JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 2:53 د • April 30th, 2023
- للوصول إلى الخادرة النامية ، قم بإزالة الشرانق بعد انفصال ظهارة العذراء عن البشرة أو بعد مرحلة العذراء P5. للبدء ، ضع الخادرة السليمة بحيث يكون جانبها البطني متجها نحوك. استخدم الملقط لتثبيت الشرانق في المساحة الفارغة بين الطرف الأمامي للغلاف ورأس الخادرة. ثم قم بكسر وإزالة القطعة الأمامية من الشرانق برفق لفضح الرأس.
مع الحفاظ على الاتجاه البطني ، استخدم الملقط لإنشاء فواصل صغيرة على طول المحور الأمامي الخلفي للشرانق وضمان تكوين فجوة مستمرة في هذه العملية. احرص على عدم إتلاف أي من أنسجة الخادرة الموجودة تحتها مباشرة. ثم استمر في كسر الشرانق من الفجوة إلى الخارج ، جزءا واحدا في كل مرة ، وانشر الغلاف الممزق في هذه العملية. باستخدام فرشاة رسم مبللة دقيقة ، التقط الخادرة المكشوفة لمزيد من التحقيق. في مثال البروتوكول ، سنرى كيفية إزالة شادرة ذبابة الفاكهة guttifera وإعداد الخادرة للتصوير.
- لبدء إزالة الشرانق ، قم بلصق قطعة من الشريط على الوجهين على قطعة من المناديل الورقية. ضع الخادرة على الشريط على الوجهين ، بحيث يكون الجانب البطني لأعلى. حدد المسافة بين الجانب الأمامي من الشرانق والخادرة الداخلية. أمسك وقم بإزالة الشرانق حول هذه الفجوة باستخدام الملقط ، وكشف الجانب الأمامي من رأس الخادرة.
أدخل طرف الملقط عن طريق تحريكه بالتوازي مع المحور الأمامي الخلفي. ارفع طرف الملقط لكسر الشرانق محليا. كرر هذا الإجراء حتى يصل الكسر إلى الجزء الخلفي من الشرانق. تأكد من تكوين فجوة بين الشرانق وأرجل العذراء ، وكسر الجانب البطني من الشرانق مع تقليل الضرر الذي يلحق بالخادرة الداخلية. بعد كسر المعدرة قدر الإمكان ، أخرج الخادرة باستخدام فرشاة رسم دقيقة. ضع الخادرة على قطعة من المناديل الورقية المبللة ب ddH2O وتوضع في طبق بتري بلاستيكي. التقط صورا على الفور لأن الخادرة المكشوفة ضعيفة وتجف بسهولة.