تظهر هذه العملية نقل قشرة الظنبوب العرضية في الفئران، مما يمكن من التصور وتحليل إعادة التداخل الوعائي أثناء نقص التروية في الطرف.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
تظهر هذه العملية نقل قشرة الظنبوب العرضية في الفئران، مما يمكن من التصور وتحليل إعادة التداخل الوعائي أثناء نقص التروية في الطرف.
النقل العرضي للقشرة الظنبوبية (TTT) هو تقنية جراحية ناشئة تستخدم لتعزيز إعادة التوعية الدموية في الأطراف السفلية الإقفارية. يعرض هذا الفيديو نموذجا قابلا لإعادة إنتاج جرذان من TTT، ويفصل عملية الجراحة لإنشاء شظية عظم قشرية، وبروتوكول النقل، والتقييمات بعد العملية. يتيح هذا الإجراء النقل المسيطر عليه للأعلى والأسفل لجزء من العظم لتحفيز الاستجابات السببية للوعاء. تظهر صور الأشعة السينية الممثلة التي تم الحصول عليها في الأيام 1 و7 و12 بعد العملية، إلى جانب تصوير التروية الميكروأوعية الدموية التي أجريت في اليوم 19 بعد القتل الرحيم، حركة شظايا عظم واضحة وتحسن في تروية الأطراف بعد TTT.
يوفر هذا النموذج منصة عملية وقابلة للتكرار للتحقيق في الآليات الجزيئية وراء تكوين الأوعية الدموية الناتج عن TTT وتقييم الاستراتيجيات العلاجية المحتملة للأمراض الإقفاري. لبناء هذا النموذج، قمنا بمحاكاة إجراء TTT السريري في فئران سبراج-داولي، والذي تضمن ثلاث خطوات جراحية رئيسية: ربط الشريان الفخذي السطحي، إنشاء وتحريك شظية عظم قشرية، وتطبيق مثبت خارجي مخصص. على مدى 12 يوما، تم نقل الشظية تدريجيا إلى الأمام ثم إلى الوراء. أكد تصوير التروية زيادة في الأوعية الدموية في الطرف الإقفاري بعد اكتمال دورة النقل. بشكل عام، يحاكي هذا النموذج الموحد للفئران عن كثب إجراءات TTT السريرية ويوفر نظاما تجريبيا قيما لدراسة التحويل الميكانيكي، وتكوين الأوعية، وتجديد الأوعية الدموية في الحالات الإقفارية.
تتميز أمراض الإقفار في الأطراف السفلية، مثل تصلب الشرايين المستضبض (ASO)، والتهاب الأوعية الدموية المستضلة (TAO)، والقدم السكري (DF)، بتقييد تدفق الدم الشرياني إلى الأطراف السفلية 1,2. في المراحل المبكرة، يعاني المرضى عادة من العرج المتقطع وألم أثناء الراحة. مع تقدم المرض، يمكن أن يؤدي نقص التروية المطول إلى نخر الأنسجة، أو عدوى، وفي الحالات الشديدة، بتر الأطراف1. العلاجات القياسية الحالية - بما في ذلك العلاج الدوائي، والتدخلات الداخلية، والإجراءات الجراحية المفتوحة - غالبا ما تؤدي إلى فعالية محدودة، خاصة في المراحل المتقدمة من المرض3.
النقل العرضي لقشرة الظنبوب (TTT) هو استراتيجية علاجية مبتكرة لعلاج مختلف أمراض الإقفار في الأطراف السفلية.4. متجذرة في طريقة إليزاروف وقاعدة "الشد والإجهاد"5,6، تتضمن هذه التقنية إنشاء قطعة عظمية قشرية متحركة في عظم الساق من خلال قطع العظم. ثم يتم تطبيق قوة تشتيت مستمرة وبطيئة ومتحكم بها لتحفيز تجديد العظام والأوعية الدموية والأنسجة الرخوة المحيطة. تسهل هذه العملية التجديدية إعادة تأسيس الدورة الدموية الدقيقة وتساعد في استعادة توازن إمداد الأكسجين في الطرف المصاب. في النهاية، يؤدي TTT إلى تحسين تدفق الدم والتعافي الوظيفي في الأنسجة الإقفارية7.
تقنيات إعادة بناء الأوعية الدموية التقليدية لعلاج نقص التروية في الأطراف السفلية يمكن أن تعيد تدفق الدم في الشرايين الكبيرة في الساق، لكنها غالبا غير فعالة في إعادة تنشيط الشرايين الصغيرة في القدم أو تعزيز إصلاح وتجديد الأوعية الدقيقة التالفة، مما يحد من قدرتها على حل نقص التروية بشكلكامل. يطبق TTT باستمرار الجر على العظم والأنسجة الرخوة المحيطة، مما يحفز إفرارا قويا للعوامل الكيميائية والسيتوكينات9. تنظم هذه العوامل الكيميائية وظائف الخلايا الجذعية المختلفة، وفي الظروف الإقفارية، يتم إفراز بكثرة في الدورة الدموية. تقوم بتجنيد الخلايا الجذعية الداخلية بنشاط إلى مواقع الإصابة، مما يسهل إصلاح الأوعية الدموية وتجددها دون الحاجة إلى زراعة الخلايا الجذعية المباشرة. بفضل هذه المزايا، برز العلاج الثلاثي الدماغي كاستراتيجية علاجية واعدة لإقفار الأطراف السفلية، ويستخدم بشكل متزايد في علاج الحالات الإقفاري المتنوعة التي تؤثر على الأطراف السفلية 7,9,10.
على الرغم من أن الأرانب والكلاب تستخدم بشكل شائع في أبحاث TTT الأساسية، فإن نقص الأدوات التحليلية المناسبة لهذه الأنواع يحد من التحقيقات الميكانيكية. في المقابل، يقدم نموذج TTT للفئران توافقا أكبر مع تقنيات الجزيئات والتصوير المتاحة مع الحفاظ على العملية وانخفاض التكلفة، مما يجعله منصة أكثر سهولة وتكرارا للدراسات الميكانيكية. ومع ذلك، حتى الآن، لم تقم أي دراسة بوصف أو تقييم فعالية TTT بشكل منهجي في نموذج جرذان لنقص تروية الأطراف السفلية.
نموذج TTT للفئران يتطلب مهارات جراحية دقيقة محسنة بسبب صغر حجم الظنبوب ورقيقة قشرته، كما أن نطاق تشتيته محدود بسماكة القشرة. يجب أخذ هذه القيود العملية في الاعتبار عند تقييم ملاءمة النموذج لبيئات بحثية محددة.
في هذه الدراسة، طورنا نموذج TTT خاص بالفئران من خلال تكرار البنية الأساسية والمبادئ التشغيلية لجهاز النقل المستعرض السريري في الظنبوب. تم تحسين الإجراء بناء على بروتوكولات تم التحقق منها سريريا لضمان الجدوى والاتساق في الحيوانات الصغيرة. هدفنا هو إنشاء والتحقق من نموذج TTT موحد وقابل للتكرار للفئران، مناسب للتحقيق في تكون الأوعية الدموية والانتقال الميكانيكي في أمراض الأطراف الإقفارية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على جميع التجارب الحيوانية من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان في المستشفى الأول التابع لجامعة قوانغشي الطبية (معتمدة رقم 2025-E0642). تم إسكان ذكور فئران سبراج-داولي (300-350 جرام) في مركز أبحاث الحيوانات بجامعة قوانغشي الطبية تحت ظروف موحدة. تم توفير طعام طبيعي ومياه شرب نظيفة للفئران حسب الرغبة، وتم الحفاظ عليها على دورة ضوء وظلام صناعية لمدة 12 ساعة. تم الحفاظ على منشأة الحيوانات عند درجة حرارة محكومة تتراوح بين 20-26 درجة مئوية مع رطوبة نسبية تتراوح بين 40٪-70٪. تم تعقيم جميع الأدوات الجراحية جيدا قبل الاستخدام. معلومات مفصلة عن جميع المواد والكواشف المستخدمة في هذه الدراسة موضحة في الجدول 1.
تم إجراء القتل الرحيم عن طريق حقن داخل الصفاق لجرعة زائدة من بنتوباربيتال الصوديوم. تم تأكيد الوفاة من خلال توقف دائم في ضربات القلب والتنفس، وتمدد الحدقة، وغياب الاستجابة للمحفزات الضارة. تم إجراء جميع الإجراءات بواسطة أفراد مدربين لتقليل ضيق الحيوانات، وقد تمت مراجعة بروتوكول القتل الرحيم والموافقة عليه مسبقا من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية.
1. مثبت خارجي ل TTT
2. الإجراء الجراحي
3. المراقبة بعد العملية
4. بروتوكول نقل شظايا العظم
5. التقييم
ملاحظة: استخدم تقنيات التصوير لتقييم كل من موقع شظية العظم واستعادة تدفق الدم.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يوضح الشكل 3 إجراء بناء نموذج حيواني لنقص تروي الأطراف السفلية المعالج ب TTT. أما في أيدينا، فقد أظهر الإجراء معدل نجاح جراحي يقارب 90٪. كان العدد المحدود من الأعطال يعزى إلى حد كبير إلى مشاكل تقنية مثل ارتخاء المثبت الخارجي أو كسر شظايا العظم أثناء العملية، مما جعل التشتيت اللاحق غير ممكن. تم تأسيس النموذج من خلال كشف وربط الشريان الفخذي السطحي لتحفيز نقص التروية (الشكل 3A). بعد ذلك، تم تجهيز شظية عظم بطول 4 مم × 8 مم على الجانب...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم إجراء جميع الإجراءات التي تشمل التخدير والجراحة مع اهتمام دقيق بسلامة الحيوانات وإرشادات رعاية الحيوانات المؤسسية. تم تأكيد عمق التخدير قبل الجرح باستخدام اختبار انسحاب الدواسة أو اختبار انعكاسات القرنية، وتمت مراقبته بانتظام طوال الإجراء. تم توفير دعم حراري كاف (مثل وسادة تسخين) لمنع انخفاض حرارة الجسم، وتم تطبيق مرهم العيون لحماية القرنية أثناء التخدير المطول.
تشمل المخاطر المحتملة المرتبطة بالتخدير ضبطان التنفس، انخفاض حرارة الجسم، تأخر التعافي، والجرعة ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لا يوجد لدى المؤلفين مصالح متنافسة ليعلنوا عنها.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مسحب مستعرض دقيق | شركة تيانجين شينتشونغ للمعدات الطبية المحدودة | A61B17/66 | قم بسحب شظايا العظم |
| مثقاب عظام صغير | شركة يانتشنغ روياو للتكنولوجيا المحدودة | RA-II | لعملية حفر عظام الظنبوب |
| رأس مثقاب من الفولاذ المقاوم للصدأ بقطر 0.6 مم | شركة تشانغتشو بورشي للمعدات الطبية المحدودة | - | لعملية حفر عظام الظنبوب |
| سلك كيرشنر من نوع الخيط 0.8 مم | شركة تشانغتشو بورشي للمعدات الطبية المحدودة | - | لتثبيت شرائح العظام والمعيد |
| سلك كيرشنر من نوع خيوط 1.0 مم | شركة تشانغتشو بورشي للمعدات الطبية المحدودة | - | لتثبيت المسحب |
| الصوديوم البنتوباربيتال | شركة شنغهاي للأدوية القابضة المحدودة | - | لتخدير الحيوانات |
| مفتاح ألين | شركة تشانغتشو بورشي للمعدات الطبية المحدودة | - | لإصلاح البراغي |
| بوبرينورفين | شركة شنغهاي للأدوية القابضة المحدودة | لحيوان مسكنات الألم | |
| ميكروفيل | شركة فلو تك المحدودة | تصوير الحيوانات | |
| إيزوفلوران | شركة هيبي ييبين للأدوية المحدودة. | لتحفيز وصيانة التخدير الاستنشاق | |
| هيدروكلوريد ليدوكائين (0.5٪) | شركة هيبي ييبين للأدوية المحدودة. | يستخدم للتسرب الموضعي لتقليل الألم بعد العملية وتقليل تهيج الأنسجة أثناء العمليات الجراحية |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.