JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 4:21 د • April 30th, 2023
- يتكون اختبار الجزيرة من منصة بيضاء مرتفعة في صينية من الماء والصابون ، مغطاة بصندوق شفاف مع جانب واحد مفتوح. تسجل الكاميرا الموجودة أعلى الصندوق صورا علوية للمنصة ، ويتم وضع الأضواء لضمان إضاءة متساوية للمنطقة.
لتحميل الذباب على الساحة ، اضغط على قارورة على سطح مستو لإحضار كل الذباب إلى الأسفل. في تتابع سريع ، قم بإزالة قابس القارورة ، واقلب القارورة ، واضغط على الطرف المفتوح للقارورة على المنصة لإخراج جميع الذباب في نفس الوقت. يؤدي الهبوط على المنصة إلى استجابة الهروب. يمكن للذباب ذو القدرة على الحركة النموذجية مسح المنصة في بضع ثوان ، على عكس تلك التي تعاني من عيوب حركية.
يقتصر الأشخاص على الصندوق ، وأولئك الذين يهبطون على الماء والصابون يغمرون بسرعة لأن الصابون يقلل من التوتر السطحي للماء. لتقييم السلوك الحركي من ظروف مختلفة ، قم بحساب الذباب المتبقي على المنصة بعد فترة زمنية محددة.
في بروتوكول المثال هذا، سنرى إعدادا لمقايسة الجزيرة متوافقا مع تحليل الصور شبه الآلي.
- أولا ، قم بإعداد ما لا يقل عن ثلاث قوارير لكل حالة تجريبية كتكرارات بيولوجية. يجب أن تحتوي كل قارورة على ما يقرب من 15 ذبابة من نفس الجنس ونفس العمر. الأهم من ذلك ، يجب أن يكون للذباب أجنحة سليمة.
قم بإنشاء المجلدات لتخزين التجارب. قم بإنشائها في بنية دليل محددة بواسطة الشروط والنسخ المتماثلة. على سبيل المثال ، إذا كانت التجربة تحتوي على نمطين جينيين مع خمس نسخ مكررة لكل منهما ، فقم بإنشاء مجلد رئيسي بتاريخ التجربة ، وداخل هذا المجلد ، قم بإنشاء مجلد فرعي واحد لكل نمط جيني. بعد ذلك ، داخل مجلدات النمط الجيني ، قم بإنشاء مجلدات فرعية لكل نسخة متماثلة.
بعد ذلك ، قم بإعداد جهاز الاختبار. أضف الماء البارد مع كمية صغيرة من الصابون إلى صينية الحمام وضع المنصة في منتصف الحمام ، إذا لم تكن مثبتة بالفعل في الحمام. قم بتغطية الدرج والمنصة بصندوق شفاف.
لإضاءة المنصة ، ضع مصباحا باردا ، مثل مصابيح LED العادية بجهد 12 فولت ، فوقها. أيضا ، ضع كاميرا ويب متصلة بجهاز كمبيوتر فوق النظام الأساسي مباشرة.
على الكمبيوتر، افتح برنامج تسجيل الصور. من نظام القائمة ، حدد كاميرا الويب المناسبة كجهاز الالتقاط. ضع ذبابة ميتة على الجزيرة لضبط إعدادات الفيديو. قم بتعديل السطوع والتباين واللون في البرنامج بحيث تظهر الذبابة الميتة باللون الأسود على خلفية بيضاء.
بعد ذلك ، اضبط إعداد فيلم الفاصل الزمني لحفظ الأفلام كملفات AVI. بعد ذلك ، استعرض للوصول إلى الدليل حيث يجب حفظ البيانات وحدد اسم الفيلم. احفظ هذه التغييرات.
لضغط بيانات الصورة ، اختر كود Intel IYUV. اضبط سرعة التسجيل على إطار واحد كل 0.1 ثانية واضبط معدل التشغيل المقابل على 10 صور في الثانية.
أخيرا ، انتقل إلى الإعداد المتقدم وحدد إنشاء صورة BNP لكل إطار تم التقاطه. بعد ذلك ، استعرض للوصول إلى نفس الدليل الذي اخترته لاستضافة ملفات AVI واضغط على موافق.
قبل البدء ، تأكد من أن الجزيرة فارغة ونظيفة. بعد ذلك ، ابدأ التسجيل في واجهة صورة الفاصل الزمني لبرنامج تسجيل الصور.
خذ قارورة تحتوي على الذباب واضغط عليها مرتين أو ثلاث مرات لإسقاط كل الذباب إلى الأسفل. بعد ذلك ، قم بإزالة القابس بسرعة من القارورة واضغط بقوة على الذباب على المنصة. يجب أن يضربوا جميعا على المنصة في نفس الوقت تقريبا.
امنح الذباب ما يصل إلى 30 ثانية لمغادرة المنصة. ثم أوقف التسجيل. إذا لزم الأمر ، قم بإزالة أي ذباب متبقي يدويا من المنصة.
قبل المتابعة إلى التجربة التالية ، تأكد من إعادة تعريف الدليل حيث سيتم تخزين المجموعة التالية من البيانات.