نموذج الفئران لخلل اليد المرتبط بغسيل الكلى

يظل إنشاء والحفاظ على الوصول الوظيفي للأوعية الدموية هدفا أساسيا مهما لمرضى المرحلة النهائية من مرض الكلى (ESRD) الذين يتلقون العلاج ببدائل الكلى عن طريق غسيل الكلى¹. تعد علاجات غسيل الكلى المتكررة ضرورية لإزالة الفضلات ، وتطبيع الشوارد ، والحفاظ على توازن السوائل بمجرد أن تصبح وظائف الكلى غير كافية ، وبالتالي فهي ضرورية للبقاء على المدى الطويل². لذلك ، يمثل الوصول إلى الأوعية الدموية "شريان الحياة" للمرضى الذين يعانون من ESRD ، ويظل وضع الناسور الشرياني الوريدي الذاتي (AVF) خيارا مفضلا للوصول إلى غسيل الكلى بين هذه المجموعة³. ومع ذلك ، فإن ما يقرب من 30٪ -60٪ من مرضى غسيل الكلى يعانون من مجموعة من إعاقات اليد ، والتي تعرف سريريا بأنها خلل وظيفي في اليد مرتبط بالوصول (ARHD). يمكن أن تتراوح أعراض اضطراب فرط الحركة ونقص الانتباه من الضعف وعدم التنسيق إلى الشلل الأحادي والغرغرينا الرقمية ، والتي يمكن أن تحدث في وقت مبكر بعد إنشاء الشريان الوريدي أو تتطور تدريجيا مع نضوج الناسور. علاوة على ذلك ، يعقد ARHD جدول علاج ESRD ، والذي يرتبط بسوء نوعية الحياة ، وارتفاع مخاطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية ، وزيادة معدل الوفيات²،^3،4.

تم تطوير العديد من النماذج الحيوانية لدراسة إعادة تشكيل الأوعية الدموية الناجمة عن تغيرات الدورة الدموية بعد إنشاء AVF⁵،⁶،⁷،⁸،⁹،¹⁰،11،12،13،^14،15. النماذج الحيوانية الكبيرة ذات التشوه الشرياني الوريدي الحرقفي أو الفخذي¹⁶،¹⁷،¹⁸،^19،20 ونماذج القوارض التي تستخدم إما مفاغرة الشريان السباتي الوريد الوداجي أو تكوين ناسور الشريان الأورطي السفلي تحت الكلوي راسخة جيدا لفحص الجوانب المذكورة أعلاه لنضج AVF والمباح ²¹ . على سبيل المثال، ارتفاع ضغط الدم الوريدي، وزيادة قطر اللمعة، وزيادة سمك جدار الوريد هي علامات على نضوج AVF الناجح، في حين أن التليف الكبير للوسائط وتضخم الدم الباطني أو تطور الخثرة مع عدم وجود تغييرات في التدفق غالبا ما يميز فشل AVF ^6,15. ومع ذلك ، تفتقر النماذج الحيوانية الكبيرة إلى المرونة التجريبية أو القدرات المعدلة وراثيا لنماذج الفئران ، في حين أن نماذج القوارض الحالية لا تسهل بسهولة التحقيق في ARHD بسبب الموقع التشريحي و / أو عدم وجود أمراض الأطراف المرتبطة بها. في الواقع ، نظرا لعدم وجود نموذج حيواني راسخ قبل السريري يلخص النمط الظاهري السريري ذي الصلة ، ظل التقدم البحثي لتوضيح الآليات البيولوجية المرضية وتطوير استراتيجيات علاجية جديدة راكدا ، على الرغم من الزيادة التدريجية في عدد مرضى ARHD الذين يعانون من أعراض. لذلك ، فإن الهدف الأساسي من هذه الدراسة هو تقديم نموذج فأر فريد من ARHD ، وتوفير الخطوات الإجرائية للجراحة المجهرية AVF وتوصيف الفيزيولوجيا المرضية المتعلقة ب AVF.

تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات (IACUC) بجامعة فلوريدا ومركز مالكوم راندال الطبي لشؤون المحاربين القدامى.

ملاحظة: تم شراء ذكور الفئران C57BL / 6J البالغة (8-10 أسابيع) من مختبر جاكسون وتم وضعها في ضوء (ضوء 12 ساعة: دورة مظلمة لمدة 12 ساعة) ، ودرجة حرارة (22 درجة مئوية ± 1 درجة مئوية) ، والرطوبة (50٪ ± 10٪) منشأة حيوانية خاضعة للرقابة. سمح لخمسة فئران بالسكن لكل قفص (العرض: 18 سم × الطول: 29 سم × الارتفاع: 12.5 سم) مع توفير مواد التعشيش والطعام والماء حسب الحاجة. بعد 7 أيام من تأقلم الموائل مع تشاو القياسي ، تم تغيير الفئران إلى نظام غذائي قائم على الكازين لمدة 7 أيام كمرحلة انتقالية للنظام الغذائي. بعد ذلك ، تم تغذية الفئران بالطعام القائم على الكازين مع مكملات الأدينين بنسبة 0.2٪ -0.15٪ لمدة 2-3 أسابيع للحث على الفشل الكلوي (CKD) قبل جراحة AVF كما هو موضح سابقا²²،^23،24. تلقت الفئران الضابطة نظاما غذائيا قائما على الكازين بدون مكملات الأدينين (السيطرة). تم الحفاظ على الوجبات الغذائية الضابطة و CKD طوال فترة التعافي بعد الجراحة (POD).

1. قياسات ما قبل الجراحة

1. تقييم قياسات النتائج الأساسية / قبل الجراحة ، وأقطار الأوعية الأبهرية الحرقفية ومعلمات التدفق الديناميكي للدورة باستخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية المزدوجة والتروية الخلفية عبر دوبلر الليزر كما هو موضح سابقا²⁵.
2. تحديد قوة قبضة الطرف الخلفي من جانب واحد وتقييم مشية جهاز المشي لإنشاء وظيفة الطرف الخلفي الأساسية كما هو موضح سابقا^25,26.
3. تقييم وظائف الكلى عن طريق قياس معدل الترشيح الكبيبي (GFR) عن طريق تصفية FITC-inulin و / أو مستوى نيتروجين اليوريا في الدم (BUN) كما هو موضح سابقا²²،^24،27.

2. التحضير الجراحي

1. تحضير الأدوات واللوازم الجراحية التالية (جدول المواد): معقم حبة ساخنة ، زيوت تشحيم للعين ، أداة تشذيب قلم ، تحضيرات كحولية ، مناديل كلورهيكسيدين ، ملقط Graefe ناعم للغاية ، محلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪ ، محاقن إبرة 29 جم و 31 جم ، 2 × 2 إسفنج غير منسوج ، جولة متوسطة أحادية النهاية (SC-9) ومسحات قطنية صغيرة صلبة وحادة ومدببة (SC-4) ، كي منخفض الحرارة ، ملقط دومون مستقيم ، ملقط دومون بزاوية 45 درجة ، مقص زنبركي فانا مستقيم ، مقص زنبركي منحني من فاناس ، حاملات إبر مستديرة ، أحجام متعددة من الغرز (4-0 حرير ، 5-0 PGA ، 6-0 حرير ، و 10-0 خيوط نايلون) ، هيبارين ، إسفنجة جيلاتينية قابلة للامتصاص ، حامل إبرة مستقيم ، وبوبرينورفين.
   ملاحظة: الأربطة المطاطية المثبتة للأطراف والمبعدات للبطن والساقين مصنوعة يدويا.
2. تعقيم الاستعدادات الجراحية باستخدام الأوتوكلاف مع التعقيم بالبخار عند 120-125 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة تليها التجفيف لمدة 30 دقيقة قبل الجراحة. استخدم 70٪ من تطهير الإيثانول متبوعا بتعقيم بالخرز الساخن (240-270 درجة مئوية لمدة 3 دقائق) بين كل جراحة حيوانية.
3. تحضير محلول ملحي طبيعي معقم 0.9٪ ، محلول ملحي هيبارين (100 وحدة دولية / مل) ، وبوبرينورفين (0.01 مجم / مل) باستخدام محاقن إبرة 29-31 جم.

3. التخدير وتحديد المواقع

1. بدء تخدير الفئران في غرفة الحث (0.8 مل / دقيقة ، 2.5٪ إيزوفلوران). بمجرد تخدير الفأر بشكل كاف ، ضع الفأر في وضع ضعيف على محطة الجراحة المغطاة بستارة معقمة. تفتق تركيز الأيزوفلوران إلى ~ 1.2٪ أثناء خطوات الحلاقة وتحديد المواقع.
2. ضع مادة تشحيم العين لحماية العينين من الجفاف أثناء الجراحة.
3. باستخدام أداة تشذيب القلم ، احلق شعر البطن للعملية وشعر الساق لقياسات التروية بعد العملية الجراحية. نظف الشعر من المجال الجراحي.
4. ثبت الأطراف العلوية والسفلية بأشرطة مطاطية ومسامير ، وتحقق من عمق التخدير من خلال مراقبة منعكس قرصة إصبع القدم ، وقم بمعايرة التخدير حسب الضرورة. قم بإجراء تقييم نمط الجهاز التنفسي كل 3-5 دقائق طوال العملية الجراحية لمعايرة مستوى التخدير.

4. استكشاف المنطقة المستهدفة الجراحية

1. نظف منطقة الجلد المحلوقة عدة مرات ، بالتناوب بين تحضير الكحول ومناديل الكلورهيكسيدين في نمط دائري لتطهير المجال الجراحي.
2. جعل بضع البطن خط الوسط من الحافة السفلى من الهامش القصي إلى ارتفاق العانة. تشريح وسادة الدهون العانة للحصول على مجال جراحي أوسع.
3. افتح بضع العظم للوصول إلى المحتويات البريتونية باستخدام المبعدات ونزع الأحشاء من الأمعاء الدقيقة والكبيرة باستخدام مسحات قطنية مستديرة متوسطة أحادية النهاية. قم بتغطية الأمعاء بإسفنجة غير منسوجة مبللة بالمحلول الملحي.
4. بمجرد الحصول على التعرض الكافي للأوعية الدموية خلف الصفاق ، قم بتغطية الأمعاء والكلى والحالب المتبقية بإسفنج صغير غير منسوج منقوع بالمحلول الملحي. قم بإخلاء المثانة المنتفخة عن طريق الضغط برفق على قبة المثانة باستخدام مسحات قطنية متوسطة مستديرة أحادية الطرف حسب الحاجة.
5. قم بتشريح اللفافة المحيطة بالأوعية الدموية والأنسجة الدهنية بعناية من حوالي 1 سم بالقرب من التشعب الأبهري الممتد إلى مستوى التشعب الحرقفي الأيسر باستخدام ملقط دومون مستقيم ومسحات قطنية صغيرة صلبة وحادة ومدببة مزدوجة النهاية.
   ملاحظة: يتم ترك الشريان الحرقفي الأيسر والوريد ملتصقين ببعضهما البعض أثناء عزل الهياكل الشريانية الوريدية بشكل جماعي. ستوفر هذه الخطوة تعبئة كافية للسفن لتسهيل إنشاء AVF.
6. إذا واجهت أي فروع وريدية صغيرة تنشأ من الوريد الحرقفي المشترك الأيسر أو تتقارب معه ، فقم بربطها باستخدام الكي بدرجة حرارة منخفضة مع أو بدون خياطة حريرية 6-0 حسب الحاجة.
7. مرر طرف الملقط المائل تحت حزمة الأوعية الدموية الحرقفية المشتركة اليسرى وانتشر برفق عدة مرات لتعبئة الأوعية من العضلات خلف الصفاق الأساسية (الشكل 1 أ).

5. إنشاء مفاغرة الناسور الشرياني الوريدي الحرقفي المشترك

1. ضع غرزتين حريريتين 4-0 حول الحزمة الشريانية الوريدية الحرقفية المشتركة اليسرى المعزولة واستخدمهما كأحرف مركبة (على سبيل المثال ، المشابك المتقاطعة) لحزمة الأوعية الدموية. قم بإنشاء عقدة واحدة مع كل ربطة عنق حريرية 4-0 وقم بتطبيقها بالتتابع من القريب إلى البعيد.
2. تأكد من وضع المشابك المتقاطعة ذات الربطات الحريرية متباعدة بما يكفي لعزل ~ 2 مم من طول الوعاء ، وأن التطبيق المتسلسل لأربطة الخياطة سوف يترسب احتقان الوريد الحرقفي الأيسر.
3. باستخدام خيوط خياطة الحرير 4-0 كمقابض ، قم بتدوير حزمة الأوعية الدموية الشريانية الوريدية الحرقفية اليسرى في اتجاه عقارب الساعة وضبط الموضع لتحديد موقع الوريد الأمامي للشريان مؤقتا (الشكل 1 ب).
4. قم بعمل بضع الوريد الطولي (~ 1 مم) باستخدام مقص زنبركي مستقيم من Vannas واطرد الدم المتبقي برفق من التجويف الوريدي بنسبة 0.9٪ محلول ملحي (الشكل 1C). توخ الحذر خلال هذه الخطوة ، لأن تدفق المحلول الملحي عالي الضغط يمكن أن يسبب اضطرابا وريديا.
   ملاحظة: توفر منطقة اللون الأحمر التي تبقى في الشريان الحرقفي بعد الاحمرار الوريدي نافذة مرئية للخطوة التالية.
5. ضع خياطة نايلون 10-0 من خلال الجدار الخلفي للوريد.
   ملاحظة: يجب أن يكون هذا الجزء من الوريد الحرقفي في وضع فوري للجدار الأمامي للشريان الحرقفي ، وتكون الجدران ملتصقة بشكل طبيعي. يجب أن يمر الخيط عبر كلا الجدارين ويربط الخيط بعقدة واحدة (الشكل 1 د). لاحظ أن كمية صغيرة من النزيف ، والتي تنشأ من الدم الراكد في الشريان الحرقفي ، ستظهر بمجرد مرور الإبرة عبر كلا الجدارين. إذا استمر النزيف داخل اللمعية خلال هذه الخطوة ، فقد تكون المشابك المتقاطعة للخياطة الحريرية فضفاضة جدا وتحتاج إلى مزيد من التشديد.
6. أمسك أطراف الخيط المشبوكة وضعها تحت شد لطيف لإزاحة الجدار الأمامي من الجدار الخلفي للشريان الحرقفي. قم بعمل شق بيضاوي ~ 1.0 مم × 0.3 مم باستخدام مقص زنبركي منحني من Vannas ، مع إزالة الجدران الملتصقة لكل من الشريان الحرقفي والوريد.
   ملاحظة: يتم إنشاء الناسور الشرياني الوريدي بمجرد إنشاء هذه القناة المشتركة. من الممكن إصابة الجدران الجانبية للوريد خلال هذه الخطوة حيث يتم إجراء شق جدار الشريان الحرقفي الخلفي / الشريان الحرقفي الأمامي من خلال التعرض للوريد. يجب توخي الحذر لتجنب هذه المضاعفات لأن هذا يمكن أن يقلل بشكل كبير من قطر الناسور ويؤدي إلى تطور الجلطة.
7. اغسل الدم المتبقي من تجويف الشرايين المكشوف برفق باستخدام محلول ملحي 0.9٪ ومحلول ملحي هيبارين (100 وحدة دولية / مل) ²⁸ (الشكل 1E).
8. بعد إنشاء AVF ، قم بإصلاح بضع الوريد الأولي للجدار الأمامي باستخدام اثنين أو ثلاثة خيوط من النايلون 10-0 بطريقة متقطعة (الشكل 1F).
9. أعد حزمة الأوعية الدموية إلى اتجاهها التشريحي الأصلي وضع قطعة صغيرة من إسفنجة الجيلاتين القابلة للامتصاص المنقوعة بالمحلول الملحي بجوار بضع الوريد الذي تم إصلاحه لتسهيل الإرقاء.
10. قم بفك الأربطة المتقاطعة ذات العقدة الواحدة 4-0 بالتتابع من البعيد إلى القريب. راقب موقع بضع الوريد عن كثب بحثا عن نزيف مفرط أثناء تخفيف كل خياطة.
11. إذا لم يكن الإصلاح مرقئا بشكل كاف ، فأعد تطبيق المشابك المتقاطعة وضع خياطة نايلون أخرى 10-0 في موقع النزيف. إذا تم التأكد من الإرقاء ، فقم بإزالة الغرز ثم الإسفنجة الجيلاتينية القابلة للامتصاص.
12. فرك بلطف حزمة الأوعية الدموية مع مسحات القطن الصغيرة الصلبة والحادة والمدببة ذات النهايات المزدوجة ، والتي تسهل بشكل أكبر استعادة تدفق الدم. تأكد من النجاح التقني للعملية باستخدام تصور الدم المؤكسج الأحمر النابض الساطع الذي يدخل الوريد الحرقفي ويختلط بالدم الوريدي الداكن العائد من الطرف الخلفي.
13. حقن محلول ملحي هيبارين (0.2 وحدة دولية / جم)¹⁵ في IVC لمنع تخثر الدم الجهازي لتحسين نتائج سالكية AVF.
    ملاحظة: على الرغم من أن هذه الخطوة تحدث بعد إعادة بناء الأوعية الدموية (على عكس التناظرية البشرية حيث يحدث الهيبارين قبل لقط الأوعية المتقاطعة) ، فقد لوحظ انخفاض في النزيف أثناء العملية وتحسين سالكية AVF عند إجراؤها في هذه المرحلة من الإجراء. يفضل الحقن في موقع مغطى باللفافة و / أو الدهون لمنع النزيف من موقع البزل.
14. إعادة فحص موقع الجراحة للإرقاء بعد حقن محلول ملحي هيبارين. إذا لم تكن هناك مخاوف من النزيف ، أغلق لفافة خط الوسط ثم شق الجلد بخيوط PGA قابلة للامتصاص 5-0 بطريقة جري.
15. بالنسبة للعمليات الزائفة ، اتبع جميع الخطوات الرئيسية للإجراء باستثناء تشكيل AVF. ضع عقدة واحدة من الرباط الحريري 4-0 في الطرف القريب من الحزمة الشريانية الوريدية الحرقفية اليسرى وقم بمطابقة أوقات المشبك مع جراحات AVF (على سبيل المثال ، ~ 20 دقيقة ، اعتمادا على كفاءة الجراح المجهري).

6. رعاية ما بعد الجراحة والقياس

1. بعد إغلاق البطن ، قم بقياس نضح الدم لعضلات الظنبوب الأمامية الثنائية والكفوف البطنية باستخدام تصوير دوبلر بالليزر.
   ملاحظة: سيؤكد عجز التروية من جانب واحد تحويل الناسور لتدفق الشرايين ("سرقة").
2. يتم تطبيق 0.1 ملغ/كغ من البوبرينورفين تحت الجلد وإعادة الفأر إلى قفص فأر مسخن مسبقا مع فراش طري عالي الامتصاص مع عش.
3. اسمح للماوس بالتعافي في قفص الماوس المسخن مسبقا حتى يزول التخدير ، وهو ما سيكون واضحا عندما يكون الماوس متنقلا وتفاعليا (~ 2 ساعة). أثناء الشفاء ، امنح الماوس سهولة الوصول إلى نظام غذائي رطب وناعم.
4. يتم تطبيق البوبرينورفين و/أو الترطيب الملحي تحت الجلد كل 12 ساعة حتى 48 ساعة وإجراء المراقبة اليومية لمدة 5 أيام بعد الجراحة. القتل الرحيم للحيوانات ذات الحالة المتدهورة أو نخر الأنسجة المفرط ، المصنفة على أنها درجة نقص التروية المعدلة ≥2²⁹.
5. استخدام تقييمات الموجات فوق الصوتية المزدوجة التسلسلية لتقييم سالكية الناسور بعد الجراحة ؛ يتم استبعاد الفئران المصابة بتجلط الناسور من التحليلات اللاحقة ما لم يكن الغرض من التجارب هو توصيف فشل نضوج AVF.
6. تحديد قياسات النتائج الأخرى بعد الجراحة مثل ديناميكا الدم المحلية وقوة القبضة وأداء المشي خلال فترة التعافي. جمع الناسور والأنسجة العضلية لتقييم علم الأنسجة في نهاية التجربة أثناء التضحية^25,27.

الحيوانات التي تعرضت لنظام غذائي أدينين قد خفضت معدلات الترشيح الكبيبي (التحكم: 441.3 ± 54.2 ميكرولتر / دقيقة مقابل CKD: 165.1 ± 118.3 ميكرولتر / دقيقة ، p < 0.05) وزيادة مستويات نيتروجين اليوريا في الدم في الدم (التحكم: 20.39 ± 4.2 ميكرولتر / دقيقة مقابل CKD: 38.20 ± 10.65 ميكرولتر / دقيقة ، p < 0.05) مقارنة بالحيوانات التي تلقت تشاو القائم على الكازين ، مما يؤكد وجود قصور كلوي قبل جراحة الناسور الشرياني الوريدي.

التحقق من صحة سالكية AVF
على الرغم من أن التأكيد البصري أثناء العملية للنجاح التقني هو التحديد الأولي لسالكية الناسور ، إلا أنه لا يضمن تماما المباح أو النضج الفسيولوجي طوال فترة الدراسة. تم تحديد نتائج المباح بعد الجراحة (أي النجاح أو الفشل) باستخدام كل من التصوير بالموجات فوق الصوتية المزدوجة والفحص النسيجي ، كما أوضحنا سابقا25. يوضح الشكل 2 الوضع B التمثيلي ، ودوبلر بموجة النبض ، وصور الموجات فوق الصوتية دوبلر الملونة والأقسام المورفولوجية لمفاغرة الناسور الشرياني الوريدي ، على التوالي. يتم تصور الناسور السالكة مباشرة على تحليل دوبلر الملون مع ديناميكا الدم المضطربة ، وكذلك التوسيع الطيفي في موقع الناسور. كما تؤكد التغييرات التكيفية بوساطة التدفق لأوعية التدفق الداخل والخارج بشكل غير مباشر سالكية AVF. على وجه التحديد ، فإن الشريان الأورطي لديه ذروة ذروة السرعة الانقباضية ونهاية الانبساطي ، ويطور IVC النبض مع سرعة ذروة مرتفعة ، وتمدد الأوعية في كل من الشريان الأورطي و IVC واضح (الشكل 2 أ). في المقابل ، لا يحتوي الناسور الفاشل أو الخثاري على أي تغييرات تقريبا في قياسات التدفق الداخلي أو الخارجي ولا يوجد اضطراب أو اتساع طيفي داخل الأوعية الدموية الحرقفية اليسرى. عادة ما يؤدي فشل الناسور الناتج عن تجلط الدم جزئيا أو كليا إلى انسداد الشريان الحرقفي الأيسر ، والذي يتم تصوره على أنه تدفق ضئيل أو معدوم في تحليل دوبلر بالموجات النبضية. يوضح الشكل 2B أقسام الأنسجة التسلسلية ل AVF بعد أسبوعين من الإنشاء الجراحي. يبلغ سمك المقاطع 5 ميكرومتر وملطخة بثلاثية الألوان لماسون. المفاغرة الجراحية للشريان والوريد واضحة ، والشرايين الوريدية المتميزة موجودة (سماكة الجدار الوريدي والتليف مع تضخم neointimal). تم إجراء التصوير بالموجات فوق الصوتية في اليوم 3 بعد الجراحة لاستبعاد الفئران المصابة بفشل AVF المبكر ، ثم تم الحصول على قياسات متسلسلة غير جراحية طوال فترة الدراسة. يوفر التقييم المورفولوجي تفاصيل إعادة تشكيل الأوعية الدموية الخاصة بالفترة في وقت التضحية وكان يستخدم لتأكيد نتائج الموجات فوق الصوتية. من المتوقع في البداية أن يبلغ معدل سالكية AVF حوالي 50٪ (20٪ -30٪ من الوفيات بعد الجراحة و 20٪ -30٪ من فشل الناسور)25 ، لكن معدل النجاح الجراحي يتحسن بشكل كبير (~ 5٪ -10٪ معدل الفشل) مع الممارسة وزيادة الكفاءة.

الخصائص الفيزيولوجية المرضية بعد تكوين الناسور الشرياني الوريدي الحرقفي
التغير الديناميكي للدوران: يجب قياس خصائص ديناميكا الدم AVF والتروية الخلفية البعيدة لتحديد سياق الفيزيولوجيا المرضية للأطراف المرتبطة بالوصول. كشفت قياسات الموجات فوق الصوتية دوبلر ذات الوضع B والموجات النبضية بعد الجراحة عن اتساع الأوعية الدموية للتدفق الداخلي والخارج (IVC: 1.4 أضعاف عند POD3 و 1.6 أضعاف عند POD13 و IRA: 1.4 ضعف عند POD3 و 1.7 ضعف عند POD13 ، p < 0.05) وزيادات في ذروة السرعة الانقباضية (سرعة الانقباض القصوى IVC: 5.5 أضعاف عند POD3 و 4.9 أضعاف عند POD13 وسرعة الانقباض القصوى IRA: 2.8 أضعاف عند POD3 و 3.7 أضعاف عند POD13 ، P < 0.05) مقارنة بالحيوانات الوهمية (الشكل 3A-D). علاوة على ذلك ، كان نقص تروية الأطراف الخلفية أحادي الجانب واضحا بعد الجراحة ، مما يؤكد نقص تروية الشرايين بوساطة السرقة البعيد عن الناسور. من المتوقع أن يكون عجز نضح المخلب الأيسر ~ 20٪ من الطرف المقابل ، وعجز التروية في عضلة الظنبوب الأمامية هو ~ 60٪. استعادت الفئران جزئيا هذا العجز طوال فترة الدراسة (الشكل 3E ، F).

ضعف الأطراف الخلفية: من المتوقع حدوث إعاقة في الأطراف المماثلة بعد إنشاء AVF ، والذي يتضمن عرجا خفيفا (في معظم الحالات) إلى شديد (حالات قليلة) يمكن أن يستمر لعدة أيام. قد يكون شلل الأطراف الخلفية الذي لم يتم حله و / أو نخر المخلب مؤشرا على إهانة إقفارية شديدة ناتجة عن حجم الناسور خارج النطاق الطبيعي. تم قياس الوظيفة الحركية العصبية للأطراف الخلفية من خلال اختبار قوة القبضة وتحليل نمط مشية جهاز المشي ، والتي تم إجراؤها بالتتابع طوال فترة التعافي. قوة القبضة الأحادية المتوقعة هي ~ 50٪ من الطرف المقابل في اليوم 4 بعد الجراحة ، مع التعافي التدريجي. تتطلب الفئران AVF أيضا سرعات منخفضة لجهاز المشي أثناء تقييم المشي (<20 سم / دقيقة) (الشكل 3G ، H).

الشكل 1: خطوات الجراحة المجهرية لمفاغرة الناسور الشرياني الوريدي . (أ) تعرض المنطقة المستهدفة الجراحية ، بما في ذلك بضع البطن في خط الوسط وعزل الشريان الحرقفي الأيسر / الوريد. (ب) 4-0 أربطة خياطة (على سبيل المثال ، تستخدم كمشابك وعائية مؤقتة) على الحزمة الشريانية الوريدية الحرقفية المشتركة اليسرى في المواقع القريبة والبعيدة. ج: بضع الوريد الطولي على الجدار الأمامي للوريد الحرقفي. د: 10-0 درز مشبك عبر الجدار الخلفي للوريد الحرقفي والجدار الأمامي للشريان الحرقفي. ه: شق بيضاوي الشكل مع الانتفاخ المتداخل. (F) يتم إصلاح بضع الوريد الطولي الأولي من الصورة C باستخدام خياطة متقطعة 10-0. شريط المقياس = 1 مم. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الشكل 2: التحقق من صحة سالكية الناسور الشرياني الوريدي . (أ) تحديد الموجات فوق الصوتية دوبلر لسالكية AVF. تشمل خصائص الناسور السالكي التمدد الشرياني والوريدي في التصوير في الوضع B ، والتدفق المضطرب على تحليل دوبلر الملون للأوعية الدموية الحرقفية اليسرى ، والتوسيع الطيفي النابض على تقييم دوبلر بالموجات النبضية للأوعية الحرقفية اليسرى ، والزيادات في ذروة السرعة الانقباضية ونهاية الانبساطي للشريان الأورطي تحت الكلوي ، والنبض داخل IVC مع زيادة في ذروة السرعة الانقباضي. يشير التدفق المتناقص أو الغائب داخل الأوعية الحرقفية إلى فشل / تخثر AVF. توفر تقنية الموجات فوق الصوتية المزدوجة كلا من البيانات المورفولوجية والفسيولوجية. قياسات السرعة بالمليمترات في الثانية. (ب) التقييم المورفولوجي لمفاغرة التشوه الشرياني الوريدي بعد 14 يوما من تكون الناسور. كانت الصور ملطخة بثلاثية الألوان لماسون. هناك تغييرات تشريحية في الفحص المجهري للمقطع التسلسلي من التشريح الشرياني الوريدي الحرقفي المشترك القريب (الطرف الأيسر) إلى التشريح الشرياني الوريدي الحرقفي المشترك البعيد (الطرف الأيمن). انسداد الأوعية الدموية بسبب الجلطة و / أو تضخم neointimal المفرط يؤكد فشل AVF. الصور هي تكبير 10x. ج: الشريان الحرقفي المشترك ، V: الوريد الحرقفي المشترك. شريط المقياس = 500 ميكرومتر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 3: الخصائص الفيزيولوجية المرضية قبل وبعد تكوين AVF. القياس الكمي للتصوير بالموجات فوق الصوتية في (أ) قطر الأبهر تحت الكلوي ، (ب) ذروة الأبهر تحت الكبري السرعة الانقباضية ، (ج) قطر الوريد الأجوف السفلي ، و (د) ذروة الوريد الأجوف السفلي السرعة الانقباضية قبل الجراحة وفي أيام ما بعد الجراحة 3 و 13. قياس نضح الدم الموضعي (دوبلر الليزر) على (E) الظنبوب الأمامي و (F) المخلب البطني قبل الجراحة وطوال فترة النقاهة لمدة 2 أسبوع. تضمن الاختبار الوظيفي العصبي الحركي (G) قوة القبضة و (H) اختبار جهاز المشي قبل وبعد الجراحة. تم تحليل البيانات باستخدام ANOVA ثنائي الاتجاه ، وتم إجراء اختبار Tukey اللاحق عند الاقتضاء. القيم تعني ± SD. * p < 0.05 ، ** p < 0.01 ، ***p < 0.001 ، **** p < 0.0001 مقابل Control_Sham. #p < 0.05 ، ##p < 0.01 ، ###p < 0.001 ، ####p < 0.0001 مقابل CKD_Sham. ن = 6-10 / مجموعة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.