الجنسين بسبب التأثيرات المحتملة للاختلافات بين الجنسين. بعد وصولها ، تم إيواء الفئران تحت دورة مظلمة / ضوئية مدتها 12 ساعة / 12 ساعة (3-4 فئران لكل قفص) ، مع طعام وماء مخصصين.
1. التحضير للجراحة
2. الربط الدائم للشريان التاجي الأيمن
3. تقييم تخطيط صدى القلب لوظيفة RV بعد الجراحة
ملاحظة: بالنسبة لتخطيط صدى القلب، استخدم مسبارا MS400D بتردد مركزي يبلغ 30 ميجاهرتز، متصلا بنظام تصوير بالموجات فوق الصوتية عالي الدقة (انظر جدول المواد). يتم إجراء فحص تخطيط صدى القلب بعد 4 أسابيع من الجراحة.
4. القياسات الغازية لديناميكية الدم RV
ملاحظة: يتم تقييم ديناميكية الدم RV من خلال قسطرة القلب اليمنى بعد 4 أسابيع من RVI. يتم تطبيق قسطرة 1.0 F جنبا إلى جنب مع نظام مراقبة.
5. صب الأوعية الدموية التاجية باستخدام عامل صب الأوعية الدموية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في هذه الدراسة ، تم تعيين الفئران عشوائيا إلى مجموعة RVI (n = 11) أو عملية صورية (n = 11). يظهر المصبوب التاجي في قلبين عاديين للفئران في الشكل 1A. واستجابة لربط RCA، شوهد ارتفاع الجزء ST في المقدمة III من ECG (الشكل 1B). علاوة على ذلك ، أظهر تلطيخ كلوريد رباعي الفينيل ثلاثي الفينيل (TTC) 2,3,5 أن منطقة الاحتشاء تمثل 45٪ من الجدار الحر RV في 24 ساعة بعد العملية الجراحية (الشكل 1C ، D). تشير البيانات المذكورة أعلاه إ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
أبلغ سيكارد وزملاؤه من فرنسا لأول مرة عن نموذج فأر من RVI في عام 2019 ، والذي وصف العملية الجراحية وركز على التفاعل بين LV و RV بعد RVI9. ومع ذلك ، حتى الآن ، لم تبلغ أي دراسة عن استخدام هذا النموذج لمزيد من الدراسات. سيكون الإجراء الأكثر تفصيلا مفيدا للباحثين لاستخدام نموذج الماوس من RVI للتحقيق. على النقيض من تقرير Sicard et al.9 ، قدمنا معلومات خطوة بخطوة لتوليد النموذج واستراتيجية مراقبة الجودة وقمنا بتقييم التوزيع التشريحي ل RCA ، وديناميكا الدم RV ، وبقاء الخلايا العض...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
تم دعم هذا العمل من خلال منح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82073851 إلى الأحد) والمؤسسة الوطنية الصينية لعلوم ما بعد الدكتوراه (2021M690074 إلى Lin).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 2،3،5-ثلاثي فينيلترازوليوم كلوريد | سيجما | T8877 | لتلوين TTC |
| جهاز التنفس الصناعي الصغير للحيوانات | هافارد | نوع 845 | للتهوية الاصطناعية |
| نظام الموجات فوق الصوتية للحيوانات VEVO2100 | VEVO2100 | الصوتي | البصري لسرعة تدفق دوبلر ولوحة |
| AS باتسون s # 17 طقم التآكل التشريحي | Polyscience Inc | 7349 | لصب الأوعية |
| بوبرينورفين | Isoreag | 1134630-70-8 | لتقليل آلام الفئران بعد الجراحة |
| C57BL / 6J الفئران + D29A1A2: D27 | مركز بجامعة الجنوب الطبية | - | لتوليد الفأر RVI نموذج |
| الكاميرا | Sangnond | لالتقاط صورة | |
| ضوء بارد مضيء | أوليمبوس | ILD-2 | ضوء لعملية |
| تخطيط كهربية القلب | ADI | أداة ADAS1000 | لتسجيل مخطط كهربية |
| كريم إزالة الشعر | ريكيت بينشيزر | RQ / B 33 النوع 2 | إزالة شعر الماوس |
| وسادة حرارية - نظام جراحي ثرموستاتي (ALC-HTP-S1) | شنغهاي ألكوت التكنولوجيا الحيوية | المحدودة ALC-HTP-S1 | التدفئة |
| الهيماتوكسيلين اليوزين صبغ | Leagene | DH0003 | تلطيخ الهيماتوكسيلين يوزين |
| ملح الصوديوم الهيبارين | ماكلين | H837056 | للتنبيب |
| Isoflurane | RWD علوم الحياة | R510-22 | التخدير المستنشق |
| صنع ملعقة | تعمل كمنظار حنجرة | ||
| صنع المختبر قنية | للتنبيب | ||
| Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer | Midmark Corporation | VIP 3000 | خياطة |
| نايلون طبية للتخدير (5-0) | شركة نينغبو الطبية للإبرة | 5-0 | لإغلاق الصدر |
| ملاقط الكوع الجراحية المجهرية | RWD علوم الحياة | F11021-11 | للجراحة |
| مقص الجراحة المجهرية | NAPOX | MB-54-1 | لبضع |
| قسطرة ميلار | AD الأدوات ، شنغهاي | 1.0F | قياس تدرج الضغط |
| MS400D مسبار بالموجات فوق الصوتية | المرئي سونيك | MS400D | قياس تدفق دوبلر السرعة |
| والملقط إبرة | AS البصري سونيك | F31006-12 | للجراحة |
| النتروجليسرين | بكين Yimin الطب التعاوني | لتوسيع الشريان التاجي | |
| مقص العيون | RWD علوم الحياة | S11022-14 | للجراحة |
| الصوديوم بنتوباربيتال | ميرك | 25 ملغ | التخدير |
| PowerLab متعدد الاتجاهات نظام التسجيل الفسيولوجي | AD Instruments ، شنغهاي | 4/35 | تسجيل الضغط |
| التوازن الإلكتروني الدقيق | دنفر Instrument | TB-114 | مقياس الوزن |
| خياطة الحرير (8-0) | شركة نينغبو الطبية للإبرة | 6-0 | ربط الشريان التاجي |
| معدات الجراحة المجهرية للحيوانات | الصغيرة Napox | MA-65 | الأدوات الجراحية |
| ملقط الأنسجة | البصري سونيك | F-12007-10 | لمقص الأنسجة الجراحية |
| Visual Sonic | S13052-12 | فتح الصدر لقياس الديناميكا | |
| الدموية جل انتقال | Guang Gong pai | 250ML | التحضير ل قياس تخطيط صدى |
| القلب المشابك الوعائية | البصرية سونيك | R31005-06 | لمنع الدم من الشريان الأورطي |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن