الهدف الأساسي من هذا البروتوكول هو تمكين التصوير غير المدمر والتحليل الكمي لعيون مركب ذبابة الفاكهة. يجمع بين استراتيجية تثبيت الشريط مع اكتساب Z-stack المجهرية المجسمة وإعادة بناء عمق التركيز الممتد لإنتاج صور عالية الدقة وخالية من العيوب الأثرية.
Method Article
بروتوكول تركيب الشريط لتصوير Z-stack عالي الدقة لعيون مركب ذبابة الفاكهة
* These authors contributed equally
Opens in a new tab
In This Article
Summary
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Abstract
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
هنا، نقدم بروتوكول تركيب وتصوير غير مدمر لتحليل ظاهري عالي الدقة لعين مركب ذبابة الفاكهة. غالبا ما يكون التصنيف الظاهري الدقيق لعين مركب ذبابة الفاكهة محدودا بهندستها المحدبة وهشاشتها الميكانيكية أثناء التعامل. لمعالجة ذلك، نفصل سير عمل تصوير متعدد الاستخدامات وغير جراحي يتيح التصوير عالي الدقة من عدة وجهات نظر. يستخدم البروتوكول استراتيجية تثبيت لاصقة مخصصة على منصة شريط مقلوب، حيث يثبت الذباب من الجسم والأجنحة مع ترك الرأس دون أن يمسه أي شيء. والأهم من ذلك، أن هذا التكوين المرن يدعم اتجاهات تثبيت مميزة: وضع جانبي لالتقاط التقعر الكامل للعيون الفردية، ووضعية أمامية لتقييم تماثل الرأس بالكامل. كما تسهل هذه الطريقة ترتيب المصفوفات عالية الكثافة، مما يسمح بمعالجة سريعة من 20 إلى 30 عينة في كل جلسة. من خلال دمج المجهر المجسم بالضوء المنعكس مع اكتساب Z-stack وإعادة بناء عمق التركيز الممتد (EDF)، ينتج سير العمل صورا مركبة شبه ثلاثية الأبعاد حادة بشكل متجانس. يحافظ هذا النهج على التصبغ الطبيعي وينتج صورا عالية الدقة وغنية بالتباين مناسبة للتحليل الظاهري الكمي على نطاق الأعضاء.
Introduction
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
عين مركب ذبابة الفاكهة الميلانوغاستر هو نموذج كلاسيكي وقوي لدراسة نمو الأعضاء ونمطها ومتانتها أثناء التطور. تتكون عين الذبابة من حوالي 800 أوماتيديا عالية الترتيب، وتوفر قراءة حساسة وقابلة للقياس للاضطرابات الجينية التي تؤثر على التكاثر والتمايز وتنظيم الأنسجة 1,2,3. لقد أتاح التلاعب الجيني لتطور العين تاريخيا رؤى أساسية حول مسارات الإشارة المحفوظة. أظهرت الدراسات الأساسية أن التعبير خارج الرحم لعامل النسخ عديم العين كاف لتحفيز تكوين العين في الأنسجة غير الشبكية، مما يثبت العين كنموذج لتحديد الأعضاء والمرونة4. حددت الدراسات اللاحقة مسار إشارات فرس النهر D. melanogaster كمنظم مركزي لحجم العين وعدد الخلايا من خلال التحكم المنسق في التكاثر وموت المبرمج 5,6. بالتوازي، أظهرت إشارات القنفذ وBMP تنظيم التقدم المورفوجيني ودقة النمو والنمط المكاني داخل الشبكية 7,8 النامية.
ومع ذلك، فإن التقاط صور عالية الدقة للعين المركبة البالغة يشكل تحديات بصرية كبيرة بسبب هندستها المحدبة نصف الكروية. المجهر الساطع القياسي محدود بعمق ميدان ضحل، مما يجعل من المستحيل التركيز في الوقت نفسه على أقصى نقطة ظهرية (قطب) والحواف الهامشية (خط الاستواء) للعين في تعريض واحد9. غالبا ما يؤدي هذا القيد إلى ظهور صور حيث تكون أجزاء كبيرة من سطح الشبكية ضبابية، مما يعيق تطبيق أدوات تحليل الصور عالية الدقة وتعلم الآلة المصممة لقياس الأنماط الظاهرية المتنوعة. لتوصيف سطح الشبكية بالكامل، يجب تصور الانحناء بالكامل دون وجود تشوهات بصرية. لذلك، هناك حاجة إلى طريقة تصوير تحافظ على شكل العين الأصلي مع تمكين الرؤية عالية الدقة لسطح الشبكية المنحني بالكامل.
علاوة على ذلك، غالبا ما تضر طرق تحضير العينات التقليدية للمجهر بسلامة هيكلية رأس الذبابة. تعتمد تقنيات التركيب التقليدية غالبا على المواد اللاصقة التي قد تحجب تفاصيل السطح أو تتطلب التلاعب المادي بملقط يضغط على كبسولة الرأس. كما لوحظ في دراسات حول تتكون الشبكية، فإن السلامة الهيكلية للعين هي الأهمية. يسبب الضغط المباشر أو الثقب تسرب الهيموليمف، مما يؤدي إلى فقدان الضغط الداخلي والانهيار أو "الانبعاج" الناتج عن سطح العين. يمكن أن تحاكي هذه العيوب الميكانيكية الأنماط التنكسية العصبية أو العيوب الجينية، مما يؤدي إلى نتائج إيجابية كاذبة في الفحوصات واسعة النطاق. هدف هذا البروتوكول هو توفير سير عمل للتركيب والتصوير غير المدمر لتصوير عيون مركبة ذبابة الفاكهة السليمة بدقة عالية.
هنا، نقدم سير عمل تصوير سريع وقابل للتكرار يتيح التصور عالي الدقة لعيون مركب ذبابة الفاكهة السليمة وشكل الرأس بالكامل دون ملامسة مباشرة للرأس. في هذه الطريقة، يتم تثبيت الذباب البالغ باستخدام استراتيجية تثبيت لاصقة مرنة تثبت الجسم والأجنحة، مما يسمح بوضع مستقر إما في الاتجاه الجانبي—لالتقاط الانحناء الكامل لعين واحدة—أو في الاتجاه الأمامي—لتقييم تناظر الرأس الكامل وخصائص العين. تقلل هذه الاستراتيجية المرنة من التلف الميكانيكي وتحافظ على هندسة العين الأصلية في ثلاثة أبعاد. عند دمجها مع المجهر المجسم بالضوء المنعكس، واكتساب مكدس Z، وإعادة بناء عمق التركيز الممتد9، ينتج هذا النهج صورا حادة وعالية الجودة بشكل موحد من عدة وجهات نظر، مناسبة لكل من الفحص النوعي والتحليل الكمي للظاهرات. هذه الطريقة مناسبة بشكل خاص لدراسات الاضطرابات الجينية، والأنماط الظاهرية النموية، والفحص عالي الإنتاجية لمورفولوجيا العين في ذبابة الفاكهة.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Protocol
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. جمع العينات والمزامنة
ملاحظة: لضمان قابلية المقارنة التجريبية، هناك حاجة إلى رقابة صارمة في توقيت الإغلاق الخارجي. في ظروف الزراعة القياسية عند 25 درجة مئوية، يحدث السحب عادة بعد 10 إلى 12 يوما من وضع البيض. يجب مراقبة العذارى عن كثب خلال هذه الفاصلة، حيث يشير تغميق العذراء إلى اقتراب حدوث العذراء.
- طريقة النقر المباشر (الطريقة القياسية)
- اضغط بلطف على قارورة زراعة ذبابة الفاكهة البلاستيكية القياسية بحجم 24 × 95 مم (مغلقة بسدادة رغوية) على وسادة ناعمة لإزاحة الذباب البالغ إلى القاع.
- قم بإزالة السدادة بسرعة ومحاذاة فم قارورة الجمع الطازج مع قارورة الزرعة.
- اقلب الإعداد بحيث تكون قارورة الثقافة في الأعلى. انقر بلطف على الجدران لنقل الذباب إلى قارورة الجمع.
ملاحظة: لا ينصح بهذه الطريقة إذا كان وسط طعام دقيق الذرة والآجار القياسي رطبا، لأن الذباب الجديد قد يحتجز ويقتل بسهولة. لتقليل الوفيات، يقوم بجمع الذباب في البداية في قارورة فارغة بحجم 24 × 95 مم. بعد التخدير (الخطوة 3)، انقل الذباب إلى الجدار الداخلي لقارورة بحجم 24 × 95 مم تحتوي على وسط طعام طازج.
- طريقة نقل الجيوتاكسيس السلبية (طريقة مكافحة الالتصاق)
- أزل السدادة من قارورة جديدة وقلبها على سطح الطاولة لمنع دخول الذباب الضال.
- امسك قارورة الزراعة بحيث تكون الفتحة متجهة للأسفل. الذباب يتسلق للأعلى نحو جانب الطعام، بعيدا عن الفتحة.
- بمجرد أن تصبح الفتحة خالية من الذباب، قم بفتح زجاجة الزراعة بسرعة ومحاذاتها مع قارورة الجمع الفارغة المقلوبة بحجم 24 × 95 مم على المنضدة.
- انقر بلطف على نقطة الاتصال على سطح الطاولة لوضع الذباب في قارورة الجمع.
ملاحظة: هذه الطريقة تقلل بشكل كبير من الوفيات الناتجة عن التصاق الطعام لكنها تستغرق وقتا أطول من النقر المباشر.
- طريقة تخدير CO₂ (طريقة عالية الكفاءة)
- اقلب قارورة الزراعة بحيث تواجه السدادة للأسفل.
- أدخل إبرة مسدس التخدير CO₂ بعناية بين السدادة وجدار القارورة.
- شغل دواسة القدم وصمام اليد بلطف لإطلاق 100٪ ثاني أكسيد الكربون بمعدل تدفق منخفض وهدوء.
- بمجرد تخدير الذباب وسقوطه على السدادة، ضع قارورة الزراعة أفقيا. قم بإزالة السدادة، ومحاذاة مع قارورة جمع فارغة، واضغط برفق على قارورة الزراعة لنقل الذباب المخدر إلى قارورة الجمع.
ملاحظة: قد يؤدي تدفق الهواء المفرط إلى دفع الذباب إلى سطح الطعام، مما يسبب الالتصاق والوفاة؛ حافظ بدقةعلى تدفق ثاني أكسيد الكربون اللطيف الكافي لتخدير الذباب دون إزاحة جسدية. يطير المونيتور عن كثب للكشف عن علامات التعافي المبكرة، مثل الارتعاش الطفيف أو حركة الأجنحة والساقين.
- الوسم والصيانة
- ضع علامة على القارورة بالجنس، وتاريخ الجمع، وتاريخ الإخراج، والنمط الجيني، وظروف الزراعة.
- فصل الجنس: إذا كانت الطيران في التصوير أطول من 10 أيام، افصل الذكور والإناث في قوارير مزرعة تحتوي على طعام مختلفة لمنع التزاوج وظهور جيل F2، مما قد يتداخل مع بيئة التجارب.
ملاحظة: يمكن الاحتفاظ بالذباب في هذه القوارير التي تحتوي على الطعام تحت ظروف الزراعة السابقة (مثل 25 درجة مئوية) حتى يصل إلى العمر المطلوب للتصوير.
2. تحضير لوحة التثبيت
- احصل على شريحة مجهر زجاجية قياسية نظيفة.
- قص شريطا من شريط لاصق أبيض أطول بحوالي 2 سم من الشريحة.
- ضع الشريط اللاصق على الشريحة بحيث يكون الجانب اللاصق مواجها للأعلى (الجانب غير اللاصق مقابل الزجاج). تأكد من أن الشريط يتدلي فوق السلايد بحوالي 1 سم من كلا الطرفين.
- ثبت الأطراف المتدلية عن طريق لف شريطين إضافيين بحجم ~5 مم من الشريط بإحكام حول ظهر الشريحة.
- تأكد من أن سطح اللاصق مستو ومشدود وخال من التجاعيد.
- وضع العلامات: وضع علامة على مؤشرات الاتجاه (مثل "الأعلى/الأعلى" و"الأسفل/الأسفل") أو معرفات العينات على الأطراف غير اللاصقة للشريط لتسهيل التوجيه وتتبع العينات تحت المجهر.
ملاحظة: عند اختيار الذباب للتصوير، تجنب اختيار الأفراد الذين لديهم فروق كبيرة في حجم الجسم. حتى مع نفس التكبير، يمكن أن تؤدي اختلافات حجم الجسم إلى مساحات سطح مركبة غير قابلة للمقارنة.
3. القتل الرحيم والصعود
- القتل الرحيم
- انقل الذباب إلى قارورة جمع مغلقة وفارغة.
- ضع القارورة المغلقة في فريزر بدرجة حرارة -80 درجة مئوية لمدة 15–20 دقيقة.
تحذير: لا تثقب أو تعصر الذبابة بأطراف الملقط الحادة. حتى تسرب الهيموليمف الطفيف يسبب فقدانا سريعا للضغط الهيدروستاتيتيكي الداخلي، مما يؤدي إلى انبعاج فوري وانهيار لا رجعة فيه للعين المركبة، مما يدمر جودة التصوير.
- التركيب للرؤية الجانبية (عين مركبة واحدة)
- التمركز: تحت المجهر الستيريو القياسي (مثل نيكون SMZ745)، استخدم ملقط دقيق لتوجيه الذبابة المصابة إلى وضع جانبي (مستلقي جانبي).
- النقل: باستخدام ملقط دقيق، أمسك الطعم بلطف من الجناح (مع الحفاظ على وضعية الجانب) وانقله إلى لوحة التثبيت اللاصقة المحضرة.
- التثبيت: الصق أحد جانبي جسم الذبابة بالشريط اللاصق. افرد الأجنحة والصقها بشكل مسطح على الشريط لزيادة الثبات.
- إدارة الزائدة: أثناء التثبيت، تأكد من أن الأرجل لا تعيق العين المركبة. إذا كانت الأرجل الأمامية تحجب مجال الرؤية، استخدم الملقط لسحبها بعناية بعيدا عن العين وتثبيتها بإحكام على الشريط اللاصق (مثل مددها للأسفل أو إخفاؤها تحت الصدر).
- التثبيت: ميل الملقط واستخدم جانب الطرف (وليس النقطة الحادة) لضغط الجسم بلطف على الشريط لضمان تثبيت الرابط.
- التعديل الدقيق: تحقق مما إذا كان الرأس أفقيا. إذا لم تكن العين على مستوى بؤري واحد، استخدم الملقط لضبط زاوية الجسم بدقة.
- التركيب للرؤية الأمامية (الرأس الكامل)
- التمركز: على وسادة التخدير، وجه الذبابة إلى وضعية بطنية على الجانب السفلي (استلقاء).
- النقل: استخدم الملقط للإمساك بجناح واحد ورفع السحاب. انقله إلى لوحة التثبيت اللاصقة.
- التثبيت الأولي: افرد كلا الجناحين بلطف (يسار ويمين) وضغطهما بقوة على سطح اللاصق لتثبيت الذبابة.
- تثبيت الجسم: اضغط بلطف على الصدر لضمان التلامس الكامل مع اللوح اللاصق. استخدم الملقط لإمساك البطن الخلفي (الذيل) برفق واسحب بلطف لتسوية محور الجسم قبل تثبيت البطن على الشريط.
- اتجاه الرأس: ضبط زاوية الرأس باستخدام ملقط دقيق لضمان أن يكون المستوى الأمامي (الوجه) موازيا لسطح اللاصق. يجب أن تكون كلتا العينين المركبتين مستويتين ومرئتين في نفس المستوى البؤري.
- الترتيب
- قم بتركيب عدة ذباب في صفوف متوازية أو على شكل شبكة على سطح اللاصق. تأكد من أن الذباب الفردي لا يتداخل لمنع تداخل المكدس Z، رغم السماح بالتعبئة القريبة لتعظيم معدل النقل (مثلا، 20–30 ذبابة لكل منزلقة). محاذاة جميع الذباب بحيث تكون رؤوسها متجهة لنفس الاتجاه (كما هو موضح في الملصقات في الخطوة 2.6) لتسهيل التصوير المنهجي.
- جهز مصفوفات عينات منفصلة للتصوير الجانبي والجبهي باستخدام مجموعات مختلفة من الذباب المدمر من نفس الدفعة. بمجرد التصاق الذبابة بالشريط اللاصق، لا يمكن إزالتها بأمان أو إعادة وضعها دون التسبب في ضرر ميكانيكي شديد للعينة؛ لذلك، لا يمكن تصوير عدة رؤى بشكل متسلسل من نفس الفرد.
ملاحظة: ينصح بشدة بتصوير العينات مباشرة بعد القتل الرحيم والتركيب لمنع جفاف الأنسجة.
4. اكتساب الصور
- تشغيل وتهيئة نظام التصوير المجهر المجسم المحركي
- شغل جهاز الكمبيوتر والشاشة ووحدة المجهر بالتسلسل.
- شغل برنامج LAS X.
- عندما يظهر تنبيه "تهيئة/اختبار ذاتي"، تأكد من أن المساحة تحت الهدف خالية من العقبات واضغط على تأكيد. اسمح للمجهر بإكمال حركة معايرة محور Z بالكامل.
ملاحظة: تم تحسين الخطوات التالية لاستخدام المجهر الستيريو باستخدام نظام البرمجيات LAS X.
- توزيع العينات والإضاءة
- نقل لوحة التثبيت المحضرة إلى منصة القاعدة في المجهر المجسم المحرك، ووضعها يدويا لتكون في مركز العينة الأولى في المصفوفة تحت هدف الكاميرا الرقمية.
- شغل مصدر الضوء المرسلة (القاعدة) والضوء الساقط (الأعلى). لتصوير العين المركب، استخدم بشكل أساسي الضوء المنعكس. اضبط الفتحة لضمان إضاءة متجانسة.
- تكوين البرمجيات
- اضبط وضع الاستحواذ على Z-stack. في إعدادات المشروع، قم بتعيين أولوية الحركة متعددة الأبعاد على 'Z-first' لضمان تشغيل مستمر ومستقر لمحرك القيادة.
- اضبط وضع التصوير على الضوء المنعكس.
- تمكين عمق التركيز الممتد (EDF) للسماح بتوليف صورة مركزة بالكامل.
- في إعدادات الصورة المتقدمة، قم بتفعيل النطاق الديناميكي العالي (HDR). يوصى بشدة بهذا الإجراء لتقليل الإضاءة المرآتية والإفراط في التعريض الذي يحدث عادة بسبب السطح العاكس عالي الكيتين للعين المركبة.
- التموضع وتوازن اللون الأبيض
- اضبط مقبض التكبير إلى المستوى المناسب (مثلا، عامل تكبير 16x للرؤية الجانبية من العين الواحدة، و12.5x للرؤية الأمامية الكاملة للرأس)، مما يضمن أن المنطقة المحددة تشغل نصف إلى ثلثي مجال الرؤية.
- ضع لوحة التثبيت يدويا لجعل صدر الذبابة في وسط مجال الرؤية.
- قم بمعايرة توازن اللون الأبيض باستخدام الصدر لتصحيح درجة حرارة اللون.
- معايير التعريض والتصوير (القيم المرجعية)
التعريض: 60–80 مللي ثانية.
الكسب: 0–5 (حافظ على الانخفاض لتقليل الضوضاء).
الشدة: 60٪–80٪.
حجم خطوة المكدس Z: القياسي: 8–12 ميكرومتر.
ملاحظة: بالنسبة للعيون المركبة الملساء والصحية (مثل w1118 × GMR-GAL4)، قد تكون أحجام الخطوات حتى 15 ميكرومتر كافية، لأن الانحناء المستمر والمنتظم يتطلب مقاطع بصرية أقل. ومع ذلك، بالنسبة لأنماط العين الخشنة أو غير المتساوية التي تتميز بتغيرات طوبولوجية مفاجئة، تتطلب أحجام خطوات أصغر (منخفضة حتى 5 ميكرومتر) لالتقاط التفاصيل الهيكلية الدقيقة وتحسين دقة إعادة بناء EDF بشكل كبير. - تعريف والتقاط مكدس Z
- للرؤية الجانبية: اضبط نطاق المكدس Z من الحافة المدارية (البداية) إلى الوسط (النهاية) باستخدام حجم خطوة من 8–12 ميكرومتر.
- للرؤية الأمامية: اضبط مقبض التركيز حتى يصبح الشكل الخارجي للعينين المركبة في بؤرة التركيز (ابدأ). اضبط التركيز في الاتجاه المعاكس حتى تصبح العيون الوسطى (العيون الصفراء البسيطة) في أعلى الرأس في بؤرة التركيز (النهاية). اضغط على إنهاء الوضع.
- انقر على إيقاف البث المباشر لتجميد المعاينة.
- انقر على بدء الاستحواذ. يقوم النظام تلتقط المستويات البؤرية المحددة تلقائيا ويقوم بتركيب صورة عالية الدقة ومركزة بالكامل.
- حفظ الملفات:
- عند الانتهاء من إعادة بناء EDF، انقر على أيقونة الحفظ في واجهة البرنامج (أو انتقل إلى ملف > حفظ باسم).
- اختر مجلد الوجهة، وأدخل اسم الملف المخصص، ثم اضغط على الحفظ.
- لاحظ أن كل عملية اقتناء تولد ثلاثة ملفات صور مميزة: أ. صورة RAW/القناة (تدرج رمادي);ب. صورة معاينة ملونة؛ ج. صورة مركبة EDF (مع لاحقة "_Composite")
ملاحظة: يجب الاحتفاظ بكل من الصورة الخام/القناة وصورة EDF المركبة للتحليل والتوثيق
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Results
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
يتم تلخيص خط أنابيب التجارب الكامل، من جمع العينات إلى جمع الصور، في الشكل 1. تظهر كفاءة البروتوكول المعدل من خلال إنشاء مصفوفات عينات عالية الكثافة. كما هو موضح في الشكل 2A، يمكن ترتيب 20–30 ذبابة مخدرة في نمط شبيه بالشبكة على منصة واحدة ذات شريط مقلوب. تضمن علامات الاتجاه المكتوبة على أطراف الشريط غير اللاصقة اتجاهها للرأس بشكل متسق، مما يسهل التصوير السريع والمنهجي مع أقل قدر من التعديلات على المرحلة. والأهم من ذلك، أن هذه ال...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Discussion
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تعمل عين مركب ذبابة الفاكهة كقراءة ظاهرية قوية للفحص الجيني، حيث تشير التغيرات الملحوظة في حجم العين أو خشونتها أو تصبغها 2,3,8 غالبا إلى اضطرابات في مسارات الإشارة الأساسية مثل فرس النهر 5,6 أو القنفذ7. ومع ذلك، فقد عانت كفاءة هذه الشاشات لفترة طويلة بسبب قيود سير العمل التقليدي في التصوير. تقنيات التثبي...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Disclosures
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
يعلن المؤلفون عدم وجود تضارب مصالح.
Acknowledgements
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
وقد تم رعاية هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (32071135).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| أسطوانة ثاني أكسيد الكربون (CO2) | المورد المحلي | لا يوجد | |
| مسدس التخدير CO2 | T& L | DG-08 | |
| كاميرا المجهر الرقمي | لايكا | DMC6200 | |
| ملقط ناعم | فيتوس | MOS-167B | |
| سدادات الرغوة | دونغبينغ | لا يوجد | |
| برنامج اكتساب الصور (LAS X) | لايكا | 3.7.1 | |
| برنامج معالجة الصور (FIJI/ImageJ) | المعاهد الوطنية للصحة | المصدر المفتوح | |
| إضاءة قبة LED | لايكا | LED5000 HDI | |
| إضاءة LED من نوع Gooseneck | كوزيم | LG-10 | |
| المجهر المجسم المحرك | لايكا | M205 FCA | |
| عدسة الهدف | لايكا | 1.0x PlanApo NA0.2 | |
| صمام دواسة القدم الهوائي | ديليكسي | FV-320 | |
| قوارير زراعة ذبابة الفاكهة القياسية | لايبور | 2424951 | |
| وسط غذاء ذبابة الفاكهة القياسي | لا يوجد | دقيق الذرة-آجار-دبس السكر | |
| شرائح المجهر الزجاجي القياسية | سيتوتست | 10127101P-G | |
| المجهر المجسم القياسي | نيكون | SMZ745 | |
| شريط لاصق على ورق أبيض | أوبوين | عرض 25 مم |
Reprints and Permissions
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission