تركيب أدمغة ذبابة الفاكهة البالغة: طريقة لإعداد الشرائح للتصوير متحد البؤر

- على شريحة مجهرية موجبة الشحنة ، قم بلصق زلتين للغطاء بمسافة كافية بينهما لخلق مساحة لتركيب أدمغة ذبابة الفاكهة. تحت المجهر المجسم ، قم بتمرير الماصة في وسط التركيب في تلك المساحة. ستساعد الشحنة السالبة للأنسجة الأدمغة على الالتزام بالشحنة الموجبة على سطح الشريحة.

قم بإزالة وسيط التثبيت الزائد للسماح بتحديد المواقع بدقة للأدمغة على الشريحة في نمط شبكي مع توجيه فصوص الهوائيات لأعلى ، ثم قم بجد زلات الغطاء عن طريق لصق زلة غطاء ثالثة لتغطية الأدمغة.

لملء التجويف ، ضع وسط التثبيت قطرة واحدة في كل مرة في حافة التجويف ، واتركه ينتشر بحركة شعرية حتى لا يزعج الدماغ.

أغلق التجويف بطلاء الأظافر ، واحفظه على درجة حرارة سالبة 20 درجة مئوية في الظلام للحفاظ على مضان الأنسجة الملطخة.

في مثال البروتوكول ، سنقوم بتركيب أدمغة ذبابة الفاكهة للتصوير متحد البؤر للخلايا العصبية الملطخة بالمناعة.

- لتركيب الأدمغة ، قم ببناء شريحة جسر. ينزلق وضع غطاءي القاعدة على بعد سنتيمتر واحد تقريبا على شريحة موجبة الشحنة. تأكد من أن الجانب الموجب مشحون هو وجهه لأعلى. ثم قم بلصق زلات الغطاء على الشريحة باستخدام طلاء الأظافر ، واترك الملمع يجف تماما قبل المتابعة.

بعد ذلك ، ضع الشريحة تحت مجهر استريو وأدمغة الماصة في وسط في الفراغ بين زلات الغطاء. تأكد من ضبط الإضاءة لتحسين تصور العقول.

بعد ذلك ، استنشق وسائط التثبيت الإضافية من الشريحة ، مع الحرص على تجنب الأدمغة. ثم قم بإزالة وسائط التثبيت الزائدة المتبقية. سيسمح ذلك بوضع الأدمغة بشكل أكثر دقة. الآن ، باستخدام الملقط ، قم بتوجيه الأدمغة إلى نمط شبكي مع توجيه فصوص الهوائيات لأعلى.

بعد ذلك ، ضع زلة غطاء فوق الدماغ ، واستخدم طلاء الأظافر لإغلاق حواف زلة الغطاء العلوي المرفقة بزلات غطاء القاعدة.

الآن ، قم بتحميل التجويف المركزي بوسائط تثبيت جديدة من حيث السقوط ، مما يسمح بسحب الوسائط تحت زلة الغطاء عن طريق الحركة الشعرية. عندما يمتلئ التجويف ، قم بإغلاقه تماما باستخدام طلاء أظافر شفاف.