يصف هذا البروتوكول تقنية محسنة لزراعة الرئة اليسرى في الفئران ، مع التركيز على تقليل الصعوبة التشغيلية وتحسين معدلات البقاء على قيد الحياة.
مقالة منهجية
زرع الرئة اليسرى تقويم العظام في الفئران
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يعد نموذج زراعة تقويم العظام للرئة اليسرى أداة أساسية في أبحاث زراعة الرئة. على الرغم من أن زراعة الرئة إجراء معقد ، إلا أن تعقيدها يتم تقليل تعقيدها بشكل كبير مع إدخال تقنية الكفة. يمكن لمعظم الجراحين إتقان هذه التقنية بعد التدريب ، لكن تطبيقها كان محدودا بسبب منحنى التعلم الطويل وانخفاض معدل بقاء النموذج. لمعالجة هذه المشكلات ، نقترح تقنية محسنة ذات قابلية تكرار عالية ، والتي تشمل حصاد رئة المتبرع وتعديله وزرعه. بالمقارنة مع الطرق السابقة ، تركز تحسيناتنا بشكل أساسي على تشريح حصاد رئة المتبرع ، وتعديل رئة المتبرع ، وزرع رئة المتبرع. يعمل هذا التعديل على تبسيط الإجراء وتقليل الصعوبة التشغيلية وزيادة التكرار. بالإضافة إلى ذلك ، تم تقصير أوقات نقص التروية الباردة ونقص التروية الدافئ أثناء الإجراء ، مما أدى إلى تحسين معدل نجاح الزرع. يوفر بحثنا أساسا تقنيا أكثر كفاءة وقابلية للتكرار لنموذج زراعة رئة الفئران ، مما يدعم الأبحاث المستقبلية في زراعة الرئة.
المقدمة
زراعة الرئة هي حاليا العلاج الفعال الوحيد لأمراض الرئة في المرحلة النهائية ، والتي تطورت بسرعة في السنوات الأخيرة. في الوقت الحاضر ، تم الانتهاء من أكثر من 100,000 عملية زرع الرئة في جميع أنحاء العالم1 ، لكن معدلات البقاء على قيد الحياة لمدة 5 سنوات و 10 سنوات بعد زراعة الرئة هي 54٪ و 32٪ على التوالي2. بالمقارنة مع عمليات زرع الأعضاء الصلبة الأخرى ، يجب تحسين معدل البقاء على قيد الحياة بعد زراعة الرئة3. المضاعفات الخطيرة المختلفة بعد زراعة الرئة هي العوامل الرئيسية التي تؤثر على معدل بقاء المتلقين على قيد الحياة ، بما في ذلك الخلل الوظيفي الأولي في الكسب غير المشروع ، والرفض الحاد ، والخلل الوظيفي المزمن في الطعم الخيفي في الرئة ، وعدوى الرئة4،5. يعد نموذج زراعة رئة الفئران أداة قيمة لدراسة هذه القضايا ، ولكن تم إعاقة اعتماده على نطاق واسع بسبب الصعوبات الفنية. على الرغم من أن العديد من المختبرات قد تم الإبلاغ عن الإجراء ، إلا أنه ينطوي على منحنى تعليمي حاد ، ومعدلات مضاعفات عالية بعد الجراحة ، ومعدلات بقاء منخفضة ، مما يحد من إمكانية الوصول إليه للباحثين.
في هذه الدراسة ، نقدم تقنية زراعة الرئة المسننة لتقويم العظام مصممة للتغلب على هذه التحديات. تعتمد طريقتنا على البروتوكولات الحالية ولكنها تقدم تحسينات رئيسية ، بما في ذلك تحضير الكفة ، وتشريح هيكل النقير ، وتثبيت رئة المتبرع ، وتقنيات مفاغرة الأمثل. تتيح هذه التحسينات إجراء العملية من قبل جراح واحد بأقل قدر من المعدات ، وتقليل صعوبة مفاغرة الولادة ، وتقصير أوقات نقص التروية الباردة والدافئة ، وتعزيز معدل نجاح النموذج في النهاية. يهدف هذا النهج إلى دعم أبحاث أساسية أكثر قوة وقابلية للتكرار في زراعة الرئة.
البروتوكول
تمت الموافقة على جميع التجارب على من قبل لجنة أخلاقيات التابعة لشركة Guangzhou Lai'an Technology Co.، Ltd. (الموافقة رقم G2024129). أجريت التجربة على ذكور فئران لويس تتراوح أعمارهم بين 6-8 أسابيع ووزنها 250-300 جرام. تم تربية الفئران في ظل دورة إضاءة / ظلام مدتها 12 ساعة (الضوء: 25 لوكس) وكان لديها حرية الوصول إلى الطعام والماء.
1. تحضير الأصفاد (الشكل 1)
- قم بإعداد 14 G و 16 G قسطرة وشفرات وريدية (الشكل 1 أ).
- قم بقص القسطرة الوريدية في صفعة بذيل باستخدام شفرة. قسم كل صفعة إلى جسم (طول 2-3 مم) وذيل (طول 2-3 مم) (الشكل 1 ب).
- قم بإنشاء خدوش سطحية على جسم الكفة لزيادة الاحتكاك لتثبيت الخيط.
ملاحظة: احتفظ بأصفاد 16 جم للمفاغرة للشريان الرئوي (PA) والوريد الرئوي (PV) ، واحتفظ بأصفاد 14 جم لاتصالات الشعب الهوائية (Br) (الشكل 1C).
2. حصاد الرئة من المتبرعين (الشكل 2)
- تخدير الجرذ المتبرع عن طريق الحقن داخل الصفاق من البنتوباربيتال (80 ملغ/كغ). ضع الفئران مستلقة على طاولة العمليات مع رفع الرأس والذيل وتمديد الرقبة.
- اسحب اللسان للخارج وللأعلى ، ثم ضع المصباح الجراحي الأمامي للرقبة كمصدر ضوء موضعي لتحقيق تصور واضح لفتحة المزمار (الشكل 2 أ).
- أدخل قنية وريدية 14 جم في مجرى الهواء من خلال المزمار.
- اضبط جهاز التنفس الصناعي على وضع التحكم في الضغط ، وأدخل معلمات الوزن ، واضبط الضغط على 15 سم H2O ، وقم بتوصيل جهاز التنفس الصناعي.
- تحقق مما إذا كان ارتفاع وهبوط الصدر متوافقا مع تردد جهاز التنفس الصناعي للتأكد من وجود القسطرة الوريدية في مجرى الهواء.
- ثبت الأطراف والرأس ، وتطهير الصدر والبطن ، ورفع جلد البطن بالملاقط ، واستخدم المقص لقطع الجلد من البطن والصدر وأمام الرقبة.
- قم بعمل شق خط الوسط ، وقطع جدار البطن ، وحقن الهيبارين بجرعة 1,000 وحدة دولية / كجم من خلال وريد التجويف البريتوني المكشوف لمدة 3 دقائق لضمان الهيبارين الجهازي.
- قطع الحجاب الحاجز وقطع تجويف الصدر من منتصف القص. إصلاح جدار الصدر على كلا الجانبين مع المرقئ. قم بإزالة الغدة الصعترية وفضح التركيب التشريحي لأعضاء تجويف الصدر بالكامل.
- قطع الوريد الأجوف العلوي ، والوريد الأجوف السفلي ، والأذن اليمنى واليسرى بدورها. قم بحقن محلول ملحي بارد بحقنة سعة 20 مل في جذر PA ببطء (~ 1 دقيقة) للتروية بالضغط المنخفض حتى تتحول رئة المتبرع إلى اللون الأبيض تماما (الشكل 2 ب).
- قم بتثبيت Br من الرئة المانحة باستخدام ملقط مرقئ. ارفع Br واقطع الأنسجة المتصلة برئة المتبرع. أخرج قلب الرئة والرئة المتبرعة وانقعها في محلول ملحي مبرد مسبقا (الشكل 2 ج).
ملاحظة: يمكن أن يضمن تثبيت Br أثناء وجود الرئة المانحة في حالة الشهيق عدم انهيار الحويصلات الهوائية للرئة المتبرعة.
3. تعديل رئة المتبرع (الشكل 3)
- ضع كتلة القلب والرئة على الجليد تحت المجهر. أمسك القصبة الهوائية بمرقئ وثبتها في البلاستيسين.
- قم بتغطية الرئتين اليمنى واليسرى بورق عدسة معقم مبلل ، وافصل الرئتين اليمنى واليسرى قدر الإمكان ، وكشف التركيب التشريحي للنقير الرئوي بالكامل.
- افصل PA و Br و PV تحت المجهر بالملقط واربط Br بالقرب من الرئة ب 6-0 خيوط جراحية (الشكل 3A-C).
- استخرج PA و Br و PV من الكفة المصنوعة من 16 جم و 14 جم و 16 جم على التوالي. ثبت جدران الأنبوب على الكفة باستخدام 8-0 الغرز الجراحية (الشكل 3D-F).
- الحفاظ على رئتي المتبرع المعدلة في محلول ملحي ، وإعادة وضعها على الجليد ، وانتظار الزرع.
4. زرع الرئة من المتبرع (الشكل 4)
- تخدير الفئران المتلقية بحقن البنتوباربيتال داخل الصفاق (70 ملغم/كغ) وتنبيب باستخدام نفس الطريقة المتبعة في الخطوات 2.1-2.3.
- قم بإزالة منطقة الصدر اليسرى للمتلقي ، ووضع المتلقي في وضعية الاستلقاء الجانبي الأيمن على طاولة العمليات الحرارية ، وتطهير المجال الجراحي بالكحول بنسبة 75٪.
- قم بعمل شق في الجلد وجدار الصدر عند النقطة التي يكون فيها الدافع القمي أكثر بروزا (في الفضاء الوربي الرابع) لدخول التجويف الصدري.
- استخدم ضام الجفن لفتح التجويف الصدري. ادفع الرئة اليسرى برفق جانبا باستخدام قطعة قطن مبللة لكشف الرباط الرئوي السفلي ، ثم قم بتمرير الرباط بحدة.
- أمسك الرئة اليسرى بالملقط وسحبها خارج التجويف الصدري. قم بتأمين إقهار الرئة باستخدام hemostat وتثبيته في شق الصدر البطني. استخدم طين النمذجة لزيادة تثبيت الإرقاء على جانب المتلقي (الشكل 4 أ).
- قم بإزالة الأنسجة حول الرئة اليسرى ، وتشريح النقير الرئوي ، وافصل PA و PV و Br.
- قم بتثبيت الأطراف القريبة من PA و Br و PV باستخدام المشابك الوعائية (الشكل 4 ب).
- استخدم 8-0 خياطة جراحية لربط PA و Br و PV المسبق للمتلقي ، مما يضمن مفاغرة سريعة أثناء زرع رئة المتبرع (الشكل 4C).
- قم بقص منصة على الرئة اليسرى للمتلقي المثبت لتسهيل وضع رئة المتبرع. قم بعمل شق صغير في الطرف البعيد من PA و Br و PV للمتلقي (الشكل 4 د).
- اشطف PA و PV بمحلول ملحي هيبارين لمنع تكون الجلطة (الشكل 4E).
- أخرج رئة المتبرع من الجليد وضعها على منصة الرئة اليسرى للمتلقي. ارفع جانبا واحدا من فتحة القطع بالملقط ، ثم ازرع أصفاد PA و Br و PV في المتلقي بالتتابع وربطها (الشكل 4F ، G).
ملاحظة: يجب إجراء تسلسل مفاغرة على النحو التالي: أولا مفاغرة PA ، متبوعا ب Br ، وأخيرا ، PV. - افتح مشبك مرقئ الدم الدقيق ولاحظ أن رئة المتبرع تتغير تدريجيا من الأبيض إلى الأحمر. افحص وتأكد من عدم وجود نزيف في موقع مفاغرة (الشكل 4H).
- قم بإزالة الرئة اليسرى للمتلقي ، وأعد الرئة المانحة إلى تجويف الصدر (الشكل 4I ، J).
- زيادة ضغط جهاز التنفس الصناعي بشكل مناسب لضمان التوسع الكافي للحويصلات الهوائية في رئة المتبرع.
ملاحظة: في وضع التهوية التي يتم التحكم فيها بالضغط ، يجب ألا يتجاوز الضغط 25 سم في الساعة2درجة مئوية. أثناء الإجراء ، يتم ضبط معلمات جهاز التنفس الصناعي بناء على حالة المتلقي. إذا أظهر المتلقي تنفسا يلهث ، فهذا يشير إلى وجود نقص الأكسجة ، ويجب تعديل معلمات جهاز التنفس الصناعي على الفور وفقا لذلك. - امسح تجويف الصدر حتى يجف بكرة قطنية معقمة ، ثم أغلقه طبقة تلو الأخرى (الشكل 4 كيلو).
- انتظر حتى يستعيد المتلقي التنفس التلقائي تدريجيا ، ثم قم بإزالة جهاز التنفس الصناعي وراقب. عندما يصل معدل التنفس التلقائي إلى حوالي 100 مرة في الدقيقة ، قم بإزالة أنبوب القصبة الهوائية (الشكل 4L).
ملاحظة: تشمل العلامات التي تشير إلى أن المتلقي جاهز لإزالة جهاز التنفس الصناعي عند استعادة التنفس التلقائي حركة الشعيرات وحركة الأطراف ومنحنى التنفس غير المنتظم على شاشة جهاز التنفس الصناعي. - ضع المستلمين في أقفاص فردية مع حرية الوصول إلى الطعام والماء ، وحافظ على درجة الحرارة عند ~ 22 درجة مئوية.
- يتم تطبيق حقن ميلوكسيكام تحت الجلد (5 ملغ/كغ) للمتلقين لمدة 3 أيام متتالية لتخفيف الألم.
النتائج
سجلنا وقت العملية لكل خطوة في عملية زرع الرئة في 30 فأرا. يظهر في الجدول 1 وقت تحضير الكفة ، وحصاد رئة المتبرع ، ونقص التروية البارد ، ونقص التروية الدافئ. باستخدام طريقتنا المحسنة ، بعد التدريب الأولي ، وصلت نسبة نجاح جراحة الزرع إلى 100٪. يمكن أن توفر هذه التقنية الدعم للأبحاث اللاحقة حول المضاعفات بعد زراعة الرئة. لقد استخدمنا هذه التكنولوجيا لأكثر من 2 سنوات. توضح الأشكال التالية عمليتنا من صنع الكفة (الشكل 1) ، واستخراج رئة المتبرع (الشكل 2C) ، وتعديل رئة المتبرع (الشكل 3) ، إلى زرع رئة المتبرع (الشكل 4) وتقييم النتائج الجراحية (الشكل 5). بعد ستة أشهر من الزرع الزاوي ، أجرينا التصوير المقطعي المحوسب (CT) والتقييم المرضي على المتلقين. وجدنا أن تهوية الرئتين المزروعة كانت جيدة في التصوير المقطعي المحوسب ، على غرار تلك الخاصة بمجموعة العمليات الوهمية (بضع الصدر فقط بدون زرع الرئة). لم يكن هناك فرق كبير في المظهر العياني للرئتين خارج الجسم الحي بين مجموعة العمليات الوهمية والرئة اليمنى الذاتية ، ولم يتم العثور على تغييرات مرضية واضحة في نتائج تلطيخ الهيماتوكسيلين إيوزين (HE). باختصار ، كانت عملية زرع الرئة المتعامدة للرئة اليسرى ناجحة ، ووضع نضج هذه التقنية الأساس لبناء نماذج مرضية أخرى بعد زراعة الرئة.
الشكل 1: تحضير الكفة. (أ) أحجام مختلفة من القنيات الوريدية وشفرات قطع الكفة. (ب) التكبير بمقدار 5 أضعاف. قطع الكفة تحت المجهر. شريط المقياس = 1 مم. (C) الأصفاد ل PA (16 G) و PV (16 G) و Br (14 G). الاختصارات: IV = في الوريد. PA = الشريان الرئوي. PV = الوريد الرئوي. Br = الشعب الهوائية. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: حصاد الرئة من المتبرعين. (أ) التنبيب الرغامي للمتبرع. (ب) نضح الرئة من المتبرع. (ج) ضع رئة المتبرع النظيفة على الجليد. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: تعديل رئة المتبرعين. (أ) تحرير السلطة الفلسطينية. (ب) حرر وقم بربط Br. (ج) حرر الكهروضوئية (D-F) قم بتثبيت PA و Br و PV على الكفة على التوالي. تم التقاط جميع الصور المجهرية بتكبير 5x. شريط المقياس = 1 مم. الاختصارات: PA = الشريان الرئوي. PV = الوريد الرئوي. Br = الشعب الهوائية. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: زرع رئة المتبرع. (أ) تم تثبيت المتلقي على طاولة العمليات الثرموستاتي. تم فتح جدار الصدر. وتم سحب الرئة اليسرى وتثبيتها على الشق. (ب) تحرير ومنع الهياكل الهيلارية. (ج) عقدة جراحية مسبقة. (د) قم بعمل شق صغير في الطرف البعيد من PA و Br و PV. (ه) يغسل بمحلول ملحي هيباريني. (إف ، ز) مفاغرة PA و Br و PV بالتسلسل. (ح) افتح مشبك مرقئ للسماح بالتهوية والدورة الدموية. (ط) استئصال الرئة اليسرى للمتلقي. (ي) إعادة الرئة المانحة إلى تجويف الصدر. (ك) إغلاق الصندوق. (ل) انتظار استيقاظ المتلقي. تم التقاط جميع الصور المجهرية بتكبير 5x. شريط المقياس = 1 مم. الاختصارات: PA = الشريان الرئوي. PV = الوريد الرئوي. Br = الشعب الهوائية. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: تقييم ما بعد الزرع. خضعت مجموعة العمليات الوهمية لبضع الصدر فقط دون زرع. تم إجراء التصوير المقطعي المحوسب والتقييم المرضي للعينات بعد 6 أشهر. تلقت مجموعة الزرع عملية زرع متزامنة وخضعت للتصوير المقطعي المحوسب والتقييم المرضي بعد 6 أشهر. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
| إجراء | وقت التشغيل (دقيقة) |
| تحضير الكفة | 3.2±0.38 |
| حصاد الرئة للمتبرعين | 9.85±0.60 |
| نقص تروية البرد | 29.96±2.77 |
| نقص التروية الدافئ | 12.62±2.35 |
الجدول 1: وقت تشغيل كل إجراء. تحضير الكفة: إجمالي الوقت المستغرق لعمل ثلاثة أصفاد (بما في ذلك الأصفاد ل PA و PV و Br) ، حصاد رئة المتبرع: الوقت المستغرق لإزالة الرئة المتبرع من المتبرع. نقص التروية البارد: المدة التي يتم فيها إبقاء رئة المتبرع على الجليد. نقص التروية الدافئ: الوقت المستغرق من إزالة الرئة المانحة من الجليد إلى إعادة التروية. الاختصارات: PA = الشريان الرئوي. PV = الوريد الرئوي. Br = الشعب الهوائية.
المناقشة
نموذج زراعة رئة الفئران هو نموذج شائع الاستخدام في مجال البحث الأساسي حول زراعة الرئة. يمكن أن يحاكي بشكل جيد العملية الفيزيولوجية المرضية لزراعة الرئة البشرية. تتمتع الفئران أيضا بمزايا التكاثر السريع والتكلفة المنخفضة. استخدم Mizuta et al.6 تقنية الكفة لأول مرة في عام 1989 لتقليل صعوبة هذا النموذج بشكل كبير. ومع ذلك ، نظرا لتعقيد العملية ، لا يزال العديد من الباحثين مترددين.
في عملية تحضير الكفة ، صنع معظم الباحثين أصفاد بأشكال متشابهة. قام Wu et al.7 بعمل اكتئاب في منتصف الكفة لمنع العقدة من الانزلاق أثناء عملية مفاغرة ، لكنهم احتاجوا إلى شخصين لإجراء مفاغرة ، مما سيزيد بلا شك من القوى العاملة وتكاليف المواد. قام بعض الباحثين أيضا بتعديل ذيل الكفة لجعلها أكثر نعومة8 ، لكنهم لم يزيلوا ذيل الكفة قبل زرع الكفة في المتلقي ، مما سهل على الكفة أن تتسبب في التواء الأوعية الدموية والممرات الهوائية أو طيها في المتلقي.
فيما يتعلق باختيار حجم الكفة ، اقترحت الدراسات السابقة أنه يجب استخدام سوار 18 جراما للسلطة الفلسطينية عندما يكون وزن المستلم أقل من 270 جراما ، ويجب استخدام سوار 16 جراما عندما يتجاوز وزن المتلقي 270 جم9. يستخدم بعض الباحثين أيضا بشكل موحد 18 جم 7,10. فيما يتعلق بتعديل رئة المتبرع ، وضع Tian et al.8 رئة المتبرع في طبق استزراع مصمم ذاتيا لإصلاح الأوعية الدموية الرئوية و Br لتسهيل تثبيتها على الكفة. ومع ذلك ، تتطلب هذه الطريقة مشبك وعائي خاص وليس لها ميزة في تقليل وقت نقص التروية البارد في رئة المتبرع. في عملية مفاغرة المتلقي ، أبلغت الدراسات الحديثة عن طريقة مفاغرة البندول8. ومع ذلك ، فإن هذه الطريقة لها متطلبات صارمة للأدوات والمعدات. غالبا ما يجد المبتدئون صعوبة في الحصول على بعض المعدات الرئيسية ويواجهون خطر وقت مفاغرة طويل وحتى تمزق الأوعية الدموية بسبب التوتر العالي أثناء عملية مفاغرة.
يقوم بعض الباحثين أولا بإجراء مفاغرة PV أثناء عملية مفاغرة. إنهم يعتقدون أن مفاغرة PV هي أصعب خطوة. يمكن أن يضمن مفاغرة الكهروضوئية أولا أن الرئة المانحة لديها مساحة كافية للتحرك. ومع ذلك ، نظرا لأن الكهروضوئية أصعب من Br و PA ، فإن هذا يؤدي إلى خطر سقوط الكفة الكهروضوئية أو حتى التمزق الوريدي عند مفاغرة Br و PA10. حاول بعض الباحثين تقليل التوتر أثناء مفاغرة باستخدام وضع شبه ضعيف الأيمن8،11 أو وضع ضعيف. ومع ذلك ، فإن طريقة حشو الصدر الأيمن ستغير زاوية الأنبوب الرغامي وتزيد من ضغط مجرى الهواء7. قدم الباحثون المذكورون أعلاه ابتكارات في إنتاج الكفة ، وتعديل رئة المتبرع ، وزرع رئة المتبرع. على الرغم من تحسين هذا النموذج من قبل العديد من الباحثين ، إلا أنه لم يتم الترويج له وتطبيقه على نطاق واسع.
في دراستنا ، أجرينا تحسينات في إنتاج الكفة ، وتعديل رئة المتبرع ، وزرع رئة المتبرع على أمل أن يتمكن الباحثون من إتقان هذا النموذج بسرعة أكبر. اخترنا قنية إبرة وريدية 16 جم كصفعة PA لأن الكفة 16 G يمكن وضعها بسهولة على الشرايين بصلابة أفضل ، وهناك مساحة كافية في الكفة لضمان تدفق الدم بشكل جيد. نظرا لأن الكفة 18 جم أصغر بكثير من القطر الداخلي للجهاز المتلقي ، فإن هذا لا يفضي إلى تدفق الدم السلس ، وأثناء عملية مفاغرة ، تكون الكفة صغيرة جدا وتفتقر إلى الاحتكاك الكافي بين جدار PA الخاص بالمتلقي ، مما يزيد من صعوبة مفاغرة ويؤدي بسهولة إلى انزلاق الكفة.
فيما يتعلق باختيار حجم الأصفاد Br و PV ، فإن معظم الباحثين لديهم رأي ثابت نسبيا. تجدر الإشارة إلى أنه لتقليل حدوث انسداد مفاغرة Br ، يجب أن تكون صفعة Br المختارة كبيرة قدر الإمكان. في علاج الكفة ، قام Hiroaki et al.6 بعمل بعض الشقوق على سطح الكفة لزيادة الاحتكاك ، واستخدم بعض الباحثين الأصفاد بدون ذيول12،13. في دراستنا ، تم استخدام صفعة ذات ذيل لتسهيل التثبيت باستخدام ملقط مرقئ. بعد إصلاح PA و Br و PV ، تمت إزالة الذيل. يمكن أن توفر هذه الطريقة الوقت في تثبيت PA و Br و PV على الكفة ويمكن أن تمنع تلف الأوعية الدموية ورئتي المتبرع بسبب حركة ذيل الكفة في المتلقي بعد مفاغرة.
أثناء تعديل رئة المتبرع ، يزيد الهيكل التشريحي المعقد من وقت نقص التروية البارد في الرئة المتبرعة. في هذه الدراسة ، تمت تغطية سطح وأسفل رئة المتبرع بورق عدسة معقم مسبقا ، وتم وضع رئة المتبرع على طبق مزرعة معقم ثم وضعها على الجليد للتعديل. كان ورق العدسة المعقم الذي يغطي سطح الرئة المانحة مبلل قليلا بمحلول ملحي مبرد مسبقا. هذا لا يضمن فقط ترطيب الرئة المانحة ويمنع تلف الرئة المانحة بسبب الملقط ، ولكنه يوفر أيضا احتكاكا كافيا لضبط موضع الرئتين اليمنى واليسرى عند فصل بنية النقير ، وذلك لكشف الهيكل التشريحي للنقير بالكامل وفصل PA و Br و PV بسرعة عن الجانب الظهري للرئة المتبرعة. في الدراسات السابقة ، تم وضع الشاش على سطح رئة المتبرع7،10،14. بسبب الفجوة الكبيرة في منتصف الشاش ، تضررت رئة المتبرع بسهولة بسبب الملقط أثناء عملية الفصل ، مما أدى في النهاية إلى استرواح الصدر. يمكن لطريقتنا تحرير PA و Br و PV وغيرها من الهياكل بسرعة وتقصير وقت نقص التروية البارد في الرئة المانحة.
خلال مرحلة زرع رئة المتبرع ، يتماشى تأمين الرئة اليسرى للمتلقي في منطقة الصدر الأمامية بشكل وثيق مع البنية التشريحية للمتلقي. قللنا بشكل كبير من التوتر المفاغرة بين رئة المتبرع والأوعية الدموية والشعب الهوائية للمتلقي ، وبالتالي تقليل الصعوبة الجراحية وخطر حدوث مضاعفات بعد الجراحة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن المساحة الصدرية الخلفية أكبر نسبيا ، مما يسهل التلاعب بالأدوات الجراحية وزرع الرئة المانحة. في المقابل ، ثبتت معظم الدراسات السابقة الرئة اليسرى للمتلقي على الجانب الظهري7،8،12. يولد هذا النهج توترا أكبر أثناء عملية مفاغرة ، مما يزيد من الصعوبة الجراحية وخطر حدوث مضاعفات بعد الجراحة. علاوة على ذلك ، قد تحد مساحة التشغيل المحدودة في التجويف الصدري الأمامي من مرونة الأدوات الجراحية.
أخيرا ، يتطلب هذا النهج تراجعا واسعا لرئة المتلقي ، مما قد يزيد من خطر الإصابة الميكانيكية. بالإضافة إلى ذلك ، احتفظنا بالرئة اليسرى للمتلقي قبل مفاغرة وقمنا بقص منصة عليها. سهل هذا وضع الرئة المتبرع بشكل أفضل وتعديل موضعه أثناء مفاغرة. في الدراسات السابقة ، تمت إزالة جذع الرئة للمتلقي بالكامل قبل مفاغرة ، وتم تثبيت PA و PV و Br بأدوات التثبيت15 ، والتي يمكن أن تسبب تمزق الأوعية الدموية بسهولة. قبل مفاغرة المرض ، يجب استخدام محلول ملحي هيباريني لري الأوعية الدموية لإزالة جلطات الدم ومنع مضاعفات الانصمام الخثاري. تم الإبلاغ عن هذا في العديد من الدراسات السابقة7،10،16. ومع ذلك ، لم ينتبه العديد من الباحثين إلى حقيقة أنه يمكن إدخال فقاعات الهواء بسهولة أثناء عملية مفاغرة ، مما يؤدي إلى انسداد الهواء. في إجراءاتنا ، نستخدم قطعة قطن ناعمة لإزالة فقاعات الهواء الكبيرة من الأوعية الدموية للمتلقي والكفة المانحة ، مما يمنع بشكل فعال انسداد الهواء. يمكن امتصاص الفقاعات الأصغر ولا تسبب مشاكل كبيرة.
في إجراء مفاغرة ، يتم معالجة الشريان الرئوي (PA) أولا ، يليه الشعب الهوائية (Br) ، وينتهي بالوريد الرئوي. تم اعتماد هذا النهج المتسلسل بشكل استراتيجي بسبب المرونة الفائقة للسلطة الفلسطينية ، والتي تقلل من خطر إصابة الأوعية الدموية أو إزاحة الكفة الناتجة عن التوتر المفرط أثناء مفاغرة الوريد اللاحقة. قد تؤدي مفاغرة البداية إما الكهروضوئية أو Br إلى تمزق الأوعية الدموية أو الشعب الهوائية ، وكذلك هجرة الكفة بسبب المضاعفات المرتبطة بالتوتر. من خلال بروتوكولات التدريب المنهجية والممارسة المتكررة ، أظهر هذا التسلسل الأمثل مزايا كبيرة في تقليل التعقيد التقني وتعزيز معدلات النجاح التشغيلي. والجدير بالذكر أن نهجنا حقق معدل نجاح مفاغرة بنسبة 100٪ ، متجاوزا النتائج التي تم الإبلاغ عنها في الدراسات المماثلة. أثناء إجراء الزرع ، يحتاج المشغل فقط إلى سحب حافة الشق بيد واحدة ، وإدخال الكفة المانحة في تجويف المتلقي ، وتثبيتها بعقدة بيد واحدة. هذه التقنية ، التي تتيح التثبيت والعقد بيد واحدة ، تقلل بشكل كبير من متطلبات الموظفين وتعزز الكفاءة الجراحية. وبالتالي ، حسنت دراستنا طريقة زرع تقويم العظام للرئة اليسرى للفئران ، وقللت من وقت وصعوبة العملية الجراحية ، وحسنت تكرار هذا النموذج.
الإفصاحات
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنحة رقم 82470103) ، ومنحة البحوث الخاصة لمؤسسة وو جيبينغ الطبية (رقم 320.6750.2025-01-1) ، وجمعية التعليم الطبي الصينية (المنحة رقم. ZJWYH-2023-YIZHI-003) ، مشروع أبحاث علم الأوبئة السريرية للمختبر الرئيسي للدولة لأمراض الجهاز التنفسي (رقم المنحة. SKLRD-L-202504) ، ومشروع قوانغتشو للتكنولوجيا المميزة السريرية (المنحة رقم 2023C-TS10) ، ومشروع البحث السريري الرئيسي في إطار برنامج تعزيز القدرات البحثية بجامعة قوانغتشو الطبية (رقم المنحة. GMUCR2024-01007).
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 0.9٪ محلول ملحي | هوبيو | HBPP008-100 | |
| طبق بتري معقم 10 سم | بيكمان | صحن بتري بلاستيكي 10 سم | |
| 16 جرام سلك توجيه التنبيب القصبة الهوائية | فيغا | - | |
| ملقط دومون ناعم # 7 منحني / 11.5 سم | ف.س.ت | 11271-30 | |
| مقص العين 10 سم مستقيم حاد | جينغتشونغ | Y00030 | |
| ملقط مرقئ (منحني كامل الأسنان) | جينغتشونغ | J31180 | |
| محلول الهيبارين الصوديوم | ليجين | راند 10119 | |
| إبرة Introcan 14 جرام إبرة فراشة | ب. براون | 4254210 ب | |
| إبرة Introcan 16 جرام إبرة فراشة | ب. براون | هاتف: 4254171 ب | |
| مصباح مصدر الضوء البارد ثنائي الألياف LED | RWD | 76312 | |
| ورق تنظيف العدسة | كيمبيرلي | 34155 | |
| فئران لويس ؛ | قوانغتشو دين جين التكنولوجيا المحدودة (قوانغتشو ، الصين) | ||
| مسحات قطنية طبية | الفائز / وينجيان | 10 سم × 50 قطعة | |
| حامل إبرة طبية | تشنغهي | - | |
| حقنة طبية معقمة | الفائز / وينجيان | 20 مل | |
| مقص جراحي طبي 12.5 سم مستقيم حاد | بولون | رطل1251 | |
| شريط طبي | وينشيان | 1527 | |
| ملقط الأنسجة الطبية | RWD | ج30607 | |
| ضام الجفن الطبي التيتانيوم | يوديكانج | - | |
| ملقط منحني صغير | جينغتشونغ | JzCrWA3050 0.3 / 140 مم | |
| ملقط مرقئ للأوعية الدموية الدقيقة 12.5 سم منحني | جينتشونغ | دبليو 40350 | |
| ملقط مرقئ للأوعية الدموية الدقيقة 12.5 سم مستقيم | جينتشونغ | مغرب40340 | |
| التصوير المقطعي المحوسب الصغير | بينسنغ | SNC-100 | |
| مقاطع الأوعية الدموية المصغرة | ف.س.ت | 18055-06 | |
| آلة تخدير الصغيرة متعددة القنوات | RWD | 550 راند | |
| طقم التخثر الجراحي العصبي ، طقم التخثر | ف.س.ت | 18010-00 | |
| بنتوباربيتال الصوديوم | سيغما | ص 3761 | |
| مسحات قطنية مدببة | آخر | 1000 قطعة | |
| منصة التنبيب الفئران / الفأر | بوكسين | - | |
| نظام حمام مائي للفئران / الفأر (أثناء الجراحة) 10-65 درجة ؛ C التحكم في درجة الحرارة ، 310 × 290 مم ، 220 فولت | هوايانغ | 36-0041 | |
| شنغهاي جولدن بيل ملقط طبي مجهري مجهري دقيق ملقط دقيق مستقيم الانحناء الأدوات الجراحية الدقيقة الأدوات المجهرية | جينغتشونغ | دبليو إيه 1020 | |
| شنغهاي بودونغ جينهوان خيوط جراحية قابلة للامتصاص طبي خيوط معقمة مع مصاعد زرع إبرة (4-0) | شنغهاي بودونغ جينهوان | 473445 | |
| أجهزة التنفس الصناعي للحيوانات الصغيرة | كينت العلمية | روفنت جونيور | |
| نظام عزل حمام مائي للحيوانات الصغيرة | هويون | TG-TP-BL | |
| مقص زنبركي (كبير) | جينغ تشونغ | جي زي كروا1020 | |
| ملقط البعوض الطبي من الفولاذ المقاوم للصدأ | جياتي | ال ز1021 | |
| مقبض فولاذي مسطح منحني غير مسنن 0.3 أسنان | Zhenbang (طبي) | مسنن مع خطاف / منصة للربط | |
| مقبض فولاذي مسطح مستقيم غير مسنن 0.3 أسنان | Zhenbang (طبي) | مسنن مع خطاف / منصة للربط | |
| كرات قطنية معقمة | بوشنغتياناي | حجم صغير | |
| شاش معقم | هيسرن | 6 سم × 8 سم | |
| خياطة بإبرة | لينغكياو | 8-0 | |
| خياطة بإبرة | لينغكياو | 6-0 | |
| ملاقط دومون # 5 ملقط ، مستقيم | ف.س.ت | 11254-20 | |
| طين خفيف للغاية | بوكي | CQNT-24 | |
| حامل المشبك الوعائي | RWD | R34001-14 |
المراجع
- Perch, M., et al. The International Thoracic Organ Transplant Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: Thirty-ninth adult lung transplantation report-2022; focus on lung transplant recipients with chronic obstructive pulmonary disease. J Heart Lung Transplant. 41 (10), 1335-1347 (2022).
- Kulkarni, H. S., et al. Bronchiolitis obliterans syndrome-free survival after lung transplantation: An International Society for Heart and Lung Transplantation Thoracic Transplant Registry analysis. J Heart Lung Transplant. 38 (1), 5-16 (2019).
- Bos, S., Vos, R., Van Raemdonck, D. E., Verleden, G. M. Survival in adult lung transplantation: where are we in 2020. Curr Opin Organ Transplant. 25 (3), 268-273 (2020).
- Hu, C. X., et al. Lung transplantation in China between 2015 and 2018. Chin Med J (Engl). 132 (23), 2783-2789 (2019).
- Khush, K. K., et al. The International Thoracic Organ Transplant Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: Thirty-sixth adult heart transplantation report - 2019; focus theme: Donor and recipient size match. J Heart Lung Transplant. 38 (10), 1056-1066 (2019).
- Goto, T., et al. Simplified rat lung transplantation using a new cuff technique. Ann Thorac Surg. 93 (6), 2078-2080 (2012).
- Li, J., et al. A modified orthotopic left lung transplantation model in rats. Heliyon. 10 (10), e30728(2024).
- Tian, D., Shiiya, H., Sato, M., Nakajima, J. Rat lung transplantation model: modifications of the cuff technique. Ann Transl Med. 8 (6), 407(2020).
- Lee, Y. G., et al. A rat lung transplantation model of warm ischemia/reperfusion injury: Optimizations to improve outcomes. J Vis Exp. (176), e62455(2021).
- Rajab, T. K. Techniques for lung transplantation in the rat. Exp Lung Res. 45 (9-10), 267-274 (2019).
- Zhao, J., Tian, D., Yang, X., Liu, M., Chen, J. Anterior hilum anastomosis versus posterior hilum anastomosis in a mouse lung transplantation model. JTCVS Tech. 14, 159-165 (2022).
- Guo, H., et al. Improvements of surgical techniques in a rat model of an orthotopic single lung transplant. Eur J Med Res. 18 (1), 1(2013).
- Zhai, W., et al. Simplified rat lung transplantation by using a modified cuff technique. J Invest Surg. 21 (1), 33-37 (2008).
- Gao, P., et al. Improvement of surgical techniques for orthotopic single lung transplantation in rats. Ann Transl Med. 10 (12), 673(2022).
- Krupnick, A. S., et al. Orthotopic mouse lung transplantation as experimental methodology to study transplant and tumor biology. Nat Protoc. 4 (1), 86-93 (2009).
- Kubisa, B., Schmid, R. A., Grodzki, T. Model of single left rat lung transplantation. Relation between surgical experience and outcomes. Rocz Akad Med Bialymst. 48, 70-73 (2003).
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
