مقالة منهجية

العزل القائم على قياس التدفق الخلوي والتقييم العلاجي للخلايا الليمفاوية المتسللة للورم في نموذج فأر لسرطان البنكرياس

DOI:

10.3791/67413

⸱

يناير 17, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pancreatic Cancer, National Clinical Research Center for Cancer, Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Tianjin Key Laboratory of Digestive Cancer, Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy, Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital, 2Department of Immunology and Biotherapy, National Clinical Research Center for Cancer, Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Key Laboratory of Cancer Immunology and Biotherapy, Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy, Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital, 3Research Core Facility, School of Basic Medical Sciences, Tianjin Medical University, 4Department of Public Laboratory, National Clinical Research Center for Cancer, Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy of Tianjin, Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نصف طريقة لاستخدام الخلايا الليمفاوية المتسللة للورم (TILs) من الفئران من خلال قياس التدفق الخلوي لنقل الخلايا بالتبني. يهدف هذا البروتوكول إلى التحقق من السمية الخلوية المحددة ل TILs ضد الأورام في نموذج فأر سرطان البنكرياس المتزاوي ، مما يوفر رؤى حول تطوير علاجات الخلايا بالتبني لسرطان البنكرياس.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

سرطان البنكرياس هو ورم خبيث عدواني مع تشخيص كئيب وخيارات علاجية محدودة. يمثل العلاج بالخلايا بالتبني ، والذي يتضمن عزل وتنشيط الخلايا المناعية للمريض ، مثل الخلايا الليمفاوية المتسللة للورم (TILs) ، قبل إعادة حقنها ، نهجا تجريبيا واعدا. ومع ذلك ، فإن تقنيات نقل الخلايا بالتبني في نماذج سرطان البنكرياس قبل السريرية ليست راسخة. هنا ، نصف بروتوكولا مفصلا للعلاج بالخلايا بالتبني باستخدام TILs من نموذج فأر سرطان البنكرياس المتزالين. يتضمن الإجراء زرع خلايا سرطان البنكرياس الحية أو المشعة في الفئران المراسلة المسماة بالفلورة لبدء تدفق الخلايا المناعية ، ثم عزل الخلايا الليمفاوية عن الأورام الأولية عن طريق فرز قياس التدفق الخلوي و / أو تنشيط وتوسيع الخلايا التائية التفاعلية للورم خارج الجسم الحي ، ونقل هذه الخلايا التائية المنشطة داخل الصفاق إلى الفئران الحاملة للورم ، متبوعا بإعطاء الإنترلوكين -2. يسمح تصوير الورم المضيء بيولوجيا بالمراقبة الطولية لنمو الورم التقويمي والاستجابة للعلاج ، وخاصة تقييم التأثيرات السامة للخلايا الخاصة بالورم. يلخص هذا النهج الخدمات اللوجستية التي ينطوي عليها تطوير علاجات نقل الخلايا بالتبني لمرضى سرطان البنكرياس. تظهر النتائج فعالية معززة مضادة للأورام للخلايا التائية التفاعلية للورم المنقولة بالتبني مقارنة بضوابط الخلايا الليمفاوية غير ذات الصلة. تتيح هذه المنهجية متعددة الاستخدامات دراسة العلاج المناعي بالتبني في الجسم الحي في سرطان البنكرياس بالإضافة إلى تحسين معلمات معالجة الخلايا وأنظمة العلاج المركبة.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

العلاج المناعي لسرطان البنكرياس في مراحله الأولى ، مع الاستكشاف والتحقق قبل السريري المستمر بشكل أساسي في نماذج الفئران1. تشمل العلاجات الحالية لسرطان البنكرياس الجراحة والعلاج الكيميائي والعلاج الإشعاعي والعلاجات الموجهة. لسوء الحظ ، غالبا ما تفشل هذه الطرق في القضاء تماما على آفات الورم ، مما يؤدي إلى التكرار والتطور. تركز العلاجات التقليدية على الخلايا السرطانية ولكنها غالبا ما تتجاهل البيئة المكروية للورم (TME) ، والتي تشمل كلا من الخلايا السرطانية والسدى المرتبط بها المكون من الخلايا الليمفاوية المتسللة للورم (TILs) والخلايا الليفية والمصفوفة خارج الخلية2. TILs هي خلايا مناعية داخل TME ، بما في ذلك الخلايا التائية السامة للخلايا ، والخلايا التائية المساعدة ، والخلايا التائية التنظيمية ، والخلايا البائية ، والخلايا القاتلة الطبيعية ، والضامة ، والخلايا المثبطة المشتقة من النخاع3. تشارك هذه الخلايا في الاستجابات المناعية التي تؤثر على نمو الورم والنتائج العلاجية4.

يتضمن العلاج بالخلايا بالتبني (ACT) جمع الخلايا المناعية للمريض ، وتعديلها وتوسيعها في المختبر ، ثم إعادة إدخالها لاستهداف الخلايا السرطانية وقتلها. يتم البحث عن علاج TIL ، وهو نوع من ACT ، لعلاج أنواع مختلفة من السرطان ، بما في ذلك سرطان الجلد وسرطان الرئة وسرطان عنق الرحم. تتضمن هذه العملية عزل الخلايا الليمفاوية عن الورم ، وزراعتها باستخدام IL-2 في المختبر ، وإعادة ضخها في المريض ، غالبا بعد استنفاد اللمفاويات بالعلاج الكيميائي أو العلاج الإشعاعي5.

منذ أن أظهرت دراسة روزنبرغ عام 1986 فعالية TILs في الفئران6 ، أصبح العلاج المناعي لنقل الخلايا بالتبني نقطة ساخنة للبحث وأظهر وعدا في علاج السرطان7،8،9،10. نحن نهدف إلى استخراج TILs من الفئران ، وفرزها لخلايا تائية معينة عن طريق قياس التدفق الخلوي ، والتحقق من صحة آثارها القاتلة للورم من خلال النقل بالتبني.

في هذا البروتوكول ، نصف طريقة لاستخدام TILs من الفئران من خلال قياس التدفق الخلوي لنقل الخلايا بالتبني. الهدف هو التحقق من السمية الخلوية المحددة ل TILs ضد الأورام في نموذج فأر سرطان البنكرياس المتزابقي ، مما يوفر رؤى حول تطوير العلاجات الخلوية بالتبني لسرطان البنكرياس. تتضمن هذه الطريقة زرع خلايا سرطان البنكرياس الحية أو المشعة في الفئران المراسلة المسماة بالفلورة لبدء تدفق الخلايا المناعية ، وعزل الخلايا الليمفاوية عن الأورام الأولية عن طريق فرز قياس التدفق الخلوي ، أو تنشيط وتوسيع الخلايا التائية التفاعلية للورم خارج الجسم الحي ، ونقل هذه الخلايا التائية المنشطة بالتبني إلى الفئران الحاملة للورم. يسمح الإعطاء اللاحق لتصوير الورم بالإنترلوكين 2 والتصوير الحيوي بالمراقبة الطولية لنمو الورم التقويمي والاستجابة للعلاج ، لا سيما تقييم التأثيرات السامة للخلايا الخاصة بالورم. يلخص هذا النهج الخدمات اللوجستية التي ينطوي عليها تطوير علاجات نقل الخلايا بالتبني لمرضى سرطان البنكرياس. تظهر النتائج فعالية معززة مضادة للأورام للخلايا التائية التفاعلية للورم المنقولة بالتبني مقارنة بضوابط الخلايا الليمفاوية غير ذات الصلة. تتيح هذه المنهجية متعددة الاستخدامات دراسة العلاج المناعي بالتبني في الجسم الحي في سرطان البنكرياس ، بالإضافة إلى تحسين معلمات معالجة الخلايا وأنظمة العلاج المركبة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تقع مستعمرة الفئران في منشأة معتمدة من AAALAC International ، وتلتزم بجميع لوائح ومعايير وزارة الزراعة الأمريكية و HHS و NIH ذات الصلة. قام معهد السرطان بجامعة تيانجين الطبية ولجنة رعاية واستخدامها في المستشفى بمراجعة واعتماد جميع الإجراءات الحيوانية ، بما في ذلك الأساس المنطقي لاختيار السلالة ، وتخصيصات المجموعة التجريبية ، والتبرير الإحصائي لأعداد والتوزيع العشوائي.

1. تحريض الورم

  1. استخدم خط خلاياKPC-Luc 11 للحث على أورام البنكرياس التقويمية في الفئران.
  2. قم بإعداد تعليق الخلية عن طريق تربسين خلايا KPC-Luc ، وغسلها مرتين باستخدام PBS ، وإعادة تعليقها بتركيز 1 × 106 خلايا / مل في PBS مع مصفوفة غشاء القاعدي 30٪ (BMM).
  3. قم بتخدير الفأر بالأيزوفلوران بجرعة تحريضية تبلغ 4٪ ثم قم بالتبديل إلى جرعة صيانة بنسبة 2٪. قدم الدعم الحراري باستخدام وسادة التدفئة والمراقبة حسب الضرورة. ضع مرهم العين على كلتا العينين لمنع الجفاف.
  4. قم بتطهير المنطقة الجراحية عدة مرات بحركة دائرية باستخدام مقشر يحتوي على اليود والكحول. قم بإعطاء حقنة تحت الجلد من كاربروفين 5 ملغم / كجم كمسكن قبل الجراحة. باستخدام شفرة مشرط معقمة ، قم بإجراء شق صغير في البطن الأيسر (0.5-1 سم) تحت الضلع الأيسر للفأر لفضح البنكرياس.
  5. استخدم الملقط لتثبيت طحال الفأر وفضح بنكرياس الفأر ، واخلط الخلايا وحقنها في بنكرياس الفأر مع 50,000 خلية لكل فأر. حقن 50 ميكرولتر من معلق الخلية مباشرة في البنكرياس باستخدام إبرة 29 جم.
  6. أعد البنكرياس الفأر وخياطة الصفاق والجلد بالتتابع بالغرز.
  7. اسمح للماوس بالتعافي على وسادة دافئة حتى يستيقظ تماما. يجب تطبيق 5 ملغ/كغ من الكاربروفين تحت الجلد كمسكن بعد الجراحة يوميا لمدة 3 أيام.
  8. إجراء التصوير الحي بعد 7 أيام من الحقن لمراقبة نمو الورم.
    ملاحظة: يمكن إعطاء العلاجات في هذه الخطوة.
    1. حقن الفأر داخل الصفاق بملح البوتاسيوم D-Luciferin (150 ميكروغرام / مل في PBS ، 60 ميكرولتر لكل فأر).
    2. بعد تخدير الأيزوفلوران ، ضع الفأر في نظام التصوير في الجسم الحي للكشف عن التلألؤ البيولوجي. بعد التصوير ، قم بإزالة الماوس من النظام واتركه يتعافى من التخدير بشكل طبيعي.

2. حصاد الأورام

  1. القتل الرحيم للفئران المانحة باستخدام حجرة ثاني أكسيد الكربون2 . تعقيم الجسم كله بنسبة 75٪ من الإيثانول.
  2. ضع الماوس في غطاء معقم. استخدم مقصا وملقطا معقما لفتح تجويف البطن.
  3. قم بإزالة الأورام ووضعها في PBS على الجليد. قم بقياس حجم الورم باستخدام الفرجار الورني واحسب حجم الورم باستخدام الصيغة (π × طول × عرض × عرض) / 6.

3. هضم الورم

  1. تحضير محلول الهضم عن طريق صنع 0.125 مجم / مل كولاجيناز ، و 0.125 مجم / مل Dispase II ، و 10 ميكروغرام / مل DNase I في RPMI 1640 بتركيز 1x. أضف 1-2 مل من محلول الهضم لكل بئر في طبق مكون من 12 بئر.
  2. افرم الأورام إلى قطع صغيرة باستخدام مقص معقم. هضم قطع الورم عند 37 درجة مئوية مع رجها عند 70 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة.

4. جمع الخلايا

  1. قم بإنهاء عملية الهضم بإضافة 2-4 مل من مصل الأبقار الجنينية بنسبة 10٪. نقل جميع الخلايا إلى أنبوب تجميع.
  2. اغسل الآبار باستخدام PBS مرتين لجمع أي خلايا متبقية. قم بتصفية تعليق الخلية من خلال مصفاة خلية 40 ميكرومتر أو 70 ميكرومتر.
  3. اجمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي عند 400 × جم لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية. أعد تعليق الخلايا في 5٪ BSA لتلوين قياس التدفق الخلوي.

5. إعداد قياس التدفق الخلوي

  1. تحضير الطحال أو خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMCs) من الفئران غير الحاملة للورم كضوابط.
    ملاحظة: اختياري: يمكن أيضا استخدام PBMCs من الفئران الحاملة للورم كعناصر تحكم.
  2. الخلايا الملطخة مع حاصرات Fc (<1 ميكروغرام لكل مليون خلية) والأجسام المضادة للتدفق (CD3-APC ، CD45-APC / Fire750 عند تخفيف 1: 100).
  3. احتضن على الجليد في الظلام لمدة 30 دقيقة. اغسل مرتين باستخدام PBS البارد وأعد تعليق الخلايا في 1٪ BSA في PBS.

6. فرز الخلايا

  1. قم بفرز خلايا CD45 + CD3 + باستخدام مقياس التدفق الخلوي. بوابة الخلايا الحية على أساس FSC-A و SSC-A (P1). بعد ذلك ، قم ببوابة الخلايا المفردة من P1 بناء على FSC-A و FSC-H (P2).
  2. أخيرا ، قم بفرز CD45 + CD3 + من P2 باستخدام بوابات CD45 و CD3 وجمعها في أنابيب التجميع. ضمان إعادة التعليق السليم والحفاظ على صلاحية الخلية أثناء الفرز.

7. تحضير الخلية للنقل

  1. خلايا مفرزة أجهزة الطرد المركزي عند 400 × جم لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية. أعد تعليق الخلايا في مصل الفأر بتركيز نهائي 1 × 106 خلايا / مل. حافظ على الخلايا على الجليد.
    ملاحظة: يمكن إجراء زراعة خارج الجسم الحي أو تنشيط الخلايا التي تم فرزها.

8. نقل التبني

  1. إجراء تحريض الورم للفأر المتلقي قبل 7 أيام من يوم النقل.
  2. حقن 2 × 105 خلايا لكل فأر داخل الصفاق في الفئران المتلقية باستخدام حقنة الأنسولين 29 جم × 1/2 بوصة. يتم تطبيق IL-2 (50 وحدة دولية لكل فأر) داخل الصفاق لمدة ثلاثة أيام متتالية.

9. مراقبة الورم

  1. قم بإجراء التصوير الحي في اليوم 4 واليوم 7 بعد النقل لتقييم نمو الورم ، مع تصوير حي إضافي أسبوعيا بنفس الإجراء الموضح في الخطوة 1.8.
  2. متابعة بقاء الفئران المتلقية. في نهاية التجربة ، قتل الفأر كما هو موضح أعلاه. استخدم مقص العيون والملقط لإزالة الأورام ، ثم ضعها في PBS على الجليد لقياس سريع لحجم الورم وقد تستمر في التجارب اللاحقة حسب الحاجة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تنقسم الفئران المتلقية إلى سبع مجموعات لتقييم فعالية نقل TIL بدقة: (أ) التحكم في المحلول الملحي (تحكم فارغ): تتلقى الفئران حقنا ملحية لتكون بمثابة خط أساس. (ب) IL-2 فقط (تحكم فارغ): الفئران التي تتلقى حقن IL-2 لحساب أي آثار للسيتوكين وحده. (ج) نفس العلاج الفردي للفئران المانحة المعالجة (المراقبة الإيجابية): تتلقى الفئران نفس العلاج مثل الفئران المانحة لمقارنة العلاج المباشر مقابل نقل TIL. (د) TILs من المتبرعين الضابطين مع IL-2 (تحكم سلبي): لتقييم تأثير TILs من الأورام غير المعالجة. (ه) PB...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

قد يعزز العلاج المناعي المحتمل لسرطان البنكرياس جهاز المناعة لاستهداف الخلايا السرطانية والقضاء عليها ، بما في ذلك العلاج المناعي بالتبني ومثبطات نقاط التفتيش المناعية ولقاحات الورم12. يستخرج العلاج TIL الخلايا الليمفاوية ويوسعها من الأورام ، والتي يتم بعد ذلك إعادة حقنها في المرضى. بالمقارنة مع علاجات الخلايا بالتبني الأخرى ، فإن علاج TIL له استنساخ TCR متنوع ، وقدرة فائقة على توجيه الورم ، وسمية منخفضة خارج الهدف ، مما يجعلها مفيدة لعلاج الأورام الصلبة

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأعلن أصحاب البلاغ أنه ليس لديهم تضارب في المصالح. أثناء استخدام ChatGPT و Claude-3 لتحرير اللغة ، قام المؤلفون بمراجعة الكلمات والجمل التي تم إنشاؤها بواسطة ChatGPT أو Claude-3 بعناية والتحقق من صحتها قبل تضمينها في المقالة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تمويل هذا البحث من قبل منح المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC) ، ورقم المنحة 82272767 و 82072691 إلى YM. يشكر المؤلفون أعضاء فريقهم على مناقشتهم وتعاونهم.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
نظام التصوير الحيويPerkinElmerIVIS Spectrumلمراقبة نمو الورم
مصل الأبقار Albumin VSolarbioA8020لإعادة تعليق الخلايا
مصفاة الخلايا (40 & م أو 70 مو ؛ م)CSS013040 النفاثةلتصفية معلقات الخلايا أجهزة
الطرد المركزيEppendorf5810Rلجمع الخلايا وتحضيرها
غرفة CO2Tianjin LiliangN / Aللقتل الرحيم للفئران
CollagenaseSigma-AldrichC5138لمحلول الهضم
CD3-APC الجسم المضادBiolegend100236لقياس التدفق الخلوي تلطيخ
CD45-APC / Fire750 الجسم المضادBiolegend100154لقياس التدفق الخلوي تلطيخ
C57BL / 6 الفئران البيضاءمختبر جاكسون58الفئران المانحة والمتلقية
Dispase IIGibco17105-041لمحلول الهضم
DNase ISparkJadeAC1711لمحلول الهضم
D-Luciferin ملحالبوتاسيومBeyotimeST198-10gللتصوير الحي
للإيثانول (75٪)N / Aللتعقيم
حاصرات FcBD Biosciences553142لقياس التدفق الخلوي تلطيخ
مصل الأبقار الجنينيجيبكوA5669701لزراعة الخلايا
مقياس التدفق الخلويBD BiosciencesFACSAria IIIلفرز الخلايا
IL-2 (Interleukin-2)PeproTech200-02للإدارة بعد النقل
IsofluraneShandong AnteN / Aللمخدرات
خلية KPC-Lucإنشاء مختبر PIN / Aلتحفيز أورام البنكرياس تقويم العظام
Matrigel MatrixCorning356234 لزرع تقويم
العظام PBS (محلول ملحي مخزن بالفوسفات)ServicebioG4207-500MLلغسل وتعليق الخلايا
RPMI 1640 11875093جيبكولتحضير محلول الهضم
غطاء معقمESCON / Aلاستخراج الورم المعقم ومعالجته
مقص وملقطغير متاحلاستخراج الورم
خياطة (4-0 ، خياطة قابلة للامتصاص PGA)Jinhuan MedicalR413لإغلاق الجرح
حقنةجيانغشي فنجلين1 مل 0.45 & مرات 16RWLBلحقن
لوحة زراعة الأنسجة 12 بئرجيت TCP001012لهضم الورم
خط تم المتوسطة معقم

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ma, Y., et al. Combination of PD-1 inhibitor and OX40 agonist induces tumor rejection and immune memory in mouse models of pancreatic cancer. Gastroenterology. 159 (1), 306-319.e12 (2020).
  2. Pitt, J. M., et al. Targeting the tumor microenvironment: Removing obstruction to anticancer immune responses and immunotherapy. Ann Oncol. 27 (8), 1482-1492 (2016).
  3. Zhang, Y., Zhang, Z. The history and advances in cancer immunotherapy: Understanding the characteristics of tumor-infiltrating immune cells and their therapeutic implications. Cell Mol Immunol. 17 (8), 807-821 (2020).
  4. Tay, C., Tanaka, A., Sakaguchi, S. Tumor-infiltrating regulatory t cells as targets of cancer immunotherapy. Cancer Cell. 41 (3), 450-465 (2023).
  5. Betof Warner, A., et al. Expert consensus guidelines on management and best practices for tumor-infiltrating lymphocyte cell therapy. J Immunother Cancer. 2 (2), e008735(2024).
  6. Rosenberg, S. A., Spiess, P., Lafreniere, R. A new approach to the adoptive immunotherapy of cancer with tumor-infiltrating lymphocytes. Science. 233 (4770), 1318-1321 (1986).
  7. Leidner, R., et al. Neoantigen t-cell receptor gene therapy in pancreatic cancer. N Engl J Med. 386 (22), 2112-2119 (2022).
  8. Lowery, F. J., et al. Molecular signatures of antitumor neoantigen-reactive t cells from metastatic human cancers. Science (New York, N.Y.). 375 (6583), 877-884 (2022).
  9. Rosenberg, S. A., Parkhurst, M. R., Robbins, P. F. Adoptive cell transfer immunotherapy for patients with solid epithelial cancers. Cancer Cell. 41 (4), 646-648 (2023).
  10. Yossef, R., et al. Phenotypic signatures of circulating neoantigen-reactive cd8+ t cells in patients with metastatic cancers. Cancer Cell. 41 (12), 2154-2165.e5 (2023).
  11. Ma, Y., Hwang, R. F., Logsdon, C. D., Ullrich, S. E. Dynamic mast cell-stromal cell interactions promote growth of pancreatic cancer. Cancer Res. 73 (13), 3927-3937 (2013).
  12. Mahadevan, K. K., et al. Type I conventional dendritic cells facilitate immunotherapy in pancreatic cancer. Science. 384 (6703), eadh4567(2024).
  13. Mullard, A. FDA approves first tumour-infiltrating lymphocyte (til) therapy, bolstering hopes for cell therapies in solid cancers. Nat Rev Drug Discov. 23 (4), 238(2024).
  14. Morotti, M., et al. PGE2 inhibits til expansion by disrupting IL-2 signalling and mitochondrial function. Nature. 629 (8011), 426-434 (2024).
  15. Chupp, D. P., et al. A humanized mouse that mounts mature class-switched, hypermutated and neutralizing antibody responses. Nat Immunol. 25 (8), 1489-1506 (2024).
  16. Stress response in tumor-infiltrating T cells is linked to immunotherapy resistance. Nat Med. 29 (6), 1336-1337 (2023).
  17. Wang, A. Z., et al. Glioblastoma-infiltrating CD8+ T cells are predominantly a clonally expanded GZMK+ effector population. Cancer Discov. 14 (6), 1106-1131 (2024).
  18. Chen, Y., et al. A transformable supramolecular bispecific cell engager for augmenting natural killer and t cell-based cancer immunotherapy. Adv Mater. 36 (3), e2306736(2024).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Tumor Infiltrating LymphocytesFlow CytometryAdoptive Cell TherapyPancreatic Cancer ModelTIL IsolationTumor Reactive T CellsBioluminescent ImagingCell SortingInterleukin 2 AdministrationOrthotopic Tumor

مقالات ذات صلة