تزامن الديدان الخيطية: طريقة للحصول على مجموعات الديدان في مراحل متطابقة من التطور

- ابدأ بوضع الديدان ذاتية التسميد في مرحلة اليرقات الأخيرة على أطباق بذرة بمصدر غذاء بكتيري. اسمح لليرقات بالتطور إلى بالغين ناضجين حتى يكون هناك وفرة من البيض داخل الديدان وتوضع على الأطباق. اغسل الأطباق بمحلول عازل لجمع البيض والديدان.

بعد ذلك ، استبدل المخزن المؤقت بمحلول التبييض الذي يذيب الديدان البالغة. محمية بقشر البيض ، ستنجو الأجنة من هذا العلاج ، على الرغم من أنها ستكون في مراحل مختلفة من التطور. ثم استبدل المبيض بمخزن مؤقت واسمح للأجنة بالنمو. عندما تفقس اليرقات من قشر البيض في غياب الطعام ، سيتوقف التطور مؤقتا في مرحلة اليرقات الأولى.

انقل اليرقات إلى أطباق بها طعام لاستئناف النمو. سيحفز هذا التقدم المتزامن خلال مراحل اليرقات المتبقية.

عندما تصل الديدان إلى المرحلة الأخيرة من اليرقات ، انقلها إلى أطباق بها طعام و FUdR ، وهو مثبط تخليق الحمض النووي يمنع إنتاج النسل. ينتج عن التطور المستمر في وجود FUdR مجموعة من الديدان البالغة المعقمة. في هذه التجربة ، سنقوم بمزامنة مجموعة من الديدان الخيطية C. ايليجانس.

- للبدء ، انقل يرقات L4 من الخلفيات الجينية المرغوبة إلى عشب بذرة طازجة من الإشريكية القولونية على وسط نمو الديدان الخيطية أو ألواح NGM. استخدم ما لا يقل عن لوحين 100 ملم أو ثلاث ألواح 60 ملم لكل سلالة.

احتضان الديدان في درجة حرارة النمو المناسبة لمدة ثلاثة إلى أربعة أيا