ذبابة الفاكهة تشريح القرص الخيالي لليرقة: طريقة لمراقبة الظهارة النامية

- لبدء التشريح ، استخدم زوجا واحدا من الملقط لقبض جسم اليرقات في المنتصف ، وزوجا ثانيا لتمزيق اليرقة إلى نصفين. ثم اضغط على خطاف الفم في الطرف الأمامي مع إمساك الجسم في الجانب الخلفي. بعد ذلك ، ادفع الملقط الذي يحمل الفم داخل الجسم. استخدم الملقط الخلفي لطي جدار الجسم من الداخل إلى الخارج.

في هذا المستحضر ، يمكن التعرف على الغدد اللعابية والأمعاء بسهولة وإزالتها للكشف عن الدماغ والأقراص الخيالية. يمكن رؤية أقراص الهوائيات والعين والساق والجناح والهسال. بمجرد الإصلاح ، انقل مستحضر اليرقات إلى شريحة ذات وسط تثبيت حيث يمكن تشريح الأقراص بشكل أكبر. في مثال البروتوكول ، سنرى كيفية تشريح الأقراص الخيالية للجناح باستخدام مستحضر اليرقات هذا.

- للبدء ، استخدم عصا خشبية أو ملقطا غير حادة لنقل يرقات الطور الثالث المتجولة إلى طبق بتري مع PBS. ثم قم بتصنيفها الجيني تحت ضوء الفلورسنت لتحديد علامات الفلورسنت المناسبة ليرقات الفسيفساء. قبل المتابعة ، اغسل اليرقات باستخدام PBS. ثم تحت مجهر التشريح ، استخدم زوجين من الملقط لقرص مركز اليرقة ، وتمزيق الجسم إلى نصفين. بعد ذلك ، اضغط على خطافات الفم أثناء دفع الفم نحو الجسم لقلب الجسم من الداخل إلى الخارج. ثم قم بإزالة المواد غير الضرورية ، مثل الغدد اللعابية والأجسام الدهنية. يتم الآن تحضير اليرقات للتثبيت وتلوين الأجسام المضادة ، وهو ما هو مفصل في بروتوكول النص.

انقل مستحضرات الأنسجة الملطخة إلى شريحة مجهرية باستخدام ماصة نقل بلاستيكية سعة ملليلتر. ثم باستخدام الملقط ، انقل اليرقة الفردية إلى قطرات من وسط التركيب على شريحة مجهرية. الآن باستخدام الملقط ، اعزل الأقراص الخيالية. ابدأ بالضغط باستمرار على نهاية الأنسجة المقطعة وسحب أقراص هوائيات الدماغ والعين باستخدام الملقط الآخر. حافظ على الأدمغة جاهزة للاستخدام.

الآن حدد موقع الأقراص الخيالية للجناح. الأقراص الخيالية للجناح عالقة على الجانب الجانبي من الأنسجة التشريح. بعد ذلك ، قم بتأمين الأنسجة بملقط واحد ، وخدش أقراص الجناح برفق. ثم ضع الأدمغة بالقرب من أقراص الجناح لحمايتها من التكسير بواسطة زلة الغطاء. الآن قم بتغطية الهياكل برفق مع زلة الغطاء ، وختم الغطاء مع طلاء الأظافر. قم بتخزين الشريحة على حرارة 4 درجات مئوية.