يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إنشاء نموذج لالتهاب الجرذان حول الزرع عبر وضع زراعة التيتانيوم في الفك العلوي وتحفيز الربط الجنثي Porphyromonas

429 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/69682

⸱

مارس 6, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Prosthodontics, The Affiliated Stomatological Hospital, Southwest Medical University, 2School of Stomatology, Southwest Medical University, 3Institute of Stomatology, Southwest Medical University, 4Orofacial Reconstruction and Regeneration Laboratory, Southwest Medical University, 5The First People's Hospital of Yibin, 6The Second People's Hospital of Deyang, 7Department of Periodontics & Oral Mucosal Diseases, The Affiliated Stomatology Hospital, Southwest Medical University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

أسست هذه الدراسة نموذجا للفئران لالتهاب ما حول الزرع باستخدام زرعات التيتانيوم في الفك العلوي، شمل خلع الأسنان، وزرع تركيبات التيتانيوم جراحيا، وتحفيز فقدان العظام الالتهابي عبر وضع رباط مشبع ب Porphyromonas gingivalis حول عنق الزرعة بعد الشفاء.

الملخص

يعد التهاب الزراعة المحيطية (PI) سببا رئيسيا لفشل زراعة الأسنان، ويتميز بآفات التهابية في الأنسجة الرخوة وفقدان تدريجي للعظم، مما يستلزم نماذج حيوانية موثوقة للأبحاث الميكانيكية والعلاجية. أسست هذه الدراسة نموذجا جديدا للفئران يجمع بشكل تآزري بين التهيج الميكانيكي والعدوى البكتيرية لمحاكاة أفضل لمرض العدوى البشرية. بعد خلع الأضراس الأولى في الفك العلوي لدى 12 ذكرا من جرذ سبراج-داولي (عمره 4 أسابيع) وفترة شفاء استمرت 8 أسابيع، تم وضع زرعات التيتانيوم. بعد 4 أسابيع من التكامل العظمي، تلقت مجموعة PI (n = 6) أربطة مشبعة ب Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) حول رقبة الزرع، بينما لم تلق مجموعة الضابطين السلبية (NC) (n = 6) أي علاج رباط. بعد أسبوعين من التحفيز، أظهرت التحليلات عبر التصوير المقطعي الدقيق المحوسوب (Micro-CT) وعلم الأنسجة فقدانا كبيرا للعظام السنخية والتهابا شديدا في الأنسجة الرخوة، بما في ذلك تسرب خلايا التهابية ملحوظة وتدمير الأنسجة، في مجموعة PI مقارنة بمجموعة NC. وقد لخص هذا النموذج المعتمد بشكل فعال السمات الرئيسية للباحث السريري السريري. تشمل محدوديته تحدي الممرض الأحادي الممرض مبسطا وتسريع مسار المرض مقارنة بالممرضين البشريين. ومع ذلك، يوفر أداة قوية وذات صلة سريرية للدراسات البحثية والعلاجية.

المقدمة

مع التقدم في طب الأسنان الصناعي، تشهد زراعة الأسنان تطبيقا سريريا متزايداباستمرار. ومع ذلك، فإن التهاب ما قبل الزراعة (PI)، باعتباره المضاعفات الأكثر شيوعا، يؤثر بشكل كبير على بقاء زراعة الأسنان على المدى الطويل ويؤدي إلى آثار سلبية مستمرة على صحة فم المرضى2. PI هو حالة التهابية مرضية في الأنسجة المحيطية بالغرعة، وتناجم أساسا عن خلل حيوي في ميكروبيوم طبقة اللويحات الحيوية، ويتميز بالتهاب تدريجي للأنسجة الرخوة حول الزرعة وفقدانعظم داعم 3,4. مع تقدير معدلات الانتشار على مستوى المريض وعلى مستوى الزرعات ب 19.53٪ و12.53٪ على التوالي5، وبالنظر إلى الطبيعة المعقدة والمكلفة لإدارته، يمثل PI عبئا سريريا وصحيا عاما كبيرا6.

يعتمد توضيح المرض المعقد ل PI وتطوير علاجات فعالة بشكل أساسي على نماذج حيوانية قوية تحاكي المرض البشري بأمانة 7,8. بينما تقدم نماذج الحيوانات الكبيرة مثل الكلاب والخنازير الصغيرة أوجه تشابه تشريحي، فإن استخدامها في البحث الميكانيكي العميق محدود بسبب التكاليف العالية، والمخاوف الأخلاقية والسكنية، ونقص الأدوات الجزيئية الخاصة بالنوع9. أما نماذج القوارض، فهي تقدم مزايا من حيث الفعالية من حيث التكلفة، وسهولة التعامل، وسهولة التلاعب الجيني، مما يسهل تحقيقا تفصيليا في المسارات الجزيئية10. ومع ذلك، غالبا ما يكون نموذج الفأر محدودا بصغر حجمه والتحديات التقنية للإجراءات الجراحية11. تتفاقم هذه القيود بسبب القضايا الإجرائية في الطرق المعتمدة، مثل الطبيعة البؤرية وفقدان الربط المبكر الشائع في نماذج التهاب دواعم السن في الفأر12. يظهر الفأر كحل وسط عملي، حيث يوفر مجال عمليات أكبر، وفائدة راسخة في أبحاث شفاء العظام، وتوفر سلالات معدلة وراثيا لاستكشاف عوامل وراثية محددة13، مما يجعله مرشحا مناسبا جدا لنمذجة PI. على الرغم من إمكاناتها، فإن تبني نماذج PI للفئران محدود بالتعقيدات التقنية في الإجراءات الجراحية، بما في ذلك خلع الأسنان بشكل موثوق ووضع الزرعات بشكل منتظم.

تشمل تقنيات تحفيز نماذج الفئران الحالية وضع الربط الحريري14،15، التلقيح الممرضالمحلي 16، وحقن بوليبوليسكاريد17. نماذج العدوى السابقة التي اعتمدت على غسل البكتيريا الفموية غالبا ما تؤدي إلى تكون أغشية حيوية غير مستقرة واستجابات التهابية غير متسقة18. طريقة ربط الحرير شائعة لتعزيز تراكم اللويحات بسرعة. ومع ذلك، فإن الربط وحده يشكل إهانة ميكانيكية غير فسيولوجية ويفشل في دمج تحدي مرضي مسيطر عليه، مما يمثل بشكل غير كاف سبب الأمراض المعدية ل PI19. أما العدوى الأحادية بمسببات الأمراض مثل P. gingivalis، فغالبا ما تواجه صعوبة في تأسيس طبقة حيوية مستقرة وقد لا تسبب التهابا قوياباستمرار. نفترض أن إجراء الربط يسبب إهانات مزدوجة، حيث تعمل خيوط الحرير كمهيج ميكانيكي وهيكل لتكوين الغشاء الحيوي المعقد، بينما الممرض الأساسي الذي يتم تسليمه، P. gingivalis، يحفز ويكرر استجابة التهابية خلل حيوية21. لتلخيص هذا النهج المتكامل المزدوج الممرض وتطوره الزمني، تم تقديم نظرة عامة تخطيطية على الإجراء التجريبي والجدول الزمني لإنشاء نموذج الفئران المرتبط بالبكتيريا اللثوة (الشكل 1). توضح هذه المقالة تأسيس والتحقق من صحة نموذج ربط P. gingivalis المجمع، المصمم لإعادة إنتاج الأمراض الحيوية للعظم والأنسجة الرخوة لدى الباحث البشري بشكل موثوق، مما يعزز الصلة السريرية للنموذج وفائدته في الأبحاث قبل السريرية.

الشكل 1
الشكل 1: مخطط تخطيطي للجدول الزمني للإجراء التجريبي لإنشاء نموذج التهاب الجرذان حول الزرع الناتج عن طريقة ربط الغرز المحملة بالبكتيريا. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم تحديد حجم العينة بناء على الممارسات الشائعة في نماذج التهاب الغرس المحيطي بالغرس (PI) المنشورة سابقا وقيود الموارد المتاحة22. تم استخدام اثني عشر ذكرا من نوع Sprague-Dawley عمرهم 4 أسابيع (مقدمة من مركز الحيوانات التجريبية في جامعة ساوثويست الطبية، رقم الرخصة: SCXK (تشوان) 2024-0046) لخلع الأسنان، ووضع الزرع، وتحفيز PI. تم الحفاظ على جميع الفئران في منشأة حاجز خالية من مسببات الأمراض (SPF) القياسية، مع وجود حيوانات من مجموعات تجريبية مختلفة تقيم بشكل منفصل. كانت مواقع الأقفاص داخل الرف تحدد عشوائيا أسبوعيا. تم تعيين الفئران إما إلى مجموعة التحكم السلبية (NC) أو مجموعة PI (n = 6 لكل مجموعة) باستخدام مولد أرقام عشوائية. ترتيب الإجراءات الجراحية لجميع الفئران عشوائي. جميع الإجراءات معتمدة من لجنة أخلاقيات أبحاث الحيوان في جامعة ساوثويست الطبية (رقم الموافقة 202411111-012) وتلتزم بإرشادات رفاهية الحيوان. تجرى هذه الدراسة وفقا لمبادئ 3R (الاستبدال، التقليل، التحسين) للأبحاث الأخلاقية على الحيوانات. المواد المستخدمة والمواد المستخدمة مدرجة في جدول المواد.

1. التحضير المسبق للاستخراج

  1. قم بتعقيم جميع الأدوات الجراحية (مستكشف الأسنان #5، حاملة الإبر، ملقط العيون، مسحات قطنية طبية، ملقط الأنسجة، إلخ) عن طريق التداخل الجسدي. قم بجميع الإجراءات التالية داخل خزانة السلامة البيولوجية من الفئة الثانية للحفاظ على ظروف معقمة.
  2. إعطاء حقن داخل الصفاق من ترايبروموإيثانول (250 ملغ/كجم) لتخدير الفئران23 (وفقا للبروتوكولات المعتمدة مؤسسيا). تأكيد عمق التخدير من خلال غياب رد فعل الانسحاب استجابة لقرص في الكف الخلفي.
  3. ضع مزلق العيون لمنع جفاف القرنية أثناء الإجراءات.
  4. قم بتعقيم جميع أسطح العمل جيدا باستخدام محلول إيثانول بنسبة 75٪.
  5. ضع الفأر في وضعية الاستلقاء على الظهر على منصة جراحية مستقرة. قم بسحب القواطع الفكية والفك السفلي باستخدام الأربطة المطاطية لتحقيق والحفاظ على فتح الفم القصوى. أضاء تجويف الفم بمصباح جراحي.
  6. أمسك اللسان برفق باستخدام ملقط النسيج واسحبه إلى جانب واحد. تأكد من تثبيت اللسان بإحكام للحفاظ على رؤية واضحة وخالية من العوائق للأضراس الفكية.

2. إجراء خلع الأسنان

  1. عقم موقع الجراحة ببوفيدون-يودين. ضع مستكشف الأسنان #5 عند السطح البعيد للضرس الأول في الفك العلوي (المسافة بين الضرس الأول والثاني)، وطبق القوة المتوسطة المتوسطة لتحقيق الخلع الأولي (الشكل 2A).
  2. إعادة وضع المستكشف إلى السطح المتوسط للضرس الأول، وإعادة تطبيق القوة المتوسطة لتحريك السن بشكل أكبر (الشكل 2B).
  3. ضع طرف المستكشف في الجب اللثوي الحنك. طبق مزيجا من الحركة الدورانية اللطيفة للحنك والحنك والضغط المستمر على طول محور السن الطويل. استمر حتى ينفصل السن تماما عن التجويف (الشكل 2C,D).
  4. افحص السن المخلوع بعناية تحت الرؤية المباشرة للتأكد من أن جميع الجذور سليمة ولا توجد كسور. اشتر التجويف الفارغ بلطف بتدفق من محلول ملحي طبيعي من حقنة معقمة لإزالة أي جلطات دموية متبقية أو حطام (الشكل 2E,F).
  5. حقق الارتعاش الدموي بتطبيق ضغط معقم من مسحة القطن لمدة دقيقة واحدة. أعد اللسان إلى وضعه التشريحي. حافظ على الحيوان على وسادة التدفئة حتى يتعافى تماما من التخدير.
  6. قدم نظاما غذائيا ناعما ومياه شرب مكملية بالمضادات الحيوية (أموكسيسيلين 250 ملغ/كغ) لمدة أسبوع واحد.
    ملاحظة: استخدم قوة محكومة وتدريجية أثناء الخلع وتجنب الحركات المفاجئة لمنع كسر الجذر أو تلف العظام الحويصلية.

الشكل 2
الشكل 2: إجراء خلع الأسنان. تم إدخال مسبار أسنان في الجوانب البعيدة والقريبة من الضرس الأول في الفك العلوي للفئران لتحرير أربطة اللثة (A,B). تطبيق الحنك للقوى الدورانية والسدودية لخلع السن (C,D). تم فحص التجويف بدقة بحثا عن أي بقايا جذور (E). يظهر ضرس أول في الفك العلوي السليم للجرذ (F). يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

3. جراحة وضع الزرعات

  1. بعد ثمانية أسابيع من الخلع، قم بإنشاء شق متوسط بطول 5 مم فوق الحافة الغافية باستخدام شفرة معقمة 12c، تخترق سطح العظم (الشكل 3A).
  2. استخدم مستكشف #5 للتشريح غير العريض لرفع شرائح الغشاء المخاطي الكامل السمك، مما يكشف موقع الجراحة (الشكل 3B).
  3. قم بتوصيل مثقاب كربيد التنجستن (قطر 1.5 مم) بمحول مفك يدوي وإجراء عملية قطع العظم عن طريق الدوران اليدوي باتجاه عقارب الساعة مع الري الملحي المتقطع للتحكم الحراري، مع تجهيز موقع زرع بعمق 4 مم داخل مقبس الاستخراج الملتئم مع الحفاظ على تغذية راجعة ملموسة مستمرة لمنع الثقب القشري (الشكل 3C).
  4. إدخال زرعة تيتانيوم مخصصة (قطر 1.8 مم، طول 3.2 مم، سطح مصنع) باستخدام الدوران باتجاه عقارب الساعة. تحقق من الاستقرار من خلال غياب الحركة في تطبيق المستكشف (الشكل 3D-F).
  5. اترك فترة شفاء لمدة أسبوع مع استمرار النظام الغذائي الناعم ونظام المضادات الحيوية كما هو موضح سابقا.
    ملاحظة: استخدم تقنية جراحية لطيفة وتجنب القوة المحاورية الزائدة لمنع الثقب العلاجي في قاع الجيوب الفكية.

الشكل 3
الشكل 3: إجراء وضع الزرع. تم إجراء شق متوسط الطرف باستخدام شفرة منحنية رقم 12 (A). تم عكس شريحة الغشاء المخاطي بواسطة مسبار أسنان (B). تم إجراء عملية قطع العظم باستخدام رأس مثقاب تنجستن كاربيد بقطر 1.5 مم متصل بمثقاب يدوي (C). تم وضع الزرعة في عظم الفك عبر حامل زرعة مخصص (D). بعد الزرع، تم استخدام مسبار لفحص الحركة (E,F). زرعة تيتانيوم مصممة خصيصا (خيط سطح أملس، قطر 1.8 مم، طول 3.2 مم)، حامل الزرعة المقابل (G,H)، ومثقاب يدوي صغير (I). يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

4. تحضير الغرز المرتبط ب P. gingivalis

  1. زراعة P. gingivalis بشكل لاهوائي عند 37 درجة مئوية في مرق حقن القلب الدماغي (BHI) بحجم 5 مل حتى تصل إلى 109 وحدة CFU/mL (OD600 = 1.0).
  2. نقل نظام التعليق عند 1:20 إلى 10 مل من BHI المتوسط الطازج.
  3. اغمر غرز حرير معقمة 3-0 في وسط متلقيح بالكامل. حضن بشكل لاهوائي عند 37 درجة مئوية لمدة 48-72 ساعة لتكوين غشاء حيوي ناضج.

5. تحفيز PI

  1. بعد أربعة أسابيع من الزرع، قم بربط خياطة مغطاة ب P. gingivalis حول عنق الزرعة باستخدام حامل إبر معقم. ثبته بعقدة ثلاثية بجانب نسيج اللثة (الشكل 4A-D).
  2. حافظ على الربط لمدة أسبوعين مع مراقبة تقدم الالتهاب.
  3. قم بفحص الروابط يوميا. استبدلها إذا تم فك أو فقدان باستخدام تقنية معقمة.
    ملاحظة: عند ربط العقد، افصل الأنسجة الرخوة بلطف لتجنب التمزق، وتأكد من وضع عقدة الغرز تحت اللثة.

الشكل 4
الشكل 4: إجراء PI الناتج عن الغرز: تم وضع خيط الغرز المحضر المبلل بالبكتيريا (3-0) في الموضع تحت اللثة على الطرف البعيد للغرسة (A). تم ربط العقدة الأولى وتثبيتها بحامل إبر لمنع خلع العقدة (B). بعد ذلك، ربط عقدة ثلاثية لمنع انزلاق الغرز (C,D). يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

6. القتل الرحيم وجمع العينات

  1. بعد فترة تحفيز لمدة أسبوعين، يتم القضاء على الحيوانات عن طريق خلع عنق الرحم تحت تخدير إيزوفلوران عميق (وفقا لبروتوكولات معتمدة مؤسسيا). قم بتشريح الفك العلوي السليم باستخدام الزرعات باستخدام أدوات حادة.
  2. اغمر العينات فورا في بارافورمالديهايد بنسبة 4٪ لتثبيت لمدة 24 ساعة. أزل الأنسجة الرخوة المتبقية باستخدام الري بنظام PBS وخزنها في 70٪ إيثانول.
    ملاحظة: يمكن إيقاف التجربة في هذه المرحلة مع التخزين طويل الأمد في إيثانول 70٪ عند 4 درجات مئوية.

7. تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (micro-CT)

  1. امسح العينات باستخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق وفقا للمنهجية المعتمدة24.
  2. شغل الماسح الضوئي والكمبيوتر. أطلق برنامج الاستحواذ. انقر على أيقونة السلامة من الإشعاع وترك الإحماء لمدة 15 دقيقة.
  3. غرفة المسح المفتوحة. ثبت العينة في أنبوب مخروطي بحجم 15 مل مثبت برغوة منخفضة الكثافة، ثم ثبت الأنبوب على المرحلة الدوارة ووضعه داخل غرفة المسح.
  4. ابدأ مصدر الأشعة السينية (90 كيلو فولت، 80 ميكروأمبير). انقر على أيقونة المعاينة لتأكيد الوضع الأمثل. اضبط المعلمات: دقة 12 ميكرومتر ، تعريض 20 هرتز ، 4000 إطار إجمالي.
  5. إعادة بناء الصور باستخدام برنامج Recon 1.7.4.0.
  6. حلل معلمات العظام التالية في برنامج أفاتار 1.7.4.0 من خلال تحديد عائد الاستثمار في منطقة الضرس الأول في الفك العلوي: نسبة حجم العظم (BV/TV)، نسبة سطح العظم إلى حجم العظم (BS/BV)، سمك الترابيكولار (Tb.Th)، وعدد الترابيكولار (Tb.N).

8. المعالجة النسيجة

  1. إزالة الكالسيفي عينات ثابتة بنسبة 10٪ EDTA (درجة حموضة 7.4) مع تغيير المحلول كل 72 ساعة لمدة 4 أسابيع. تحقق من إتمام الاختبار باستخدام اختبار اختراق الإبرة.
  2. تجفيف العينات من خلال سلسلة الإيثانول: 75٪ إيثانول لمدة 4 ساعات، 85٪ إيثانول لمدة ساعتين، 90٪ إيثانول لمدة ساعتين، 95٪ إيثانول لمدة ساعة، وتغييرين من 100٪ إيثانول لمدة 30 دقيقة لكل منهما.
  3. عينات شفافة في الزيلين مع تغييرين لمدة 10 دقائق لكل منهما. استخدم البارافين باستخدام ثلاث تغييرات لمدة ساعة لكل منها.
  4. قم بإدخال الأنسجة في البارافين المنصهر وتبريده على مرحلة تجميد بدرجة حرارة -20 درجة مئوية. قم بقص الكتل وخزنها على درجة حرارة 4 درجات مئوية لمدة 10 ساعات قبل التقسيم.
  5. كتل البارافين المقطعية بسماكة 5 ميكرومتر. أقسام عوامة على حمام مائي بدرجة حرارة 45 درجة مئوية وركبتها على منزلقات زجاجية. الانزلاقات الجافة عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة.
  6. قم بإزالة القواعد من خلال تغييرين من الزيلين لمدة 5 دقائق لكل منهما. أعد ترطيب الإيثانول من خلال سلسلة إيثانول متدرجة: 100٪ إيثانول لمدة 5 دقائق، 90٪ إيثانول لمدة 5 دقائق، 80٪ إيثانول لمدة 5 دقائق، و70٪ إيثانول لمدة 5 دقائق.
  7. اشطف الأقسام في ماء مقطر لمدة دقيقة واحدة. صبغ بالهيماتوكسيلين لمدة 8 دقائق، ثم اشطفها بماء الصنبور الجاري.
  8. تميز الكحول الحمضي بنسبة 1٪ لمدة 3 ثوان. اشطف بماء الصنبور الجاري للبلوغ الأزرق. ضع الصبغة المضادة بالإيوزين لمدة 5 دقائق.
  9. تجفيف الأقسام عبر سلسلة الإيثانول المصنفة: 70٪ إيثانول لمدة 10 ثوان، 80٪ إيثانول لمدة 10 ثوان، 90٪ إيثانول لمدة 10 ثوان، و100٪ إيثانول لمدة 10 ثوان. نظف الزيلين مرتين لمدة 5 دقائق لكل منهما.
  10. ثبت أغطية البلسم المحايد وفحصها تحت المجهر الضوئي.
    ملاحظة: الزيلين خطير. استخدمها في غطاء بخار مع معدات الحماية الشخصية المناسبة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

جميع جرذان سبراج-داولي الاثني عشر البالغ من العمر 4 أسابيع والمسجلين في الدراسة أكملوا جميع الإجراءات الجراحية بنجاح وأظهروا استقرارا في التكامل العظمي قبل الربط، مستوفيين معيار الشمول المحدد مسبقا للتعافي دون مضاعفات. لا يتم استبعاد أي حيوان من التحليل. يتم تعيين الفئران عشوائيا إلى مجموعة NC أو PI (n = 6 لكل مجموعة) باستخدام مولد أرقام عشوائية. يظل الباحثون الذين يجرون القياسات الميكرو-CT والتقييمات النسيجية المرضية عميان عن التعيينات الجماعية طوال تقييم النتائج وتحليل البيانات. تحافظ جميع الزرعات على الاستقرار خلال عم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

توضح الدراسة الحالية إمكانية تحفيز المعالج الصناعي في نموذج الفئران باستخدام غرز مشبعة ب P. gingivalis، وتوفر توثيقا تفصيليا للإجراءات الجراحية المرتبطة. نماذج القوارض، خاصة في الفئران، راسخة جيدا في أبحاث الأسنان لدراسة التهاب دواعم السن والتهاب دواعم السن، بسبب سهولة الوصول إليها، وانخفاض تكلفة الصيانة، وكفاءة الإنجاب العالية، كما تدعمها الأدبيات الموجودة15،25. على الرغم من أن معظم الإجراءات الجراحية لدى الفئران يمكن إ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يؤكد المؤلفون أنه لا توجد تضارب محتمل في المصالح قد يكون أثر على العمل المبلغ عنه في هذه الورقة.

شكر وتقدير

يدعم هذا العمل بمنح من جمعية الطب في سيتشوان (المنحة رقم S2024052)؛ مكتب العلوم والتكنولوجيا في لوتشو (رقم 2024JYJ070)، ومستشفى طب الأسنان التابع لجامعة الجنوب الغربي الطبية (المنحة رقم 2025DS03). كما يشكر المؤلفون بكل امتنان المساعدة الفنية التي قدمها مركز تجارب الحيوانات في جامعة ساوثويست الطبية. يتم إنشاء المخطط العلمي باستخدام BioRender.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
#5 مستكشف الأسنانشركة تشنغتشو كانغديتاي الطبية المحدودة، تشنغتشو، CN6970327120856خلع الأسنان وخلعه
كحول حمضي بنسبة 1٪شركة سينوفارم للكاشف الكيميائي، شنغهاي، CN10000018 (إيثانول) و 10000118 (Hcl)تمايز الهيماتوكسيلين
10٪ EDTA (درجة الحموضة 7.4)شركة سيرفسبيو تكنولوجي المحدودة، ووهان، كونواناG1105إزالة الكالسية العظمية
محلول إيثانول 100٪شركة ماكلين للتكنولوجيا الكيميائية الحيوية، المحدودة، شنغهاي، الصينE708068الجفاف الكامل وتحضير المذيب
شفرة 12c ومشرط جراحيشركة تياندا الطبية المحدودة، هويان، CN6951933811154تكوين شريحة مخاطية البيريوستيل
أربطة حريرية 3-0جينهوان الطبية، شنغهاي، CNNC9201232الربط
4٪ بارافورمالديهيدبايوشراب، هيفي، سي إنBL539Aتثبيت الأنسجة
70٪ إيثانولالتحضير المخبري-تخزين العينات
محلول إيثانول بنسبة 75٪شركة ماكلين للتكنولوجيا الكيميائية الحيوية، المحدودة، شنغهاي، الصينE885996تعقيم السطح والجفاف الأولي
أموكسيسيلين 50 ومو; g/mLشركة نورث تشاينا للأدوية، شيجياتشوانغ، CNH13020635مكملات المضادات الحيوية في مياه الشرب
برنامج الأفاتارشركة أفاتار للأنظمة المتكاملة، ميونيخ، ديلاوير-تحليل معلمات العظام
متوسط BHIشركة كراون لاب بلبلايس إنك، كولومبيا البريطانية، كاليفورنيا110052ثقافة P. gingivalis
CT-Voxelشركة بروكر، بيليريكا، ماساتشوستس، الولايات المتحدة الأمريكية-تصوير صورة ميكرو-CT
إيوسينبكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودة، بكين، CN
G1100		التلوين السيتوبلازمي
سلسلة الإيثانول (80٪، 90٪، 95٪)التحضير المخبريالجفاف/إعادة ترطيب الأنسجة تدريجيا
منشور جراف بادشركة جراف باد سوفتوير المحدودة، سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكيةالإصدار 9.0.0التحليل الإحصائي وتوليد الرسوم البيانية
المصباح الأماميشركة شينزين سوبفاير للإضاءة المحدودة، شنتشن، كونيتيكتHL23-Xالإضاءة داخل الفم
الهيماتوكسيلينبكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودة، بكين، CNH8070التلوين النووي
حامل الزرعةشركة سيتشوان ويسيدا للأجهزة الطبية، سيتشوان، CNالمنتج الفريدتركيب الزرع يدويا
إيزوفلورانشركة RWD لايف ساينس المحدودة، شنتشن، كونواناR510-22-10 صيانة التخدير الاستنشاقي
محول مفك براغي يدويشركة ديكين للمواد الزخرفية المحدودة، هانغتشو، كونواناDQ-80013استيوتومي العظم
عواد القطن الطبيةشركة كيكانغ للأدوية المحدودة، سوتشو، CNHN-02الورم الدموي
ماسح Micro-CTشركة سيرفسبيو تكنولوجي المحدودة، ووهان، كونواناVNC-102μ فحوصات الأشعة المقطعية
حامل الإبرشركة شنغهاي الطبية للأدوات المحدودة، شنغهاي، CNJ32110ربط الغرز
البلسم المحايدبكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودة
بكين، CN		G8590تركيب القسم الأنسيجي
ملقط العيونشركة سولينجمد للتكنولوجيا، شنتشن، كونواناSS-5002وضع الأرباط
البارافينشركة أمين نوري للتجارة العامة ذ.م.م، دبي، AE8012-95-1تضمين الأنسجة
PBSعلوم الحياة وبروسيل شركة تكنولوجي المحدودة، ووهان، كونواناPB180327الري بالأنسجة
بورفيروموناس جينجيفاليسما يعادل-تحفيز الالتهاب
بوفيدونيودينشركة تشنغدو يونغآن للأدوية، تشنغدو، كونواناH51023539التعقيم
برامج الاستطلاعشركة ريكون تكنولوجي المحدودة، جزر كايمان، بريطانيا العظمىالإصدار 1.7.4.0إعادة بناء صورة ميكرو-CT
شريط مطاطيشركة تشجيانغ يوي لمنتجات المطاط المحدودة، تايتشو، كونواناVYR43*1.4شد الفك وتثبيت
جرذان SDمركز الحيوانات التجريبية في جامعة الجنوب الغربي الطبية، لوتشو، كونواناSCXK (تشوان) 2024-0046الإجراءات الجراحية
مقص جراحي حادشركة هونان كوفو للتكنولوجيا الطبية، تشانغشا، كونوانا1.0806E+13قص الخيوط
ملقط الأنسجةأدوات العلوم الدقيقة، مدينة فوستر، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية11000-12شد اللسان وتثبيت
زرعات التيتانيوم (وأوسلاش؛ 1.8&مرة؛ 3.2 مم)شركة سيتشوان ويسيدا للأجهزة الطبية، سيتشوان، CNالمنتج الفريدزرع التيتانيوم
تريبروموإيثانول (أفيرتين)شركة هينان سايهو للتكنولوجيا الحيوية المحدودة، تشنغتشو، CN-التخدير داخل الصفاق
زيلينشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي، شنغهاي، CN10023418إزالة الأنسجة وإزالة الشمع

المراجع

  1. Gupta, R., Gupta, N., Weber, D. K. Dental implants. , StatPearls Publishing LLC. Treasure Island (FL). Copyright 2025 (2025).
  2. Lee, C. T., Huang, Y. W., Zhu, L., Weltman, R. Prevalences of peri-implantitis and peri-implant mucositis: Systematic review andmeta-analysis. J Dent. 62, 1-12 (2017).
  3. Berglundh, T., et al. Peri-implant diseases and conditions: Consensus report of workgroup 4 of the 2017 world workshop on the classification of periodontal and peri-implant diseases and conditions. J Clin Periodontol. 45 (Suppl 20), S286-S291 (2018).
  4. Schwarz, F., Derks, J., Monje, A., Wang, H. L. Peri-implantitis. J Clin Periodontol. 45 (Suppl 20), S246-S266 (2018).
  5. Diaz, P., Gonzalo, E., Villagra, L. J. G., Miegimolle, B., Suarez, M. J. What is the prevalence of peri-implantitis? A systematic review and meta-analysis. BMC Oral Health. 22 (1), 449(2022).
  6. Herrera, D., et al. Prevention and treatment of peri-implant the EFP S3 level clinical practice guideline. J Clin Periodontol. 50 (Suppl 26), 4-76 (2023).
  7. Fu, J. H., Wang, H. L. Breaking the wave of peri-implantitis. Periodontol. 84 (1), 145-160 (2020).
  8. Sant'anna, H. R., et al. Peri-implant repair using a modified implant macrogeometry in diabetic rats: Biomechanical and molecular analyses of bone-related markers. Materials (Basel). 15 (6), 2317(2022).
  9. Ribitsch, I., et al. Large animal models in regenerative medicine and tissue engineering: To do or not to do. Front Bioeng Biotechnol. 8, 972(2020).
  10. He, Q., et al. Development of a rat model for type 2 diabetes mellitus peri-implantitis: A preliminary study. Oral Dis. 28 (7), 1936-1946 (2022).
  11. DeAraújo Silva, D. N., et al. Experimental model of ligature-induced peri-implantitis in mice. J Vis Exp. (207), e66316(2024).
  12. Chadwick, J. W., Glogauer, M. Robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils. J Vis Exp. (155), e59667(2020).
  13. Kantarci, A., Hasturk, H., Van Dyke, T. E. Animal models for periodontal regeneration and peri-implant responses. Periodontol. 68 (1), 66-82 (2000).
  14. Varon-Shahar, E., et al. Peri-implant alveolar bone resorption in an innovative peri-implantitis murine model: Effect of implant surface and onset of infection. Clin Implant Dent Relat Res. 21 (4), 723-733 (2019).
  15. Hiyari, S., et al. Ligature-induced peri-implantitis and periodontitis in mice. J Clin Periodontol. 45 (1), 89-99 (2018).
  16. Tzach-Nahman, R., Mizraji, G., Shapira, L., Nussbaum, G., Wilensky, A. Oral infection with Porphyromonas gingivalis induces peri-implantitis in a murine model: Evaluation of bone loss and the local inflammatory response. J Clin Periodontol. 44 (7), 739-748 (2017).
  17. Pirih, F. Q., et al. Ligature-induced peri-implantitis in mice. J Periodontal Res. 50 (4), 519-524 (2015).
  18. Pirih, F. Q., et al. A murine model of lipopolysaccharide-induced peri-implant mucositis and peri-implantitis. J Oral Implantol. 41 (5), e158-e164 (2015).
  19. Reinedahl, D., Chrcanovic, B., Albrektsson, T., Tengvall, P., Wennerberg, A. Ligature-induced experimental peri-implantitis-a systematic review. J Clin Med. 7 (12), 492(2018).
  20. Gao, L., Yu, X. Q., Cai, Y. Effect of molar ligation and local Porphyromonas gingivalis inoculation on alveolar bone loss in the mouse. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 49 (1), 31-35 (2017).
  21. Wongtim, K., et al. Overexpression of PD-L1 in gingival basal keratinocytes reduces periodontal inflammation in a ligature-induced periodontitis model. J Periodontol. 93 (1), 146-155 (2022).
  22. Koutouzis, T., Eastman, C., Chukkapalli, S., Larjava, H., Kesavalu, L. A novel rat model of polymicrobial peri-implantitis: A preliminary study. J Periodontol. 88 (2), e32-e41 (2017).
  23. Veríssimo, L. F., et al. Cardiovascular effects of early maternal separation and escitalopram treatment in rats with depressive-like behaviour. Auton Neurosci. 256, 103223(2024).
  24. Kim, Y., Brodt, M. D., Tang, S. Y., Silva, M. J. MicroCT for scanning and analysis of mouse bones. Methods Mol Biol. 2230, 169-198 (2021).
  25. Kuraji, R., Hashimoto, S., Ito, H., Sunada, K., Numabe, Y. Development and use of a mouth gag for oral experiments in rats. Arch Oral Biol. 98, 68-74 (2019).
  26. Lu, S., et al. Effect of ovariectomy on tissue-level changes in rat maxilla. Int J Oral Maxillofac Implants. 34 (4), 865-872 (2019).
  27. Heitzer, M., et al. Establishing a new periodontitis-like intrabony maxillary defect in rats for investigation on bone regeneration. Sci Rep. 15 (1), 39358(2025).
  28. Moiseev, D., et al. A new way to model periodontitis in laboratory animals. Dent J (Basel). 11 (9), 219(2023).
  29. Marchesan, J., et al. An experimental murine model to study periodontitis. Nat Protoc. 13 (10), 2247-2267 (2018).
  30. Nasution, D. L. I., Tjahajawati, S., Indriyanti, R., Amaliya, Anti-inflammatory effectiveness of Peperomia pellucida (l.) kunth in rats induced with periodontitis. Biochem Biophys Rep. 40, 101856(2024).
  31. Meng, L. W., et al. Comparison of three methods for establishing rat peri-implantitis model. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 55 (1), 22-29 (2023).
  32. Zhang, H., et al. Application of immediate implant placement techniques in peri-implantitis modeling. J Craniofac Surg. 34 (8), 2544-2550 (2023).
  33. Ortiz-Sánchez, B. J., Juárez Avelar, I., Rodriguez-Sosa, M. Murine model of advanced periodontitis induced by nylon ligature in the second upper molar. J Vis Exp. (219), e67848(2025).
  34. Lafaurie, G. I., et al. Microbiome and microbial biofilm profiles of peri-implantitis: A systematic review. J Periodontol. 88 (10), 1066-1089 (2017).
  35. Zhang, Q., Liu, J., Ma, L., Bai, N., Xu, H. Lox-1 is involved in TLR2-induced RANKL regulation in peri-implantitis. Int Immunopharmacol. 77, 105956(2019).
  36. Qiao, S., et al. Oral microbial profile variation during canine ligature-induced peri-implantitis development. BMC Microbiol. 20 (1), 293(2020).
  37. De Avila, E. D., Van Oirschot, B. A., Van Den Beucken, J. Biomaterial-based possibilities for managing peri-implantitis. J Periodontal Res. 55 (2), 165-173 (2020).
  38. Iizumi, T., et al. Effect of antibiotic pre-treatment and pathogen challenge on the intestinal microbiota in mice. Gut Pathog. 8, 60(2016).
  39. Heitz-Mayfield, L. J. A., Salvi, G. E. Peri-implant mucositis. J Clin Periodontol. 45 ((Suppl 20)), S237-S245 (2018).
  40. Javed, F., Romanos, G. E. Efficacy of photobiomodulation in the management of experimentally-induced peri-implant osseous defects: An evidence-based review of studies on animal models. J Dent. 159, 105833(2025).
  41. Yu, S., et al. Adjunctive diode laser therapy and probiotic lactobacillus therapy in the treatment of periodontitis and peri-implant disease. J Vis Exp. (183), e63893(2022).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

نموذج زراعة الأسنان في الجرذانفقدان العظم السنخيالتهاب الأنسجة الرخوةتحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيقالتحليل النسيجيفشل زراعة الأسنان

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.