Name: فأري إجراء زراعة الكلى (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-10T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: تعلم إجراء زراعة الكلى في الفئران لدراسة علم الأحياء الزراعي باستخدام نماذج الفئران. يتضمن هذا الأسلوب استئصال الكلى من المتبرع وزراعتها في المستقبل ورصد وظيفة الزرع عبر قياس مستويات الكرياتينين.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ودعمت هذه الدراسات في جزء من التمويل من المعاهد الوطنية للصحة R01 AI36532 لجاه. نود أن نعترف بالدعم المتميز في علم الأمراض زرع المقدمة من الدكتور تيبور Nadasdy ، والتوجيه لا تقدر بثمن والبصيرة التي قدمها الراحل الدكتور شارل Orosz زاي في استهلال هذا الجهد البحثي.

حصاد الجهاز المانحة (2) : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير المانحة باستخدام 65mg/kg IP بنتوباربيتال ؛ الحفاظ التخدير بواسطة Isoflurane (2-3 ٪). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق خط الوسط من القص إلى العانة لدخول البطن المانحة وفضح الكلية اليسرى عن طريق تحريك الأمعاء أفقيا إلى الجانب الأيمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الكلى التي خلفتها ligating وتقسيم السفن الكظرية والخصية مع خياطة الحرير 8-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعبئة الأبهر أعلاه التقائه الشريان الكلوي والوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعبئة الوريد الأجوف السفلي (IVC) أعلاه ، وأدناه التقائه الشريان الكلوي والوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ligate أدناه الأورطى الشريان والوريد الكلوي مع خياطة الحرير 8-0 للحد من النزيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح الحالب الأيسر من نقير الكلى إلى المثانة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كشف تقاطع حالبي مثاني باستخدام التراجع ذنبيا على القبة المثانة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صغير المكوس ، والتصحيح اهليلجيه المثانة تحتوي على مفترق اليسار الحالبي المثاني ، وتستخدم لإعادة الإعمار عن طريق البول مفاغرة المثانة إلى المثانة. لم يتم تضمين مع الحق الحالب والمثانة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ligate في IVC تحت الشريان والوريد الكلوي مع خياطة الحرير 8-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> heparinized حل رينغر اكتات عبر الشريان الأورطي infrarenal Ligate الشريان الأورطي فوق الشريان والوريد الكلوي ، ويروي ببطء والكسب غير المشروع في الموقع مع 0.2 - 0.4ml الباردة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ligate في IVC فوق الشريان والوريد الكلوي مع خياطة الحرير 8-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المسح الشامل للالوريد الكلوي عند التقائه في IVC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم الأبهر مواربة ، 2mm وتقريبا دون الشريان الكلوي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكلى والأوعية الدموية مع امداداتها الحالب تعلق على التصحيح المثانة ان التكتل. متجر في حل رينغر اكتات على الجليد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الماوس الجهات المانحة عن طريق الخلع عنق الرحم تحت التخدير. </li></ol> المستلم زرع (2) : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير المتلقي مع IP ملغم / كغم من 65 بنتوباربيتال والحفاظ على التخدير بواسطة Isoflurane (2-3 ٪). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق خط الوسط ، وتغطي الأمعاء مع الشاش الرطب وسحب بعناية إلى الجانب الأيسر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ligate الحالب الأيمن ، الشريان الكلوي والوريد ، وإزالة الكلية اليمنى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل بعناية وعبر المشبك ، والشريان الأورطي infrarenal IVC مع المشابك 4 ملم two microvasular بعد ligating فروع القطنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان الدرز النايلون 10-0 من خلال سمك الكامل الأبهر وسحب لإجراء aortaotomy بيضاوي الشكل من قطع واحد (حوالي خمس القطر للسفينة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل فصد طولية بواسطة ثقب إبرة IVC مع قياس 30 و توسيع نطاق استخدام microscissors مناسب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ري كل من الشريان الأورطي وIVC مع المالحة heparinized لمسح الدم داخل اللمعة أو جلطات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكلى المانحة من الجليد ووضعه داخل بطنيا في الجهة اليمنى من الفأرة. يتم الاحتفاظ الكلى المانحة الرطبة الباردة مع وسادة شاش غارقة في المياه المالحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان الغرز اثنين في البقاء على قمة الدانية والقاصية من aortaotomy المتلقين مع الكفة الأبهر المانحين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل مفاغرة النهاية إلى جانب المانحين الكفة بين الشريان الأورطي والجدار الأمامي للaortaotomy المتلقين ، وذلك باستخدام 2 ~ 3 المستمر 10-0 خيوط النايلون في الخارج من الشريان الأورطي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدوره الكسب غير المشروع الكلى المانحة الى الجهة اليسرى للمتلقي. كرر الإجراء السابق بين المانحين الكفة الأبهر والجدار الخلفي للمتلقي aortaotomy </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء مفاغرة نهاية إلى الجانب بين الوريد الكلوي المانحة والجدار الخلفي للIVC المتلقين ، وذلك باستخدام 4-5 10-0 خيوط النايلون المستمر في داخل IVC. ومن ثم يتم إغلاق الجدار الأمامي من الوريد الكلوي IVC والجهات المانحة مع 4 5 ~ خيوط المستمر خارج IVC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن يتم الانتهاء من كل من مفاغرة الوريد والشريان في غضون 20 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شطف الكسب غير المشروع مع عدة مرات المالحة الباردة خلال مفاغرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم قبة المثانة المتلقي ، ووقف نزيف مع الكي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء قطع صغيرة على القبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان الغرز البقاء اثنين من النايلون ل10-0 anastomize المانحين التصحيح المثانة صغيرة مع القبة المثانة المتلقين. وتخاط كل جانب من مفاغرة مع 8 غرز 10 ~ مستمر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق البطن في طبقتين مع 4-0 العقيمة مستمرة ، خياطة امتصاص vicryl الاصطناعية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعطاء الفئران المتلقي المالحة الدافئة 0.4ml أثناء الجراحة بواسطة الحقن الرابع على فترات متقطعة. </li></ol> بعد العمليات الجراحية العناية مستلم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد إغلاق البطن ، وتدار في حقنة واحدة من البنسلين في العضل (500U/10g) (2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بالإضافة إلى ذلك ، تتلقى المستلمين 0.05 ملغم / كغم البوبرينورفين عضليا على 0 اليوم آخر يوم والجراحة 1 للألم. بعد الجراحة ، والمتلقين زرع تلقي المياه التي تحتوي على sulfatrim (100mg/kg) حتى التجربة هي الشركة المصرية للاتصالاتrminated. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ل24H الأولى هي حافظت الفئران بعد العمل الجراحي في درجة حرارة الحاضنة للرقابة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الفئران وعادة ما يشفى من التخدير في حدود 1 ساعة من العملية ، ويتم إعطاء الغذاء والمياه العادية بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إزالة الخيوط الجراحية الجلد 2 أسابيع بعد الجراحة. </li></ol> استئصال الكلية المستفيدة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير المتلقي 4 الكلى آخر ~ 7 أيام الزرع مع 65 ملغم / كغم IP بنتوباربيتال ؛ الحفاظ التخدير بواسطة Isoflurane (2-3 ٪). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح البطن من خلال شق خط الوسط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الأمعاء مع غارقة في المياه المالحة والشاش ، ويتراجع بعناية إلى الجانب الأيمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكلية اليسرى بعد ligating اليسار الوريد حالب الكلى ، والشرايين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق البطن في طبقتين مع خياطة متواصلة امتصاص 4-0 vicryl الاصطناعية. </li></ol> كلها قياسات الدم الكرياتينين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم أسبوعيا لجمع الدم مرة كل أسبوعين من أقل من 0.2 سم submandibularly إما بدون تخدير أو الرجعية orbitally تحت التخدير Isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم تحديد كمية الكرياتينين بالدم الكامل مستويات باستخدام محلل المحمولة I - ستات السريرية (Heska كورب ، وفورت كولينز ، أول أكسيد الكربون). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تحويل وحدات تقليدية (ملغم / دل) إلى وحدات SI للميكرومول / لتر بضرب الوحدات التقليدية بنسبة 88.4. </li></ol>

<ol><li>Russell, P. S., Chase, C. M., Colvin, R. B., Plate, J. M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+transplants+in+mice.+An+analysis+of+the+immune+status+of+mice+bearing+long-term%2C+H-2+incompatible+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22JExpMed%22%5BJournal%5D)">Kidney transplants in mice. An analysis of the immune status of mice bearing long-term, H-2 incompatible transplants.</a> JExpMed. 147, 1449-1468 (1978).</li>
<li>Zhang, Z., Schlachta, C., Duff, J., Stiller, C., Grant, D., Zhong, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+techniques+for+kidney+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Improved techniques for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 16 (2), 103-109 (1995).</li>
</ol>

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها وIACUC جامعة ولاية أوهايو.

لقد نفذنا ما يقرب من 1200 حالة لزرع الكلى في الفئران مع نسبة نجاح 90 ٪ من التقنية&gt;. مقارنة زرع القلب ، ونسبة نجاح عمليات زرع الكلى منخفضة في العادة. ومع ذلك ، حافظت مختبرنا نسبة نجاح عالية (&gt; 90 ٪) من زرع الكلى. النقاط الأساسية للنجاح هي للحد من إصابات الكلى ضخه إلى الجهات المانحة والمتلقية على حد سواء ، وتقليل النزف والتجلط في جميع أنحاء الداخلي والجراحة آخر. قد يكون للعوامل التالية أهمها : (أ) تقليل النزف في المتلقي أثناء الجراحة قدر الإمكان من خلال عملية دقيقة ورقيقة ، (ب...

<table><tbody><tr><td>i-STAT</td><td>أخرى</td><td>HESKA</td><td>Cat 5101</td><td></td></tr><tr><td>خرطوشة i-STAT</td><td>أخرى</td><td>HESKA</td><td>CAT 5110-CREA</td><td></td></tr><tr><td>Sulfatrim</td><td>أخرى</td><td>Actavis</td><td>R02109</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>أخرى</td><td>NOVAPLUS</td><td>CA-0474</td><td></td></tr><tr><td>خيط جراحي 10-0</td><td>جراحة</td><td>Sharpoint</td><td>AK0100</td><td></td></tr></tbody></table>

فأري إجراء زراعة الكلى

Murine Renal Transplantation Procedure

زرع الكلى في الفئران مثلي هو إجراء تحديا تقنيا. على الرغم من إجراء عمليات زرع الكلى الأولى في الفئران عن طريق رسل آخرون أكثر من 30 سنة مضت (1) وصقلها عن طريق تشانغ وآخرون سنة في وقت لاحق (2) ، ويتقن عدد قليل من الناس في العالم هذا الإجراء. في المختبر لدينا أجرينا بنجاح عملية زرع الكلى مثلي 1200 مع معدل&gt; البقاء على قيد الحياة 90 ٪. النقاط الرئيسية لتحقيق النجاح تشمل رقابة صارمة من ضخه النزيف والإصابة والتجلط ، سواء أثناء وبعد إجراء عمليات الزرع ، واستخدامها بدلا من 10-0 11-0 خياطة لanastomoses. بعد العمليات الجراحية الرعاية والعلاج للمتلقي من المهم للغاية لنجاح زرع والتقييم. جميع المستفيدين طعم كلوي تلقي المضادات الحيوية في شكل حقنة من البنسلين مباشرة بعد الزرع وsulfatrim في مياه الشرب باستمرار. يتم تقييم شامل للصحة الحيوانية يوميا ويتم تنفيذ كل التحليلات الكرياتينين بالدم بشكل روتيني مع جهاز I - STAT المحمولة لتقييم وظيفة الكسب غير المشروع.

زرع الكلى في الفئران هو إجراء تحديا فنيا يتطلب الحذر بعد العمليات الجراحية الرعاية والعلاج للنجاح.

تعد عملية زراعة الكلى في الموقع التشريحي الأصلي (orthotopic) لدى الفئران إجراءً صعباً من الناحية التقنية. وعلى الرغم من أن أولى عمليات زراعة الكلى في الفئران قد أجراها راسل...

تبدأ عملية زراعة الكلية في الفئران باستئصال العضو المانح، حيث يتم إزالة الكلية اليسرى من الفأر المانح وحفظها على الثلج. ثم يتم إزالة الكلية اليمنى من الفأر المستقبل لإفساح المجال للكلية المانحة. بعد ذلك، تُخرج الكلية المانحة من الثلج وتُزرع في الفأر المستقبل.يُترك الفأر لفترة تعافٍ لمدة أربعة أيام قبل إزالة ما تبقى من الكلية الأصلية. وبعد سبعة أيام، يتم مراقبة مستويات الكرياتينين باستخدام محلل سريري محمول من نوع I STAT لتقييم وظيفة الطعم. مرحباً، أنا سارة هايمر من مختبر الدكتور جريج هادلي وقسم جراحة زراعة الأعضاء في جامعة ولاية أوهايو.سنعرض لكم اليوم إجراءً لعملية زراعة الكلى في الفئران. سيقوم جراح الأعصاب الخبير والمقيم لدينا، Jing Wing، بإجراء جراحة زراعة الكلى التي ستشاهدونها اليوم. يرجى استخدام هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة الأحداث المناعية المرافقة لرفض الطعم، بالإضافة إلى استراتيجيات منع حدوث هذا الرفض.لنبدأ الآن. لبدء عملية استئصال العضو المانح، يتم إجراء قرصة لأصابع القدم للتأكد من أن الحيوان تحت تأثير التخدير الكامل. وبالعمل ضمن مجال معقم وباستخدام أدوات معقمة، يتم إجراء شق في الخط الناصف للفأر المخدر من القص إلى العانة، ثم يتم كشف الكلية اليسرى عن طريق تحريك الأمعاء جانبياً إلى الجهة اليمنى لإجراء تروية الكلية المانحة. يتم وضع غرز حريرية TY 4-0 حول الشريان الأورطي والوريد الأجوف السفلي أسفل وفوق الشريان والوريد الكلويين.يتم التروية ببطء في الموضع باستخدام محلول رينجرز لاكتات بارد ومُهَبَّن عبر الأبهر تحت الكلوي. يتم عزل الكلية اليسرى عن طريق ربط وتقسيم الأوعية الكظرية والخصوية وبعض الفروع القطنية باستخدام خياطة حريرية 8-0. بعد ذلك، يتم تحريك نقطة اتصال الأبهر والوريد الأجوف السفلي مع الشريان والوريد الكلوي الأيسر، مع ربط أربع خياطات حريرية 8-0 حول الأبهر والوريد الأجوف السفلي أسفل وفوق الشريان والوريد الكلوي.لتقليل النزيف، يتم ربط الشريان الأبهر أولاً أسفل الوعاء الكلوي. بعد ذلك، يتم تشريح الحالب الأيسر لتحريره من السرة الكلوية وصولاً إلى المثانة. ثم يتم كشف نقطة اتصال الحالب بالمثانة باستخدام سحب مخروطي لقبة المثانة.مع الحرص على تجنب الحالب الأيمن، يتم استئصال رقعة بيضاوية صغيرة من المثانة تحتوي على ملتقى الحالب الأيسر بالمثانة. ستُستخدم هذه الرقعة لإعادة بناء الجهاز البولي عبر مفاغرة بين مثانة ومثانة. ثم يتم ربط الأبهر فوق الشريان والوريد الكلويين.يتم تروية القطعة ببطء في موقعها باستخدام محلول رينجر لاكتات المبرد والمحتوي على الهيبارين عبر الأبهر تحت الكلوي. يتم تقسيم الأبهر بشكل مائل على بُعد حوالي 2 mm أسفل الشريان الكلوي. وأخيراً، يتم استئصال الكلية وإمداداتها الوعائية مع بقاء الحالب متصلاً برقعة المثانة ككتلة واحدة.يجب تخزين الكلية في محلول رينجر لاكتات على الثلج حتى تصبح جاهزة للزراعة في المتلقي المضيف، ويتم قتل الفأر المانح عن طريق الخلع العنقي تحت التخدير. وكما تم توضيحه سابقاً، تبدأ عملية الزراعة في المتلقي بقرصة لضمان تخدير الحيوان بشكل كامل. لبدء الجراحة، يتم إجراء شق في الخط الناصف، وتغطية الأمعاء بشاش مبلل وإزاحتها بعناية إلى الجانب الأيسر.من أجل إتمام عملية زراعة الكلية هذه بنجاح، يجب إجراء المفاغرة بين الطوق الأبهر للمتبرع وأبهر المتلقي. وكذلك بين الوريد الكلوي للمتبرع والوريد الأجوف السفلي للمتلقي، ورقعة مثانة المتبرع ومثانة المتلقي. يتم ربط الشريان والوريد الكلوي للحالب الأيمن.أزل الكلية بعد ربط الفروع القطنية. قم بعزل ومشبك تقاطعي للشريان الأبهر تحت الكلوي والوريد الأجوف السفلي بعناية باستخدام مشبكين وعائيين دقيقين بحجم 4 mm. مرر خيط نايلون 10-0 عبر كامل سمك الشريان الأبهر واسحبه لإجراء فتحة بيضاوية في الشريان الأبهر بقطع واحد يبلغ حوالي خمس قطر الوعاء الدموي.بعد ذلك، قم بإجراء شق طولي في الوريد عن طريق ثقب الوريد الأجوف السفلي بإبرة قياس 30، ثم قم بتوسيع الشق بشكل مناسب باستخدام مقصات دقيقة. اغسل كلًا من الأبهر والوريد الأجوف السفلي بمحلول ملحي يحتوي على الهيبارين لإزالة الدم أو الجلطات الموجودة داخل التجويف. أخرج الكلية المتبرعة من الثلج وضعها في الخاصرة اليمنى للفأر.ضع غرزتين مثبتتين (stay sutures) عند القمة القريبة والبعيدة لفتحة الشريان الأبهر للمستقبل مع cuff الشريان الأبهر للمانح. قم بإجراء مفاغرة طرفية-جانبية (end to side anastomosis) بين cuff الشريان الأبهر للمانح والجدار الأمامي لفتحة الشريان الأبهر للمستقبل باستخدام غرزتين إلى ثلاث غرز مستمرة من النايلون عيار 10 في الجزء الخارجي من الشريان الأبهر. بعد ذلك، قم بتدوير طعم الكلية المانحة نحو الجانب الأيسر للمستقبل.كرر الإجراء السابق بين طوق الشريان الأبهر للمانح والجدار الخلفي للشريان الأبهر للمستقبل. من المهم تذكر ضرورة إتمام عملية التوصيل لكل من الوريد والشريان في غضون 20 دقيقة. كما يجب شطف الطعم بمحلول ملحي بارد عدة مرات أثناء عملية التوصيل.قم بإجراء مفاغرة طرفية-جانبية بين الوريد الكلوي للمانح والجدار الخلفي للوريد الأجوف السفلي للمستقبل باستخدام أربعة إلى خمسة غرز نايلون مستمرة مقاس 10 في الجزء الداخلي من الوريد الأجوف السفلي. أغلق الجدار الأمامي للوريد الأجوف السفلي والوريد الكلوي للمانح بأربعة إلى خمسة غرز مستمرة من خارج الوريد الأجوف السفلي. الخطوة التالية هي شق قبة مثانة المستقبل.أوقف النزيف باستخدام الكي. وبمجرد اكتمال العملية، قم بإجراء شق صغير في القبة وضع غرزتين ثابتتين من خيوط النايلون 10-0 لموصلة رقعة المثانة الصغيرة من المتبرع مع قبة مثانة المستقبل، مع خياطة كل جانب من الموصلة بـ 8 إلى 10 غرز مستمرة. وأخيراً، أغلق البطن على طبقتين باستخدام غرز Vicryl اصطناعية معقمة وقابلة للامتصاص مستمرة بمقاس 4-0.تبدأ الرعاية بعد الجراحة بإعطاء حقنة عضلية واحدة من البنسلين. كما يُعطى متلقي الزرع 0.05 milligrams per kilogram من البوبرينورفين عن طريق الحقن العضلي في اليوم صفر واليوم الأول بعد الجراحة لتسكين الألم، بالإضافة إلى توفير إمداد مستمر من الماء المحتوي على السلفا تريم. ويتم الاحتفاظ بالميเซอร์ في حضانة يتم التحكم في درجة حرارتها خلال أول 24 ساعة بعد العملية.تتم إزالة غرز الجلد بعد أسبوعين من الجراحة. وتُعد إزالة الكلية الأصلية المتبقية أمراً ضرورياً حتى يتسنى مراقبة تدهور وظيفة الكلية المزروعة عن طريق قياسات الكرياتينين في المصل. وعادةً ما يتم إجراء هذه العملية بعد مرور أربعة إلى سبعة أيام من الزرع الأولي لكلية المتبرع، وتتضمن الخطوات الرئيسية المستخدمة عند استئصال الكلية من فأر المتبرع.يُستخدم تخدير الفلورين (ISO) لتهدئة الحيوان المضيف حتى يتسنى جمع عينات الدم. تُستخدم مستويات الكرياتينين في الدم الكامل الكمية المسحوبة من خلف الحجاج كمؤشر لتقييم وظيفة الطعم، ويتم تحديدها باستخدام محلل سريري محمول من نوع I stat. تُحول الوحدات التقليدية إلى وحدات SI عن طريق ضرب الوحدات التقليدية في 88.4.يُعبر عن تركيز الكرياتينين بميكرومول لكل لتر. وعادةً ما تتماثل الحيوانات للشفاء خلال ساعتين إلى ثلاث ساعات بعد الجراحة، وتُظهر سلوك الفئران الطبيعي بعد إزالة الكلية الأصلية المتبقية. وتعتمد حياة الحيوان على وظيفة الطعم الكلوي، والتي يمكن تقييمها من خلال الفحوصات اليومية للحالة الصحية العامة للحيوان ومستوى الكرياتينين.قياس الدم الكامل باستخدام محلل i-STAT السريري المحمول كمرجع. يمتلك الفأر الطبيعي غير المزروع مستوى كرياتينين يقارب 20 micromolar. ويُعتبر وجود خلل في وظيفة الطعم الكلوي عندما يظهر على الفأر علامات المرض ويرتفع مستوى الكرياتينين ليصل إلى ما يقارب 100 micromolar.لقد عرضنا لكم للتو إجراء عملية زرع الكلى في الفأر. وعلى الرغم من أن هذا الإجراء يمثل تحدياً تقنياً، إلا أن مختبرنا حقق نجاحاً كبيراً في تنفيذه. وهذا كل شيء.شكرًا للمشاهدة، وبالتوفيق في تجاربكم.

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

وقد ولدت من تمايز موجهة الى خلايا محددة hESCs الكثير من الاهتمام في مجال الطب التجديدي. ونحن نقدم موجزة ، وخطوة بخطوة لتحديد...

رسم مصير الخلايا الجذعية الجنينية البشرية من خلال تكوين ورم مسخي

وقد اقترح زرع الجزر المعزولة لتكون المعاملة المحتملة للاصابة بداء السكري من النوع 1. نحن هنا وصف الأسلوب لعزل الجزر من بنكرياسات الماوس وزرع لهم في الفضاء تحت المحفظة في الكلى.

وهناك طريقة لعزل جزيرة الفئران تحت المحفظة وزراعة الكلى

هنا ، نقدم بروتوكولا لدراسة مناعة الرفض. قدم النموذج الجراحي تقارير عن وقت تشغيل قصير وتقنية موجزة. اعتمادا على تركيبة سلالة المتبرع والمتلقي ، قد تصاب الكلية المزروعة برفض خلوي حاد أو تلف الطعم الخيفي المزمن ، والذي يتم تحديده من خلال التليف الخلالي وضمور أنبوبي.

الماوس زرع الكلى: نماذج من طعم خيفي رفض

يقدم هذا التقرير وصفا مفصلا لزرع الغدة الصعترية الفأرية من مختلف الفئران المتبرعة العمرى تحت كبسولة الكلى لمتلقي الفئران الذين يعانون من نقص المناعة. الهدف من هذا النهج هو نمذجة تطور الخلايا التائية وأحداث انتقاء الغدة الصعترية في الجسم الحي.

العزل وزرع مختلفة المسنين الفئران التوتة الطعوم.

الهدف من هذه المخطوطة هو وصف الخطوات المطلوبة لإجراء عملية زرع الكلى في الفأر ، مع إيلاء اهتمام خاص لتفاصيل مفاغرة الشرايين.

الكلى الفئران زرع تقنية

نحن نقدم طريقة بسيطة وفعالة لزرع 2'-ديوكسيغوانوسين المعالجة E18.5 الغدة الصعترية في كبسولة الكلى من فأر عارية. هذه الطريقة ينبغي أن يساعد في دراسة كل من وظائف الخلايا الظهارية الثيميك ونضج الخلايا T.

زرع تحت القبعات الكلوية من الغدة الصعترية الجنينية Murine المعالجة 2'-ديوكسيغوانوسين في الفئران عارية

يقدم هذا البروتوكول تقنية جراحية جديدة لزراعة كلى الفئران مع التركيز على استراتيجية مفاغرة شريانية معدلة. كما يتم تقديم تقنية خياطة الأوعية الدموية بما في ذلك طريقة بسيطة وأكثر أمانا لمفاغرة الحالب والمثانة. هذه التعديلات تقصر وقت العملية وتحسن معدل نجاح عملية زرع الكلى بالفئران.

تقنية جراحية معدلة لزراعة الكلى في الفئران

يساهم نموذج زرع الكلى التقويمي للفئران في التحقيق في آلية رفض اللوغراف الكلوي. يزيد النموذج الحالي من بقاء المتلقين على قيد الحياة دون التدخل في إمدادات الدم والارتجاع الوريدي في الجزء السفلي من الجسم باستخدام مفاغرة شاملة لزرع الكلى وطريقة "نفق" من طرف إلى جانب لمفاغرة الحالب والمثانة.

نموذج زرع الكلى التقويمي للفئران لرفض اللوغراف الكلوي

يصف هذا البروتوكول إجراء البقاء على قيد الحياة لاستئصال الغدة اللمفاوية الكلوية الثنائية الثنائية الآمن والمحتمل.

استئصال الوراثة الثنائية الثنائية للشدة الكلوية في الفأر

وقد ثبت الماوس زرع قلب منتبذ النموذج من قبل محققين كثير أن يكون وسيلة هامة لدراسة آليات الرفض والاستجابة المناعية. ومع ذلك ، فإن التقنيات المستخدمة لا تزال صعبة. عن طريق تعديل معيار تقنيات لقد حققنا نجاحا مع أكثر من 1000 عملية زرع.

منتبذ زرع القلب في الفئران

تعلم إجراء زراعة الكلى في الفئران لدراسة علم الأحياء الزراعي باستخدام نماذج الفئران. يتضمن هذا الأسلوب استئصال الكلى من المتبرع وزراعتها في المستقبل ورصد وظيفة الزرع عبر قياس مستويات الكرياتينين.

فأري إجراء زراعة الكلى

استكشف المزيد من الفيديوهات