مقالة منهجية

تصنيع مصفوفة دماغية قابلة للتوسع قابلة للتخصيص عبر مراحل النمو

DOI:

10.3791/68638

⸱

فبراير 20, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Spinal Cord and Brain Injury Research Center, Department of Physiology, College of Medicine, University of Kentucky, 2Department of Biomedical Engineering, College of Engineering, University of Kentucky, 3Department of Neurosurgery, University of Kentucky

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم وصف طريقة مبتكرة لبناء مصفوفات دماغية قابلة للتوسع لقطع شرائح الإكليل أو السهمية لتطبيقها على الخنازير الوليدة. يستخدم هذا النهج الاقتصادي صفائح أكريليك منحوتة باستخدام قوالب من قالب دماغ بجل الأغاروز، ويطبق على عدة أنواع، ويسمح بالتوسع لاستيعاب نمو الدماغ.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الاهتمام المتزايد باستخدام الخنازير الصغيرة حديثة الولادة كنموذج دراسي لتطور حديثي الولادة وعلم الأمراض أثار الحاجة إلى مصفوفة دماغية لاكتساب الأقسام النسيجة بدقة. ومع ذلك، فإن النمو السريع لدماغ حديثي الولادة يحد من فائدة المصفوفات التجارية المتاحة إلى نافذة تطور ضيقة. لذلك، تم تطوير طريقة بناء مصفوفة دماغية قابلة للتعديل. أولا، وضع وعاء زجاجي على الثلج الرطب، ووضعت طبقة من جل الأغاروز بنسبة 4٪ في القاع. بعد ذلك، تم وضع دماغ مثبت بالفورمالين على هذه الطبقة ومزين بجل أغاروز بنسبة 4٪. بعد أن تصلب الهلام، تم إزالة الجل فوق الدماغ بعناية، وتم استخراج الدماغ. تم ملء التجويف بجل أغاروز بنسبة 4٪ مع 2٪ حبر هندي. بعد التصلب، تمت إزالة كتلة الجل وتقطيعها إلى السماكة المطلوبة (2 مم أو 5 مم) والاتجاه (التاجي أو السهمي) لطباعة قوالب الدماغ على ورق مقياسي. تم نسخ القوالب إلى سلسلة من ألواح الأكريليك الشفافة (بسماكة 2 مم أو 5 مم) وقطعها وفقا لذلك على منشار شريط. وأخيرا، تم تجميع الألواح وتثبيتها بثلاث مجموعات من البراغي والصواميل عبر فتحات محاذاة محفورة مسبقا لبناء مصفوفة دماغية مخصصة. يتم توضيح بناء مصفوفات الإكليل والسهمي لدماغ خنزير صغير في اليوم الخامس بخطوات 2 مم ومصفوفة إكليل لأدمغة اليوم 32-38 بعد الولادة بخطوات 5 ملم. عن طريق إضافة أو إزالة ألواح أكريليك مناسبة، تم تعديل المصفوفة لتتناسب مع أحجام أدمغة الخنازير الصغيرة. وهكذا، تم تقديم طريقة بسيطة وفعالة من حيث التكلفة لتخصيص مصفوفات الدماغ لأحجام مختلفة من الحيوانات الكبيرة إلى مجتمع البحث العصبي.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تطور دماغ الخنازير الصغيرة يحاكي إلى حد كبير نمو دماغ البشر 1,2,3,4. لذا، هناك اهتمام متزايد باستخدام الخنازير الصغيرة في الدراسات ما قبل السريرية حول اضطرابات النمو العصبي، وأمراض حديثي الولادة والأطفال، والإصابات (الشكل 1A,B)5,6,7,8,9,10. كما هو موضح في الشكل 1، فإن الخنزير الصغير، كنموذج حيواني كبير، لديه جمجمة ودماغ أقرب إلى حجم الجنين البشري الخدج (الشكل 1A,B)، بينما جماجم الفأر والجرذ البالغة أصغر بمقدار مقادين على الأقل.

ومع ذلك، هناك تحديات في استخدام الثدييات الأكبر حجما في الأبحاث الطبية الحيوية مقارنة بالنماذج الأكثر استخداما للفئران. تنمو أدمغة الخنازير الوليدة بسرعة خلال الأشهر الثلاثة الأولى بعد الولادة. في أول خمسة أسابيع من الحياة، يتضاعف وزن دماغ الخنزير الصغير تقريبا ويضاعف حجمه ثلاث مرات (الشكل 1C)4، 11، 12، 13. خلال الفترة من p5 إلى p38، كان نمو وتطور التلمات والجروح الدماغية ملحوظة (الشكل 1C). كان وزن وحجم دماغ الخنزير الصغير p5 29.5 جرام و18.9 مل، بينما كان وزن دماغي p32 51.4 و52.6 جم، و49.6 و53.5 مل على التوالي. عند 38 يوما، نما وزن الدماغ إلى 53.7 جرام و52.5 مل، مما يمثل زيادة بنسبة 80٪ في الوزن وزيادة بنسبة 170٪ في الحجم مقارنة ب p5. يشكل هذا النمو السريع لدماغ الخنازير الوليدة تحديا للتقسيم النسيجي الدقيق لأدمغة الخنازير الصغيرة من أعمار أو سلالات أو أجناس مختلفة، باستخدام مصفوفة واحدة.

تكلفة مصفوفات الدماغ التجارية للخنازير الصغيرة تتراوح تقريبية بين 1000 دولار إلى 3600 دولار لكل واحدة، وهي متوفرة بحجم واحد فقط، مصممة للاستخدام للخنازير الصغيرة التي تبلغ من العمر أسبوعين أو أقل. على الرغم من وجود بعض المنشورات التي استخدمت تقنية المسح ثلاثي الأبعاد والطباعة ثلاثية الأبعاد لإنشاء مصفوفات دماغية مختلفة لأسماك الزرد والفئران والطيور14، 15، 16، فإن هذه المصفوفات على نطاق صغير نسبيا. لا توجد سلسلة تصوير بالرنين المغناطيسي أو مخطط نمو مفصل لأدمغة الخنازير الحديثة، خاصة لمن هم في عمر أسبوعين أو أقل. لذلك، أنشأنا عدة قوالب لشرائح الدماغ باستخدام أدمغة جمعت بين اليوم الخامس واليوم 38، والتي تم بناء على نظام مصفوفة الدماغ القابلة للتعديل.

يصف هذا البروتوكول طريقة مبتكرة لإنشاء قوالب أدمغة خنازير صغيرة حديثي الولادة وتطوير مصفوفة دماغية قابلة للتخصيص تعتمد على ألواح الأكريليك يمكن استخدامها في التقسيمات الإكليلية أو السهمية للأدمغة عبر طيف من الأحجام.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في هذا المقال، تم الحصول على أدمغة الخنازير الأربعة وإعدادها للتلوين النسيجي بعد القتل الرحيم الإنساني وفقا لبروتوكول تمت الموافقة عليه من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية (IACUC) في جامعة كنتاكي لدراسة منفصلة. تمت الموافقة على جميع الإجراءات على الحيوانات الموضوعة، وتم اتخاذ الرعاية المناسبة للحيوانات لتقليل التوتر أو الألم المرتبط بالعلاجات أو القتل الرحيم.

1. الحيوانات

  1. احصل على أربعة خنازير ذكور حديثة الولادة (اليوم الرابع بعد الولادة، p4) (وزن الجسم 1.5-1.8 كجم) بخلفية وراثية 62.5٪ لاندريس، 25٪ كبيرة أبيض، و12.5٪ يوركشاير.
  2. ضع الحيوانات معا في غرفة مخصصة واحدة داخل حظيرة خنازير، مع دعم مصباح تدفئة وأرضية مغطاة بالمناشف. أطعمهم ببديل الحليب بإعطاء الوقت المناسب للأسبوع الأول ثم انتقل تدريجيا إلى طعام الحبيبات بعد 2-3 أسابيع.
  3. راقب النشاط الفسيولوجي ووزن الجسم وأجر فحوصات رنين مغناطيسي أسبوعية تحت تخدير الإيزوفلوران.
  4. القتل الرحيم بجرعة زائدة من البنتوباربيتال وبيرفيوز عبر القلب باستخدام محلول ملحي مهيبارين، يليه فورمالين معادل 10٪ متعادل.
  5. قم بتشريح الدماغ من الجمجمة17، ثم ثبته بالفورمالين طوال الليل، ثم ضع 30٪ سكروز في PBS لمدة 3 أيام للحفاظ على التجميد.

2. تشكيل جل الأجاروز

  1. اغمر وعاء زجاجي في دلو من الثلج الرطب حتى يصل إلى نصف ارتفاعه (الشكل 2A).
  2. استخدم شريطا بلاستيكيا ثقيلا كبطانة للحاوية وتأكد من تغطية الجزء السفلي والجدران الجانبية بالكامل مع ترك الطرفين على بعد لا يقل عن 5 سم فوق الحافة العلوية.
  3. سخن 150 مل من PBS في كأس زجاجي إلى 90 درجة مئوية على صفيحة ساخنة متحركة باستخدام مغناطيس وأضف وأذيب تدريجيا 6 جرام من الأجاروز لتكوين 4٪ جل أغاروز في PBS.
  4. صب طبقة بسماكة 0.5-1 سم في الحاوية الزجاجية (انظر الشكل 2B) وانتظر حتى تتصلب.
  5. ضع طبقة رقيقة من الزيت المعدني موضعيا على الدماغ (الشكل 2C) وضع الدماغ على طبقة الهلام (الشكل 2D).
  6. اترك محلول الأغاروز يبرد إلى 50 درجة مئوية. قم بدمج الدماغ بهلام الأغاروز المبرد (الشكل 2E) ودعه ليتصلب (الشكل 2F)، والذي يستغرق عادة ~10 دقائق على الجليد الرطب.
  7. قم بإزالة الطبقة العلوية من جل الأجاروز فوق الدماغ بعناية (الشكل 2G) باستخدام مسبار جراحي واستخرج الدماغ من العفن المتصلب (الشكل 2H,I).
  8. سخن 98 مل من PBS في كأس زجاجي آخر إلى 90 درجة مئوية على صفيحة ساخنة للتحريك باستخدام محرك مغناطيسي، أضف 4 جرام من الأجوروز و2 مل من حبر الهند، واتركه يتحرك ويخلط جيدا. صب 4٪ أغاروز مع 2٪ حبر هندي في التجويف الذي تركه الدماغ المستخرج (الشكل 2J) حتى يمتلئ ودعه يتصلب على الجليد الرطب لمدة 15 دقيقة (الشكل 2K).
  9. باستخدام الأجزاء المتدلية من الشريط البلاستيكي، ارفع الشريط البلاستيكي لإزالة كتلة الأغاروز بالكامل من الحاوية (الشكل 2L).

3. تقطيع كتل الأغاروز ونسخ القوالب إلى ورق مقياس

  1. لحماية الورق من الرطوبة أثناء عملية التقطيع، ضع قطعة ورق مقياس واحدة بين لوحين أكريليكيين شفافين بسماكة 0.76 مم (0.03") (الشكل 3A)، وضع لوح الورق والأكريليك المصفح بالقرب من حافة المنضدة.
  2. ثبت مربعات الزوايا على الطاولة باستخدام مشابك في وضع مناسب للحفاظ على لوحين أكريليكيين بسماكة 5 مم واقفين وتثبيت كتلة الجل بإحكام بينهما مع الاتجاه المطلوب (السهمي في الشكل 3). تأكد من محاذاة حافة كل لوحة أكريليك عمودية على نفس الخط على ورق القياس لاستخدامها كمرجع لتقطيع كتلة الجل. استخدم وزنا لتثبيت كتلة الجل في الطرف المقابل لمكان التقطيع (الشكل 3B).
  3. باستخدام ورق القشرة الموجود في الأساس كدليل، حرك كتلة الجل للأمام من بين ألواح الأكريليك عند الخطوة المطلوبة (2 مم أو 5 مم)، أمسك شفرة الميكروتوم بكلتا يديك، وقطع الجزء الذي يتجاوز الحافة الأمامية لللوحة الأكريليكية (الشكل 3B).
  4. اجمع كل شريحة (الشكل 3C)، وضعها على ورق مقياس منفصل (الشكل 3D)، اضغط بلطف على الجزء المصبوغ بالحبر الهندي من القالب على ورق المقياس لنقل الإطار (الشكل 3E)، تتبع مخطط قسم الجل بالكامل باستخدام قلم، أزل قسم الجل، ورسم مخطط بالحبر الهندي أيضا باستخدام قلم (الشكل 3F). انتبه للحفاظ على اتساق اتجاه كل شريحة والقالب المنسوخ.
  5. كرر الخطوات 2.3 و2.4 حتى يتم نسخ جميع قطع الجل إلى ورق السلم وترقيمها بالتسلسل. أعد فحص الشرائح وبصماتها (صور تمثيلية للشرائح التاجية والمطبوعات في الشكل 3G,H).

4. نحت على ألواح الأكريليك

  1. اقطع الأخاديد على لوح الأكريليك الكبير باستخدام سكين قطع من البلاستيك الزجاجي وكسر الألواح الكبيرة إلى قطع بحجم 10 × 8.5 سم.
    ملاحظة: يعتمد العدد الكلي للقطع على حجم الدماغ، وسماكة الشريحة المطلوبة، واتجاه التقطيع. بشكل عام، نجهز 25 قطعة من صفائح الأكريليك بحجم 2 مم إما لمصفوفة إكليلية أو سهمية لأدمغة خنازير حديثي الولادة، و15 قطعة من صفائح 5 مم للأدمغة الأكبر لتسهيل التعامل معها.
  2. علامة بارزة: ثلاث ثقوب تثبيت على لوحة الأكريليك عند إحداثيات x، y كما تم قياسها من الزاوية السفلية اليسرى (بالمليمتر): (11، 42); (45, 15); و (88، 42).
  3. ثبت ألواح الأكريليك بدعم من مربعات زاوية ومشابك على منصة مكبس الحفر. احفر ثلاث ثقوب تثبيت عند الإحداثيات المذكورة سابقا باستخدام رأس مثقاب من صفيحة الأكريليك (الشكل 4A). ارسم خط لوني على الجانب الأيمن من جميع الألواح لتحديد الاتجاه.
  4. قم بإزالة الفيلم الواقي من لوح الأكريليك وضعه فوق القالب على ورق الميزان، محاذاة الحافة العلوية للطبق الأكريليكي مع الخطوط العلوية للقالب الذي تم نسخه على ورق الميزان. ارسم مخطط الدماغ على لوحة الأكريليك باستخدام قلم قلم دائم (الشكل 4B). ضع علامة على اللوحة بشكل متسلسل كما في القالب.
  5. اقطع لوحة الأكريليك على منشار الشريط على طول خطوط القالب (الشكل 4C). بدلا من ذلك، استخدم أداة دوارة مع مجموعة قطع متعددة الأغراض ورأس نحت خشبي لإزالة المناطق غير المرغوب فيها.
  6. قم بتلميع حافة القطع باستخدام أداة الدوران باستخدام رأس صنفرة تلميع لتنعيم الحواف التي تركتها أداة القطع (الشكل 4D).
  7. أعد التحقق من القطع على ألواح الأكريليك مقابل القالب على ورق المقياس (الشكل 4E). قم بتقليم وتلميع إذا لزم الأمر.
  8. قم بتجميع المصفوفة مسبقا عن طريق تكديس الألواح المقطوعة بترتيب متسلسل وفحص محاذاة الألواح (الشكل 4F).

5. تجميع وتوسيع مصفوفة الدماغ

  1. ضع ثلاث غسالات بين ألواح الأكريليك، كل واحدة مركزة على فتحة تثبيت واحدة (الشكل 5A). قم بلصقها حول فتحات التثبيت باستخدام الغراء الفائق على نفس جانب جميع ألواح الأكريليك لتقليل وقت التجميع (الشكل 5A).
  2. قم بتكديس ألواح الأكريليك بشكل متسلسل، وأدخل براغي من الفولاذ المقاوم للصدأ عبر كل فتحة تثبيت لتجميع المصفوفة، وشد الصواميل لتثبيت التثبيت (الشكل 5A).
  3. طبق التلميع النهائي للحواف المقطوعة التي ستلامس الدماغ لتملمس الألواح على الأرض.
  4. قم بترميز لون أعلى المصفوفة للمساعدة في تحديد الخطوات أثناء التقطيع. تناوب تلوين حواف سطح اللوحة بالأسود والأحمر ثم الفارغة لتشكيل نمط. كرر هذه الخطوة حتى يتم ترميز جميع الألواح بنفس النمط (الشكل 5).
  5. لتعديل الهندسة أو تغيير حجم التجويف ليتناسب بشكل أفضل مع بعض الأدمغة، قم بإزالة أو إضافة ألواح أكريليك مختارة (الشكل 5B) للتكيف مع أحجام الأدمغة المختلفة، مما يزيد بشكل كبير من مرونة هذه المصفوفات ويوفر المواد والجهد.

6. القطع الإكليفي أو السهمي للدماغ

  1. لف أحد طرفي شفرة الكريوستات عالية الارتفاع بشريط لاصق مختبر لمسافة لا تقل عن 2 سم لحماية يد المستخدم. ضع الدماغ بأمان في تجويف المصفوفة. عند إمساك الطرف الملفوف من النصل، ضع الشفرة بعناية بين ألواح الأكريليك في المصفوفة، ثم قطع الأدمغة إلى شرائح تاجية أو سهمية مع دعم الدماغ وتثبيته باليد الأخرى (الشكل 6A,B).
    ملاحظة: تحذير: 1) بما أن كل جزء من أجزاء الدماغ له نسيج مختلف بعد تثبيت الفورمالين، يجب توخي الحذر لتطبيق ضغط متساو على النصل. 2) علاوة على ذلك، دماغ الخنزير الصغير كبير، لذا من الأفضل استخدام حركة تقطيع لقطع الدماغ بدلا من حركة "دفع للأسفل" المباشرة. 3) من الضروري إبقاء الدماغ متوافقا بإحكام مع المصفوفة بدعم اليد الأخرى أثناء القطع لتجنب أي ميل أو تغيير في اتجاهها. يجب تجنب الضغط المفرط على الدماغ على المصفوفة في جميع الأوقات.
  2. ضع جميع الشرائح في طبق مملوء ب PBS أو صينية من الفولاذ المقاوم للصدأ مملوءة ب PBS. ضع الشرائح بعناية في نفس الاتجاه (الشكل 6C,D) واحفظ أو استمر حسب الحاجة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم إعدام خنزير صغير واحد بجرعة زائدة من بنتوباربيتال في سن الخامسة. أظهرت الحيوانات الثلاثة الأخرى نشاطا فسيولوجيا طبيعيا وزيادة وزن مماثلة (وصل إلى 7.44-8.4 كجم). خضعت خنزيرتان صغيرتان لفحص الرنين المغناطيسي أسبوعيا تحت تخدير إيزوفلوران حتى تم إعدامهما على p32. ظل الخنزير الرابع ساذجا حتى القتل الرحيم عند الصفحة 38.

يمكن رؤية تشابه حجم الرأس بين الخنزير الصغير والجنين البشري في الشكل 1A,B، وهو أكبر على الأقل بمرتبين من حجم القوار...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يقدم هذا البروتوكول المنهجية لإنشاء مصفوفات دماغية ميسورة التكلفة وسهلة البناء يمكن استخدامها للمساعدة في تقطيع دماغ الخنزير الصغير أو أي نوع آخر من الحيوانات الكبيرة عند الاتجاه والسمك المرغوبين. ومن المهم أنه على عكس المصفوفات التجارية "ذات الحجم الثابت" التي تعمل مع نطاق محدود فقط من أحجام الدماغ، فإن هذا النهج يسمح بتعديل أو توسيع المصفوفة بسهولة لتناسب مجموعة واسعة من أحجام الأدمغة. في هذا التقرير، تم توسيع مصفوفة مصممة لدماغ خنزير صغير بوزن 30 جرام بنجاح لاستيعاب دماغ أكبر بنسبة 80...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لا يوجد لدى المؤلفين تضارب مصالح للكشف عنها.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعم هذا العمل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) #R21-NS114771 (K.E.S.)، و#R56-NS117587، و#R01-EB028792، و#R01-HD101508، و#R21-HD091118، و#R41-NS122722، و#R42-MH135825 (G. Y.)، والجمعية الأمريكية للقلب (AHA) #16GRNT30820006 (G.Y.) و#14SDG20480186 (L.C.)، ومنطقة أولوية أبحاث علوم الأعصاب بجامعة كنتاكي (L.C.). تم شراء الخنازير الذكور حديثي الولادة الساذجة من خلال قسم الموارد الحيوانية المختبرية (DLAR) من مركز الخنازير في كلية الزراعة بجامعة كنتاكي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
برغي ماكينة رأس فيليبس من الفولاذ المقاوم للصدأ بحجم 1/4"-20 × 3-1/2" (25 قطعة)، خيوط خشنة، 18-8 (304) من الفولاذ المقاوم للصدأ، بواسطة قطارة بمساراتبولت دروبرhttps://www.amazon.com/
آلة فيليبس المقاوم للصدأ
-سقطاب بمسمار/dp/B07D1L8
7VB/ref=sr_1_2?crid=38M
PNERXG39Q3& الكلمات المفتاحية
=1٪2F4٪22+3.5+بوصة+
الفولاذ المقاوم للصداء+براغي & QID=16427
82626& س=صناعي sprefix
=1٪2F4+3.5+بوصة+stainless
+bolts٪2Cindustrial٪2C62
& sr=1-2
علبة 10 من 8 × 10" ألواح PET/ألواح البليكسي جلاس 0.03" سميك كالبالميhttps://www.amazon.com/dp
/B084P4YSST/?coliid=I1S59
82XD9P6CB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
3 عبوات من صفيحة الأكريليك الشفافة 3/16" (4.5 مم) 8" × 12" من البلاستيك المصبوب (0.177") الحجم الاسمي السميك AZMشاشات AZMhttps://www.amazon.com/4-5mm
-أكريليك-بليكسجلاس-اسم-AZM
/dp/B082CGYSCK/ref=sr_1_12?
dchild=1& الكلمات المفتاحية = الأكريليك + الورقة < ال BR / > ٪ 2C + 4.5mm & qid=1617572206& SR=8-12
3  شيم مسطح لتقصير الكتف  غسالة، 18-8 من الفولاذ المقاوم للصدأ، حجم مسمار 1/2"، 0.501" معرف، 0.750" OX، 0.016" سمكة (عبوة من 50)أجزاء صغيرةhttps://www.amazon.com/Shoulder-
تقصير الغسالة-الفولاذ المقاوم للصدأ اللامعة
l-0-251/dp/B004K1FFZA/ref=sr_1_
3?crid=1K8LO0VN4GLE& dchild=1
& الكلمات المفتاحية = الغسالات والمواد pd_rd_r=
0FFe510E-ABE5-4eae-b975-ed945
08AC71A& pd_rd_w=HuED5& pd_r
d_wg=fixK7& pf_rd_p=b4950e17-f
2f6-494c-bba5-69a9d0aa3887& pf
_rd_r=BRVGS2378CHD1WBC2E
4P& pid=3tntl8w& qid=1617573484
& refinements=p_n_feature_twenty
_browse-bin٪3A17420898011٪2
Cp_n_feature_twenty-one_browse
-bin٪3A19047154011& s=إندستريا
L& sprefix=washer٪2Bfor٪2B٪2C
aps٪2C202& sr=1-3& th=1
صفيحة ذات 6 آبارأفانتور76520-650
صامولة سداسية 8-32، صامولة سداسية بخيط خشن، صامولة سداسية من الفولاذ المقاوم للصدأ 18-8، لون فضي، ؟100 قطعة؟فوليركريغhttps://www.amazon.com/Fullerkreg
-كمية ساطعة من الماكينة/
dp/B078S3J765/ref=sr_1_4?crid=4
VSSI5B9MJ2D& الكلمات المفتاحية = 1٪2F4
٪22-20+بوصة+ستانلس+فولاذ+
سداسي+صامولة+خشن+خيط& qid=1
642782823& س=صناعي sprefix
=1٪2F4+-20+بوصة+stainless+ste
el+hex+nut+coarse+thread٪2Cin
dustrial٪2C61& sr=1-4
سبيكة الألمنيوم بمربعات تحديد الموقع بزاوية 90 درجةهينمايhttps://www.amazon.com/Positioni
ng-الألمنيوم-نجارة-كارب
إنتر-غلام/dp/B08294FZ7L/r
ef=sr_1_6?crid=1I97TLVRYREPQ
& dchild=1& الكلمات المفتاحية = زاوية + SQU
are& qid=1625683905& sprefix=co
rner+squ٪2Caps٪2C182& SR=8-6
الأغاروزأفانتور97062-244
منشار الشريطسكيل
بديل حليب بيرثرايت (بايبستون)بايبستونSKU  8229https://pipevet.com/birthright-baby-pig-milk-replacer
الدلوأفانتور89233-340
دريميل 4300-5/40 مجموعة أدوات دوارة عالية الأداءدريميلhttps://www.amazon.com/dp/B0
1M1SJNVU/?coliid=IMLRI62ZL
JTSJ& colid=2XZ304Y9M7PV7
& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
رؤوس الحفر للبلاستيك (أكريليك، بليكسي جلاس، ABS، ليكسان، بولي كربونات، PVC)متى ما زلتhttps://www.amazon.com/dp/B
07D1B3B51/?coliid=I26RS6UP
UJ3P1Y& colid=2XZ304Y9M7P
V7& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
زجاج بيكر × 2أفانتور470335-854
حاوية زجاجيةأطباق ويتون الملطخةويتون<سوب> وريغ؛   900303
دفتر ملاحظات ورق رسم بياني: خطوط شبكة رمادية فاتحة بسمك 1 مم و10 مم (مقياس، 120 صفحة):https://www.amazon.com/
دفتر ملاحظات الرسم البياني
مزدوج الوجه غير مثقوب
/dp/154319026X/ref=sr_1_13?
dchild=1& الكلمات المفتاحية = مليمتر
+ ورق& qid=1617634163& SR=8-13
شفرة سكين ميكروتوم من هاكر إنسترومنتسآلات الهاكر
شريط بلاستيك ثقيلأفانتور89072-136
إنديا إنكسبيدبول سوبر بلاك
مشابك إيروين ذات القبضة السريعة، بيد واحدة، بار صغير، 6 إنش، 4 عبوات (1964758)إيروينhttps://www.amazon.com/IRWIN
-QUICK-GRIP-1964758-One-
يدوية-مشبك/dp/B001DSY4
QO/ref=sr_1_5?crid=3NJ320
86LJCS6& dchild=1& الكلمات المفتاحية
=مشابك + ل + النجارة& QID
=1617634545& بادئة = clamp٪
2Caps٪2C184& sr=8-5
Kreg KHC-مشبك وجه بريميوم كريجhttps://www.amazon.com/KREG
-KHC-PREMIUM-Kreg-Face-
Clamp/dp/B001DC9UR8/ref=sxin
_11?ascsubtag=amzn1.osa.27
eddff2-544b-4c29-9242-220b3f
760cb0. ATVPDKIKX0DER.en_
الولايات المتحدة والولايات المتحدة creativeASIN=B001DC9UR
8& crid=3NJ32086LJCS6& cv_ct_
cx=مشابك + ل + نجارة & CV
_ct_id=AMZN1.OSA.27eddff2-544b
-4C29-9242-220B3F760CB0. ATVP
DKIKX0DER.en_US& cv_ct_pg=
البحث والبحث cv_ct_we=asin& cv_ct_wn
=OSP-مصدر واحد-earns-comm&
dchild=1& الكلمات المفتاحية = المشابك + ل +
النجارة & linkCode=oas& pd_r
d_i=B001DC9UR8& pd_rd_r=eeaf7
178-eee3-4399-862a-479fffb6cfc3&
pd_rd_w=W3Inj& pd_rd_wg=PKPUl&
pf_rd_p=e666d5aa-04ca-46aa-86b0-
07ac28e037d4& pf_rd_r=22RKP4S4S
SS5PYDM2ZFD& qid=1617634545& بادئة s
=المشبك ٪2Caps٪2C184& SR=1-
2-64F3A41A-73CA-403A-923C-8152C4
5485FE & الوسم=هذا البيت القديم 05-20
شريط المختبرأفانتور76276-016
لوكتايت 1363589 زجاجة 4 جرام، لاصق التحكم في الجل فائق الجلو، 3 عبواتلوكتايتhttps://www.amazon.com/Loctite-
1363589-4-جرام-تحكم-لاصق/
dp/B01HPT0AWQ/ref=sr_1_13?
المفتاح=superglue+power+glue
+ل+بلاستيك& qid=1642782991& s
بادئة = superglue٪2Caps٪2C83& SR=8-13
شفرات Microtome عالية الملف قابلة للتخلص منهاالعلم الأمثلhttps://www.amazon.com/Optimal
-علم ميكروتوم عالي الملف
-قابل للتخلص من/dp/B08MCSN6SL/ref
=sr_1_1?dchild=1& الكلمات المفتاحية = hig
h+ملف تعريف + تبريد التبريد + شفرة & qid=16
17592221& sr=8-1
زيت المعادنسيغما-ألدرتشM8410-100 مل
PBSأفانتور97062-818
طرف الصنفرة اللامعة20 قطعة من لبات الكربيد 1/8" شانك
حبوب ما قبل البداية غير الطبية - #50 (بايبستون)بايبستونSKU  8228https://pipevet.com/pre-starter-pellet-non-med-50-hubbard
بطاقة القطع الزجاجية البيضاء 1170 Red Devilالشيطان الأحمرhttps://www.amazon.com/dp
/B000BZZ1D0/?coliid=I3C0K3
AKD3TS75& colid=XJ78FAXD8
5BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
أقلام تحديد شاربي الدائمة | علامات رأس الإزميلقلم واضحhttps://www.amazon.com/
علامات شاربي-بيرماننت-ماركرز
-Chisel-Classic/dp/B00006IFI
A/ref=sr_1_8?crid=2GD78WJ5COF
NN& الكلمات المفتاحية = دائم + ماركر
s + متنوعة + ألوان & QID=16427831
06& sprefix=دائم+علامات٪
2Caps٪2C129& SR=8-8
تحريك الصفيحة الساخنةكورنينغ100493-718
تحريك السحر العنصريVWR58948-138
ألواح أكريليك شفافة من STYLEZONE 10 قطع 8 × 10 بوصة 0.08 بوصة بسماكة 2 ممستايلزونhttps://www.amazon.com/dp/
B08GJYS4TT/?coliid=I11RLE
V42BKEFB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
صينية الجراحةأفانتور10193-194
الثلج الرطبصنع في المختبر
رأس النقش الخشبيأدوات النحت الخشبية لأدوات التدويرhttps://www.amazon.com/
المتاجر/الصفحة/28E50A85-D8C
1-4669-8272-D5D435EA126F

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jelsing, J., et al. The postnatal development of neocortical neurons and glial cells in the Gottingen minipig and the domestic pig brain. J Exp Biol. 209 (Pt 8), 1454-1462 (2006).
  2. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Johnson, R. W. Brain growth of the domestic pig (Sus scrofa) from 2 to 24 weeks of age: a longitudinal MRI study. Dev Neurosci. 34 (4), 291-298 (2012).
  3. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Nickolls, A., Johnson, R. W. Magnetic resonance imaging of the neonatal piglet brain. Pediatr Res. 71 (2), 179-184 (2012).
  4. Dobbing, J. The later growth of the brain and its vulnerability. Pediatrics. 53 (1), 2-6 (1974).
  5. Sorby-Adams, A. J., Vink, R., Turner, R. J. Large animal models of stroke and traumatic brain injury as translational tools. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 315 (2), R165-R190 (2018).
  6. Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. H. The pig model in brain imaging and neurosurgery. Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).
  7. Huang, C., et al. Speckle contrast diffuse correlation tomography of cerebral blood flow in perinatal disease model of neonatal piglets. J Biophotonics. 14 (4), 2021(2021).
  8. Dobbing, J., Sands, J. Quantitative growth and development of human brain. Arch Dis Child. 48 (10), 757-767 (1973).
  9. Lossi, L., D'Angelo, L., De Girolamo, P., Merighi, A. Anatomical features for an adequate choice of experimental animal model in biomedicine: II. small laboratory rodents, rabbit, and pig. Ann Anat. 204, 11-28 (2016).
  10. Lind, N. M., et al. The use of pigs in neuroscience: modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31 (5), 728-751 (2007).
  11. Andersen, A. D., et al. Delayed growth, motor function and learning in preterm pigs during early postnatal life. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 310 (6), R481-R492 (2016).
  12. Desantis, S., Minervini, S., Zallocco, L., Cozzi, B., Pirone, A. Age-related changes in the primary motor cortex of newborn to adult domestic pig Sus scrofa domesticus. Animals (Basel). 11 (7), 2019(2021).
  13. Pond, W. G., et al. Perinatal ontogeny of brain growth in the domestic pig. Proc Soc Exp Biol Med. 223 (1), 102-108 (2000).
  14. Huang, C. C., Chen, Y. Y., Fang, Y. T., Chen, Y. C., Hung, C. M. Generating brain matrices for zebra finch brain sectioning using three-dimensional printing technology. J Neurosci Methods. 327, 108399(2019).
  15. Yamazaki, Y., Yuguchi, M., Honjo, B., Isokawa, K. Design and fabrication of customized brain slice matrices using CAD and 3D printing technology. PLoS One. 20 (1), e0317616(2025).
  16. Lattin, C. R., et al. A 3D-printed modular device for imaging the brain of small birds. J Neurosci Methods. 293, 183-190 (2018).
  17. Fleming, S. A., Monaikul, S., Mudd, A. T., Jacob, R., Dilger, R. N. Extraction and dissection of the domesticated pig brain. J Vis Exp. (170), e62030(2021).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة