مقالة بحثية

مكون نشط حيويا من بندول Aconitum يخفف الالتهاب المرتبط بالتهاب المفاصل الروماتويدي في الفئران عبر تنظيم مسار PI3K/Akt

DOI:

10.3791/70473

⸱

أبريل 21, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Pharmacy, Qinghai MinZu University, 2Qinghai Modern Plateau Biomedical Industry Institute, 3Qinghai Institute of Tibetan Medicine, 4Qinghai Provincial Key Laboratory of Plant Resource Chemistry on the Tibetan Plateau

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

باستخدام علم الأدوية الشبكي والربط الجزيئي، تم تحديد مكونات مضادة لالتهاب المفاصل الروماتويدي (RA) من A. pendulum . أظهرت الدراسات الحية أن قلويدات الديتربين، وخاصة سميرنوتين A، تخفف أعراض التهاب المفاصل المفعول المفاصل في الفئران عبر مسار PI3K/Akt.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في الطب الصيني التقليدي والممارسات الطبية العرقية المختلفة، تستخدم جذور بندول ن. بوش بشكل شائع لقدرتها على تجريف خطوط الطول، وتبديد الروماتيزم، وتعزيز الدورة الدموية، وتخفيف ألم المفاصل. ونتيجة لذلك، أصبح هذا النبات الطبي علاجا معروفا للالتواءات والأمراض الروماتيزمية عبر أنظمة طبية عرقية مختلفة. بحثت هذه الدراسة في الآليات التي من خلالها ستة مركبات معزولة سابقا من A. pendulum ameliorate لتحسن الالتهاب المرتبط بالتهاب المفاصل الروماتويدي (RA) باستخدام كل من الأساليب المخبرية والحي . تم استخدام مزيج من التقنيات، بما في ذلك علم الأدوية الشبكي، والالتحام الجزيئي، واختبار المقاومة المناعية المرتبطة بالإنزيمات (ELISA)، وتلوين الهيماتوكسيلين والإيوزين (H&E)، وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (q-PCR)، والبقعة الغربية (WB). أظهرت النتائج أن سميرنوتين A، أحد المركبات الستة، يخفف أعراض التهاب المفاصل الروماتويدي من خلال استهداف مسار إشارات PI3K/Akt وقمع الاستجابة الالتهابية. توفر هذه النتائج أساسا علميا لفهم الأساس المادي والفعل الميكانيكي الذي يقوم عليه الاستخدام التقليدي لبندول أ. في علاج الروماتويد.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التهاب المفاصل الروماتويدي (RA) هو مرض مناعي ذاتي مزمن يتميز بالتهاب الزليلي، وتضخم البطانة الزليلية، وتسلل الخلايا المناعية، وتكوين نسيج بانوس غازي، وما ينتهي به من تدمير للمفصل 1,2,3. مع انتشار عالمي يتراوح بين 0.5٪–1٪، يشكل التهاب المفاصل الروماتويدي عبئا كبيرا على الصحة العامة ويؤثر بشكل كبير على جودة حياة المرضى 4,5,6,7. العلاجات التقليدية — مثل الميثوتركسات (MTX)، والجلوكوكورتيكويدات، ومثبطات كيناز جانوس (JAK)، والأدوية المضادة للالتهاب غير الستيرويدية (NSAIDs) — غالبا ما تكون محدودة بسبب الآثار الجانبية واستجابة المرضى المتغيرة، مما يؤكد الحاجة إلى علاجات جديدة8.

لقد حظيت المنتجات الطبيعية، وخاصة القلويات، باهتمام بسبب آلياتها متعددة الأهداف وخصائصها السلامة الإيجابية في إدارة الروماتويد. تقوم القلويدات مثل البربيرين، السينومينين، والماترين بتعديل المسارات الالتهابية الرئيسية، بما في ذلك كيناز البروتين المنشط بالميتوجين (MAPK)، والعامل النووي كابا B (NF-κB)، والفوسفاتيديلينوسيتول 3-كيناز/كيناز البروتين B (PI3K/Akt)، وإنزيم جانوس/محول الإشارة ومنشط النسخ (JAK/STAT) وتخفض تنظيم السيتوكينات مثل عامل نخر الورم ألفا (TNF-α)، والإنترلوكين (IL)-1β، وIL-6، مما يدل على الإمكانات العلاجية9. 10.

في الطب التبتي، يصنف التهاب المفاصل المفروسي على أنه بروم بو (ألم المفاصل الرطوبة)، ويعزى إلى اختلال في الأخلاط الثلاثة وتراكم الماء الأصفر غير الناضج في المفاصل11،12 (الشكل 1). بندول Aconitum N. Busch هو عشبة تستخدم تقليديا لطرد الرطوبة، وتعزيز الدورة الدموية، وتخفيف الألم 13,14. تم توثيق أكثر من 50 تركيبة تبتية كلاسيكية تحتوي على هذه العشبة، مع تاريخ من الاستخدام السريري يمتد لأكثر من 300 عام15,16. ومع ذلك، لا تزال مكوناته وآلياته النشطة بيولوجيا غير موصوفة بشكل جيد.

هنا، ندمج علم الأدوية الشبكي والربط الجزيئي للتنبؤ بالمكونات المضادة للحمض النووي الروماتويدي في بندول Aconitum N. Busch وأهدافها ومساراتها المحتملة. يتم التحقق من صحة هذه التنبؤات تجريبيا لاحقا (الشكل 2). يهدف هذا النهج المتكامل إلى توضيح الأساس المادي والأسس الميكانيكية لبندول Aconitum N. Busch في علاج الروماتويد، مما يوفر أساسا لتطوير الأدوية في المستقبل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تزويد مركز هوبي الإقليمي لمكافحة الأمراض والوقاية منها (أكاديمية هوبي الإقليمية للطب الوقائي) بخمسين فأر سبريغ-داولي الخالي من الممرضات (SPF) (بوزن 180–200 جرام) من قبل مركز هوبي الإقليمي للسيطرة على الأمراض والوقاية منها (ووهان، الصين؛ شهادة رخصة الحيوانات رقم SCXK(JB) 2023-0005). تم إجراء جميع الإجراءات التجريبية التي شملت الحيوانات وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام الحيوانات المخبرية (الطبعة الثامنة، 2011). تمت مراجعة بروتوكول الدراسة والموافقة عليه من قبل لجنة أخلاقيات الحيوانات التجريبية التابعة لشركة تيانجين جينينك للتكنولوجيا البيولوجية المحدودة (رقم الموافقة: GENINK-20250074). المواد والمواد الرئيسية المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد المرفق.

زراعة الخلايا
تم زراعة سلالة خلايا التهاب المفاصل الروماتويدي البشري MH7A في وسط Modified Eagle Medium (DMEM) من Dulbecco مع إضافة 10٪ (v/v) لمصل البقر الجنيني (FBS) والحفاظ عليه عند 37 °م في حاضنة رطبة تحتوي على 5٪ CO17.

الحيوانات والعلاجات
تم الاحتفاظ بالحيوانات في منشأة خالية من مسببات الأمراض (SPF) معيارية مع نظام قفص مهواة فرديا (IVC) تحت ظروف بيئية محكمة السيطرة صارمة: درجة حرارة مناخية مسيطر عليها بين 21.0–25.0 درجة مئوية، رطوبة نسبية بين 40–70٪، فترة ضوئية لمدة 12 ساعة، وتجديد كامل للهواء 15 مرة في الساعة. بعد فترة تأقلم مدتها 7 أيام، تم تقسيم الفئران عشوائيا إلى ست مجموعات تجريبية، مع تخصيص فئران إضافية كاحتياطيات للظروف غير المتوقعة. تم تحفيز نموذج التهاب المفاصل الالتهابي الحاد (AA) عن طريق حقن 100 ميكرولتر كامل من مساعد فرويند (CFA؛ 10 ملغ·مل-1) في الكف الخلفيالأيمن 18. تم تصميم المجموعات التجريبية كما يلي: مجموعة ضابطة فارغة، مجموعة نموذج AA، مجموعة ضابطة إيجابية (ميثوتركسات، 0.9 ملغ·كغ-1)19، وثلاث مجموعات علاج سميرنوتين A أجريت على مستويات منخفضة (0.962 ملغ·كجم-1)، متوسطة (1.923 ملغ·كغ-1)، وعالية (3.846 ملغ·كغ-1) بناء على قيمة IC₅₀.

التنبؤ بالأمراض والأهداف المركبة
استنادا إلى الفحص الأولي للنشاط الذي أجرته مجموعتنا البحثية، تم اختيار ستة مركبات تظهر نشاطا حيويا إيجابيا للبحث: خمسة قلويدات ديتربينويد (الشكل 3)، البنزويلاكونين (1)، 14-بنزويل-8-أو-ميثيلاكونين (2)، (−)-(A-b)-14α-بنزويليكسي-N-إيثيل-13β، 15α-ثنائي هيدروكسي-1α، 6α، 8β، 16β، 18-بنتاميثوكسي أكونيتان (3)، سميرنوتين A (4)، والأكونيتين (5)، بالإضافة إلى مشتق واحد من الكومارين، سكوبوليتين (6)20. تم استرجاع تدوينات نظام إدخال الخط المبسط بإدخال جزيئات (SMILES) لهذه المركبات من قاعدة بيانات PubChem (https://pubchem.ncbi.nlm. nih.gov/) أو تم إنشاؤها باستخدام ChemDraw 18.0. تم استيراد هذه الرموز لاحقا إلى قاعدة بيانات SwissTargetPrediction (https://swisstargetprediction.ch/)، مع تحديد النوع ك "الإنسان العاقل". تم تحديد الأهداف المحتملة من خلال اختيار جينات ذات قيمة احتمالية > 0، وتم جمع أسماء الأهداف ومعرفات UniProt المقابلة21,22.

شبكات PPI
تم تحليل الجينات المستهدفة المتداخلة بواسطة شبكة تفاعل البروتين والبروتين (PPI) باستخدام قاعدة بيانات STRING (https://string-db.org/)23. ثم تم استيراد البيانات الناتجة بتنسيق TSV إلى Cytoscape 3.9.1 لمزيد من التصور والتحليل. تم حساب المعلمات الطوبولوجية للشبكة باستخدام إضافة Network Analyzer المدمجة. في الشبكة المرئية، تم تعيين حجم العقدة وشدة اللون إلى قيمة درجة، بينما عكس سمك الحواف قوة التفاعل بين الأهداف. تم تحديد الأهداف الأساسية وتصنيفها بناء على درجة ارتباطها24.

تحليل مسار إثراء مسار علم الجينات (GO) وموسوعة كيوتو للجينات والجينوم (KEGG)
تم تقديم الأهداف المشتركة إلى قاعدة بيانات Metascape (https://metascape.org) لتحليلات تخصيب مسارات GO وKEGG25. تم تصور النتائج الوظيفية باستخدام منصة المعلوماتية الحيوية WeiShengXin (https://www.bioinformatics.com.cn).

بناء شبكة "المكونات النشطة للدواء-المرض-الأهداف-المسارات"
تم فحص المكونات النشطة وأهدافها المقابلة بشكل منهجي، تلاها تحليل إثراء وظيفي لتحديد مسارات الإشارة الرئيسية وأهدافها المرتبطة. تم دمج هذه العناصر لاحقا باستخدام Cytoscape 3.9.1 لبناء شبكة شاملة "الدواء–المكونات النشطة–المرض–الأهداف–المسارات'. ثم تم إجراء تحليل طوبولوجي باستخدام أداة محلل الشبكة ، حيث تم ترتيب العقد بناء على معلمات رئيسية، بما في ذلك الدرجة والوسط، لتحديد العناصر المركزية داخل الشبكة.

الالتحام الجزيئي للمركبات الرئيسية مع الأهداف الأساسية
تم استرجاع البنى ثلاثية الأبعاد للبروتينات المستهدفة الأساسية، بما في ذلك ESR1 (9BQE)، PTGS2 (5F19)، EGFR (2XKN)، GSK3B (5HLN)، SRC (5MTJ)، وERBB2 (8U8X)، من بنك بيانات البروتينات RCSB (http://www.rcsb.org/؛ تم الوصول إليه في 7 مايو 2025). تم بناء هياكل مركبة في ChemDraw (الإصدار 18.0) ثم تم تحويلها لاحقا إلى صيغة SDF ثلاثية الأبعاد باستخدام وحدة Chem3D المدمجة. تم عرض نتائج الالتحام الجزيئي باستخدام PyMOL، وتم تقييم ألفات الارتباط وفقا لطاقة التفاعل (kcal·mol-1)26.

اختبار بقاء الخلايا
تم زرع خلايا MH7A في مرحلة النمو اللوغاريتمي في 96 صفيحة بئر بكثافة 5 ×10 3 خلايا في كل بئر. عند الوصول إلى 80٪ من التقاء الجسم، عولجت الخلايا أولا بعدادة السكريات الدهنية (LPS) (1 ميكروغرام·مل-1) لمدة 6 ساعات ثم تعرضت لتركيزات مختلفة من سميرنوتين A (5، 25، 50، 75، و100 ميكروغرام·مل-1). تم إعداد كل مجموعة معالجة في رباعية المراحل وحضنتها لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية تحت 5٪ CO₂. بعد الحضانة، أضيف 100 ميكرولتر من محلول CCK8 بنسبة 10٪ إلى كل بئر، تلاها حضانة إضافية عند 37 درجة مئوية لمدة ساعتين. تم قياس الامتصاص عند 450 نانومتر باستخدام قارئ الألواح الدقيقة.

اختبار ELISA في خلايا MH7A
تم جمع المادة الفائقة عن طريق الطرد المركزي عند 2000 × جرام لمدة 20 دقيقة عند 4 درجات مئوية. تم قياس مستويات السيتوكينات الالتهابية، بما في ذلك IL-6 وIL-1β وTNF-α وIL-10، في المادة الفائقة باستخدام مجموعات ELISA المقابلة، وفقا لتعليمات الشركة المصنعة بدقة.

قياس درجة تورم الأصابع
تم تقييم درجة تورم الكف الخلفي اليمنى بقياس حجم الكف كل 3 أيام بعد النمذجة. تم أخذ القياسات مرتين لكل فأر وتم قياسها بمتوسط. تم قياس الاستجابة الالتهابية كنسبة زيادة في حجم الأرجل بالنسبة للخط الأساسي.

figure-protocol-1

قياس مؤشر الأعضاء
تم تخدير جميع الفئران وتم إعدامهم الرحيم لمدة 24 ساعة بعد الإعطاء النهائي. يتم اعتماد الطريقة الإنسانية المعترف بها من قبل المجتمع البيطري الدولي. أولا، يستخدم تركيز عال (5٪) من الإيزوفلوران لتخدير الحيوان بعمق. بمجرد أن يفقد وعيه وكل ردود الفعل، يفتح الصدر ويقطع القلب، مما يضمن موت الحيوان دون ألم ودون أي إحساس. تم استئصال الطحال والزعتر على الفور ووزنهما. بعد الشطف بالمحلول الملحي العادي، تمت إزالة الرطوبة الزائدة من أسطح الأنسجة عن طريق الطلاء بورق الترشيح، وتم تسجيل أوزان الأعضاء الرطبة27,28.

figure-protocol-2

الهيماتوكسيلين والإيوزين (HE)
للحفاظ على سلامة عينات نسيج الكف، تم جمع وتخزين الجزء الكامل من مفصل الكاحل الأيمن لكل فأر. في التقسيم، استخدم نسيج الكف المتورم. كانت عملية أخذ العينات كما يلي: تم تشريح النسيج الذي يقع على بعد حوالي 1 سم فوق مفصل الكاحل الأيمن بالكامل، وتمت إزالة الفرو، وقطع عمود العظم عند الطرف القريب. تم تثبيت العينة فورا في محلول بارافورمالديهايد بنسبة 10٪. بعد التثبيت، وضع النسيج في محلول إزالة الكالسية بنسبة 15٪ من EDTA. تمت مراقبة إزالة الكلب كل 3 أيام، وتم تجديد المحلول حسب الحاجة حتى يلين الأنسجة، مما يشير إلى اكتمال إزالة الكالسية. ثم تم تجفيف النسيج من خلال سلسلة إيثانول متدرجة (75٪ لمدة 4 ساعات، 85٪ لمدة ساعتين، 90٪ لمدة 1.5 ساعة، 95٪ لمدة ساعة، وتغييرين من 100٪ إيثانول لمدة 0.5 ساعة). تم إزالة البارافين من القطع، وإعادة ترطيبها عبر الإيثانول، وصبغها بالهيماتوكسيلين لمدة 10 دقائق، وشطفها بماء الصنبور، وتمييزها بحمض الهيدروكلوريك–الإيثانول لمدة 10 ثوان، وشطفها بماء الصنبور، ثم تغسلها، ثم شطفتها مرة أخرى، وغمسها في 85٪ إيثانول لمدة 5 دقائق، ثم صبغها بالإيوزين لمدة 5 دقائق، وشطفها بماء الصنبور لمدة 3 ثوان، ثم جففها، وإزالتها، وتركيبها للملاحظة29.

اختبار ELISA لمصل الفئران
تم طرد عينات الدم عند 2000 × جرام لمدة 20 دقيقة عند 4 درجات مئوية، وتم جمع المادة الفائقة الناتجة لتحليل السيتوكينات. تم تحديد تركيزات IL-1β وIL-6 وTNF-α باستخدام مجموعات ELISA التجارية، وفقا لبروتوكولات الشركة المصنعة بدقة. تم إنشاء منحنى قياسي وتركيبه باستخدام برنامج cvxpt32، وتم حساب مستويات التعبير لكل سايتوكين عن طريق استيفاء قيم الامتصاص في معادلة المنحنى القياسية المقابلة. تم حساب تركيزات البروتين النهائية من القياسات التجريبية الفعلية.

تحليل تفاعل بوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR)
تم عزل الحمض النووي الريبي الكلي من الخلايا الزلفية باستخدام كاشف تريزول، مع تحقيق فصل الطور من خلال إضافة الكلوروفورم30. ثم تم استخدام مجموعة نسخ عكسي تجارية لتخليق cDNA من الحمض النووي الريبي المعزول، مع اتباع تعليمات الشركة المصنعة بدقة. تم إجراء qRT-PCR باستخدام كاشف SYBR Premix. تم استخدام إنزيم غليسراالديهايد-3-فوسفات ديهيدروجيناز (GAPDH) كجين مرجعي داخلي، وتم حساب مستويات التعبير الجيني النسبية باستخدام طريقة 2-ΔΔCt . تم استخدام تسلسلات التمهيد التالية: GAPDH للأمام: ACAGCAACAGGGTGGTGGGAC، وGAPDH للخلف: TTTGAGGGTGCAGGAACTT؛ IL-17A للأمام: CTGATGCTGTTGCTGCTACTGA، وIL-17A للخلف: TGGAACGGTTGAGGTAGTGA؛ TRAF6 للأمام: ACATTTCCCTCTGTCCACAC، وTRAF6 للخلف: TTAGCATCCATGACCTCGT; IL-10 للأمام: CTGCAGGACTTTAAGGTTTACTT، وIL-10 للخلف: CTTGCTTTTATTCACAGGGGGA; IL-1β للأمام: CCTGTGTGATGAAAGACGGC، وIL-1β للخلف: TATGTCCCGACCATTGCTGT; IL-6 للأمام: GTTGCCTTCTTGGGGACTGATG، وIL-6 للخلف: TACTGGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGT.

استخراج البروتين وإزالة الطلاء الغربي
تم تحلل الأنسجة الزلية في اختبار التفاعل المشع (RIPA) المكملة مع مثبطات الفوسفاتاز/البروتياز، وتم قياس تركيزات البروتين باستخدام مجموعة اختبار حمض البيسينشونيك (BCA). في الطلاء الغربي، تم تعريض الليزاتات التي تحتوي على كميات متساوية من البروتين لجهاز الرحلان الكهربائي الهلام دوديسيل كبريت-بولي أكريلاميد الصوديوم (SDS-PAGE) ثم نقلت لاحقا إلى أغشية فلوريد البولي فينيليدين (PVDF). بعد الحجب بحليب خالي الدسم بنسبة 5٪ في محلول ملحي مخزن بتريس مع 0.1٪ توين (TBST) لمدة ساعتين عند 25 درجة مئوية، تم حضان الأغشية طوال الليل عند 4 درجات مئوية مع الأجسام المضادة الأولية (GAPDH 1:50000؛ P-PI3K 1:1000؛ PI3K 1:1000؛ P-AKT 1:3000; AKT 1:6000). بعد غسل مكثف باستخدام TBST، تفاعلت الأغشية مع الأجسام المضادة الثانوية المرافقة من بيروكسيداز الفجل الحار (HRP) (مضاد الفأر IgG 1:10000؛ مضاد للأرانب IgG 1:1000) لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. بعد سلسلة أخرى من غسلات TBST، تم تصور أشرطة البروتين باستخدام ركيزة الإضاءة الكيميائية المعززة (ECL). تم قياس شدة النطاق باستخدام برنامج ImageJ وتم تطبيعها إلى GAPDH كوحدة تحكم في التحميل.

التحليل الإحصائي
تم تحليل جميع البيانات باستخدام برنامج Graphpad Prism 9.5 وتعرض كمتوسط ±± انحراف معياري. تم إجراء المقارنات الإحصائية باستخدام تحليل النوى العميق أحادي الاتجاه عند الاقتضاء. تم اعتبار قيمة p أقل من 0.05 ذات دلالة إحصائية. مقارنة بمجموعة الضابطة: *p < 0.05، **p < 0.01، p < 0.001، وp < 0.0001؛ مقارنة بمجموعة Model/LPS: #p < 0.05، ##p < 0.01، ###p < 0.001، و###p < 0.0001.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تأثيرات مشتقات بندول ألمانيوم على هدف مضاد الروماتويديوم
تم استرجاع البنى ثلاثية الأبعاد للمركبات الستة بصيغة SDF، وتم رفع أرقام SMILES إلى قاعدة بيانات SwissTargetPrediction للتنبؤ بالأهداف. تم الاحتفاظ بالأهداف ذات الاحتمالية الأكبر من 0، وتم تصدير النتائج كملف CSV. بعد إزالة التكرارات، تم تحديد ما مجموعه 97 هدفا محتملا مرتبطا بالمركبات.

تم جمع الأهداف المرضية المرتبطة بالتهاب المفاصل الروماتويدي (RA) من قواعد بيانات GeneCards وO...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توفر هذه الدراسة المتكاملة رؤى ميكانيكية جديدة حول النشاط المضاد لالتهاب المفاصل الروماتويدي في سميرنوتين A، وهو قلوي ثنائي تيربينويد C19 من بندول Aconitum N. Busch. تظهر نتائجنا أن سميرنوتين A يخفف التهاب الروماتويدات الروماتويدية من خلال التثبيط المستهدف لمسار إشارات PI3K/Akt، وهو آلية مميزة عن قلويدات الديتيربينويد التي تم الإبلاغ عنها سابقا.

نجح الجمع بين التنبؤ بعلم الأدوية الشبكي والتحقق من الالتحام الجزيئي في تحديد EGFR وPTGS2 كأهداف رئيسية، مع...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنه لا توجد لديهم مصالح مالية متنافسة معروفة أو علاقات شخصية قد تكون أثرت على العمل المبلغ عنه في هذه الورقة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد حظي هذا البحث بدعم مالي من مشروع شباب صندوق العلوم الطبيعية في تشينغهاي (رقم 2022-ZJ-950Q) والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC) (رقم 82460845).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
AceQ qPCR SYBR Green Master Mixفازيمس111
الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للفأر AKT (60 كيلو دالتون)ووهان سانيينغ للتكنولوجيا الحيوية60203-2-Ig
مجموعة اختبار بروتين BCAتكنولوجيا حيوية جيبيسي في قوانغتشوG3522
معيار BSAتكنولوجيا حيوية جيبيسي في قوانغتشوG8532
الوسط الكامل لخلايا MH7Aشنغهاي فوهينغ للتكنولوجيا الحيويةFH-MH7A
مجموعة إليسا ل IL-10لانشانغشو للتكنولوجيا الحيويةED-13626
مجموعة إليسا ل IL-17Aلانشانغشو للتكنولوجيا الحيويةED-10344
مجموعة إليسا ل IL-1 وبيتا؛لانشانغشو للتكنولوجيا الحيويةED-10351
مجموعة إليسا ل IL-6لانشانغشو للتكنولوجيا الحيويةED-10377
مجموعة إليسا ل TNF-αلانشانغشو للتكنولوجيا الحيويةED-11776
نظام PCR الكمي الفلوريأنظمة حيوية تطبيقيةفييا-7
الجسم المضاد وحادي النسيلة للفأر GAPDHووهان سانيينغ للتكنولوجيا الحيوية60004-1-Ig
الطرد المركزي المبرد عالي السرعةمعدات هونان كيتشنغ للآلات الموسيقيةHI-16KR
HiScript II Q Select RT SuperMix ل qPCRفازيمR223
الأجسام المضادة الثانوية المضادة للفئران الماعزة الموسومة ب HRPووهان سانيينغ للتكنولوجيا الحيويةSA00001-1
الجسم المضاد الثانوي المضاد للأرانب الماعز الموسوم ب HRPبيوتايم بيوتكنولوجيA0208
التهاب المفاصل الروماتويدي البشري الشبيه بالخلايا الليفية في خط MH7Aتقنية كيساي الحيويةQS-H075
قارئ اللوحة الدقيقةBioTekMQX200
المجهرلايكافليكساكام C1
قارئ الميكرولوح متعدد الأنماطالأجهزة الجزيئيةفليكس ستيشن 3
P-AKT (60 كيلو دالتون) الأجسام المضادة للأرنب متعدد النسياتووهان سانيينغ للتكنولوجيا الحيوية28731-1-AP
ميكروتوم البارافينلايكاRM 2016
مضخم PCRأنظمة حيوية تطبيقيةبروفليكس
محلول ملحي مخزن بالفوسفات (1&00; PBS)تقنية كيساي الحيويةQS-S001
PI3K (85 كيلو دالتون) الأجسام المضادة للأرنب متعدد النسيراتالألفةAF6241
P-PI3K (85 كيلو دالتون) الأرنب المضاد متعدد النسيلاتالألفةAF3242
سميرنوتين أمعزولة ومحددة من قبل مختبرناC39H49NO11
جهاز تجفيف الأنسجةووهان جونجي إلكترونيكJT-12J
آلة تضمين الأنسجةووهان جونجي إلكترونيكJB-L6
آلة نشر وخبز الأنسجةووهان جونجي إلكترونيكJK-6
تريزولأمبيون15596-026
محلول هضم خلايا التريبسين (0.25٪ تريبسين،  ؛ مع EDTA، بدون فينول أحمر)تقنية كيساي الحيويةQS-S401

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Perera, J., Delrosso, C. A., Nerviani, A., Pitzalis, C. Clinical phenotypes, serological biomarkers, and synovial features defining seropositive and seronegative rheumatoid arthritis: a literature review. Cells. 13 (9), 743(2024).
  2. Jiang, N., Tian, X. P., Zeng, X. F. Interpretation on the 2024 Chinese for the diagnosis and treatment of rheumatoid arthritis. Med J PUMCH. 16 (1), 28-34 (2025).
  3. Nygaard, G., Firestein, G. S. Restoring synovial homeostasis in rheumatoid arthritis by targeting fibroblast-like synoviocytes. Nat Rev Rheumatol. 16 (6), 316-333 (2020).
  4. Dumoulin, Q. A., et al. Development of rheumatoid arthritis after methotrexate in anticitrullinated protein antibody-negative people with clinically suspect arthralgia at risk of rheumatoid arthritis: 4-year data from the TREAT EARLIER trial. Lancet Rheumatol. 6 (12), e827-e836 (2024).
  5. Zhang, R. Y., et al. Mechanisms of NLRP3 inflammasome in rheumatoid arthritis and osteoarthritis and the effects of traditional Chinese medicine. J Ethnopharmacol. 321, 117432(2024).
  6. Parveen, A., Wal, P., Kumar Rai, A., Wal, A. An outlook of substantial progress in nanotechnology emerged in treatment approaches for rheumatoid arthritis. Curr Drug Ther. 19 (3), 289-301 (2024).
  7. Shen, P., et al. Wutou decoction attenuates rheumatoid arthritis in rats through SIRT1-mediated deacetylation of the HMGB1/NF-κB pathway. J Ethnopharmacol. 337, 118921(2025).
  8. Wang, X. W., et al. Jingfang granules alleviates the lipid peroxidation induced ferroptosis in rheumatoid arthritis rats by regulating gut microbiota and metabolism of short chain fatty acids. J Ethnopharmacol. 339, 119160(2025).
  9. Wang, X. D., Mao, J. X. Systematic pharmacology-based strategy to investigate the mechanism of beta-sitosterol for the treatment of rheumatoid arthritis. Front Genet. 15, 1507606(2024).
  10. Liu, S., et al. Treatment of rheumatoid arthritis with alkaloids in natural medicines: a review. Mod Chin Med. 24 (4), 721-727 (2022).
  11. Tan, X. Y., et al. Rapid visual characterization of alkaloid changes in traditional processing of Tibetan medicine Aconitum pendulum by high-performance thin-layer chromatography coupled with desorption electrospray ionization mass spectrometry imaging. Front Pharmacol. 14, 1104473(2023).
  12. Yu, L. Q., et al. Traditional Tibetan medicine: therapeutic potential in rheumatoid arthritis. Front Pharmacol. 13, 938915(2022).
  13. Ai, C. Q. Sibu Yidian Sman Thang Detailed. , Qinghai Ethnic Publishing House. (2012).
  14. Zhang, X. R., et al. Medication regularity of Tibetan patent medicines for gZav-Grib disease based on data mining. Shanxi Med Periodical Press. 21 (16), 29923-29928 (2023).
  15. Liu, Y., et al. An integrated strategy of UPLC-Q-TOF/MS and HPTLC/PAD-DESI-MSI for the analysis of chemical variations: a case study of Tibetan medicine Tiebangchui. J Pharm Anal. 14 (4), 100907(2024).
  16. Li, C. Y., et al. Aconitum pendulum and Aconitum flavum: a narrative review on traditional uses, phytochemistry, bioactivities and processing methods. J Ethnopharmacol. 292, 115216(2022).
  17. Xie, C. M., et al. Triptolide suppresses human synoviocyte MH7A cells mobility and maintains redox balance by inhibiting autophagy. Biomed Pharmacother. 115, 108911(2019).
  18. Wang, X. W., et al. Exploration of protective effect and mechanism of Jingfang granules on rheumatoid arthritis based on network pharmacology and metabolomics. Chin Tradit Herb Drugs. 55 (23), 8067-8078 (2024).
  19. Yin, Q., et al. Anti-rheumatoid arthritis effects of traditional Chinese medicine Fufang Xiaohuoluo pill on collagen-induced arthritis rats and MH7A cells. Front Pharmacol. 15, 1374485(2024).
  20. Dong, D., et al. A new phenolic glycoside from roots of Aconitum pendulum. China J Chin Mater Med. 50 (22), 6380-6386 (2025).
  21. Wang, X., et al. Network pharmacology provides new insights into the mechanism of traditional Chinese medicine and natural products used to treat pulmonary hypertension. Phytomedicine. 135, 156062(2024).
  22. Nam, D. G., Kim, M., Choi, A. J., Choe, J. S. Health benefits of antioxidant bioactive compounds in ginger (Zingiber officinale) leaves by network pharmacology analysis combined with experimental validation. Antioxidants. 13 (6), 652(2024).
  23. Chen, G. Y., et al. Prediction of Rhizoma drynariae targets in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology and experimental verification. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5233462(2021).
  24. Guo, Z. W., et al. Mechanism of crocin in improving Alzheimer's disease based on network pharmacology, molecular docking and cellular validation. Chin Tradit Herb Drugs. 56 (13), 4712-4723 (2025).
  25. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1826299(2022).
  26. Zheng, Y. T., Xia, L. J., Zhang, X. J., Jin, M. Exploration of potential anti-inflammatory targets and key ingredients of Arisaematis rhizoma in treatment of major depressive disorder based on machine learning and molecular dynamics simulation. Chin Tradit Herb Drugs. 55 (15), 5174-5188 (2024).
  27. Guo, M., et al. Levamisole ameliorates rheumatoid arthritis by downregulating the PI3K/Akt pathway in SD rats. Pharmaceuticals. 17 (11), 1504(2024).
  28. Zhang, B. L., et al. Mechanism of Yiqi Yangyin Tongluo decoction regulating miR-885-5p/PTEN signaling pathway to regulate autophagy-inflammation in collagen-induced arthritis model rats. Liaoning J Tradit Chin Med. 52 (3), 182-189 (2025).
  29. Chen, G. Y., et al. Integrating network pharmacology and experimental validation to explore the key mechanism of Gubitong recipe in the treatment of osteoarthritis. Comput Math Methods Med. 2022, 7858925(2022).
  30. Li, J. Y., et al. Effect of Danggui Niantongtang on key factors of extrinsic and intrinsic apoptotic pathway in synovial tissue of adjuvant arthritis rats. Chin J Exp Tradit Med Form. 27 (4), 1-7 (2021).
  31. Xia, Z. X., Li, Q., Tang, Z. Y. Network pharmacology, molecular docking, and experimental pharmacology explored Ermiao wan protected against periodontitis via the PI3K/AKT and NF-κB/MAPK signal pathways. J Ethnopharmacol. 303, 115900(2023).
  32. Sabbah, D. A., Hajjo, R., Sweidan, K. Review on epidermal growth factor receptor (EGFR) structure, signaling pathways, interactions, and recent updates of EGFR inhibitors. Curr Top Med Chem. 20 (10), 815-834 (2020).
  33. Guo, X., et al. The antiangiogenic effect of total saponins of Panax japonicus CA Meyer in rheumatoid arthritis is mediated by targeting the HIF-1α/VEGF/ANG-1 axis. J Ethnopharmacol. 333, 118422(2024).
  34. Jiang, L., et al. Elucidating the role of Rhodiola rosea L. in sepsis-induced acute lung injury via network pharmacology: emphasis on inflammatory response, oxidative stress, and the PI3K-AKT pathway. Pharm Biol. 62 (1), 272-284 (2024).
  35. Bai, Y. M., Liang, S., Zhou, B. Yangyinghuoxue decoction exerts a treatment effect on hepatic fibrosis by PI3K-AKT pathway in rat model: based on network pharmacology and molecular docking. Aging (Albany NY). 16 (4), 3773(2024).
  36. Ba, X., et al. WTD attenuating rheumatoid arthritis via suppressing angiogenesis and modulating the PI3K/AKT/mTOR/HIF-1α pathway. Front Pharmacol. 12, 696802(2021).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

الفيديو قريباً

مقالات ذات صلة