يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إنتاج مصل مكيف ذاتي معدل وتقييم خارج الجسم الحي لإمكاناته العلاجية في ظهارة قرنية الفئران

3.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/64911

⸱

مارس 24, 2023

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Education, Chang Gung Memorial Hospital Linkou, 2School of Medicine, Chang Gung University, 3Department of Chemical Engineering and Biotechnology, National Taipei University of Technology, 4Cell Therapy Center, Tri-Service General Hospital, 5Department of General Surgery, Bo-Ai Clinic, 6Department of Ophthalmology, Chang Gung Memorial Hospital Linkou, 7Institute of Clinical Medicine, National Yang Ming Chiao Tung University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

توضح هذه المقالة بروتوكولا لتبسيط العملية وجعل تحضير المصل المشروط الذاتي (ACS) أقل تكلفة. ليست هناك حاجة إلى محاقن خاصة أو خرز زجاجي مطلي بالسطح. علاوة على ذلك ، فإن ACS المعدل (mACS) له مزايا تنافسية على المصل الذاتي التقليدي في التئام جروح القرنية لعيون الفئران خارج الجسم الحي.

الملخص

كانت العلاجات الموضعية المشتقة من الدم البشري نعمة للأطباء في العقود الأخيرة. يتم إثراء المصل الذاتي (AS) والبلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بعوامل النمو الظهارية الضرورية في التئام جروح القرنية. على عكس AS ، يعتمد PRP على نظام الطرد المركزي التفاضلي ، مما ينتج عنه المزيد من عوامل النمو المشتقة من الصفائح الدموية. المصل المكيف الذاتي (ACS) لا يحافظ فقط على إعداد AS و PRP ، ولكنه يركز أيضا على خصائص تعديل المناعة ، والتي تعتبر مهمة في الأمراض الالتهابية.

يعد الافتقار إلى البروتوكولات الموحدة وتكاليف التحضير المرتفعة قيودا على التطبيق السريري ل ACS. توضح تجربة الفيديو هذه إجراء تشغيليا قياسيا لتحضير قطرات العين المعدلة ذات المصل الذاتي المكيف (mACS). أولا ، تمت إضافة الجلسرين إلى محاقن الهيبارين كمثبت لخلايا الدم أثناء حضانة نقص الأكسجين. لتنشيط خلايا الدم ، بدأت حضانة 4 ساعات عند 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، تم طرد عينات الدم بالطرد المركزي عند 3500 × غرام لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد ترشيح المادة الطافية من خلال مرشح 0.22 ميكرومتر ، تم تحضير قطرات العين mACS بالكامل.

أظهرت تجربة مبدئية للتأثير العلاجي ل mACS أنه قد يكون له مزايا تنافسية على AS التقليدي في التئام جروح القرنية في عيون الفئران خارج الجسم الحي. تم إعداد AS المستخدم في هذه الدراسة وفقا للدراسات المنشورة والممارسة السريرية في مستشفانا. لذلك ، يمكن تقييم فعالية mACS على أمراض سطح العين في الأبحاث المستقبلية من خلال الدراسات الحيوانية في الجسم الحي والتجارب السريرية.

المقدمة

تم الإبلاغ عن الآثار العلاجية للمصل الذاتي (AS) في أمراض جفاف العين لأول مرة في ثمانينيات القرن العشرين من قبل Fox et al.1. ويعتقد أن كل من خاصية التشحيم والمكونات الكيميائية الحيوية الأساسية الظهارية في AS، التي تحاكي الدموع الطبيعية، تفيد تكاثر الخلايا الظهارية القرنية. على مدى العقود الماضية ، تم إجراء العديد من الدراسات على هذا الأساس. تشمل المكونات الغذائية عامل نمو البشرة (EGF) وفيتامين أ وعامل النمو المحول β (TGF- β) والسيتوكينات الأخرى. ومن المثير للاهتمام أن المصل غني ب TGF- β وفيتامين أ ، والتي يعتقد أنها تلعب دورا محوريا في تكاثر البشرة2،3،4،5. بالإضافة إلى ذلك ، عند علاج المرضى الذين يعانون من أمراض سطح العين ، أظهرت العديد من الدراسات بعض مزايا قطرات العين AS في النتائج التي أبلغ عنها المريض ، ومعلمات العين الجافة الموضوعيةالأخرى 6,7 ، والنتائج المجهرية مثل كثافة الخلايا8. كشفت دراسات التحليل التلوي أنه قد تكون هناك بعض الفوائد في تحسين متلازمات المريض مع علاج قطرات العين AS ، ولكن النتائج والملاحظات على المدى الطويل لا تزال تفتقر إلى 9,10.

على عكس AS ، يتم اشتقاق البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) من إضافة مضاد للتخثر أثناء التحضير ، مع مزيد من الطرد المركزي التفاضلي والتنشيط الكيميائي للصفائح الدموية. بالمقارنة مع AS ، توجد العديد من المواد الكيميائية وعوامل النمو ، مثل TGF- β ، وعامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) ، و EGF ، في PRP. كما تم تطبيقه على أمراض سطح العين مع فوائد سريرية في تخفيف الأعراض11.

العلاقة المتقاطعة بين العيوب الظهارية والالتهاب معقدة. والجدير بالذكر أن الفيزيولوجيا المناعية هي قضية مهمة أخرى في أمراض سطح العين. يعتقد أن السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، مثل IL-1β و IFN-γ ، هي وسطاء محوريون في الشلالات الالتهابية12. وبالتالي يتم فتح طرق جديدة للعلاج على أساس فهم آلية المناعة. قد تلعب استراتيجيات إيقاف هذه العملية الالتهابية ، بما في ذلك إنتاج مضادات مستقبلات الإنترلوكين -1 (IL-1Ra) وغيرها من السيتوكينات المضادة للالتهابات ، دورا مهما في أمراض سطح العين13،14،15.

منذ عام 1998 ، تم استخدام Orthokine ، وهو مصل مكيف ذاتي تجاري (ACS) ، سريريا في مرضى العظام الذين يعانون من هشاشة العظام (OA) والتهاب المفاصل الروماتويدي (RA) واضطرابات العمود الفقري13. بالمقارنة مع AS و PRP ، فإن العلاج بالخرز الزجاجي المطلي كيميائيا وحضانة نقص الأكسجين لتنشيط الخلايا الوحيدة هي السمات المحددة ل ACS16. من الناحية النظرية ، يمكن إفراز المزيد من العوامل المضادة للالتهابات عن طريق إضافة إجهاد البقاء على قيد الحياة إلى الخلايا ، مما يؤدي إلى تركيز أعلى من المكونات الأساسية المعدلة للمناعة ، بما في ذلك IL-1Ra. كما تم الإبلاغ عن الفوائد العلاجية المحسنة ل ACS في الزراعة العضوية ، مقارنة ب AS ،17. تشترك أمراض سطح العين في خلفيات مناعية مماثلة مع أمراض التهاب العظام في بعض النواحي. لذلك ، بناء على النتائج الناجحة للعلاج المشتق من الدم البشري في مجال تقويم العظام ، قد يكون ل ACS مزايا على العلاجات التقليدية في الممارسة السريرية من خلال خصائص الظهارة وتعديل المناعة. على الرغم من استخدام ACS على نطاق واسع في أمراض التهاب العظام ، إلا أن تطبيقاته السريرية في طب العيون لا تزال بحاجة إلى استكشاف ، والتي قد تعوقها تكلفتها العالية ، ونقص دعم الأدبيات ، وعدم توحيد عملية التحضير ، مما يؤدي إلى أداء متنوع.

في مقالة الفيديو هذه ، تم عرض طريقة جديدة وفعالة من حيث التكلفة ومريحة لتوليد ACS المعدل (mACS) ، أو البلازما الغنية بعوامل النمو (PRGF) ، مما ينتج عنه محلول قطرة العين بقيمة عملية مماثلة ل ACSs التجارية. تم الاحتفاظ بالأفكار الرئيسية لإضافة مضادات التخثر وتحفيز خلايا الدم على إفراز السيتوكينات المضادة للالتهابات عن طريق الحضانة المجهدة ، ولكن على عكس الطرق المستحثة كيميائيا ، مثل تلك القائمة على الخرز الزجاجي المطلي ب CrSO4 والمجموعات التجارية ، يتم تحفيز حالة الإجهاد الحرجة جسديا عن طريق حضانة نقص الأكسجين في هذه الطريقة. علاوة على ذلك ، تمت إضافة الجلسرين لتوفير فوائد إضافية ، بما في ذلك زيادة استقرار غشاء خلايا الدم ، والحفاظ على ضغط السائل خارج الخلية التناضحيالمناسب 18 ، ومصدر مناسب للمغذيات في حالات نقص الأكسجين التي تتجنب الإجهاد الزائد للخلايا.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم إجراء البحث وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية في بداية قسم البروتوكول. تم تنفيذ جميع البروتوكولات والإجراءات وفقا لإعلان هلسنكي وتمت مراجعتها والموافقة عليها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية لمؤسسة تشانغ غونغ الطبية. تم إبلاغ جميع المتطوعين بطبيعة هذه الدراسة ووقعوا على نموذج موافقة مستنيرة قبل إدراجهم. يتم عرض المواد الاستهلاكية المطلوبة للإجراء التجريبي بأكمله في الشكل 1 والشكل 2 ، وكذلك في جدول المواد.

1. تحضير المواد اللازمة لإنتاج قطرات العين mACS

  1. قم بإعداد 250 مل من محلول الجلسرين بنسبة 10٪ واحتفظ بمجموعة تسريب مجنحة الفراشة 21 جم ، ومحقنة سعة 3 مل بدون إبرة ، وستة أنابيب فراغ سعة 10 مل تحتوي على وحدات الهيبارين 158 USP جاهزة (الشكل 1).
  2. قم بتوصيل إبرة جمع الدم 21 جم بالمحقنة سعة 3 مل واسحب 3 مل من محلول الجلسرين بنسبة 10٪ إلى المحقنة المعدة.
    ملاحظة: يجب تعقيم جميع المواد قبل إدخال الإبرة.
  3. قم بتوزيع محلول الجلسرين بنسبة 10٪ في أنابيب الفراغ بالتسلسل ، مع ما يقرب من 0.5 مل من محلول الجلسرين بنسبة 10٪ في كل منها (الشكل 3 أ).
    ملاحظة: بسبب الضغط السلبي في أنبوب الاختبار ، يجب أن تخرج الإبرة فور دخولها لتوزيع 3 مل من محلول الجلسرين بالتساوي على أنابيب الاختبار الستة.
  4. تعقيم جلد المريض بمسحات قطنية معقمة بنسبة 75٪ من الكحول. ثقب الوريد السطحي للأطراف العلوية للمريض بإبرة جمع الدم 18 جرام. ارسم 60-70 مل من الدم الوريدي من الوريد السطحي في المجموع.

2. التحضير لقطرات العين mACS

  1. حقن 10 مل من الدم الوريدي المسحوب بالتتابع في كل من الأنابيب الفراغية الستة (الشكل 3 ب).
    ملاحظة: تعتمد هذه الخطوة على الضغط السلبي للفراغ لملء الأنابيب. لتجنب اضطراب خلايا الدم وانحلال الدم ، لا تمارس أي ضغط إيجابي.
  2. ضع الأنابيب الفراغية الستة في الحاضنة بدرجة حرارة ثابتة تبلغ 37 درجة مئوية لمدة 4 ساعات (الشكل 3C).
    ملاحظة: يتم الحفاظ على حالة نقص الأكسجين واستقرارها من خلال الضغط السلبي المتبقي في أنبوب مغلق يتلقى الجلسرين.
  3. قم بإزالة الأنابيب من الحاضنة بعد 4 ساعات وطردها مركزيا عند 3500 × جم لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
  4. في هذه المرحلة ، قم بإعداد المواد لاستخراج mACS ، بما في ذلك زجاجات قطرة العين المعقمة ، ومحقنة 3 مل بالإبرة ، ومرشح 0.22 ميكرومتر ، وإبرة 18 جم ، وزوج من القفازات المعقمة (الشكل 2).
    ملاحظة: يجب مسح طاولة العمليات بنسبة 75٪ كحول لضمان بيئة معقمة. الطافي ، بعد الطرد المركزي ، هو بالفعل منتج نصف نهائي من mACS.
  5. ضع الأنابيب الستة على رف الأنبوب وافتح الأغطية بعد الطرد المركزي الكامل (الشكل 3D).
    ملاحظة: العقم غير مطلوب في هذه الخطوة.
  6. ارتد قفازات معقمة واسحب mACS واحدا تلو الآخر باستخدام حقنة سعة 3 مل بإبرة 18 جرام.
    ملاحظة: احرص على عدم رسم طبقة خلايا الدم السفلية خلال هذه الخطوة (الشكل 3E).
  7. اسحب الإبرة ، وقم بتوصيلها بمرشح 0.22 ميكرومتر ، وقم بتوصيل إبرة جمع الدم 23 G ، 1.5 بوصة مع المحقنة الأصلية 3 مل بالمخرج أدناه (الشكل 3F).
  8. ادفع الإبرة برفق من خلال مرشح 0.22 ميكرومتر في زجاجات قطرة العين المعقمة المعدة (الشكل 3G).
  9. كرر الخطوات المذكورة أعلاه حتى يتم ترشيح جميع mACS وتخزينها في زجاجات قطرة العين (الشكل 3H).
  10. قم بتخزين قطرات العين mACS على حرارة 4 درجات مئوية للاستخدام الفوري ؛ يحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية للحفظ على المدى الطويل.
    ملاحظة: لا تحتفظ بها لأكثر من أسبوعين عند 4 درجات مئوية أو لمدة تزيد عن 3 أشهر عند -20 درجة مئوية 9,19.

3. نموذج التئام الجروح خارج الجسم الحي لظهارة القرنية الفئران

ملاحظة: استند النموذج الحيواني خارج الجسم الحي التالي إلى خبرة سابقة من Hung et al. على الإصابات الميكانيكية لظهارة القرنية20. يجب تنفيذ الخطوات التالية تحت المجهر لإنشاء جرح ظهاري للقرنية محدد جيدا ومتناسق.

  1. تخدير الفئران C57BL / 6 مع 3٪ -4٪ إيزوفلوران. ضع مسافة بادئة لكمة خزعة الجلد فوق القرنية المركزية للفأر ، تاركا دائرة ضحلة على الظهارة كهامش جرح موحد.
    ملاحظة: كن لطيفا لتجنب تمزق مقلة العين.
  2. قم بإزالة ظهارة القرنية داخل المنطقة المؤكدة وصولا إلى طبقة بومان ، باستخدام مزيل حلقة صدأ القرنية المجهز بلدغ 0.5 مم.
  3. لإنشاء نموذج حيواني خارج الجسم الحي لجرح القرنية الميكانيكي ، قم بحصاد مقلة العين وإعداد الثقافة جيدا.
    1. القتل الرحيم للفئران أولا ؛ بعد ذلك ، اضغط برفق على الحافات المدارية العلوية والسفلية للفئران ، وأدخل طرف الملقط فوق الفضاء الخلفي ، وأخرج مقلة العين وأمسكها بالملقط.
    2. قطع العصب البصري والأنسجة الرخوة حول الحجاج بمقص القرنية لعزل مقلة العين بشكل مثالي.
    3. تحضير لوحة 96 بئرا مع الشمع المذاب بداخله. قم بإنشاء ثقب دائري بسرعة باستخدام أطراف الملقط ثم انتظر التصلب.
  4. تحضير الوسائط المراد اختبارها: 0.5٪ mACS ، 0.5٪ AS للمقارنة ، محلول ملحي عادي كعنصر تحكم سلبي ، ووسط النسر المعدل من Dulbecco (DMEM).
    ملاحظة: يتم الحصول على mACS باستخدام البروتوكول المذكور أعلاه.
  5. بالنسبة للثقافة خارج الجسم الحي ، ضع مقلة العين المحصودة على اللوحة المعدة المكونة من 96 بئرا. أضف 200 ميكرولتر من كل وسيط إلى لوحة 96 بئرا.
  6. ضع صفيحة الاستزراع المكونة من 96 بئرا في الحاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO2. التأكد من تغيير الإعلام الثقافي كل 24 ساعة.
  7. لتأكيد تأثير التئام الجروح المتسلسل ، راقب منطقة الجرح الظهاري تحت المجهر كل 8 ساعات عن طريق تلطيخ الفلوريسين.
    1. حل الفلوريسئين على ورقة الفلوريسئين مع المياه المالحة العادية.
    2. أسقط صبغة الفلوريسئين على القرنية المركزية للفأر ، ثم راقبها ووثقها تحت المجهر. تظهر نتيجة نموذجية في الشكل 4.
      ملاحظة: قطرة واحدة (حوالي 0.05 مل) من صبغة الفلوريسئين كافية للمراقبة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يوضح الشكل 1 والشكل 2 المواد اللازمة للتجربة ، ويعرض الشكل 3 الخطوات المتسلسلة والمنتجات المتوسطة الناجحة أثناء تحضير mAcs. أولا ، تمت إضافة 0.5 مل من محلول الجلسرين بنسبة 10٪ إلى كل أنبوب اختبار معقم سعة 10 مل (الشكل 3 أ). ثم ، تم الحصول على 60-70 مل من الدم الوريدي من المريض ، وتم حقن 10 مل من الدم في كل أنبوب (الشكل 3 ب). يجب أن يخضع دم المريض لفحوصات مخبرية شاملة ومنتظم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

في هذه الدراسة ، تم وصف بروتوكول لإعداد mACS وتظهر فائدة قطرات العين mACS في التئام الجروح للنماذج الحيوانية. التعديل الحاسم لبروتوكول mACS هذا هو إضافة ما يقرب من 0.5 مل من محلول الجلسرين بنسبة 10٪ في كل أنبوب اختبار ، مما يخلق ظروفا مناسبة لنقص الأكسجين خلال فترة الحضانة لمدة 4 ساعات عند 37 درجة مئوية. يوفر هذا الإعداد ل AS الضغط المناسب والخلايا السريعة لإفراز عوامل النمو الضرورية التي تساعد على التئام الجروح. يمكن أن يساعد مرشح 0.22 ميكرومتر في القضاء على البروتينات الجزيئية الكبيرة وخلايا الدم والشوائب ، مما يجعل ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن جميع المؤلفين أنه لا يوجد تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون Ya-Lan Chien و Chia-Ying Lee على المساعدة الفنية الممتازة ، وشركة OnLine English على الطبعة اللغوية. تم تمويل هذه الدراسة جزئيا من قبل مشروع تشانغ غونغ للبحوث الطبية (رقم المنحة CMRPG3L1491).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
  96-بئر لوحة ثقافةMerck KGaA, ألمانياCLS3997
Barraquer غطاء speculumkatenaK1-535515 مم
Barraquer حامل إبرةKatenaK6-3310بدون قفل  
Barron Vacuum Punch 8.0 ممkatenaK20-2108لقطع ورق الترشيح
BD 10.0 مل أنابيب فراغ تحتوي على الهيبارين 158 وحدة USPBecton ، Dickinson and Company ، US367880ما لا يقل عن 6 أنابيب ، ضرورية لجمع الدم للتجارب اللاحقة ولتجنب تراص الدم
BD 21 G مجموعة التسريب ذات الأجنحة الفراشةBecton ، Dickinson and Company ، الولايات المتحدة367281للتوزيع المتساوي لمحلول الجلسرين
C57BL / 6 الفئران   ؛RMRC11005 المركز الوطني للحيواناتللمختبر لنموذج الفأر
Castroviejo ملقط 0.12 ممkatena K5-2500
جهاز طرد مركزيEppendorf ، ألمانيا58110004283,500 × جم لمدة 10 دقائق
Cheng Yi 10.0 مل زجاجة قطارة عين معقمةCheng Yi Chemical ،تايوان CP405141يجب أن تكون معقمة وكحاوية تخزين للمنتج النهائي
مزيل حلقة الصدأ القرنية مع 0.5 مم لدغAlgerbrush IITM ؛ Alger Equipment Co., Inc. Lago Vista, TXCHI-675لتنضير ظهارة القرنية
Dulbecco المتوسط الأساسي المعدل MerckKGaA, ألمانياD6429
ورق الترشيح تويو روشي كايشا ، المحدودة1.11
شرائط العيون الفلوريسين الصوديوم U.S.POPTITECHتلطيخ OPTFL100 لعيب ظهارة القرنية   ؛
حاضنةFirstek ، تايوانS300S37 درجة ؛ C لمدة 4 ساعات
قفازات معقمة كانامصناعات اللاتكس ، الهندEN455للعملية المعقمة
Merck 0.22 & micro ؛ مرشح mMerck KGaA ، ألمانياPR05359مرشحين على الأقل لترشيح mACS
نانغ كوانغ 250 مل محلول جلسرين 10٪نانغ كوانغ للأدوية ، تايوان19496لتقديم تأثير استقرار الغشاء المناسب والضغط التناضحي خارج الخلية لخلايا الدم
المحلول الملحي العاديTAIWAN BIOTECH CO.، LTD.100-120-1101
خزعة الجلد لكمة 2 ممSTIEFEL22650
مجهر مجسمكارل زايس ميديتيك ، دبلن ، كاليفورنيامجهر SV11للجراحة
إبرة Terumo 18 GTerumo ، تايوانSMACF0120-18BXحقنة 3.0 مل مع إبرة 18 جم لاستخراج المادة الطافية بعد الطرد المركزي
Terumo 20.0 مل حقنةTerumo ،تايوان MDSS20ESيمكن استخدامه لجمع المصل بعد الطرد المركزي الأولي واستخدامه في الطرد المركزي الثانوي.
حقنة Terumo 3.0 مل مع إبرة 23 GTerumo ، تايوانMDSS03S2325تستخدم حقنة 3.0 مل لاستخراج المادة الطافية بعد الطرد المركزي. ثم قم بتوصيل الفلتر وإبرة 23 جم للحقن في زجاجات قطرة العين.
مقص وستكوت تينوٹومي وسطK4-3004

المراجع

  1. Fox, R. I., Chan, R., Michelson, J. B., Belmont, J. B., Michelson, P. E. Beneficial effect of artificial tears made with autologous serum in patients with keratoconjunctivitis sicca. Arthritis and Rheumatology. 27 (4), 459-461 (1984).
  2. Noble, B. A., et al. Comparison of autologous serum eye drops with conventional therapy in a randomised controlled crossover trial for ocular surface disease. The British Journal of Ophthalmology. 88 (5), 647-652 (2004).
  3. Bradley, J. C., Bradley, R. H., McCartney, D. L., Mannis, M. J. Serum growth factor analysis in dry eye syndrome. Clinical & Experimental Ophthalmology. 36 (8), 717-720 (2008).
  4. Alshammari, T. M., Al-Hassan, A. A., Hadda, T. B., Aljofan, M. Comparison of different serum sample extraction methods and their suitability for mass spectrometry analysis. Saudi Pharmaceutical Journal. 23 (6), 689-697 (2015).
  5. Tsubota, K., et al. Treatment of dry eye by autologous serum application in Sjögren's syndrome. The British Journal of Ophthalmology. 83 (4), 390-395 (1999).
  6. Urzua, C. A., Vasquez, D. H., Huidobro, A., Hernandez, H., Alfaro, J. Randomized double-blind clinical trial of autologous serum versus artificial tears in dry eye syndrome. Current Eye Research. 37 (8), 684-688 (2012).
  7. Cui, D., Li, G., Akpek, E. K. Autologous serum eye drops for ocular surface disorders. Current Opinion in Allergy and Clinical Immunology. 21 (5), 493-499 (2021).
  8. Jirsova, K., et al. The application of autologous serum eye drops in severe dry eye patients; subjective and objective parameters before and after treatment. Current Eye Research. 39 (1), 21-30 (2014).
  9. Pan, Q., Angelina, A., Marrone, M., Stark, W. J., Akpek, E. K. Autologous serum eye drops for dry eye. Cochrane Database of Systematic Reviews. 2 (2), (2017).
  10. Wang, L., et al. Autologous serum eye drops versus artificial tear drops for dry eye disease: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Ophthalmic Research. 63 (5), 443-451 (2020).
  11. Soni, N. G., Jeng, B. H. Blood-derived topical therapy for ocular surface diseases. The British Journal of Ophthalmology. 100 (1), 22-27 (2016).
  12. Solomon, A., et al. anti-inflammatory forms of interleukin-1 in the tear fluid and conjunctiva of patients with dry-eye disease. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 42 (10), 2283-2292 (2001).
  13. Meijer, H., Reinecke, J., Becker, C., Tholen, G., Wehling, P. The production of anti-inflammatory cytokines in whole blood by physico-chemical induction. Inflammation Research. 52 (10), 404-407 (2003).
  14. Bielory, B. P., Shah, S. P., O'Brien, T. P., Perez, V. L., Bielory, L. Emerging therapeutics for ocular surface disease. Current Opinion in Allergy and Clinical Immunology. 16 (5), 477-486 (2016).
  15. Stevenson, W., Chauhan, S. K., Dana, R. Dry eye disease: an immune-mediated ocular surface disorder. Archives of Ophthalmology. 130 (1), 90-100 (2012).
  16. Yang, J., Guo, A., Li, Q., Wu, J. Platelet-rich plasma attenuates interleukin-1β-induced apoptosis and inflammation in chondrocytes through targeting hypoxia-inducible factor-2α. Tissue and Cell. 73, 101646(2021).
  17. Shakouri, S. K., Dolati, S., Santhakumar, J., Thakor, A. S., Yarani, R. Autologous conditioned serum for degenerative diseases and prospects. Growth Factors. 39 (1-6), 59-70 (2021).
  18. Gull, M., Pasek, M. A. The role of glycerol and its derivatives in the biochemistry of living organisms, and their prebiotic origin and significance in the evolution of life. Catalysts. 11 (1), 86(2021).
  19. Drew, V. J., Tseng, C. L., Seghatchian, J., Burnouf, T. Reflections on dry eye syndrome treatment: therapeutic role of blood products. Frontiers in Medicine. 5, 33(2018).
  20. Hung, K. H., Yeh, L. K. Ex vivo and in vivo animal models for mechanical and chemical injuries of corneal epithelium. Journal of Visualized Experiments. (182), e63217(2022).
  21. Geerling, G., Maclennan, S., Hartwig, D. Autologous serum eye drops for ocular surface disorders. The British Journal of Ophthalmology. 88 (11), 1467-1474 (2004).
  22. Rutgers, M., Saris, D. B., Dhert, W. J., Creemers, L. B. Cytokine profile of autologous conditioned serum for treatment of osteoarthritis, in vitro effects on cartilage metabolism and intra-articular levels after injection. Arthritis Research & Therapy. 12 (3), R114(2010).
  23. Antebi, B., et al. Short-term physiological hypoxia potentiates the therapeutic function of mesenchymal stem cells. Stem Cell Research & Therapy. 9 (1), 265(2018).
  24. Chen, Y. M., Wang, W. Y., Lin, Y. C., Tsai, S. H., Lou, Y. T. Use of autologous serum eye drops with contact lenses in the treatment of chemical burn-induced bilateral corneal persistent epithelial defects. BioMed Research International. 2022, 6600788(2022).
  25. Diaz-Valle, D., et al. Comparison of the efficacy of topical insulin with autologous serum eye drops in persistent epithelial defects of the cornea. Acta Ophthalmologica. 100 (4), e912-e919 (2022).
  26. Metheetrairut, C., et al. Comparison of epitheliotrophic factors in platelet-rich plasma versus autologous serum and their treatment efficacy in dry eye disease. Scientific Reports. 12 (1), 8906(2022).
  27. NaPier, E., Camacho, M., McDevitt, T. F., Sweeney, A. R. Neurotrophic keratopathy: current challenges and future prospects. Annals of Medicine. 54 (1), 666-673 (2022).
  28. Garcia-Conca, V., et al. Efficacy and safety of treatment of hyposecretory dry eye with platelet-rich plasma. Acta Ophthalmologica. 97 (2), e170-e178 (2019).
  29. Gholian, S., et al. Use of autologous conditioned serum dressings in hard-to-heal wounds: a randomised prospective clinical trial. Journal of Wound Care. 31 (1), 68-77 (2022).
  30. Raeissadat, S. A., Rayegani, S. M., Jafarian, N., Heidari, M. Autologous conditioned serum applications in the treatment of musculoskeletal diseases: a narrative review. Future Science OA. 8 (2), 776(2022).
  31. Tokawa, P. K. A., Brossi, P. M., Baccarin, R. Y. A. Autologous conditioned serum in equine and human orthopedic therapy: A systematic review. Research in Veterinary Science. 146, 34-52 (2022).
  32. Evans, C. H., Chevalier, X., Wehling, P. Autologous conditioned serum. Physical Medicine and Rehabilitation. Clinics of North America. 27 (4), 893-908 (2016).
  33. Coskun, H. S., Yurtbay, A., Say, F. Platelet rich plasma versus autologous conditioned serum in osteoarthritis of the knee: clinical results of a five-year retrospective study. Cureus. 14 (4), e24500(2022).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

التئام جروح القرنيةقطرات العين المصليةالعلاجات المشتقة من الدمالبلازما الغنية بالصفائح الدمويةأمراض سطح العينتحليل السيتوكيناتالطرد المركزي التفاضلي
إنتاج مصل مكيف ذاتي معدل وتقييم خارج الجسم الحي لإمكاناته العلاجية في ظهارة قرنية الفئران
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.