يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

يخفف Hydroxysafflor Yellow A من السمية التي يسببها LPS في الخلايا العصبية الدوبامينية لأسماك الزرد عن طريق تنظيم مسار إشارات TLR4 / NF-ĸB

620 مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/68314

⸱

يوليو 18, 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Mitochondria and Healthy Aging, College of Life Science, Yantai University, 2Research Institute of Life Sciences, Yinfeng Biological Group Co., Ltd.

في هذه المقالة

ملخص

يهدف هذا البروتوكول إلى اختبار ما إذا كان هيدروكسي سافلور الأصفر أ (HSYA) يخفف من السمية العصبية التي يسببها LPS في أسماك الزرد. تم تقييم الوظيفة الحركية باستخدام نظام الرؤية البصرية. تم فحص إصابة العصب الدوبامين بواسطة الكيمياء المناعية. تم تحليل الجزيئات المشاركة في مسار TLR4 / NF-κB باستخدام اللطخة الغربية.

الملخص

يلعب الالتهاب الناجم عن عديدات السكاريد الدهنية (LPS) دورا مهما في تحفيز وإدامة الأمراض التنكسية العصبية ، بما في ذلك مرض باركنسون (PD). Hydroxysafflor الأصفر A (HSYA) هو المكون الرئيسي ل Carthamus tinctorius L.. تهدف هذه الدراسة إلى ملاحظة ما إذا كان HSYA يمكن أن يحسن السمية الناجمة عن LPS في الخلايا العصبية الدوبامينية لأسماك الزرد. تعرضت أسماك الزرد ل LPS ثم عولجت ب HSYA. تم إجراء اختبارات السلوك لتقييم الوظيفة الحركية لأسماك الزرد. تم فحص إصابة الخلايا العصبية الدوبامين ومستوى الدوبامين. كما تم قياس TLR4 و NF-κB و IL-1β و TNF-α. وأظهر أن LPS (60 ميكروغرام / مل ، التركيز النهائي) تسبب في السمية في أسماك الزرد وتسبب في خلل وظيفي حركي وتلف الخلايا العصبية الإيجابية لهيدروكسيلاز التيروزين (TH). لم يقلل التعرض ل LPS من محتوى الدوبامين فحسب ، بل أدى أيضا إلى زيادة مستويات IL-1β و TNF-α والتعبير عن TLR4 و NF-κB. خففت HSYA من الخلل الحركي الناجم عن LPS. بالإضافة إلى ذلك ، خففت HSYA من فقدان الخلايا العصبية الإيجابية TH ، والتي كانت مصحوبة بزيادة في محتوى الدوبامين. كما منع علاج HSYA التعبير عن TLR4 و NF-κB وإنتاج IL-1β و TNF-α. في الختام ، توضح هذه الدراسة أن HSYA يخفف من الإصابة الناجمة عن الالتهاب في الخلايا العصبية الدوبامينية لأسماك الزرد عن طريق تنظيم مسار TLR4 / NF-κB ، والذي يوفر أساسا تجريبيا للوقاية من الإصابة الالتهابية في مرض باركنسون.

المقدمة

التسبب في مرض باركنسون (PD) هو تدهور النشاط الحركي بسبب إصابة الخلايا العصبية الدوبامين في الدماغ. تشمل مظاهر مرض باركنسون الخلل الحركي ، بما في ذلك الرعاش أثناء الراحة ، وبطء الحركة ، وعدم استقرار الوضعية ، وتوتر العضلات. الالتهاب هو السمة المميزة المرضية البارزة لمرض باركنسون. ترتفع مستويات السيتوكين في السائل النخاعي ومناطق الدماغ الأبدية بعد الوفاة للأفراد المصابين بمرض باركنسون مقارنة بالضوابط الصحية المطابقة للعمر1. تم تأسيس الآليات التي تحدث بها إصابة الخلايا العصبية الدوبامينية بسبب الالتهاب. في مرض باركنسون ، تكون الخلايا العصبية الدوبامين في الدماغ المتوسط حساسة للسيتوكينات مثل عامل نخر الورم (TNF) -ɑ 2. عديد السكاريد الدهني (LPS) هو أحد مكونات البكتيريا. يتم تحديد LPS على أنه رابط لمستقبلات شبيهة بالحصيلة 4 (TLR-4). بمجرد الارتباط ب TLR-4 ، يؤدي LPS إلى استجابة التهابية ويظهر سمية للأنسجة. يقع TLR-4 على الخلايا الدبقية الصغيرة في الجهاز العصبي المركزي. ينشط LPS TLR-4 وبالتالي ينتج TNF-α و IL-1β. سيؤدي التعرض المركزي أو المحيطي ل LPS إلى تسمم الجهاز العصبي المركزي. هناك أدلة تثبت أن السمية التي يسببها LPS تلعب دورا في تحفيز وإدامة الأمراض التنكسية العصبية ، بما في ذلك PD3،4،5.

في الآونة الأخيرة ، تم استخدام أسماك الزرد بشكل شائع كنموذج لدراسة أمراض الجهاز العصبي. أسماك الزرد والبشر لديهم 80٪ تماثل جيني. وسمك الزرد لديه نفس عدد الكروموسومات تقريبا مثل البشر. علاوة على ذلك ، فإن الهيكل الرئيسي لدماغ الزرد ومسارات الإشارات الخاصة به تشبه تلك الخاصة بالثدييات. يمكن أن تنتج أسماك الزرد أيضا أعدادا كبيرة من الأجنة الشفافة ، وتتطور بسرعة ، وتكون عرضة للتلاعب الجيني6. هذه المزايا تجعل من أسماك الزرد نموذجا ممتازا للتحقيق في التسبب في مرض باركنسون وتطوير فحص الأدوية عالي الإنتاجية في مرض باركنسون.

Hydroxysafflor الأصفر A (HSYA) هو مكون رئيسي ل Carthamus tinctorius L. أظهرت الدراسات السابقة أن HSYA له خصائص مضادة للالتهابات. في المزارع الدماغية الأولية ، لم تظهر HSYA عند 20 ميكرومتر إلى 640 ميكرومتر أي سمية. وتركيز HSYA الذي يتراوح من 40 ميكرومتر إلى 640 ميكرومتر قلل من تلف الخلايا العصبية الدوبامينية الناجم عن LPS7. تعرضت الفئران C57BL / 6J ل 6-hydroxydopamine للحث على نموذج من PD. HSYA لا يخفف فقط من ضعف الوظيفة العصبية ولكن أيضا يحمي الخلايا العصبية الدوبامين في الدماغ. علاوة على ذلك ، قلل HSYA من التعبير عن سينسيز الأكسدة الحلقية -2 ، وسينسيز أكسيد النيتريك المحفز ، و NF-κB في المادة السوداء8.

حتى الآن ، لا توجد تقارير توضح خاصية HSYA لتقليل سمية LPS في الجسم الحي. وأظهرت أن HSYA خففت من السمية الناجمة عن LPS في المختبر7. ومع ذلك ، فإن التقييم القائم على الخلايا لا يمثل جميع خطوات العملية المعقدة للسمية العصبية. أثبتت أسماك الزرد أنها ذات قيمة خاصة لكشف آلية السمية. في السنوات الأخيرة ، ثبت أيضا أن HSYA قادرة على تثبيط تنشيط المسار الالتهابي NF-κB عن طريق تقليل التعبير عن بروتين كيناز B ، وبالتالي تحسين الاستجابة الالتهابية ، وأن HSYA يثبط أيضا مسار الإشارات الالتهابية المرتبط بالبروتين المنشط 1 ، والذي يؤثر على تكاثر الخلايا وعامل نخر الورم α الإصابة الالتهابيةالناجمة 9 ، 10. تهدف هذه الدراسة إلى التحقيق فيما إذا كان HYSA يمكن أن يحسن السمية التي يسببها LPS في الخلايا العصبية الدوبامينية لأسماك الزرد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

أجريت التجارب وفقا للمبادئ التوجيهية للمعاهد الوطنية للصحة لاستخدام المختبر (المنشور 86-23 ، تمت مراجعته في عام 1986). وتمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة رعاية واستخدامه بجامعة يانتاي (YTDX20220623). الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. صيانة الزرد

تم الاحتفاظ بأسماك الزرد من سلالة AB (Danio rerio) في نظام مائي معاد تدويره عند درجة حرارة ماء تتراوح بين 27 و 28.5 درجة مئوية (درجة الحموضة 7.0) ، في دورة ضوء / مظلمة مدتها 14/10 ساعة. تم تغذية أسماك الزرد مرتين يوميا بالجمبري. بعد التزاوج الطبيعي ، تم جمع الأجنة المخصبة في أطباق بتري تحتوي على وسط E3 بالماء منزوع الأيونات ، KCl ، كلوريد الصوديوم ، MgSO4 · 7 ساعة2O ، و CaCl2.

2. السمية التي يسببها LPS في أسماك الزرد

تم حصاد أجنة أسماك الزرد بعد 24 ساعة من الإخصاب (HPF) وتخصيصها لمجموعات المراقبة و LPS ، مع 60 جنينا في كل مجموعة. تم وزن مسحوق LPS وإضافته إلى كمية معينة من محلول PBS (الرقم الهيدروجيني = 7.4) للذوبان ، وتم تحضيره كمحلول مخزون LPS 2 مجم / مل ، ووضع في -20 درجة مئوية للتخزين والاستعداد. أثناء التجربة ، تم تخفيف محلول احتياطي LPS إلى 30 ميكروغرام / مل و 60 ميكروغرام / مل و 90 ميكروغرام / مل من محلول LPS. تمت إضافة محلول LPS بتركيز نهائي قدره 30 ميكروغرام / مل أو 60 ميكروغرام / مل أو 90 ميكروغرام / مل إلى أطباق بتري تحتوي على 24 أجنة أسماك الزرد hpf ؛ كان حجم المحلول لكل بئر تجريبي 3 مل. وفي المجموعة الضابطة، تم استزراع أجنة الزرد في وسط E3 بدون LPS. تم وضع أطباق بتري في غرفة حضانة بدرجة حرارة ثابتة عند 28 درجة مئوية. تكرر التعرض ل LPS باتباع نفس الإجراء المذكور أعلاه لمدة خمسة أيام متتالية.

3. تأثير مثبط TLR4 على السمية الناجمة عن LPS في أسماك الزرد

تم تعيين أجنة أسماك الزرد عند 24 hpf لمجموعات التحكم و LPS و TAK-242. تم إجراء عدد من الدراسات للتحقق من صحة التأثير التنظيمي ل TAK-242 بتركيز نهائي قدره 1 ميكرومتر على تنظيم مسار إشارات TLR4 ، من بينها أظهرت بعض الدراسات أن TAK-242 ، من خلال تثبيط تكاثر الخلايا الناجم عن LPS وإطلاق العوامل الالتهابية ، يوفر طريقة جديدة لحل المشكلات المتعلقة بالحد من الجلوكوما في فترة ما بعد الجراحة11. في مجموعة TAK-242 ، تمت إضافة TAK-242 (1 ميكرومتر ، التركيز النهائي) إلى طبق بتري يحتوي على 24 أجنة من أسماك الزرد HPF. كان حجم المحلول لكل بئر تجريبي 3 مل. بعد 30 دقيقة ، تمت إضافة LPS (60 ميكروغرام / مل ، التركيز النهائي) للحث على السمية ، ولم تتسبب تركيزات LPS في نفوق أسماك الزرد. تم الحفاظ على الأجنة في المجموعة الضابطة في وسط E3 فقط. تم وضع أطباق بتري في غرفة حضانة بدرجة حرارة ثابتة عند 28 درجة مئوية. تكرر الإجراء أعلاه لمدة خمسة أيام متتالية.

4. تأثير HSYA على السمية التي يسببها LPS في أسماك الزرد

تم تخصيص أجنة أسماك الزرد عند 24 hpf لمجموعات التحكم و LPS و HSYA. تمت إضافة HSYA بتركيز نهائي يبلغ 20 ميكرومتر أو 40 ميكرومتر أو 80 ميكرومتر إلى أطباق بتري التي تحتوي على 24 أجنة من أسماك الزرد HPF ؛ كان حجم المحلول لكل بئر تجريبي 3 مل. بعد 30 دقيقة ، تمت إضافة LPS (60 ميكروغرام / مل ، التركيز النهائي). تم الحفاظ على الأجنة في المجموعة الضابطة في وسط E3 فقط. تم وضع أطباق بتري في غرفة حضانة بدرجة حرارة ثابتة عند 28 درجة مئوية. تكرر الإجراء أعلاه لمدة خمسة أيام متتالية.

5. التقييم السلوكي

تم نقل أسماك الزرد إلى 60 بئرا الوسطى من صفيحة مكونة من 96 بئرا ، مع يرقة واحدة لكل بئر. تمت إضافة وسط استزراع E3 (250 ميكرولتر) إلى كل بئر للسماح بالسباحة الحرة. تم تسجيل النشاط الحركي باستخدام نظام الرؤية. تمت إضافة الماء النقي إلى الصندوق المظلم (30 سم × 40 سم × 60 سم) ، والذي تم ضبطه على حالة تسخين مع ضبط درجة الحرارة على 28 درجة مئوية.

بمجرد أن وصلت درجة حرارة الصندوق المظلم إلى 28 درجة مئوية ، تم وضع الصفيحة المكونة من 96 بئرا التي تحتوي على أسماك الزرد بالداخل ، وتم تنشيط نظام Visual Vision لتسجيل النشاط الحركي. تم إنشاء مجلد جديد لتخزين البيانات. تم تحديد ملف الفيديو محلي الصنع كمصدر للفيديو للدخول إلى واجهة الإعدادات التجريبية. في قسم إعدادات التجربة ، تم تعيين عدد مناطق المراقبة على 60 ، مما يسمح بالمراقبة المتزامنة ل 60 من أسماك الزرد. في إعدادات الساحة ، ظهرت صورة اللوحة المكونة من 96 بئرا التي تم التقاطها بواسطة العدسة على الشاشة ، جنبا إلى جنب مع دوائر تحديد المواقع. تم ضبط الوحدات النمطية في واجهة Arrange Arenas بحيث تتماشى منطقة التقاط العدسة مع كل بئر. في Arena Hardware Mapping ، تم ضبط ضوء الصندوق المظلم على Light On.

في إعدادات التحكم في التجربة ، تم إنشاء برنامج جديد مع فترة تحضير مدتها 10 دقائق وفترة اكتشاف مدتها 10 دقائق ، والتي تم تطبيقها بعد ذلك على جميع التجارب المتوازية. تم استخدام إعدادات الكشف للتأكد من أن وظيفة التقاط العدسة تعمل بشكل طبيعي. في قائمة التجارب ، تم عرض بيانات من 60 سمكة زرد في كل مجموعة. تم استخدام عدد التجارب في شريط الأدوات لإنشاء جدول بيانات يحتوي على جميع المجموعات التجريبية، مما يضمن اكتمال البيانات.

تم تأكيد جميع الإعدادات ، وتم الحفاظ على درجة حرارة الصندوق المظلم عند 28 درجة مئوية. بعد التحقق من أن كل بئر يحتوي على سمكة زرد واحدة بها علامات حيوية ، بدأت التجربة. أثناء التجربة ، سجلت عدسة الأداة السلوكية مسار الحركة والمدة والمعلمات ذات الصلة. بعد 20 دقيقة من التسجيل الأول ، انتهى النظام تلقائيا واستعد للتجربة التالية. تم فتح الصندوق المظلم ، وتم استبدال اللوحة المكونة من 96 بئرا بأخرى جديدة تحتوي على أسماك الزرد للتجربة اللاحقة.

في نهاية التجربة ، تم اختيار النتائج من وحدة التحليل . تم استخراج المعلمات التجريبية مثل متوسط السرعة والمسافة والتسارع الأقصى وزاوية التوجيه المطلقة من وحدة النتائج وتصديرها. ثم تم تجميع البيانات لتحليل الاختلافات السلوكية بين مجموعات أسماك الزرد12.

6. قياس السيتوكينات المؤيدة للالتهابات

تم جمع أسماك الزرد. تم وزن العينات وأضيف PBS (0.01 م ، الرقم الهيدروجيني = 7.4) بنسبة قياس الوزنية 1: 9 وتجانسها (5000 دورة / دقيقة ، 30 ثانية) عند 4 درجات مئوية. تم طرد المتجانسات عند 4 درجات مئوية ، 5000 × جم ، 20 دقيقة ، وتم حصاد المواد الطافية. تم فحص IL-1β و TNF-α باستخدام مجموعات ELISA للأسماك وفقا للتعليمات المقدمة من الشركة المصنعة.

7. الكيمياء المناعية

تم تثبيت أسماك الزرد ب 5 مل 4٪ (حجم / حجم) بارافورمالدهايد. مدمجة في البارافين وقطع أقسام بسمك 5 ميكرومتر. تم تحضين الأقسام بمحلول السترات (200 ميكرولتر) في الميكروويف لمدة 10 دقائق. تم تحضينها في محلول بيروكسيد الهيدروجين والميثانول بنسبة 0.3٪ لمدة 30 دقيقة لمنع البيروكسيديز الداخلي. يغسل ب PBS 3 مرات ، 5 دقائق في كل مرة. تم تحضين المصل غير المناعي لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية ، وتم تحضين الجسم المضاد الأولي المضاد ل TH (1: 100) لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية ، وغسل 3 مرات باستخدام PBS. محتضن بجسم مضاد ثانوي مرتبط ببيروكسيداز الفجل الحار (1: 200) عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ثم تمت إضافة 3,3'-diaminodbenzidine. تم تصوير الأقسام باستخدام مجهر المجال الساطع.

8. الناقلات العصبية

تم استخدام HPLC-ECD لفحص مستوى الدوبامين. تم إذابة هيدروكلوريد الدوبامين في حمض بيركلوريك 0.1 M (HClO4) للحصول على محلول تدرج تركيز عند 3.90625 نانوغرام / مل ، 7.8125 نانوغرام / مل ، 15.625 نانوغرام / مل ، 31.25 نانوغرام / مل ، 62.5 نانوغرام / مل ، و 125 نانوغرام / مل. تم تحليل سلسلة من الحلول القياسية للدوبامين بواسطة HPLC-ECD. تم إجراء الانحدار الخطي باستخدام تركيز الدوبامين ومنطقة ذروة الدوبامين. تم رسم منحنى قياسي. تم تجانس أنسجة أسماك الزرد مع 0.1 M HClO413. تم طرد المتجانسات عند 4 درجات مئوية ، 20،000 × جم ، 15 دقيقة. بعد ذلك، فصلت العينات على عمود ODS2 (E2118047؛ 4.6 × 250 مم، 5 ميكرومتر). تم تحضير العازلة: 25 مليمول / لتر من أسيتات الصوديوم ، 25 مليمول / لتر من حامض الستريك ، 0.01 مليمول / لتر ملح ثنائي الصوديوم من حمض الإيثيلين ديامين تترا أسيتيك ، 1 مليمول / لتر من الصوديوم 1-أوكتانيسلفونات ، وحمض الخليك ، الرقم الهيدروجيني المعدل إلى 3.35. كانت المرحلة المتنقلة أسيتونيتريلي: عازلة (1: 9 ، حجم / حجم). بعد الترشيح الفراغي باستخدام غشاء مرشح 0.22 ميكرومتر ، تم تفريغ العينة عن طريق التفريغ بالموجات فوق الصوتية لمدة 10 دقائق. كانت درجة حرارة فرن العمود 30 درجة مئوية. كان معدل التدفق 1 مل / دقيقة. تم حقن العينة بحجم 20 ميكرولتر. تم تشغيل الكاشف الكهروكيميائي بجهد 1000 مللي فولت بنطاق 10 ميكرو أمبير. تم حساب كمية الدوبامين في أنسجة الزرد بناء على معادلة الانحدار.

9. اللطخة الغربية

تم استخراج البروتينات من أنسجة الزرد ، وتم فحص التركيز (التركيز النهائي: 10 مجم / مل). تعرضت البروتينات (50 ميكروغرام / 5 ميكرولتر) للرحلان الكهربائي لجل دوديسيل كبريتات الصوديوم - بولي أكريلاميد بنسبة 8٪. تم إجراء غشاء النقل عند 110 فولت لمدة 1 ساعة. تم حظر الأغشية بحليب 5٪ لمدة ساعة واحدة. تحتضن عند 4 درجات مئوية مع الأجسام المضادة الأولية: أرنب مضاد ل TLR4 (1: 1000) ، أرنب مضاد NF-κB (1: 2000) ، أرنب مضاد لامين B1 (1: 2000) ، أو أرنب مضاد ل GAPDH (1: 1000). بعد الغسيل باستخدام TBST (3 مرات لمدة 5 دقائق لكل منهما) ، تم تحضين الأغشية بجسم مضاد ثانوي لمدة 1 ساعة. تم تصور العصابات باستخدام مجموعة الركيزة الكيميائية ECL وقياسها كميا باستخدام نظام تصوير هلامي. تم استخدام Lamin B1 و GAPDH كأدوات تحكم في التحميل.

10. التحليل الإحصائي

تم التعبير عن جميع البيانات كمتوسط ± SD وتحليلها باستخدام البرمجيات الإحصائية. تم إجراء التحليلات الإحصائية باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) متبوعا باختبار Tukey. كانت قيمة P البالغة <0.05 ذات دلالة إحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تأثيرات LPS على الوظيفة الحركية لأسماك الزرد
انخفض متوسط السرعة والمسافة الإجمالية وأقصى تسارع لأسماك الزرد في مجموعات LPS (60 ميكروغرام / مل و 90 ميكروغرام / مل) (P < 0.01) مقارنة بالمجموعة الشاهدة. تجلى الخلل الوظيفي الحركي أيضا في التغيرات المتكررة في اتجاه الحركة. زادت زاوية الدوران المطلقة لسباحة أسماك الزرد في مجموعتي LPS 60 ميكروغرام / مل و LPS 90 ميكروغرام / مل بشكل ملحوظ (P < 0.01) (الشكل 1) عند مقارنتها با...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تتمتع النباتات الطبية بسجل حافل من التطبيقات المضادة للالتهابات والحماية العصبية14. أظهرت دراساتنا السابقة أن HSYA كان له تأثير وقائي في النماذج الحيوانية لمرض باركنسون الناجم عن العوامل السامة للأعصاب. باستخدام السمية التي يسببها LPS في أسماك الزرد ، توضح هذه الدراسة أن HSYA يخفف من الإصابة الناجمة عن الالتهاب في الخلايا العصبية الدوبامينية لأسماك الزرد عن طريق تنظيم مسار إشارات TLR4 / NF-κB.

لا ترتبط اضطرابات النوم والخلل الوظيفي المع...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

مساهمة المؤلف:
التصور: Guirong Zhang ، Bing Han. الاستحواذ على التمويل: Guirong Zhang ، Bing Han. التحقيق: Huilin Zhang. المنهجية: Huilin Zhang ، Mingyue Li ، Xiaohan Zhang ، Yang Li. الإشراف: Guirong Zhang ، Bing Han. الكتابة - المسودة الأصلية: Mingyue Li ، Xiaohan Zhang ، Yang Li. الكتابة والمراجعة والتحرير: Huilin Zhang ، Guirong Zhang ، Bing Han.

شكر وتقدير

نشكر راشيل جيمس على تحرير هذه المخطوطة. تم تمويل هذا البحث من قبل مؤسسة العلوم الطبيعية لمقاطعة شاندونغ (رقم المنحة. ZR2020MH377).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

مجموعة نظام Beijing
قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
قياس تركيز بروتين BCA
Beyotime BiotechnologyP0012S
التصوير الكيميائيSage Venture Technology Co.ChampChemi 910
الدوبامين هيدروكلوريدسيجما – AldrichPHR1090
التوازن الإلكترونيShanghai OHAUS Instrument Co.مجموعات AR-2140
ELISA ل IL-1 & beta ؛مجموعات COIBO BiotechnologyCB10018-FI
ELISA ل TNF- & alpha ؛COIBO BiotechnologyCB10148-FI
GAPDH الأجسام المضادةتقنية إشارات الخلية5174S
GraphPad Prism 5.0GraphPad البرمجيات الإحصائية ، بوسطن ،
MA ، الولايات المتحدة الأمريكية ، www.graphpad.com		بريزم 5.0
سائل عالي الأداء
كروماتوغرافيا &ndash ؛ الكشف الكهروكيميائي
(HPLC & ndash ؛ ECD)		GL Sciences ، Ibaraki ، اليابانED723
جهاز الطرد المركزي عالي السرعة للتجميدBeijing Dalong Xingchuang
Experimental Instrument Co.		D3024R
HPLC – ECDGL SciencesED723
HSYALuye Pharma Group Ltd.LY202206
صورة QuantGE Healthcare ، طوكيو ، اليابانLAS 4000
Lamin B1تقنية إشارات الخلاياالمضادة 13435S
LPSSigma & ndash ؛ AldrichL2630
مجهرLeica ، WetzlarDM1000LED
المجهرLeica ، ألمانياDM1000LED
ملصقات الإنزيم متعددة الوظائفShanghai Meigu Molecular Instrument Co.SpectraMax النموذج
NF-& كابا; بالأجسام المضادة خلية الإشاراتالتكنولوجيا 8242S
Noldus البصرية XT نظامبكين نولدوس التكنولوجيا الحيوية المحدودةEthoVision XT15
مجموعة استخراج البروتين النووية والسيتوبلازمية
Beyotime BiotechnologyP0028
PMSFBeyotime BiotechnologyST506
TAK-242Merck614316
ترموستاتشركة Shenzhen Galaxy Instrumentation Co.12810129
الأجسام المضادة TLR4Abcamab13556
الزردالمركز الشمالي للحيوانات الوطنية
الزرد نموذج		AB سلالة
أسماك الزرد إعادة تدوير نظام المياهبكين Aisheng التكنولوجيا الحيوية المحدودة.ESEN-AW-S1

المراجع

  1. Lazdon, E., Stolero, N., Frenkel, D. Microglia and Parkinson's disease: Footprints to pathology. J Neural Transm. 127 (2), 149-158 (2020).
  2. Block, M. L., Zecca, L., Hong, J. S. Microglia-mediated neurotoxicity: Uncovering the molecular mechanisms. Nat Rev Neurosci. 8 (1), 57-69 (2007).
  3. Wang, A., et al. Inhibition of NLRP3 inflammasome ameliorates LPS-induced neuroinflammatory injury in mice via PINK1/Parkin pathway. Neuropharmacology. 257, 110063(2024).
  4. Dhureja, M., Deshmukh, R. Impact of alogliptin on lipopolysaccharide-induced experimental Parkinson's disease: Unrevealing neurochemical and histopathological alterations in rodents. Eur J Pharmacol. 975, 176635(2024).
  5. Jiang, S. Y., et al. Mefloquine targets NLRP3 to reduce lipopolysaccharide-induced systemic inflammation and neural injury. EMBO Rep. 24 (10), e57101(2023).
  6. Lal, R., et al. Experimental models of Parkinson's disease: Challenges and Opportunities. Eur J Pharmacol. 980, Article 176819 (2024).
  7. Wang, T., et al. Hydroxysafflor Yellow A attenuates lipopolysaccharide-induced neurotoxicity and neuroinflammation in primary mesencephalic cultures. Molecules. 23 (5), 1210(2018).
  8. Yang, X., et al. Protective effect of hydroxysafflor yellow A on dopaminergic neurons against 6-hydroxydopamine, activating anti-apoptotic and anti-neuroinflammatory pathways. Pharm Biol. 58 (1), 686-694 (2020).
  9. Feng, X., et al. Hydroxysafflor yellow A regulates lymphangiogenesis and inflammation via the inhibition of PI3K on regulating AKT/mTOR and NF-κB pathway in macrophages to reduce atherosclerosis in ApoE-/- mice. Phytomedicine. 112, 154684(2023).
  10. Liu, S., et al. Hydroxysafflor yellow A inhibits TNF-α-induced inflammation of human fetal lung fibroblasts via NF-κB signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2019, 4050327(2019).
  11. Liang, L., et al. Inhibitive effect of TAK-242 on Tenon's capsule fibroblasts proliferation in rat eyes. Int J Ophthalmol. 12 (11), 1699-1707 (2019).
  12. Zhao, Y., et al. Rosmarinic acid protects against MPTP-induced dopaminergic neurotoxicity in zebrafish embryos. Toxicol In Vitro. 65, 104823(2020).
  13. Monje, M. L., Toda, H., Palmer, T. D. Inflammatory blockade restores adult hippocampal neurogenesis. Science. 302 (5651), 1760-1765 (2003).
  14. Batiha, G. E., et al. Commiphora myrrh: A phytochemical and pharmacological update. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 396 (3), 405-420 (2023).
  15. Al-Kuraishy, H. M., et al. Sleep disorders cause Parkinson's disease or the reverse is true: Good GABA good night. CNS Neurosci Ther. 30 (3), e14521(2024).
  16. Alrouji, M., et al. Role of uric acid in neurodegenerative diseases, focusing on Alzheimer and Parkinson disease: A new perspective. Neuropsychopharmacol Rep. 44 (3), 639-649 (2024).
  17. Jankovic, J. Parkinson's disease: Clinical features and diagnosis. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 79, 368-376 (2008).
  18. Al-Kuraishy, H. M., et al. Parkinson's disease risk and hyperhomocysteinemia: The possible link. Cell Mol Neurobiol. 43 (6), 2743-2759 (2023).
  19. Al-Kuraishy, H. M., et al. The classical and non-classical axes of renin-angiotensin system in Parkinson disease: The bright and dark side of the moon. Ageing Res Rev. 94, 102200(2024).
  20. Hou, S., et al. Dopamine is produced in the rat spinal cord and regulates micturition reflex after spinal cord injury. Exp Neurol. 285, 136-146 (2016).
  21. Kalia, L. V., Lang, A. E. Parkinson's disease. Lancet. 386, 896-912 (2015).
  22. Hirsch, E. C., Standaert, D. G. Ten unsolved questions about neuroinflammation in Parkinson's disease. Mov Disord. 36, 16-24 (2021).
  23. Hussey, S. E., et al. TAK-242, a small-molecule inhibitor of Toll-like receptor 4 signalling, unveils similarities and differences in lipopolysaccharide- and lipid-induced inflammation and insulin resistance in muscle cells. Biosci Rep. 33, e00098(2012).
  24. Heidari, A., Yazdanpanah, N., Rezaei, N. The role of Toll-like receptors and neuroinflammation in Parkinson's disease. J Neuroinflamm. 19, 135(2022).
  25. Zhao, Z., et al. Fecal microbiota transplantation protects rotenone-induced Parkinson's disease mice via suppressing inflammation mediated by the lipopolysaccharide-TLR4 signaling pathway through the microbiota-gut-brain axis. Microbiome. 9, 226(2021).
  26. Sun, M. F., Shen, Y. Q. Dysbiosis of gut microbiota and microbial metabolites in Parkinson's disease. Ageing Res Rev. 45, 53-61 (2018).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

TLR4 NF KappaB
الفيديو قريباً
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.